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微小隐孢子虫P60蛋白的表达及功能研究

微小隐孢子虫P60蛋白的表达及功能研究

作者：张晨远华南农业大学

学位级别：硕士

隐孢子虫(Cryptosporidium)是人兽共患的顶复门原虫,感染宿主后导致中等到重度腹泻,严重时导致死亡。隐孢子虫包含近40个虫种,其中微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是最重要的人兽共患虫种,该虫种内又包含不同的亚型家族。比较基... 详细信息

隐孢子虫(Cryptosporidium)是人兽共患的顶复门原虫,感染宿主后导致中等到重度腹泻,严重时导致死亡。隐孢子虫包含近40个虫种,其中微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是最重要的人兽共患虫种,该虫种内又包含不同的亚型家族。比较基因组学分析表明,微小隐孢子虫不同亚型家族的基因组之间存在一些高度多态性的区域,其中包括一个编码蛋白酶P60的cgd6＿60基因,并且该基因所在区域存在高水平的遗传重组,因此推测该基因编码的P60蛋白在隐孢子虫生活史中起了重要作用。为了解P60蛋白的生物学功能,进行了如下研究:1)P60蛋白的生物信息学分析。比较基因组学分析发现,cgd6＿60基因为高度多态性位点,在微小隐孢子虫与其它虫种之间以及微小隐孢子虫的不同亚型之间均表现出高度多态性。进一步通过生物信息学分析对P60蛋白的结构进行预测,发现P60蛋白含有多个不同的功能结构域。在二级结构中,P60蛋白含有α螺旋、β折叠、β转角以及无规卷曲四种结构,其中C端大部分区域为无规卷曲结构,且位于全长蛋白的无序区域。除此之外,C端蛋白是P60蛋白的功能中心,包含了全长蛋白所有功能域,包括低复杂区域(LCRS)、内重复区域(RPT1)和SCOP同源域。2)P60全长蛋白的表达。利用p ET-28a质粒与cgd6＿60全长基因构建重组质粒并转入大肠杆菌BL21 Condon Plus(DE3)-RIPL表达菌株中诱导蛋白表达,发现在169k Da有P60的全长蛋白,并且在上清液中表达。但由于该蛋白表达量低,经过反复尝试仍无法获得纯化蛋白,因此之后选择P60蛋白中功能结构域集中的C端蛋白(37k Da)进行功能解析。3)P60-C端蛋白的表达与功能验证。采用上述方法,对P60-C端蛋白进行了原核表达并制备针对重组蛋白的多克隆抗体。采用实时荧光定量PCR,检测该蛋白在隐孢子虫不同时期的表达水平。采用间接免疫荧光方法,对P60-C端蛋白在卵囊、子孢子以及胞内阶段的分布进行定位。通过中和试验,对P60-C端蛋白抗血清抑制虫体入侵的作用进行评价。结果表明,P60-C端蛋白表达产物包含37 k Da和55 k Da两个条带,蛋白质谱鉴定结果显示二者均为目的蛋白,其中55 k Da的片段可能是37 k Da片段的蛋白二聚体。该蛋白在入侵细胞后36 h处表达量最大,且主要定位于子孢子的顶部和中部,并在裂殖子阶段有表达。P60-C端蛋白抗血清对隐孢子虫入侵的中和效率为～31%。以上结果表明P60蛋白可能在隐孢子虫入侵中起了一定作用,但更多参与了隐孢子虫的胞内生长发育进程。本研究结果为进一步阐明隐孢子虫入侵和发育的分子机制,从而为隐孢子虫药物靶标的筛选奠定基础。

关键词：微小隐孢子虫 cgd6_60 P60蛋白表达入侵

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仿海豚皮减阻研究进展

化学通报 2023年第7期86卷 863-867页

作者：张晨远张智嘉丛巍巍魏浩张松松青岛哈尔滨工程大学创新发展中心青岛266400 海洋涂料国家重点实验室海洋化工研究院有限公司青岛266071

减阻材料可广泛应用于国防、工业、生产生活,具有极大的应用价值。仿生减阻作为减阻研究新的分支,受到广泛关注。由Gray计算海豚游动阻力与肌肉力量不匹配而产生的“Gray悖论”开启了对海豚减阻机理的探索。本文介绍了基于海豚表皮的几... 详细信息

减阻材料可广泛应用于国防、工业、生产生活,具有极大的应用价值。仿生减阻作为减阻研究新的分支,受到广泛关注。由Gray计算海豚游动阻力与肌肉力量不匹配而产生的“Gray悖论”开启了对海豚减阻机理的探索。本文介绍了基于海豚表皮的几种减阻机理,并介绍由其发展出的相应减阻材料的设计与测试,最后对仿海豚皮减阻研究的未来发展进行展望。

关键词：海豚皮减阻仿生柔性壁随行波

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基于数值延拓的日月综合借力DRO入轨策略

北京航空航天大学学报 2024年第4期50卷 1176-1186页

作者：张晨中国科学院空间应用工程与技术中心、太空应用重点实验室北京100094

远距离逆行轨道(DRO)是地月空间中的一类周期轨道,这类轨道具有长期稳定、入轨能量低的特点,可作为未来载人月球和载人火星任务的中转站。对于地球至DRO的两脉冲入轨任务,采用日月综合借力(即同时使用弱稳定边界(WSB)和月球借力(LGA))... 详细信息

远距离逆行轨道(DRO)是地月空间中的一类周期轨道,这类轨道具有长期稳定、入轨能量低的特点,可作为未来载人月球和载人火星任务的中转站。对于地球至DRO的两脉冲入轨任务,采用日月综合借力(即同时使用弱稳定边界(WSB)和月球借力(LGA))可以最大化入轨质量,但是这类轨道对初值非常敏感。使用日月综合借力拓展DRO入轨脉冲包络,改进构造方法和提供解析梯度大幅提高多步打靶收敛率,提出2层伪弧长延拓方法进一步降低任务总脉冲。数值仿真采用共振比为2∶1的DRO,脉冲最低解采用“LGA+WSB+2LGA”的飞行模式,飞行时间为123天,近地轨道发射脉冲为3.125 km/s,DRO入轨脉冲仅为19.7 m/s。

关键词： N体问题远距离逆行轨道弱稳定边界月球借力数值延拓

高职易班“校本化”平台与“第二课堂”课程建设的融合研究

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中国科技经济新闻数据库教育 2022年第1期 58-60页

作者：刘军张晨远肖洁丽卓智勇广东农工商职业技术学院广东广州511365

第二课堂是高校人才培养体系的重要组成部分,强调高校第二课堂建设与改革,可以为国家培养技术型人才,为了进一步分析高校第二课堂建设现状及取得的效果,展现高职易班“校本化”在促进“第二课堂”课程建设中的作用,文章首先分析了高职... 详细信息

第二课堂是高校人才培养体系的重要组成部分,强调高校第二课堂建设与改革,可以为国家培养技术型人才,为了进一步分析高校第二课堂建设现状及取得的效果,展现高职易班“校本化”在促进“第二课堂”课程建设中的作用,文章首先分析了高职易班“校本化”平台及“第二课堂”的内涵及特点,其次分析高职易班“校本化”平台促进“第二课堂”课程建设的意义,再次指出高职易班“校本化”平台促进“第二课堂”课程建设机制存在的不足,最后提出相应的机制构建策略,以借助易班网平台来推进“第二课堂”的建设。

关键词：高职易班网校本化第二课堂机制

易班“校本化”平台在高职“第二课堂”教学中的应用分析

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中国科技经济新闻数据库教育 2022年第2期 170-173页

作者：刘军肖洁丽张晨远卓智勇广东农工商职业技术学院广东广州511365

高职院校第二课堂建设是第一课堂教育的有力延伸,是第一课堂教育顺利实施的助推器,其在高职院校开展素质教育、促进高职学生全面发展过程中展现出巨大能力。作为高职院校信息交流平台的易班,要充分彰显本身思政教育功能与学生管理能力,... 详细信息

高职院校第二课堂建设是第一课堂教育的有力延伸,是第一课堂教育顺利实施的助推器,其在高职院校开展素质教育、促进高职学生全面发展过程中展现出巨大能力。作为高职院校信息交流平台的易班,要充分彰显本身思政教育功能与学生管理能力,在高职学生健康成长过程中展示应有的力量。本文主要研究了易班“校本化”平台在高职第二课堂教育中的应用策略,希望易班平台在创新高职院校第二课堂教育模式中更加突出,进一步发挥其网络育人的功能。

关键词：易班校本化高职院校第二课堂应用策略

红色基因融入高校网络思想政治教育研究——以广东交通职业技术学院为例

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中国科技期刊数据库科研 2023年第11期 15-17页

作者：张晨远梁美玲李冬梅广东交通职业技术学院汽车与工程机械学院广东广州510630 广东科贸职业学院商贸学院广东广州510630 广东交通职业技术学院学生工作处广东广州510630

随着社会的发展,互联网的普及、新媒体的传播以及影视作品思想的碰撞等,对高校网络思想政治教育带来一定的挑战。红色基因对于大学生的理想信念具有指导意义,研究红色基因融入高校网络思想政治教育有利于学生树立正确的价值观和坚定理... 详细信息

随着社会的发展,互联网的普及、新媒体的传播以及影视作品思想的碰撞等,对高校网络思想政治教育带来一定的挑战。红色基因对于大学生的理想信念具有指导意义,研究红色基因融入高校网络思想政治教育有利于学生树立正确的价值观和坚定理想信念。本文对红色基因传承遇到的困难进行了调研,对其中存在的问题与原因进行分析,以期更好地为今后高校网络思想教育工作提供创新性实践路径。

关键词：红色基因高校网络思想政治教育

那喀索斯的回响——卡拉瓦乔、元绘画与现代性

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美术研究 2024年第2期 127-136页

作者：张晨中央美术学院人文学院 100102

本文主要聚焦16-17世纪意大利艺术家卡拉瓦乔的名作《那喀索斯》,从围绕作品的基本材料与已有研究出发,结合近年相关艺术展览与最新成果,逐次展开图像考证、文本出处,以至“元绘画”与“元图像”“专注性与剧场性”、精神分析理论、自... 详细信息

本文主要聚焦16-17世纪意大利艺术家卡拉瓦乔的名作《那喀索斯》,从围绕作品的基本材料与已有研究出发,结合近年相关艺术展览与最新成果,逐次展开图像考证、文本出处,以至“元绘画”与“元图像”“专注性与剧场性”、精神分析理论、自我与主体性等的各个角度,以深入对于《那喀索斯》的案例研究与理论解读,进一步反思卡拉瓦乔在艺术史中的定位及影响,并试图回答卡拉瓦乔这件作品何以具有“现代性”的问题。

关键词：卡拉瓦乔那喀索斯元绘画元图像现代性

融合粗糙数据推理的离散麻雀搜索算法求解HFSP问题

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北京航空航天大学学报 2024年第2期50卷 398-408页

作者：周宁张嵩霖张晨兰州交通大学电子与信息工程学院兰州730070

针对麻雀搜索算法(SSA)易陷入局部最优、无法求解离散优化问题等不足,提出了一种改进离散麻雀搜索算法(IDSSA)。抽象原始麻雀搜索算法的位置更新公式,针对个体的不同身份设计新的离散化启发式位置更新策略,并针对混合流水车间调度问题(H... 详细信息

针对麻雀搜索算法(SSA)易陷入局部最优、无法求解离散优化问题等不足,提出了一种改进离散麻雀搜索算法(IDSSA)。抽象原始麻雀搜索算法的位置更新公式,针对个体的不同身份设计新的离散化启发式位置更新策略,并针对混合流水车间调度问题(HFSP)设计了编码与解码方式;引入粗糙数据推理理论,通过数学证明解释了引入理论的可行性与合理性,为算法提供理论支撑,提高可解释性;利用上近似的性质扩大搜索空间,提高种群多样性,避免算法早熟,结合划分及粗糙数据推理提出3种策略,促进种群间信息共享,调节种群的开发能力与探索能力,降低算法陷入局部最优的概率;使用改进离散麻雀搜索算法求解混合流水车间调度问题,对3个小规模实例与10个Liao经典测试集进行仿真实验,验证了改进离散麻雀搜索算法求解混合流水车间调度问题的可行性,通过与遗传算法、差分进化算法等经典算法的对比实验,证明了所提算法的优越性与改进策略的有效性。

关键词：麻雀搜索算法离散化算法粗糙集理论全局优化近似算法数据关联混合流水车间调度

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碳氮复合镍催化剂催化的高选择性己二腈加氢制备环己亚胺

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高等学校化学学报 2024年第4期45卷 68-77页

作者：张晨阳贾晨旭黄军南京工业大学化工学院材料化学工程国家重点实验室南京210009

环己亚胺是一种重要的医药农药中间体,可用于合成青霉素、除草剂和杀菌剂等.本文应用溶剂辅助机械球磨和热解法制备了一系列的负载型Ni基催化剂Ni/IM-C(R),研究了该催化剂对于1,6-己二腈加氢制备环己亚胺的工艺.结果表明,由乙酸镍、 2-... 详细信息

环己亚胺是一种重要的医药农药中间体,可用于合成青霉素、除草剂和杀菌剂等.本文应用溶剂辅助机械球磨和热解法制备了一系列的负载型Ni基催化剂Ni/IM-C(R),研究了该催化剂对于1,6-己二腈加氢制备环己亚胺的工艺.结果表明,由乙酸镍、 2-甲基咪唑及活性炭共同球磨、煅烧还原所制备的Ni/IM-C(R)具有优良的1,6-己二腈加氢活性和98%以上的环己亚胺收率.通过X射线衍射(XRD)、 X射线光电子能谱(XPS)、扫描电子显微镜(SEM)、能量色散X射线(EDX)、透射电子显微镜(TEM)和N2吸附-脱附测试等表征手段研究了Ni/IM-C(R)催化剂的表面织构性质和化学性质.结果表明,氮掺杂碳材料改善了Ni/IM-C(R)催化剂活性金属Ni纳米颗粒的分散性.在Ni/IM-C(R)催化剂中,镍物种具有高活性,尺寸较小且表面Ni0含量高.在无添加剂存在下, Ni/IM-C(R)催化1,6-己二腈加氢环化制备环己亚胺时显示出良好的加氢活性和环己亚胺的高选择性.Ni/IM-C(R)催化剂制备方法简单、反应后易于分离、多次反应循环后仍具有稳定的催化性能,具有良好的工业应用前景.

关键词：环己亚胺己二腈镍催化剂选择催化加氢