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基于聚合酶链式反应⁃限制性内切酶长度多态性方法鉴别鹿角(马鹿)药材及其配方颗粒

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中国中药杂志 2024年第6期49卷 1517-1525页

作者：周海琴海丰胡剑虹李松陈盛君张开雪程梦娟江阴天江药业有限公司江苏江阴214434

鹿角为鹿科马鹿Cervus elaphus或梅花鹿***已骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角基。目前市场上鹿角基原混杂,为快速准确地鉴别鹿角多基原及混伪品,研究通过比较马鹿、梅花鹿及其混伪品线粒体条形码Cytb基因序列差异,筛选获得鹿角的特异... 详细信息

鹿角为鹿科马鹿Cervus elaphus或梅花鹿***已骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角基。目前市场上鹿角基原混杂,为快速准确地鉴别鹿角多基原及混伪品,研究通过比较马鹿、梅花鹿及其混伪品线粒体条形码Cytb基因序列差异,筛选获得鹿角的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计鹿角特异性鉴别引物dishmy⁃F及dishmy⁃R,分别采集鹿角及其混伪品,建立鹿角配方颗粒特异性PCR鉴别方法并优化PCR反应体系,对影响该方法重复性的Taq酶种类、PCR仪型号进行耐受性和适用性考察,再使用限制性内切酶MseⅠ对梅花鹿与马鹿的扩增产物进行酶切。结果显示,当退火温度为56℃,循环次数为35时,鹿角药材、标准汤剂及其配方颗粒经PCR反应及凝胶电泳后,马鹿可在近100 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带,且马鹿的条带较梅花鹿短约60 bp,而其他混伪品如驼鹿、驯鹿、白尾鹿、黑尾鹿、狍子、白唇鹿等及阴性对照均无条带。该研究建立的PCR⁃RFLP方法可快速准确的鉴别出鹿角药材、标准汤剂和配方颗粒中的马鹿成分,并可区分梅花鹿和其他混伪品,同时为其他中药配方颗粒质量标准研究提供了理论依据。

关键词：鹿角聚合酶链式反应⁃限制性内切酶长度多态性方法(PCR⁃RFLP) 分子鉴别

不同光质对穿心莲幼苗化学成分的影响及穿心莲等六种中药饮片标准汤剂研究

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不同光质对穿心莲幼苗化学成分的影响及穿心莲等六种中药饮片标准...

作者：张开雪黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

光质由不同波段的光谱组成。光质不仅影响植物的生长发育和初生代谢,而且会对植物的次生代谢过程产生影响,是影响药用植物活性成分含量的一个重要因素。本部分以实验室栽培的穿心莲幼苗为材料,分别用红光、远红光、蓝光、紫外光处理穿... 详细信息

光质由不同波段的光谱组成。光质不仅影响植物的生长发育和初生代谢,而且会对植物的次生代谢过程产生影响,是影响药用植物活性成分含量的一个重要因素。本部分以实验室栽培的穿心莲幼苗为材料,分别用红光、远红光、蓝光、紫外光处理穿心莲幼苗,运用LC-MS对其6种化学成分的含量进行测定,观测其含量的变化,分析光质与穿心莲活性成分的关系,为穿心莲大面积种植及优化药材品质确保标准汤剂的质量方面的研究提供理论依据。近年来,中药市场上涌现了许多新的用药形式,这些剂型虽然取得了很可观的效益,但同时也存在着监管手段落后,无法解决目前存在的不同剂型之间质量不均一、剂量不统一、疗效不一致等问题。2016年8月,为了改善这种状况,国家药典委员会提出了“标准汤剂”的概念,并以标准汤剂来标化临床不同用药形式,保证临床用药剂量的准确性和疗效的一致性。本部分以穿心莲、青蒿、紫苏叶、川芎、板蓝根、蜜紫菀为研究对象,收集具有代表性的药材样品10-15批,按照标准化的工艺制备汤剂,对其饮片及标准汤剂的有效成分进行含量测定,计算转移率,考察标准汤剂的出膏率,并建立指纹图谱分析方法,为其他标准汤剂的研究提供参考。

关键词：光质穿心莲标准汤剂青蒿紫苏叶川芎板蓝根蜜紫菀

基于主题式教学法的中级汉语综合课教学设计 ——以《城隍庙—上海的襁褓》为例

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基于主题式教学法的中级汉语综合课教学设计 ...

作者：张开雪黑龙江大学

学位级别：硕士

主题式教学法的最大特点就是组织学生在有意义的主题活动中进行学习,是一个逐渐发展成熟并被广泛采用的教学方法。从主题式教学法的理论出发,文章将主题式教学法应用于汉语作为第二语言教学中进行实践,具体通过运用主题式教学法进行教... 详细信息

主题式教学法的最大特点就是组织学生在有意义的主题活动中进行学习,是一个逐渐发展成熟并被广泛采用的教学方法。从主题式教学法的理论出发,文章将主题式教学法应用于汉语作为第二语言教学中进行实践,具体通过运用主题式教学法进行教学设计和主题式教学法的课堂教学以及对教学效果进行分析来研究主题式教学法在中级汉语综合课中的运用情况,并针对教学中出现的问题提出教学建议,最终探讨出主题式教学法在教学中的指导效果。首先是对主题式教学法的概述,包括主题式教学法的理论基础、内涵、特点、优势、活动设计和应该避免的教学误区。然后是基于主题式教学法的中级汉语综合课教学总体设计,对主题式教学法总体教学思路进行设计包括教学对象、教学目标、教学内容、教案设计、教学评量与评估。其次概括了主题式教学法基本教学步骤包括制定教学主题、切入主题、课文基础知识讲解、开展主题活动、总结知识要点、教学的反馈与评价这几个环节。文章重点是以北京大学出版社出版的汉语精读课本《博雅汉语》的中级冲刺篇Ⅱ第8课《城隍庙——上海的襁褓》为例进行教学设计,将主题式教学法的理念贯穿其中,包含了教学前期分析、具体的教学过程、具体主题活动设计和活动总结,发现主题式教学法能够更好的让学生学以致用。最后对教学设计实施的成果进行了教学反思,分析了主题式教学法运用在中级综合课中应该注意的教学问题并提出了教学建议。

关键词：主题式教学法中级汉语综合课教学设计《城隍庙——上海的襁褓》

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摆动叶片式发动机的研究探讨

大众科技 2010年第1期12卷 133-134页

作者：孙旭张开雪南通航运职业技术学院江苏南通226006

针对目前主流形式的发动机存在的问题,提出一种新型摆动叶片式发动机的概念设计。通过摆动叶片将发动机分割为四个气缸,燃料在缸内燃烧,推动摆动叶片往复旋转,实现对外作功,为新型发动机的研究进行有益的探索。

关键词：摆动活塞旋转发动机研究

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板蓝根标准汤剂质量标准研究

中华中医药杂志 2020年第10期35卷 5139-5144页

作者：马明张开雪熊超邬兰孙伟马伟黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040 黑龙江中医药大学药学院哈尔滨150040 江阴天江药业有限公司江苏江阴214434 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:建立板蓝根标准汤剂质量评价标准,为板蓝根标准汤剂的研究提供参考。方法:以不同产地的13批板蓝根饮片为样品,制备板蓝根标准汤剂,考察表告依春转移率、出膏率和pH值,确定主要工艺参数,建立板蓝根标准汤剂指纹图谱分析方法,并对其... 详细信息

目的:建立板蓝根标准汤剂质量评价标准,为板蓝根标准汤剂的研究提供参考。方法:以不同产地的13批板蓝根饮片为样品,制备板蓝根标准汤剂,考察表告依春转移率、出膏率和pH值,确定主要工艺参数,建立板蓝根标准汤剂指纹图谱分析方法,并对其指纹图谱的共有峰进行指认。结果:13批板蓝根饮片标准汤剂指纹图谱相似度均>0.8,确定共有峰7个,指认4个为尿苷、腺苷、鸟苷、表告依春,板蓝根标准汤剂出膏率范围为29.5%~40.8%,平均出膏率为36.3%,RSD值为8.6%;表告依春转移率范围为55.0%~75.0%,平均转移率为(61.3±6.0)%,RSD值为9.7%;pH值范围为4.4~5.6,平均pH值为5.1,RSD值为5.9%;所得标准汤剂中表告依春含量范围为0.022%~0.039%。结论:本研究建立的板蓝根标准汤剂质量标准体系稳定可靠,可为其他标准汤剂的研究提供参考。

关键词：板蓝根标准汤剂指纹图谱出膏率转移率共有峰质量标准工艺参数

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黄芪转录组基因模型预测

中药材 2016年第4期39卷 732-736页

作者：任伟超闫嵩刘振鹏张开雪刘秀波马伟黑龙江中医药大学药学院黑龙江哈尔滨150040

目的:黄芪作为传统补气中药具有悠久历史,从黄芪中已经提取出多种有效成分。目前黄芪的基因组还未进行测序,因此基于转录组数据预测基因模型,将有助于黄芪在医药领域的广泛应用。方法:本文基于黄芪转录组数据以及已有的亲缘关系相近物... 详细信息

目的:黄芪作为传统补气中药具有悠久历史,从黄芪中已经提取出多种有效成分。目前黄芪的基因组还未进行测序,因此基于转录组数据预测基因模型,将有助于黄芪在医药领域的广泛应用。方法:本文基于黄芪转录组数据以及已有的亲缘关系相近物种全基因组序列,对黄芪转录组的unigene在基因组中的情况进行预测分析。结果:预测结果表明,黄芪和大豆Glycine max、蒺藜苜蓿Medicago truncatula、百脉根Lotus japonicus 3种植物有较近的亲缘关系,和蒺藜苜蓿比对上的基因数目是2 039条,碱基相似度是90.14%;和大豆比对上的基因数是1 948条,碱基相似度是90.40%;和百脉根比对上的基因数是1 003条,碱基相似度是89.77%。结论:黄芪与3种植物比对上的基因在3种植物的各染色体上,以及染色体外基因组上均有分布。

关键词：黄芪转录组生物信息学

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百脉根细胞亲环素电子克隆和生物信息学分析

中草药 2016年第19期47卷 3481-3485页

作者：闫嵩任伟超刘振鹏张开雪刘秀波马伟黑龙江中医药大学药学院黑龙江哈尔滨150040

目的通过电子克隆技术对百脉根细胞亲环素(cyclophilin)基因进行预测。方法以大豆cyclophilin序列为探针,基于NCBI中百脉根的EST数据库和CAP3在线软件进行序列拼接,利用生物信息学数据库及相关软件对其结构和功能进行预测分析。结果百脉... 详细信息

目的通过电子克隆技术对百脉根细胞亲环素(cyclophilin)基因进行预测。方法以大豆cyclophilin序列为探针,基于NCBI中百脉根的EST数据库和CAP3在线软件进行序列拼接,利用生物信息学数据库及相关软件对其结构和功能进行预测分析。结果百脉根cyclophilin基因全长1 346 bp,包含771 bp的开放阅读框,编码256个氨基酸,该蛋白为亲水性蛋白。结论为进一步解释基因的分子功能奠定理论及实验基础。

关键词：百脉根细胞亲环素电子克隆生物信息学分子功能

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蜜紫菀饮片标准汤剂制备及质量评价方法研究

中药材 2018年第4期41卷 904-908页

作者：张开雪马伟熊超孙伟李西文邬兰黑龙江中医药大学药学院黑龙江哈尔滨150040 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:建立蜜紫菀饮片标准汤剂质量评价标准,为以蜜紫菀为原料的相关制剂质量标准制定提供参考。方法:收集14批蜜紫菀饮片,制备标准汤剂,测定蜜紫菀标准汤剂出膏率和pH值,并建立HPLC指纹图谱分析方法。结果:14批蜜紫菀标准汤剂出膏率范围... 详细信息

目的:建立蜜紫菀饮片标准汤剂质量评价标准,为以蜜紫菀为原料的相关制剂质量标准制定提供参考。方法:收集14批蜜紫菀饮片,制备标准汤剂,测定蜜紫菀标准汤剂出膏率和pH值,并建立HPLC指纹图谱分析方法。结果:14批蜜紫菀标准汤剂出膏率范围为45.8%～61.4%;pH值范围为4.50～4.81;采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)"进行指纹图谱分析,相似度均大于0.899,确定12个共有峰,指认其中3个并对其进行简易定量分析,探讨适合标准汤剂定量的指标成分。结论:蜜紫菀标准汤剂研究可为以蜜紫菀为原料的相关制剂质量控制提供参考,因标准汤剂中紫菀酮转移率极低,可选择槲皮素等作为其定量指标成分。

关键词：蜜紫菀标准汤剂指纹图谱出膏率

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不同生长环境对黄芪叶绿体超微结构的影响

东北林业大学学报 2016年第2期44卷 15-17,25页

作者：张艳贺任伟超闫嵩刘振鹏张开雪马伟黑龙江中医药大学哈尔滨150040

选用蒙古黄芪(Astragalus membranaeus(Fisch)***-oicus(Bge)Hisao)和膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.)种子在不同的环境中进行种植,观察内生真菌、盐碱胁迫以及遮光处理对黄芪叶绿体超微结构的影响。结果表明:内生真菌处理组叶绿体和类囊体形态结构完整;盐碱胁迫处理组,蒙古黄芪叶绿体类囊体受损,基粒片层溶解,淀粉粒数量增多、直径增大。遮光处理组膜荚黄芪类囊体、基粒片层溶解,淀粉粒大量出现。蒙古黄芪栽培在透光率较低处,膜荚黄芪生长于盐碱处对其生长影响较小。黄芪栽培过程中,适当加以内生真菌菌液,有利于黄芪的生长。

关键词：黄芪超微结构遮光率盐碱胁迫内生真菌