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铜绿假单胞菌环丙沙星耐药株Ⅱ类拓扑异构酶基因突变的研究

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中国抗生素杂志 2003年第3期28卷 155-159,171页

作者：李学如贾文祥杨春刘莉曾蔚杨远马巨辉张再蓉程曦四川大学华西医学中心微生物学教研室成都610041

用PCR方法 ,扩增 2 6株临床分离铜绿假单胞菌环丙沙星耐药株、4株环丙沙星敏感菌株和PA0 1菌株的Ⅱ类拓扑异构酶 gyrA、gyrB、parC和 parE基因的喹诺酮类药物耐药决定区 (QRDR)基因片断 ;并对铜绿假单胞菌II类拓扑异构酶基因突变与耐药... 详细信息

用PCR方法 ,扩增 2 6株临床分离铜绿假单胞菌环丙沙星耐药株、4株环丙沙星敏感菌株和PA0 1菌株的Ⅱ类拓扑异构酶 gyrA、gyrB、parC和 parE基因的喹诺酮类药物耐药决定区 (QRDR)基因片断 ;并对铜绿假单胞菌II类拓扑异构酶基因突变与耐药性关系进行研究。结果表明 90 %以上的铜绿假单胞菌耐药株表现出Ⅱ类拓扑异构酶基因突变 (2 6株中有 2 4株 )。突变主要发生在 gyrA基因 (2 2株 )和 parC基因 (14株 )上 ,其中 gyrA基因的第 83位氨基酸密码子表现出高频突变 (2 2株中有 2 1株 ,ACC→ATC ,占 90 % ) ,parC基因第 80位氨基酸密码子也表现出较高的突变率 (14株中有 12株 ,TCG→TTG ,占 60 % ) ,4株耐药株的 gyrB和 3株耐药株的 parE基因发生单点突变 ,2株耐药株II类拓扑异构酶基因未检测到突变。用二倍稀释法 ,测定部分喹诺酮和 β 内酰胺类药物对耐药突变株的体外抗菌活性。表明铜绿假单胞菌Ⅱ类拓扑异构酶基因突变株对诺氟沙星、左氧氟沙星、哌拉西林、头孢他啶和亚胺培南表现出不同的敏感性。试验所用 2 4株突变株对诺氟沙星呈现 10 0 %的耐药 ;对左氧氟沙星 65 %的耐药 ;40 %的菌株对哌拉西林表现出耐药 ;3 0 %的菌株对头孢他啶耐药 ;75

关键词：铜绿假单胞菌环丙沙星 Ⅱ类拓扑异构酶基因突变最低抑菌浓度

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熊胆贝母止咳胶囊体内抗病毒作用研究

中药药理与临床 2006年第6期22卷 65-67页

作者：杨婷李婉宜杨光包旭张再蓉包定元贺英菊四川大学华西药学院四川大学华西基础医学与法医学院四川大学实验动物中心成都610041

目的:观察熊胆贝母止咳胶囊的抗病毒作用。方法:流感病毒A1型(H1N1)鼠肺适应株FM1滴鼻感染前2天每天熊胆贝母止咳胶囊灌服1次,病毒感染后每天给药2次,连续6天,病毒感染后连续10天观察记录小鼠死亡情况,对存活小鼠处死,测定肺指数,计算... 详细信息

目的:观察熊胆贝母止咳胶囊的抗病毒作用。方法:流感病毒A1型(H1N1)鼠肺适应株FM1滴鼻感染前2天每天熊胆贝母止咳胶囊灌服1次,病毒感染后每天给药2次,连续6天,病毒感染后连续10天观察记录小鼠死亡情况,对存活小鼠处死,测定肺指数,计算肺指数抑制率。结果:FM1鼠流感病毒液的血凝效价1/640,FM1鼠流感病毒液的LD50为10-3.5,熊胆贝母止咳胶囊三个剂量组的小鼠死亡抑制率分别为44.4%、33.3%和33.3%;而肺指数分别为1.57±0.1、1.76±0.23、1.80±0.25,与病毒对照组比较有显著差异。结论:熊胆贝母止咳胶囊能降低感染流感病毒小鼠的死亡率,并能显著降低染毒小鼠的肺指数,表明其具有显著的体内抗病毒作用。

关键词：熊胆贝母止咳胶囊抗病毒作用血凝效价 LD50

亚甲蓝光化学法灭活病毒的研究——抗坏血酸对血浆凝血因子的保护作用

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华西药学杂志 2004年第1期19卷 21-24页

作者：蒋仁举贾文祥王泓陈琪曾蔚张再蓉马巨辉四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川大学华西第二医院检验科四川成都610041

目的　探讨抗坏血酸对亚甲蓝光化学法处理血浆时指示病毒灭活的效果 ,以及对部分凝血因子的保护作用。方法　采用CPE法评价病毒的灭活效果 ,用Clauss法测定纤维蛋白原的含量和一期法判定FⅧ :C的凝血活性。结果　在单采人血浆中加入 1μ... 详细信息

目的　探讨抗坏血酸对亚甲蓝光化学法处理血浆时指示病毒灭活的效果 ,以及对部分凝血因子的保护作用。方法　采用CPE法评价病毒的灭活效果 ,用Clauss法测定纤维蛋白原的含量和一期法判定FⅧ :C的凝血活性。结果　在单采人血浆中加入 1μmol·L-1亚甲蓝和 2 4 0 μmol·L-1抗坏血酸 ,再给以 4 0 0 0 0lx荧光强度照射 6 0min ,VSV滴度下降 >8lgTCID50 ·ml-1,并且纤维蛋白原和FⅧ :C的回收率分别为 83.5 5 %和 81.6 7% ,比常规亚甲蓝 /荧光光化学法显著提高 (P <0 .0 1) ,而且凝血酶原时间延长值在正常允许值范围 ,活化部分凝血酶时间延长值也接近正常允许值范围。加入抗坏血酸和色氨酸可灭活病毒 ,而甘露醇不能。结论　在亚甲蓝光化学法中 ,抗坏血酸不影响病毒的灭活 ,而且对部分凝血因子有保护作用。因此 ,抗坏血酸可以有效提高单份冷冻新鲜人血浆的质量。

关键词：亚甲蓝光化学法灭活病毒抗坏血酸血浆凝血因子保护作用

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NGF治疗神经功能损伤的实验研究

华西药学杂志 1998年第1期13卷 24-25页

作者：李虹肖丽英李明远蒋中华牟家琬张再蓉华西医科大学基础医学院成都610041

以感染破伤风的小鼠作神经功能损伤的动物模型，用神经生长因子（Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）进行肌注治疗。结果显示，实验组（ＮＧＦＡ、Ｂ组）小鼠存活率明显高于对照组．Ｐ＜０．０１，表明ＮＧＦ具有促进... 详细信息

以感染破伤风的小鼠作神经功能损伤的动物模型，用神经生长因子（Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）进行肌注治疗。结果显示，实验组（ＮＧＦＡ、Ｂ组）小鼠存活率明显高于对照组．Ｐ＜０．０１，表明ＮＧＦ具有促进感染破伤风小鼠修复神经损伤、恢复运动功能的作用．该结果对ＮＧＦ的临床应用提供了基础。

关键词：神经功能损伤神经生长因子破伤风

溶原性噬菌体对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响

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四川大学学报（医学版） 2008年第6期39卷 886-889页

作者：杜宝中曾蔚陶传敏康梅刘梅张再蓉贾文祥西藏大学医学院病原生物学教研室拉萨850000 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川大学华西医院实验医学科

目的研究铜绿假单胞菌(PA3094)溶原性噬菌体Ppa3094对该菌生物被膜形成的影响。方法采用平板培养法建立PA3094及PA3094-L(带前噬菌体Ppa3094的溶原性菌株)两株菌的体外生物被膜模型;MTT法测定生物被膜形成过程中两株菌的生物被膜活菌量... 详细信息

目的研究铜绿假单胞菌(PA3094)溶原性噬菌体Ppa3094对该菌生物被膜形成的影响。方法采用平板培养法建立PA3094及PA3094-L(带前噬菌体Ppa3094的溶原性菌株)两株菌的体外生物被膜模型;MTT法测定生物被膜形成过程中两株菌的生物被膜活菌量;实时荧光定量PCR测定两株菌在培养不同时间点藻酸盐合成基因algC、algD的表达量。结果两株菌均在培养5～7 d时形成成熟的生物被膜,呈薄膜状。在生物被膜形成过程中,两株菌的生物被膜菌量存在明显差异,在整个生物被膜形成过程中,PA3094生物被膜菌量均比PA3094-L高;PA3094-L在培养第5 d时生物被膜菌量达最高,第7 d有所下降。随着培养时间的延长,藻酸盐合成基因algD、algC表达量均上调,但PA3094-L表达量均比PA3094低,且algC表达量差异更大。结论铜绿假单胞菌溶原性噬菌体Ppa3094可降低藻酸盐合成基因algD、algC的表达,从而影响生物被膜的形成。

关键词：溶原性噬菌体铜绿假单胞菌生物被膜藻酸盐基因表达

大熊猫感染性泌尿生殖道血尿症病原—肺炎克雷伯氏杆菌

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四川动物 2006年第1期25卷 83-85,F0004页

作者：王成东兰景超罗娌杨智张再蓉成都大熊猫繁育研究基地成都610081 四川大学基础与法医学院微生物室

对一只长期在秋冬季节交替或炎热夏季发生血尿症大熊猫的尿液进行细菌的分离、培养,并对分离株进行了小白鼠毒性试验和药敏试验。通过对分离菌株的染色镜检和生化试验,最后确定为肺炎克雷伯氏杆菌。作者对肺炎克雷伯氏杆菌引发大熊猫的... 详细信息

对一只长期在秋冬季节交替或炎热夏季发生血尿症大熊猫的尿液进行细菌的分离、培养,并对分离株进行了小白鼠毒性试验和药敏试验。通过对分离菌株的染色镜检和生化试验,最后确定为肺炎克雷伯氏杆菌。作者对肺炎克雷伯氏杆菌引发大熊猫的疾病类型进行了探讨,指出肺炎克雷伯氏杆菌除可引发大熊猫肠炎和败血症外,还可导致大熊猫发生以排血样尿液为主要临床表现的泌尿生殖道感染。

关键词：大熊猫肺炎克雷伯氏杆菌血尿

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黑熊出血性胃肠炎病原的分离鉴定

中国兽医科技 2002年第1期32卷 39-40页

作者：雷蕾杨营陈三何树森曾蔚张再蓉汪晓郓刘太秀冯晓科四川大学基础医学与法医学院微生物教研室四川成都610041 四川省养麝研究所四川都江堰611830 四川省卫生防疫站四川成都610015

2000年5月，四川省养康研究所饲养的幼龄黑熊出现急性出血性胃肠炎，该病传染快、死亡率高。从患出血性胃肠炎黑熊的组织病料和粪便中分离筛选出1株菌，经微生物学鉴定为大肠埃希氏菌(Escherichia coli）。该菌株致病力强，在生化反应... 详细信息

2000年5月，四川省养康研究所饲养的幼龄黑熊出现急性出血性胃肠炎，该病传染快、死亡率高。从患出血性胃肠炎黑熊的组织病料和粪便中分离筛选出1株菌，经微生物学鉴定为大肠埃希氏菌(Escherichia coli）。该菌株致病力强，在生化反应、血清学鉴定、动物试验、毒素毒力测定、基因位点等方面与其他肠出血性大肠埃希氏菌存在差异，临床上主要表现为上消化道出血。

关键词：黑熊出血性胃肠炎病原分离鉴定大肠埃希氏菌症状

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大熊猫阴道菌群调查

中国兽医科技 2001年第9期31卷 10-11页

作者：雷蕾余星明曾蔚费立松王强张再蓉王成东牛李丽赵波钟顺隆四川大学华西医学中心四川成都610041 成都动物园四川成都610081

本试验首次对 9只大熊猫阴道微生物菌群进行分离鉴定。调查结果显示 ,大熊猫阴道主要细菌为乳杆菌 (Lac tobacillius)、消化链球菌 (Peptostreptococcs)、大肠埃希氏菌 (Escherichiacoli)及表皮葡萄球菌 (Stapholococcusepidermidis) ,... 详细信息

本试验首次对 9只大熊猫阴道微生物菌群进行分离鉴定。调查结果显示 ,大熊猫阴道主要细菌为乳杆菌 (Lac tobacillius)、消化链球菌 (Peptostreptococcs)、大肠埃希氏菌 (Escherichiacoli)及表皮葡萄球菌 (Stapholococcusepidermidis) ,其中优势菌为乳杆菌 ;并从其中 4只大熊猫阴道分离出 1株白地霉菌 (Geotrichumcandiolum )。

关键词：大熊猫阴道菌群分离鉴定人工授精

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缓释微球乙型肝炎疫苗的初步研究

中国生物制品学杂志 2000年第2期13卷 89-91页

作者：吴晓蓉贾文祥邝玉张再蓉任娅刘莉朱雯李孝红邓先模华西医科大学基础医学院微生物学教研室成都610041 中国科学院成都有机化学所高分子材料室成都610041

目的　研制缓释微球乙型肝炎疫苗。方法　用聚－ＤＬ－乳酸－聚乙二醇共聚物（ＰＥＬＡ）为材料，包裹乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ），制成缓释微球疫苗。微球的粒径均小于５ｕｍ，平均粒径为２．１７ｕｍ，抗原包裹量为１．２５％，... 详细信息

目的　研制缓释微球乙型肝炎疫苗。方法　用聚－ＤＬ－乳酸－聚乙二醇共聚物（ＰＥＬＡ）为材料，包裹乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ），制成缓释微球疫苗。微球的粒径均小于５ｕｍ，平均粒径为２．１７ｕｍ，抗原包裹量为１．２５％，包裹率为６０－８０％。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测抗原，以微球疫苗免疫ＢＡＬＢ／ｃ。小鼠。结果ＨＢｓＡｇ的结构包裹前后是一致的，小鼠经皮下注射单剂微球疫苗后，在第１４ｗ，小鼠血清ＩｇＧ滴度可达到铝佐剂疫苗相当的水平，且维持较高的滴度。结论采用生物可降解的缓释微球作为乙肝疫苗载体系统具有潜在的优势。

关键词：乙肝疫苗缓释微球免疫应答疫苗载体