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双峰骆奶对2型糖尿病大鼠肝脏细胞凋亡的影响

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双峰骆奶对2型糖尿病大鼠肝脏细胞凋亡的影响

第四届（2015）中国骆驼大会

作者：王雪莹张全伟张勇赵兴绪甘肃农业大学动物医学院

(目的)观察双峰驼奶对2型糖尿病大鼠肝脏细胞凋亡的保护作用。(方法)通过链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)结合高糖高脂饮食诱导建立2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组(diabetes model c... 详细信息

(目的)观察双峰驼奶对2型糖尿病大鼠肝脏细胞凋亡的保护作用。(方法)通过链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)结合高糖高脂饮食诱导建立2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组(diabetes model control,DMC)、骆驼奶低剂量组(low camel milk,LCM)、骆驼奶高剂量组(high camel milk,HCM)和二甲双胍组(metformin hydrochloride,MHT),另设正常对照组(control group,C)。处理4周后测量大鼠体重并采血,检测糖耐量和胰岛素(INS)的变化;采用苏木精-伊红(H&E)染色方法检测肝脏组织的病理变化;采用免疫组织化学染色和免疫印迹法检测肝脏组织BCL-2(B cell lymphoma/lewkmia-2)、BAX蛋白(Bcl2-associated X protein,BAX)的表达;采用荧光实时定量RT-PCR法检测BCL-2、BAX、Caspase3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3)和NF-?B(nuclear factor-kappa B,NF-?B)m RNA的表达。(结果)与对照组相比,MHT和HCM组大鼠血糖(Glu)明显下降;H&E染色显示DMC组肝细胞水肿,部分肝细胞核皱缩、碎裂、溶解,而驼奶治疗组和MHT组肝细胞形态正常,胞核结构清晰;与DMC组相比,HCM组和MHT组大鼠肝脏细胞BAX蛋白表达减弱,BCL-2蛋白表达增强,BAX/BCL-2降低(P<0.01);BCL-2 m RNA在MHT组中表达最高,BAX m RNA在LCM组和MTH组中表达最高;DMC组、MHT组、LCM组和HCM组均可见BCL-2和BAX蛋白的表达。骆驼奶能抑制BAX蛋白的表达而促进BCL2蛋白表达,揭示骆驼奶能抑制细胞凋亡,促进细胞增殖。(结论)骆驼奶具有明显的降低2型糖尿病大鼠的血糖及肝脏细胞损伤的作用,对糖尿病治疗有积极作用,这为临床治疗糖尿病提供了新思路。

关键词：骆驼奶 2型糖尿病肝脏细胞凋亡

天祝白牦牛APEX-1基因的克隆及生物信息学分析

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华北农学报 2014年第2期29卷 51-55页

作者：李亚兰张全伟王雪莹马友记张勇赵兴绪甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学动物科技学院甘肃兰州730070

克隆天祝白牦牛脱嘌呤嘧啶核酸内切酶基因(APEX-1)全长cDNA序列,为研究天祝牦牛高原抗逆性机制提供理论基础。根据已知哺乳动物APEX-1基因cDNA序列同源性,设计引物以及5'和3'特异性引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得天祝白牦牛AP... 详细信息

克隆天祝白牦牛脱嘌呤嘧啶核酸内切酶基因(APEX-1)全长cDNA序列,为研究天祝牦牛高原抗逆性机制提供理论基础。根据已知哺乳动物APEX-1基因cDNA序列同源性,设计引物以及5'和3'特异性引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得天祝白牦牛APEX-1基因全长cDNA序列。扩增获得天祝白牦牛APEX-1基因全长cDNA序列为1 391 bp(GenBank登录号:KF611690),ORF长957 bp,编码318个氨基酸。氨基酸序列分析显示天祝白牦牛APEX-1基因编码氨基酸序列与大多数哺乳动物相似,但有7个氨基酸突变。同源建模预测,显示天祝白牦牛APEX-1蛋白由8个α-螺旋和11个β-折叠片形成一个呈三明治的α/β球蛋白。天祝白牦牛APEX-1基因的成功克隆为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词：天祝白牦牛脱嘌呤嘧啶核酸内切酶 cDNA末端快速扩增序列分析

基于创新形势下的动物生理学实验课程教学设想

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畜牧兽医杂志 2019年第1期38卷 68-70,73页

作者：张霞何玉琴张全伟甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

创新是国家发展的内在动力,教育创新是国家创新内容的重要组成部分,不同学科及课程教学的创新是教育创新实施的主体和内容。为了达到推进素质教育,全面提高教育质量的教育创新目标,我们必须进行教学的内容、方法和手段的改革与创新,必... 详细信息

创新是国家发展的内在动力,教育创新是国家创新内容的重要组成部分,不同学科及课程教学的创新是教育创新实施的主体和内容。为了达到推进素质教育,全面提高教育质量的教育创新目标,我们必须进行教学的内容、方法和手段的改革与创新,必须充分利用现代科学技术手段,大力提高教育的现代化水平。论文结合动物生理学实验课程教学实际,基于创新形势的要求,从动物生理学实验教学课程的安排,生理机能虚拟实验室的建立,设计性实验的开展及其他方面对动物生理学实验教学的创新思路进行了分析与总结。

关键词：创新动物生理学实验教学设想

CRISPR/Cas9介导获得用于分离双峰驼iPSc的转染细胞系

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CRISPR/Cas9介导获得用于分离双峰驼iPSc的转染细胞系

中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十四次学术研讨会

作者：李海江李宗帅张全伟张勇甘肃农业大学动物医学院甘肃农业大学生命科学学院

双峰驼(Camelus bactrianus)是我国西北地区特有的濒危物种,其生理特性特殊,用途广泛。利用诱导性多功能干细胞(inducedpluripotentstem cells,iPS cells)对该物种的种质资源进行保护具有重要的应用价值。传统分离鉴定iPS细胞的方法较...

双峰驼(Camelus bactrianus)是我国西北地区特有的濒危物种,其生理特性特殊,用途广泛。利用诱导性多功能干细胞(inducedpluripotentstem cells,iPS cells)对该物种的种质资源进行保护具有重要的应用价值。传统分离鉴定iPS细胞的方法较为复杂且繁琐,为获得用于高效分离双峰驼iPSc的转染细胞系,本试验结合最新的基因编辑系统一规律成簇间隔短回文重复C

关键词：

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天祝白牦牛IGF-2基因的cDNA克隆

生物技术通报 2014年第5期30卷 102-106页

作者：李亚兰张全伟王雪莹马友记张勇赵兴绪甘肃农业大学动物医学院兰州730070 甘肃农业大学动物科技学院兰州730070

旨在克隆天祝白牦牛胰岛素样生长因子2(IGF-2)基因编码区全长cDNA序列,为研究该基因的生理功能奠定基础。运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得天祝白牦牛IGF-2基因全长cDNA序列。扩增获得天祝白牦牛IGF-2基因全长cDNA序列为1 060 bp(Gen... 详细信息

旨在克隆天祝白牦牛胰岛素样生长因子2(IGF-2)基因编码区全长cDNA序列,为研究该基因的生理功能奠定基础。运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得天祝白牦牛IGF-2基因全长cDNA序列。扩增获得天祝白牦牛IGF-2基因全长cDNA序列为1 060 bp(GenBank登录号:KF682139),ORF长540 bp,编码179个氨基酸。其编码的氨基酸与已报道哺乳动物IGF-2氨基酸序列同源性在80%-92%之间。天祝白牦牛IGF-2基因的成功克隆为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词：天祝白牦牛胰岛素生长因子2 cDNA末端快速扩增基因克隆 RT-PCR

雄性小鼠生殖轴组织中AURKA表达定位及敲低后对双氢睾酮合成代谢的影响

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农业生物技术学报 2020年第9期28卷 1614-1622页

作者：赵彩英李怡娜王琪甘泽张勇马友记张全伟赵兴绪甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃农业大学动物医学院甘肃农业大学动物科学技术学院

极光激酶A (aurora kinase A, AURKA)是细胞周期有丝分裂调节蛋白激酶之一,参与调控生殖细胞的发生和成熟。研究表明AURKA是雄激素受体(androgen receptor, AR)的靶基因,双氢睾酮(dihydrotestosterone, DHT)与胞内AR结合后促进精子成熟... 详细信息

极光激酶A (aurora kinase A, AURKA)是细胞周期有丝分裂调节蛋白激酶之一,参与调控生殖细胞的发生和成熟。研究表明AURKA是雄激素受体(androgen receptor, AR)的靶基因,双氢睾酮(dihydrotestosterone, DHT)与胞内AR结合后促进精子成熟。因此,探究AURKA与DHT的作用机制对雄性动物生殖及相关疾病的研究有重要意义,但其具体作用及机制尚不完全清楚。本研究采集8周龄昆明雄性小鼠(Mus musculus)下丘脑、垂体和睾丸组织生殖轴器官组织,通过半定量PCR、免疫印迹(Western blot, WB)、苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)和免疫组化学染色(immunohistochemistry,IHC),探究AURKA在雄性小鼠性腺轴的表达规律及定位。设计AURKA-siRNA干扰序列,转染原代成年小鼠睾丸支持细胞,利用实时荧光定量PCR (real-time fluorescent quantitative PCR, q RT-PCR)和WB检测转染24 h后,细胞AURKA和5α-还原酶1 (5α-reductase type 1, SRD5A1)基因和蛋白表达变化;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)分析AURKA-siRNA干扰睾丸支持细胞对DHT含量的变化。结果表明,雄性小鼠性腺轴器官的组织中AURKA基因和蛋白均有表达,且睾丸组织中其表达量极显著高于下丘脑和垂体(P<0.01);睾丸支持细胞及精子中AURKA蛋白阳性反应最强;AURKA-siRNA干扰小鼠支持细胞24 h后,AURKA基因和蛋白的表达明显下调(P<0.05),而SRD5A1基因和蛋白表达显著上调(P<0.05)且DHT的含量显著增加(P<0.05)。说明AURKA负反馈调控SRD5A1表达促进DHT合成,本研究为雄性动物生殖过程中AURKA功能研究提供参考依据。

关键词：激光激酶A (AURKA) 5α-还原酶1 (SRD5A1) 双氢睾酮(DHT) 支持细胞性腺轴

基于RNA-seq技术挖掘杂交绵羊群体肌肉性状相关基因

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农业生物技术学报 2021年第2期29卷 288-297页

作者：史金平马贵山张全伟刘婷童建伟孙鉴弘魏玉兵杨磊成述儒甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃省天祝藏族自治县农业农村局甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃省张掖市甘州区平山湖蒙古族乡畜牧兽医站

肉质性能是影响绵羊(Ovis aries)养殖效益的主要经济性状,本研究旨在通过RNA-seq技术挖掘绵羊肉质品质相关基因,筛选优良商品代绵羊群体。以小尾寒羊(Small-tailed Han sheep, STH)母羊×萨福克(Suffolk sheep, SFK)公羊杂交一代(F1)商... 详细信息

肉质性能是影响绵羊(Ovis aries)养殖效益的主要经济性状,本研究旨在通过RNA-seq技术挖掘绵羊肉质品质相关基因,筛选优良商品代绵羊群体。以小尾寒羊(Small-tailed Han sheep, STH)母羊×萨福克(Suffolk sheep, SFK)公羊杂交一代(F1)商品代群体和小尾寒羊母羊(STH)×蒙古羊(Mongolian sheep,MG)公羊杂交一代(F1)商品代群体为研究对象,测定其屠宰性能和肉质品质,通过背最长肌转录组分析,挖掘影响绵羊肉质性状关键基因。结果显示,STH(♀)×SFK(♂)群体的屠宰性能和肉质品质均优于STH(♀)×MG (♂)群体。转录组结果显示,2个杂交群体背最长肌组织存在397个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),主要富集在生长、发育等46个基因本体(Gene Ontology, GO)项和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol-3-kinase, PI3K)、蛋白激酶B (protein kinase B, Akt)所组成的信号通路PI3K/Akt、氨基酸合成等26条通路。根据功能和通路分析,筛选脂联素基因(adiponectin, ADIPOQ)、胰岛素样生长因子结合蛋白7基因(insulin-like growth factor binding protein 7, IGFBP7)、心脏α肌动蛋白基因(actinα1, cardiac muscle, ACTC1) 3个基因作为肉质性状相关的候选基因。qRT-PCR结果显示,STH (♀)×SFK (♂)群体背最长肌中ADIPOQ和IGFBP7相对表达量显著高于STH×MG群体(P<0.01),而ACTC1表达量显著低于STH (♀)×MG (♂)群体(P<0.01)。本研究表明,STH×SFK群体在屠宰性能、肉质品质方面均优于STH×MG群体,经济效益明显。筛选获得的差异表达基因可作为改良绵羊肉质性状的候选基因。

关键词：绵羊比较转录组屠宰性能肉质品质商品代畜群

甘加型藏绵羊发情周期内输卵管和子宫中MTR1a mRNA的表达

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西北农业学报 2019年第4期28卷 530-535页

作者：杨大鹏葛闻博何玉琴张全伟王霞周凯仁陈卫刚包莹莹甘肃农业大学生命科学技术学院兰州730070

旨在研究褪黑素受体(MTR1a)基因在甘加型藏绵羊(Ganga Tibetan ovis aries)输卵管和子宫组织中的表达规律,选取发情周期内正常且未孕的甘加型藏绵羊32只,应用qRT-PCR方法检测输卵管和子宫组织中MTR1a基因的表达差异。结果显示:在整个发... 详细信息

旨在研究褪黑素受体(MTR1a)基因在甘加型藏绵羊(Ganga Tibetan ovis aries)输卵管和子宫组织中的表达规律,选取发情周期内正常且未孕的甘加型藏绵羊32只,应用qRT-PCR方法检测输卵管和子宫组织中MTR1a基因的表达差异。结果显示:在整个发情周期中,甘加型藏绵羊输卵管和子宫中均有MTR1a mRNA表达。在发情前期、发情期、发情后期、间情期4个阶段,输卵管组织中MTR1a mRNA的相对表达量分别为0.604±0.253、 0.033±0.031、 0.202±0.151和1.000±0.221,间情期的相对表达量最高,与发情期差异极显著,与其他时期差异显著;子宫组织中MTR1a mRNA的相对表达量分别为0.188±0.086、0.525±0.347、1.878±0.209和1.000±0.094,发情后期的相对表达量最高,与其他3个时期差异极显著。发情周期内MTR1a基因在输卵管和子宫中的表达变化规律表明褪黑素(Melatonin,MT)在动物排卵、受精及早期胚胎发育过程中起调节作用。

关键词：甘加型藏绵羊褪黑素受体输卵管子宫发情周期实时荧光定量PCR

AGO2和AGO3在不同月龄绵羊睾丸中的表达与定位研究

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AGO2和AGO3在不同月龄绵羊睾丸中的表达与定位研究

中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会

作者：张全伟张欢王琪张勇马友记赵兴绪甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃农业大学动物医学院甘肃农业大学动物科技学院

引言:Argonaute(AGO)是一类高度保守的家族蛋白,该家族中AGO2和AGO3主要在生殖细胞系中表达,对维持生殖系DNA完整、抑制转座子转录、抑制翻译、参与异染色质的形成、执行表观遗传调控和生殖细胞发生等均有重要作用。对生殖细胞的发育、...

引言:Argonaute(AGO)是一类高度保守的家族蛋白,该家族中AGO2和AGO3主要在生殖细胞系中表达,对维持生殖系DNA完整、抑制转座子转录、抑制翻译、参与异染色质的形成、执行表观遗传调控和生殖细胞发生等均有重要作用。对生殖细胞的发育、精子的发生和成熟及表观遗传调控等均有重要作用。动物中AGO蛋白报道甚少,除果蝇外,其他动物,特别是家畜,尚未见关

关键词：