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尼帕病毒检测技术的研究进展

黑龙江畜牧兽医 2014年第7期 55-57页

作者：张体银白泉阳王武军张志灯郑腾林素洁福建出入境检验检疫局福州350001

尼帕病毒(NiV)是新近发现的引发脑部炎症或呼吸道疾病等重症的新型人畜共患病病毒,主要侵害中枢神经系统和呼吸系统,引起急性发热、头痛和不同程度的意识障碍。该病自1998年在马来西亚首次发现以来,已造成严重的经济损失和人员伤亡。狐... 详细信息

尼帕病毒(NiV)是新近发现的引发脑部炎症或呼吸道疾病等重症的新型人畜共患病病毒,主要侵害中枢神经系统和呼吸系统,引起急性发热、头痛和不同程度的意识障碍。该病自1998年在马来西亚首次发现以来,已造成严重的经济损失和人员伤亡。狐蝠科的果蝠是该病毒的天然宿主。文章就NiV病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化、检测技术等方面进行简单综述,并对检测技术进行重点介绍。

关键词：尼帕病毒(NiV) 检测技术病原学流行病学临床症状病理变化

蜜蜂克什米尔病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立和评价

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病毒学报 2021年第3期37卷 678-685页

作者：张体银邵碧英林素洁郑腾王武军张志灯福州海关技术中心福建省检验检疫技术研究重点实验室福州350003

蜜蜂克什米尔病毒(Kashmir bee virus,KBV)是一种高毒力的急性蜜蜂病毒,可以引起蜜蜂的死亡和蜂群崩溃。本研究旨在建立一种灵敏、快速检测KBV的TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法。参照GenBank中polymerase polyprotein有关基因序列,设计... 详细信息

蜜蜂克什米尔病毒(Kashmir bee virus,KBV)是一种高毒力的急性蜜蜂病毒,可以引起蜜蜂的死亡和蜂群崩溃。本研究旨在建立一种灵敏、快速检测KBV的TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法。参照GenBank中polymerase polyprotein有关基因序列,设计一组特异性引物和探针,并通过体外转录法制备RNA标准品作为阳性模板。在对反应体系进行优化的基础上,建立了KBV的实时荧光RT-PCR检测方法并进行了特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样本验证。结果显示:该方法能有效扩增8×10^(0)拷贝/μL~8×10^(7)拷贝/μL的KBV标准品,建立的标准曲线呈现良好的线性关系。该方法的检测灵敏度为8拷贝/μL,对其他蜜蜂病毒不发生交叉反应,具有很好的特异性;重复性试验结果显示组内和组间的变异系数分别低于1%和2%,重复性良好。应用本研究建立方法与常规RT-PCR方法对样品进行检测,TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法的特异性优于常规RT-PCR。本研究建立的实时荧光RT-PCR检测具有良好的敏感性、特异性和重复性,为KBV的检测和流行病学调查提供技术支持。

关键词：蜜蜂克什米尔病毒实时荧光RT-PCR 检测方法

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生物安全隔离区建设的现状

畜牧与兽医 2014年第2期46卷 112-117页

作者：詹开瑞张伯强张体银李文迹白泉阳吴中海惠凯蔡财生徐兴进福建出入境检验检疫局福建福州350001 福建圣农发展股份有限公司福建光泽354100

生物安全隔离区是世界动物卫生组织(OIE)2003年提出的动物疫病区域化管理新模式,已经被越来越多的国家和地区所认可。在近几年的发展中,生物安全隔离区在控制动物疫病和在促进动物和动物产品国际贸易方面发挥了重大作用。本文阐述了近... 详细信息

生物安全隔离区是世界动物卫生组织(OIE)2003年提出的动物疫病区域化管理新模式,已经被越来越多的国家和地区所认可。在近几年的发展中,生物安全隔离区在控制动物疫病和在促进动物和动物产品国际贸易方面发挥了重大作用。本文阐述了近年来世界动物卫生组织(OIE)关于生物安全隔离区的演变和世界各国生物安全隔离区的建设应用情况,为我国有中国特色的生物安全隔离区建设提供参考。

关键词：生物安全隔离区控制动物疫病国际贸易

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进口蜂产品中蜂类疫病传入风险分析

畜牧与兽医 2016年第7期48卷 123-127页

作者：白泉阳张体银郑腾王武军张志灯于师宇林素洁福建出入境检验检疫局/福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001

随着蜂产品进口量的大幅增长,蜂类疫病传入风险也逐步增大。采用新西兰风险分析模式,根据OIE规定的蜂产品国际贸易重点关注疫病名录,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进口蜂产品可能携带... 详细信息

随着蜂产品进口量的大幅增长,蜂类疫病传入风险也逐步增大。采用新西兰风险分析模式,根据OIE规定的蜂产品国际贸易重点关注疫病名录,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进口蜂产品可能携带的蜂类疫病进行风险分析,通过风险评估,美洲幼虫腐臭病、欧洲幼虫腐臭病、小蜂螨病、狄斯瓦螨病和蜂房小甲虫病能给国内养蜂业带来一定风险,在此基础上,从产地要求、卫生证书要求和进口检疫等关键环节提出了相应的风险管理措施,降低疫病传入风险。

关键词：进口蜂产品风险分析细菌寄生螨敌害

检测新城疫病毒中和抗体的间接ELISA和竞争ELISA方法的初步建立

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中国兽医杂志 2005年第3期41卷 13-16页

作者：丁炜东曹丽萍张体银刘秀梵张如宽吴艳涛中国水产科学院淡水渔业研究中心扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

鸡新城疫(ND)是由鸡新城疫病毒引起的急性传染病，是对养禽业危害最大的禽病之一。融合蛋白(F)是NDV的主要保护性抗原，对新城疫的免疫保护起着重要的作用。基因工程苗是防治ND的一种新型疫苗，本室在前期研究中，以282E4株鸡痘病毒为... 详细信息

鸡新城疫(ND)是由鸡新城疫病毒引起的急性传染病，是对养禽业危害最大的禽病之一。融合蛋白(F)是NDV的主要保护性抗原，对新城疫的免疫保护起着重要的作用。基因工程苗是防治ND的一种新型疫苗，本室在前期研究中，以282E4株鸡痘病毒为载体表达了NDV F40E8株的F基因，在SPF鸡上显示了较好的保护效力，但F蛋白激发机体产生的中和抗体用常规的HI试验无法测出抗体效价。

关键词：间接ELISA 鸡新城疫病毒 NDV F基因 HI试验 SPF鸡禽病中和抗体 ELISA方法保护效力

表达新城疫病毒F HN基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性和免疫效力试验

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中国兽医杂志 2005年第2期41卷 10-14页

作者：丁炜东曹丽萍张体银刘秀梵张如宽吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放试验室江苏扬州225009

目前我国主要使用全病毒灭活苗和弱毒活疫苗免疫接种预防新城疫(ND)，虽然这两种疫苗都能产生较好的保护力，但是也存在一些不可克服的缺陷。因此迫切需要研制新型高效疫苗用于防制该病。国内外很多学者都在进行着ND各种基因工程疫苗的... 详细信息

目前我国主要使用全病毒灭活苗和弱毒活疫苗免疫接种预防新城疫(ND)，虽然这两种疫苗都能产生较好的保护力，但是也存在一些不可克服的缺陷。因此迫切需要研制新型高效疫苗用于防制该病。国内外很多学者都在进行着ND各种基因工程疫苗的研制，NDV—F、HN基因在多种载体中得到表达并取得了较好的保护效力。本实验室已构建了表达NDV F18E8株F、HN基因的重组疫苗rFPV—F、rFPV—HN。本研究对这两种重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性以及对SPF鸡和商品鸡的免疫保护作用进行了评价。

关键词：遗传稳定性免疫效力试验鸡痘病毒新城疫病毒疫苗 NDV HN基因表达基因重组免疫保护作用

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乳粉中阪崎肠杆菌标准物质的研制

中国乳品工业 2012年第12期40卷 16-18页

作者：陈彬郑晶黄晓蓉吴谦张体银黄嫦娇林杰福建出入境检验检疫局技术中心福州350001

建立乳粉中阪崎肠杆菌标准物质的制备方法。对阪崎肠杆菌真空冷冻干燥过程中使用的三种保护剂进行比较．筛选出效果最好的奶液（即脱脂奶粉与无菌水的比例为1：4）作为保护荆。用于冷冻干燥时提高阪崎肠杆菌活菌存活率。在奶液中添加一... 详细信息

建立乳粉中阪崎肠杆菌标准物质的制备方法。对阪崎肠杆菌真空冷冻干燥过程中使用的三种保护剂进行比较．筛选出效果最好的奶液（即脱脂奶粉与无菌水的比例为1：4）作为保护荆。用于冷冻干燥时提高阪崎肠杆菌活菌存活率。在奶液中添加一定浓度的阪崎肠杆菌，使用真空冷冻干燥技术制备成冻干奶粉样品，测其含茵量，根据测得的茵落数量，按比例加入脱脂奶粉混匀稀释成平板菌落计数为10～15g-，的标准样品，经真空包装获得2批共300个独立包装的冻干阪崎肠杆菌标准样品（10g／包）。经过均匀性与稳定性检验，样品的定值及不确定度评估。结果表明：该标准物质均匀性、稳定性良好，该方法对进一步完善微生物尤其是致病菌标准物质的制备具有泰者价值。

关键词：阪崎肠杆菌标准物质保护剂不确定度冷冻干燥

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进境甲壳类水生动物风险分析

中国兽医杂志 2016年第2期52卷 118-120页

作者：郑腾张体银井伟白泉阳王武军张志灯闫诚于师宇福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001

我国是一个渔业大国,也是一个水产养殖大国,有数以百万计的人以渔业和水产养殖为生,然而水生动物疾病给水产养殖行业造成的经济损失越来越巨大,每年我国因渔业病害带来的经济损失达100多亿元。近年来我国从境外引进水产苗种逐年增多,随... 详细信息

我国是一个渔业大国,也是一个水产养殖大国,有数以百万计的人以渔业和水产养殖为生,然而水生动物疾病给水产养殖行业造成的经济损失越来越巨大,每年我国因渔业病害带来的经济损失达100多亿元。近年来我国从境外引进水产苗种逐年增多,随之而来的是一些新的水生动物疫病开始传人我国,这些新的水生动物疫病来到了新的气候环境,面对新的养殖结构,摆脱了其在源发地的一些天然控制机制的束缚,呈现出暴发式的流行,给我国的养殖业带来巨大的经济损失。

关键词：水产养殖水产苗种甲壳类气候环境风险分析桃拉综合征黄头病造血组织风险评估风险等级

检测蜜蜂急性麻痹病毒TaqMan实时荧光RT-PCR方法的建立和初步应用

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微生物学通报 2021年第12期48卷 5001-5007页

作者：张体银黄嫦娇田国宁林素洁王武军张志灯福州海关技术中心福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350003 潍坊海关技术中心山东潍坊261041

【背景】蜜蜂急性麻痹病毒(Acute Bee Paralysis Virus,ABPV)是一种高毒力的蜜蜂病毒,可以引起蜜蜂的大批死亡和蜂群衰竭。【目的】建立一种快速、灵敏的ABPV实时荧光RT-PCR检测方法。【方法】根据ABPV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和探... 详细信息

【背景】蜜蜂急性麻痹病毒(Acute Bee Paralysis Virus,ABPV)是一种高毒力的蜜蜂病毒,可以引起蜜蜂的大批死亡和蜂群衰竭。【目的】建立一种快速、灵敏的ABPV实时荧光RT-PCR检测方法。【方法】根据ABPV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和探针,通过对引物、探针浓度和退火温度等反应条件进行优化,建立基于TaqMan探针检测ABPV的实时荧光RT-PCR方法,并对方法的灵敏性、特异性和稳定性进行验证。【结果】ABPV实时荧光RT-PCR检测方法在9.8×101-9.8×108 copies/μL之间呈现良好的线性关系,线性相关系数R2为0.998,扩增效率为103.8%。该方法的检测灵敏度为9.8copies/μL;对其他蜜蜂病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性;重复性试验结果显示组内和组间的变异系数分别为0.19%-0.80%和0.57%-1.07%,重复性良好。对2018年-2019年在福建地区采集的70份蜜蜂样品进行ABPV检测,阳性率为2.86%。【结论】建立的ABPV实时荧光RT-PCR检测方法能用于该病的实验室检测、流行病学调查和疫情监测。

关键词：蜜蜂急性麻痹病毒实时荧光RT-PCR 衣壳蛋白基因