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NRG1在肝细胞肝癌中杂合性丢失和蛋白表达的研究

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NRG1在肝细胞肝癌中杂合性丢失和蛋白表达的研究

作者：张义灵第四军医大学

学位级别：硕士

【背景】肝细胞肝癌（hepatocellularcarcinoma,HCC）是最常见恶性肿瘤之一，它的发生发展是一个多基因改变，多步骤不断累积的复杂过程。遗传因素在这个过程中起到重要作用。神经调节蛋白1(neuregulin1，NRG1）基因位于8p12区域，是... 详细信息

【背景】肝细胞肝癌（hepatocellularcarcinoma,HCC）是最常见恶性肿瘤之一，它的发生发展是一个多基因改变，多步骤不断累积的复杂过程。遗传因素在这个过程中起到重要作用。神经调节蛋白1(neuregulin1，NRG1）基因位于8p12区域，是新近发现的一个抑癌基因（tumorsuppressorgene,TSG），在多种肿瘤中存在杂合性丢失（lossofheterozygosity,LOH），但NRG1与HCC之间关系的研究尚未见报道。【目的】分析HCC组织中NRG1基因的两个多态性位点D8S278和D8S499LOH情况及其与NRG1蛋白表达水平之间的关系，探讨NRG1在HCC发生发展中的作用及NRG1致HCC发生的可能机制。【方法】（1）收集HCC及癌旁正常组织标本共74例，酚氯仿法抽提组织DNA，经琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度仪检测抽提物是否合格。（2）从GenBank数据库中获得NRG1基因的两个多态性位点D8S278和D8S499的引物序列，合成引物并进行PCR扩增反应。（3）扩增出来的产物进行变性聚丙烯凝胶电泳（denaturingpolyacrylamidegelelectrophoresis,D-PAGE），并硝酸银染色。对比HCC组织和癌旁正常组织电泳图，分析两多态性位点的杂合性丢失情况。（4）用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）方法检测HCC组织和癌旁正常组织中NRG1蛋白的表达情况。（5）采用SPSS17.0统计软件对结果进行统计学分析处理。【结果】（1）D8S278的信息个体共74例，其中24例发生了LOH，频率为32.43%;D8S499的信息个体为69例，26例发生了LOH，频率为37.68%。癌组织中至少有一个位点发生LOH的总频率为48.65%（36/74），两位点同时发生LOH的有7例。（2）NRG1在HCC中的阳性表达率为67.57%（50/74），在正常组织中的阳性表达率为（97.30%，72/74），两者相比，NRG1在HCC组织中的表达率显著低于正常组织（P<0.05）。（3）在发生LOH组中NRG1表达降低或缺失的例数较未发生LOH组多，两组之间具有显著性差异（P<0.05）。NRG1表达下调与肿瘤大小、Edmondson分级相关（P=0.02、P=0.01），而与年龄、性别、HBsAg、AFP、肝硬化和肝内外转移无明显相关。【结论】（1）NRG1基因两个微卫星多态性位点的LOH在HCC组织中发生率较高，提示NRG1可能是HCC的一个潜在抑癌基因。（2）NRG1在HCC组织中表达下调或缺失，促进了肿瘤的发生发展。（3）NRG1基因在HCC组织中失活的机制可能是其等位基因发生了杂合性丢失而引起。（4）NRG1与HCC的发生发展密切相关，检测NRG1，可为HCC诊断、预后评价提供分子依据，并为HCC的靶向治疗提供新的候选靶基因。

关键词：肝细胞肝癌 NRG1 杂合性丢失聚合酶链反应免疫组织化学

基于Matlab GUI受不稳定约束弹簧振子运动的研究

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实验室研究与探索 2018年第5期37卷 27-30页

作者：张义灵李洁梁冬梅罗志荣玉林师范学院物理科学与工程技术学院广西玉林537000

利用拉格朗日方程推导出在水平面上受不稳定约束弹簧振子运动的动力学方程,运用Matlab软件对动力学方程进行数值求解,并通过Matlab图形用户界面(Graphical User Interface,GUI)对不同条件下弹簧振子运动进行仿真,绘制了弹簧振子坐标随... 详细信息

利用拉格朗日方程推导出在水平面上受不稳定约束弹簧振子运动的动力学方程,运用Matlab软件对动力学方程进行数值求解,并通过Matlab图形用户界面(Graphical User Interface,GUI)对不同条件下弹簧振子运动进行仿真,绘制了弹簧振子坐标随时间变化的演化曲线、相图以及运动轨迹,得到了更为直观的弹簧振子运动规律。结果表明,弹簧振子运动与弹簧一端的运动速度大小和初始角度有关;在一定条件下,弹簧振子作准周期运动。

关键词：不稳定约束水平面弹簧振子 Matlab图形用户界面

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二维晶粒短长程拓扑相关性的相场法研究

热加工工艺 2018年第20期47卷 58-62页

作者：李洁梁冬梅张义灵罗志荣玉林师范学院物理科学与工程技术学院广西玉林537000 广西高校复杂系统优化与大数据处理重点实验室广西玉林537000

采用相场法研究了二维晶粒的拓扑特性。对105363个晶粒的边数、面积分布和短长程拓扑相关性进行定量表征。结果表明,晶粒边数分布为对数正态分布;晶粒的边数与晶粒面积呈正相关;中心晶粒与近邻晶粒的短程拓扑相关性较强,而与长程拓扑相... 详细信息

采用相场法研究了二维晶粒的拓扑特性。对105363个晶粒的边数、面积分布和短长程拓扑相关性进行定量表征。结果表明,晶粒边数分布为对数正态分布;晶粒的边数与晶粒面积呈正相关;中心晶粒与近邻晶粒的短程拓扑相关性较强,而与长程拓扑相关性较弱。

关键词：拓扑特性短长程晶粒边数相场法

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WIF-1启动子甲基化与肿瘤

现代肿瘤医学 2011年第11期19卷 2345-2348页

作者：张义灵冯英明第四军医大学唐都医院肿瘤科陕西西安710038

WIF-1(Wnt Inhibitory Factor-1)是Wnt信号通路的一种拮抗物,能在胞外与Wnt蛋白结合而抑制Wnt信号转导。近年来的研究表明,多种肿瘤中均存在WIF-1基因启动子的异常甲基化。WIF-1启动子甲基化使WIF-1蛋白表达降低,从而降低了抑制Wnt信号... 详细信息

WIF-1(Wnt Inhibitory Factor-1)是Wnt信号通路的一种拮抗物,能在胞外与Wnt蛋白结合而抑制Wnt信号转导。近年来的研究表明,多种肿瘤中均存在WIF-1基因启动子的异常甲基化。WIF-1启动子甲基化使WIF-1蛋白表达降低,从而降低了抑制Wnt信号转导的作用,使细胞发生增殖、分化,促进肿瘤的发生发展。检测组织中WIF-1甲基化程度,可作为肿瘤早期诊断和评估预后的生物学标志物;运用去甲基化剂如5-氮杂胞苷,可逆转WIF-1的甲基化状态,从而成为肿瘤治疗的一个新靶点。

关键词： WIF-1 肿瘤 DNA甲基化

子宫内膜癌细胞外泌体长链非编码RNA-C00473对人脐静脉内皮细胞VEGF和VEGFR-2表达的影响

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山西医科大学学报 2022年第3期53卷 299-304页

作者：贺新兰飞马媛张义灵空军军医大学唐都医院肿瘤科西安710038 空军军医大学唐都医院妇产科

目的分析子宫内膜癌患者血清外泌体(exosome, Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell, HUVECs)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)表达的影响。方法选取在空军军医大学唐都医院手术治疗的15例子宫内膜癌患者为研究对象,同时选取15例子宫内膜正常患者作为对照,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组血清外泌体中lncRNA-C00473表达情况。将Ishikawa细胞分为过表达组(转染pcDNA3.1-C00473)、抑制组(转染siRNA-C00473)和空白组,并提取各组外泌体。透射电镜、蛋白免疫印迹(Western blot)、纳米颗粒跟踪分析技术(nanosight tracking analysis, NTA)鉴定外泌体粒径及浓度。体外培养HUVEC细胞并添加提取的外泌体,分为过表达Exo组(添加C00473过表达组血清Exo)、抑制Exo组(添加C00473抑制组血清Exo)和对照组(添加未转染组血清Exo)。qRT-PCR、Western blot检测各组HUVEC中VEGF、VEGFR-2表达情况。结果与子宫内膜正常患者相比,子宫内膜癌患者血清外泌体中lncRNA-C00473的表达增高(P<0.05)。从各组Ishikawa细胞中提取的外泌体均具有较好的粒径及浓度、形态,并表达特征性蛋白CD63、CD9。与抑制Exo组相比,过表达Exo组HUVEC细胞中VEGF、VEGFR-2在mRNA和蛋白水平均增高(均P<0.05)。结论 lncRNA-C00473在子宫内膜癌患者血清外泌体中高表达,且过表达lncRNA-C00473的Ishikawa细胞来源外泌体能够促进HUVEC细胞中VEGF、VEGFR-2表达增高。

关键词：长链非编码RNA 外泌体子宫内膜癌细胞人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子

子宫内膜癌细胞外泌体lnc-C00473影响人脐静脉内皮细胞成管能力

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热带医学杂志 2022年第10期22卷 1334-1339,1320页

作者：张义灵兰飞马媛贺新中国人民解放军空军军医大学唐都医院肿瘤科陕西西安710038 中国人民解放军空军军医大学唐都医院妇产科陕西西安710038

目的分析子宫内膜癌患者血清外泌体(Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成管能力的影响。方法采用qRT-PCR检测15例子宫内膜癌患者(研究组)与15例子宫内膜正常患者(... 详细信息

目的分析子宫内膜癌患者血清外泌体(Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成管能力的影响。方法采用qRT-PCR检测15例子宫内膜癌患者(研究组)与15例子宫内膜正常患者(对照组)血清外泌体中lncRNA-C00473表达情况。将Ishikawa细胞分为过表达组(转染pcDNA3.1-C00473)、敲低组(转染siRNA-C00473)、空白对照组(未转染组),并提取各组外泌体。采用透射电镜、蛋白免疫印迹、纳米颗粒跟踪分析技术鉴定外泌体。HUVEC添加外泌体培养分为过表达Exo组(C00473过表达组外泌体)、抑制Exo组(C00473抑制组外泌体)、对照组(未转染组外泌体)。采用管样形成实验检测各组HUVEC细胞功能。结果与对照组比较,研究组血清外泌体中lncRNA-C00473的表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。三组Ishikawa细胞外泌体具有较好的粒径及浓度、形态,并表达特征性蛋白CD63、CD9。与对照组比较,过表达Exo组HUVEC成管能力增强,抑制Exo组HUVEC成管能力降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论lncRNA-C00473在子宫内膜癌患者血清外泌体中高表达,且过表达lncRNA-C00473的子宫内膜癌Ishikawa细胞来源外泌体能够促进HUVEC成管能力。

关键词：长链非编码RNA 外泌体子宫内膜癌细胞人脐静脉内皮细胞

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参数微扰法求解三维非线性谐振子问题

广西物理 2018年第4期39卷 5-8页

作者：张义灵梁冬梅李洁罗志荣玉林师范学院物理与电信工程学院广西玉林537000

采用参数微扰法求解了在不同微扰下三维非线性谐振子的一级近似能量。结果表明,与传统微扰法相比,参数微扰法使求解一级近似能量的计算过程更简洁,结果更精确。

关键词：参数微扰法三维非线性谐振子微扰项

培美曲塞联合奈达铂治疗老年晚期非小细胞肺癌患者的近、远期疗效及对不良反应的影响

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临床医学研究与实践 2020年第2期5卷 26-27页

作者：张小燕兰飞张义灵唐都医院

目的研究培美曲塞联合奈达铂治疗老年晚期非小细胞肺癌患者的近、远期疗效及对不良反应的影响。方法将我院收治的108例老年非小细胞肺癌患者采用随机数字法分为对照组和观察组,各54例。对照组给予培美曲塞治疗,观察组给予培美曲塞联合... 详细信息

目的研究培美曲塞联合奈达铂治疗老年晚期非小细胞肺癌患者的近、远期疗效及对不良反应的影响。方法将我院收治的108例老年非小细胞肺癌患者采用随机数字法分为对照组和观察组,各54例。对照组给予培美曲塞治疗,观察组给予培美曲塞联合奈达铂治疗。比较两组患者的近、远期疗效以及不良反应发生情况。结果治疗后,两组的近期疗效无显著差异(P>0.05),但观察组的CR率高于对照组(P0.05)。结论培美曲塞联合奈达铂对老年晚期非小细胞肺癌患者的近期疗效优于单一使用培美曲塞,易被患者耐受,但两种方法的远期疗效和不良反应发生情况无显著差异。

关键词：培美曲塞奈达铂晚期非小细胞癌近期疗效远期疗效

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MATLAB在点的复合运动中的应用

广西物理 2016年第3期37卷 28-32页

作者：苏霜张义灵吉春燕罗志荣玉林师范学院物理科学与工程技术学院广西玉林537000

在理论力学课程中,点的复合运动内容相对复杂,学生难以从复杂解析式中想象其运动规律。本文应用MATLAB软件强大的绘图功能,能够清晰地展示出点的复合运动中各物理量之间的关系图像,使其运动过程更加直观,有助于学生更好地理解和掌握运... 详细信息

在理论力学课程中,点的复合运动内容相对复杂,学生难以从复杂解析式中想象其运动规律。本文应用MATLAB软件强大的绘图功能,能够清晰地展示出点的复合运动中各物理量之间的关系图像,使其运动过程更加直观,有助于学生更好地理解和掌握运动规律,从而提高理论力学的教学效果。

关键词：理论力学点的复合运动 MATLAB