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作者：庄哈娜南方医科大学

学位级别：硕士

一.研究背景支气管哮喘(简称哮喘)目前在全球范围内有较高的发病率,并呈逐渐上升的趋势,是当今世界威胁公共健康最常见的慢性肺部疾病,是发达国家中儿童支气管疾病发病率最高的一种。根据世界卫生组织(WHO)发布的报告指出,目前全球约有... 详细信息

一.研究背景支气管哮喘(简称哮喘)目前在全球范围内有较高的发病率,并呈逐渐上升的趋势,是当今世界威胁公共健康最常见的慢性肺部疾病,是发达国家中儿童支气管疾病发病率最高的一种。根据世界卫生组织(WHO)发布的报告指出,目前全球约有3亿哮喘患者,其所造成的社会负担超过了结核病和艾滋病的总和。我国的哮喘患者已达3000万以上,其死亡率位列全球第一。因此,支气管哮喘已经成为全球范围内亟待解决的公共卫生难题。哮喘是由免疫、遗传和环境等多重因素共同作用的结果,其发病机制目前尚未完全明了。既往的研究多集中在Th2介导的嗜酸性粒细胞性炎症。近几年,随着遗传学和分子生物学的不断发展,哮喘遗传病因学成为研究的热点。对哮喘遗传机制及其相关基因研究己逐步深入,并证实哮喘是一种多基因遗传病。目前报道已有超过100个基因与哮喘发病相关,如5q31、6p21上的MHC分子,7q、14q上的T细胞受体基因,11q12、11q13、12q13-24、13q14、20p13等。 10号染色体上磷酸酶与张力蛋白同源缺失性基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome10,PTEN)是1997年由Steck等3个研究小组先后发现的一个具有双重特异磷酸酶活性的抑癌基因,是迄今发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因。PTEN基因定位于10q23.3上,全长200kb,包含9个外显子和8个内含子,编码由403个氨基酸组成的细胞质蛋白,相对分子量为50000。PTEN基因主要通过磷酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K/Akt)信号转导途径的负性调控,对细胞增殖、生长、凋亡、黏附、迁移和血管生长等进行调节,在维持细胞的结构和信号转导等方面起重要作用。目前除第9外显子未发现有基因突变,其余8个外显子均发现有突变,其中第5、第8外显子有较高的突变率。PTEN基因是继p53基因之后发现的人类肿瘤中突变率最高的抑癌基因。目前已在恶性胶质瘤、原发性乳腺癌、子宫内膜癌、前列腺癌、肝癌等肿瘤中证实了存在这种基因的表达异常。PTEN基因及其调控信号转导异常涉及多个系统疾病及恶性肿瘤的发生、发展,因而研究PTEN基因及其介导的信号转导途径可为治疗疾病新策略研发提供一定理论依据。近年,PTEN基因在过敏性气道炎症中的作用也越来越受到关注。韩国学者Yong等通过动物实验研究首次报道了PTEN可能通过抑制哮喘模型鼠气道内嗜酸粒细胞(eosinophils,EOS)脱颗粒和活化,降低IL-4、IL-5的浓度,从而减轻嗜酸性粒细胞炎症和气道高反应性。Lee等研究提示,PTEN可通过下调血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,减轻气道炎症和炎性渗出。Adachi等发现,PTEN基因在过敏性炎症反应中通过嗜酸粒细胞存活和趋化的负向调节发挥重要作用。近年国外学者发现PTEN对肺组织干细胞的动态平衡及分化也起重要作用,可对肺损伤起保护作用。国内动物实验研究发现,气道上皮细胞是PTEN主要表达细胞,哮喘大鼠PTEN蛋白表达明显减少,PTEN可减少Th2细胞因子的表达,从而影响Th1/Th2细胞因子的平衡状态;研究发现地塞米松可通过上调PTEN的表达而控制哮喘发作,这可能为地塞米松抑制哮喘气道炎症形成的重要作用机制。多项体外实验发现,上调PTEN表达能有效抑制人气道平滑肌细胞的增殖,可能主要是通过抑制PI3K/Akt信号转导途径而起作用的。目前国内外对于PTEN基因突变与支气管哮喘的相关性研究报道较少。嗜酸粒细胞的浸润是支气管哮喘的重要特征,嗜酸粒细胞是变应性疾病中最活跃的一类细胞。速发型变应性疾病的组织和器官的局部以及渗出液中均有大量的嗜酸粒细胞浸润,这是变应性发作的一个重要特征。嗜酸粒细胞的聚集和活化是支气管哮喘发病机制中的中心环节。多项动物实验通过剔除嗜酸粒细胞基因及人体实验通过使用抗IL-5单抗,使嗜酸粒细胞缺失,均证实了嗜酸粒细胞活化在哮喘的发病中起关键作用。嗜酸粒细胞在Th2类细胞参与的气道过敏性炎症中也起发挥免疫调节作用。它对于哮喘的发作、预后的判断和药物疗效的评价有重要作用,因此嗜酸粒细胞已经成为哮喘治疗的一个有力的标靶。主要由嗜酸粒细胞、肥大细胞、T辅助细胞(Th细胞)等炎症细胞参与的慢性过敏性气道炎症是支气管哮喘的主要特征之一。CD4+T细胞(即Th细胞)是T细胞的一种重要细胞亚群,是哮喘发生和发展过程中最重要的调控者。未致敏的CD4+T细胞(Th0细胞)在受到抗原刺激后主要分化为Thl和Th2两个细胞亚群。正常人Th1/Th2类细胞因子互相依存和制约,保持动态平衡。近年来由学者提出了Th1/Th2类细胞因子失

关键词：哮喘 PTEN基因突变 DNA序列分析 IL-4 IL-5 IFN-γ

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肾上腺皮质激素联合常规抗菌治疗对小儿重症感染的临床疗效及其对炎性反应的影响

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实用中西医结合临床 2017年第6期17卷 82-83页

作者：许美庄哈娜刘瑜广东深圳市妇幼保健院儿科深圳518028

目的:分析肾上腺皮质激素联合常规抗菌治疗对小儿重症感染的临床疗效及其对炎性反应的影响。方法:选取我院收治的重症感染患儿50例,随机分为常规组和治疗组,每组25例。常规组采用常规抗菌治疗,治疗组在此基础上加用肾上腺皮质激素进行治... 详细信息

目的:分析肾上腺皮质激素联合常规抗菌治疗对小儿重症感染的临床疗效及其对炎性反应的影响。方法:选取我院收治的重症感染患儿50例,随机分为常规组和治疗组,每组25例。常规组采用常规抗菌治疗,治疗组在此基础上加用肾上腺皮质激素进行治疗,比较两组的治疗效果、炎性水平及并发症发生情况。结果:治疗后,治疗组的白细胞与中性粒细胞计数均小于常规组,差异有统计学意义,P0.05。结论:肾上腺皮质激素联合常规抗菌治疗小儿重症感染,能降低炎性水平,控制中性粒细胞与白细胞计数。

关键词：小儿重症感染抗菌炎性反应肾上腺皮质激素

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脓毒症患儿血清IL-IR1、APC、PCT的动态变化研究

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现代诊断与治疗 2017年第4期28卷 750-751页

作者：许美庄哈娜刘瑜深圳市妇幼保健院儿科广东深圳518028

观察脓毒症患儿血清白细胞介素-1(IL-1R1)、活化蛋白C(APC)、降钙素原(PCT)的动态变化,为临床诊疗提供依据。将60例脓毒症患儿分为脓毒症组30例和严重脓毒症组各30例,分别于入院第1、3、7d检测血清IL-IR1、APC、PCT水平;并选择同期体检... 详细信息

观察脓毒症患儿血清白细胞介素-1(IL-1R1)、活化蛋白C(APC)、降钙素原(PCT)的动态变化,为临床诊疗提供依据。将60例脓毒症患儿分为脓毒症组30例和严重脓毒症组各30例,分别于入院第1、3、7d检测血清IL-IR1、APC、PCT水平;并选择同期体检健康儿童30例为对照组,于体检时采集血清,检测IL-IR1、APC、PCT水平。脓毒症组、严重脓毒症组与对照组相比,血清IL-1R1水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且第1、3d严重脓毒症组较脓毒症组血清IL-1R1水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);而第7d严重脓毒症组较脓毒症组血清IL-1R1水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症组、严重脓毒症组与对照组相比,血清APC水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且第1、3、7d严重脓毒症组较脓毒症组APC水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症组、严重脓毒症组与对照组相比,血清PCT水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且第1、3、7天严重脓毒症组较脓毒症组APC水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症患儿血清PCT、APC水平与病情严重程度分别呈正、负相关,可作为脓毒症诊断生物标志物,脓毒症组IL-1R1与病情严重程度不呈相关性,可能不适合作为脓毒症诊断生物标志物。

关键词：儿童脓毒症白细胞介素-1 活化蛋白C 降钙素原

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毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3水平测定

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现代诊断与治疗 2016年第10期27卷 1872-1873页

作者：庄哈娜刘瑜许美赵宏霞深圳市妇幼保健院广东深圳518000

检测毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3[25-(OH)D3]水平,探讨维生素D(Vit D)在儿童毛细支气管炎发病中的作用。选择毛细支气管炎患儿50例,同期本院门诊健康体检儿童50例,分别设为观察组及对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清25-(OH)D3... 详细信息

检测毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3[25-(OH)D3]水平,探讨维生素D(Vit D)在儿童毛细支气管炎发病中的作用。选择毛细支气管炎患儿50例,同期本院门诊健康体检儿童50例,分别设为观察组及对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清25-(OH)D3水平。按血清25-(OH)D3水平将观察组分为Vit D正常组及Vit D缺乏组,分别记录患儿喘憋消失时间、肺部体征消失时间、住院天数。观察组患儿血清25-(OH)D3浓度明显低于正常对照组(P<0.01);Vit D正常组患儿喘憋消失时间、肺部体征消失时间、住院天数较Vit D缺乏组明显缩短(P均<0.05)。Vit D水平低下影响临床症状缓解,延长住院时间,提示Vit D缺乏可能与毛细支气管炎发病相关,是儿童毛细支气管炎的易感因素。

关键词：毛细支气管炎维生素D 25-(OH)D3

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支气管哮喘患儿血清白细胞介素-4、白细胞介素-5和γ干扰素水平检测的意义

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实用儿科临床杂志 2011年第4期26卷 270-271页

作者：赵宏霞庄哈娜柯宇星李丽红南方医科大学附属深圳妇幼保健院儿科广东深圳518028 长春市儿童医院儿内科长春130021

目的探讨支气管哮喘患儿血清IL-4、IL-5和γ干扰素(IFN-γ)水平及其在支气管哮喘发病中的作用。方法选取30例门诊随诊的哮喘缓解期患儿作为哮喘组,30例同期健康体检儿童作为健康对照组,2组儿童均于清晨空腹取外周静脉血1.0 mL制备血清,... 详细信息

目的探讨支气管哮喘患儿血清IL-4、IL-5和γ干扰素(IFN-γ)水平及其在支气管哮喘发病中的作用。方法选取30例门诊随诊的哮喘缓解期患儿作为哮喘组,30例同期健康体检儿童作为健康对照组,2组儿童均于清晨空腹取外周静脉血1.0 mL制备血清,应用ELISA法对2组儿童血清IL-4、IL-5和IFN-γ水平进行测定。结果哮喘组患儿血清IL-4、IL-5水平均较健康对照组升高,差异有统计学意义(t=2.48、2.63,Pa<0.05),但其血清IFN-γ水平较健康对照组显著降低(t=3.02,P<0.01)。结论哮喘患儿存在Th1/Th2细胞免疫失衡,Th1免疫功能低下,IFN-γ下调可能是哮喘发病的重要原因,对哮喘有负向调节作用。哮喘患儿同时存在Th2细胞免疫功能亢进,以IL-4、IL-5为代表的Th2免疫功能在儿童哮喘的发病中发挥正性促炎作用。

关键词：哮喘白细胞介素-4 白细胞介素-5 γ干扰素酶联免疫吸附试验儿童

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呼吸系统疾病患儿诊治中肺功能检查的临床意义分析

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实用中西医结合临床 2016年第5期16卷 55-57页

作者：庄哈娜许美刘瑜赵宏霞广东省深圳市妇幼保健院深圳518000

目的：探讨呼吸系统疾病患儿诊治中肺功能检查的临床意义。方法：从2012年4月~2015年3月我院因呼吸道系统疾病住院治疗的患儿中抽取150例作为本次研究对象,分别为支气管肺炎（37例）、毛细支气管炎（38例）、支气管炎（29例）、支气管... 详细信息

目的：探讨呼吸系统疾病患儿诊治中肺功能检查的临床意义。方法：从2012年4月~2015年3月我院因呼吸道系统疾病住院治疗的患儿中抽取150例作为本次研究对象,分别为支气管肺炎（37例）、毛细支气管炎（38例）、支气管炎（29例）、支气管哮喘（30例）、右下肺炎（6例）、喉炎（5例）、先天性喉喘鸣（5例）,所有患儿均行肺功能检测。结果：毛细支气管炎与支气管哮喘患儿的小气道阻力增高率较支气管肺炎、支气管炎、右下肺炎、喉炎及先天性喉喘鸣明显更高,而支气管肺炎患儿的总气道阻力阳性率及功能残气量异常阳性率较支气管炎、支气管哮喘、毛细支气管炎、喉炎、先天性喉喘鸣及右下肺炎患儿明显更高（P〈0.05）;患儿的限制性通气障碍阳性率均在7%以下,右下肺炎患儿的大气道阻塞阳性率较其他组更高,其他均在15%以下,但对比均差异不显著（P〉0.05）。结论：肺功能检查用于呼吸系统疾病诊断及疗效评估中,不同疾病患儿其疾病特征表现不同,对疾病的诊断及疗效评估具有重临床价值。

关键词：呼吸系统疾病儿童肺功能检查

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哮喘患儿血清白细胞介素-4、白细胞介素-17和干扰素-γ水平的检测

哮喘患儿血清白细胞介素-4、白细胞介素-17和干扰素-γ水平的检测

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中华医学会第十七次全国儿科学术大会

作者：赵宏霞刘瑜庄哈娜许美南方医科大学附属深圳妇幼保健院儿内科

目的研究支气管哮喘患儿血清细胞因子白细胞介素-4(Interleukine-4,IL-4)、白细胞介素-17(Interleukine-17,IL-17)和干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的水平,探讨其在儿童支气管哮喘发病中的作用,以进一步揭示儿童支气管哮喘发病的免疫...

目的研究支气管哮喘患儿血清细胞因子白细胞介素-4(Interleukine-4,IL-4)、白细胞介素-17(Interleukine-17,IL-17)和干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的水平,探讨其在儿童支气管哮喘发病中的作用,以进一步揭示儿童支气管哮喘发病的免疫学机制。方法取30例门诊随诊的哮喘患儿(缓解期)设为哮喘组,30例同期健康体检儿童设为对照组,两组患儿均于清晨空腹取外周静脉血1.0mL制备血清,应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme-labeled immunosorbent assay,ELISA)技术,对两组儿童血清细胞因子IL-4、IL-17和IFN-γ水平进行测定。测定结果使用SPSS13.0统计软件进行数据的分析处理,采用t检验进行组间差异性的比较,P<0.05为差异有统计学意义。结果哮喘组患儿血清IL-4水平较对照组升高,t=28.19,P<0.001,差异具有统计学意义;哮喘组患儿血清IL-17水平相对于对照组亦升高,t=3.26,P<0.05,差异具有统计学意义;哮喘组患儿血清IFN-γ水平较对照组明显降低,t=-13.24,P<0.001,差异有显著的统计学意义。结论哮喘患儿存在Th1/Th2细胞免疫失衡:以IFN-γ的下调为标志的Th1免疫功能低下,及IL-4为代表的Th2细胞免疫功能亢进。此外,Th17/IL-17与哮喘的发生可能具有一定的相关性。

关键词：

来源： cnki会议评论

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哮喘患儿血清白细胞介素-4、白细胞介素-17和干扰素-γ水平的检测

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中国实验诊断学 2013年第4期17卷 735-737页

作者：刘瑜赵宏霞曹敏庄哈娜许美南方医科大学附属深圳妇幼保健院儿科广东深圳518028

支气管哮喘（简称哮喘）是一种以气道阻塞、气道炎症和气道高反应性为特征的慢性呼吸道疾病,为儿童期最常见的慢性肺病,近年来其发病率有逐年增高趋势,世界范围内儿童哮喘流行病学调查结果显示,儿童哮喘患病率较10年前明显升高。全世界... 详细信息

支气管哮喘（简称哮喘）是一种以气道阻塞、气道炎症和气道高反应性为特征的慢性呼吸道疾病,为儿童期最常见的慢性肺病,近年来其发病率有逐年增高趋势,世界范围内儿童哮喘流行病学调查结果显示,儿童哮喘患病率较10年前明显升高。全世界大约有2.35亿哮喘患儿,每年因哮喘而死亡的病人数高达万人,

关键词：哮喘患儿白细胞介素-17 白细胞介素-4 干扰素-γ 慢性呼吸道疾病血清检测气道高反应性

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支气管哮喘患儿PTEN基因突变分析

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实用儿科临床杂志 2012年第9期27卷 674-676页

作者：庄哈娜赵宏霞曹敏杨勇罗丹阳南方医科大学附属深圳妇幼保健院儿科广东深圳518028

目的探讨10号染色体上磷酸酶与张力蛋白同源缺失的基因(PTEN)与儿童支气管哮喘(哮喘)的相关性及其与嗜酸性粒细胞(EOS)的关系,为哮喘的发病机制及治疗提供理论依据。方法 30例哮喘复发患儿(临床缓解期)作为哮喘组,30例健康儿童设为健康... 详细信息

目的探讨10号染色体上磷酸酶与张力蛋白同源缺失的基因(PTEN)与儿童支气管哮喘(哮喘)的相关性及其与嗜酸性粒细胞(EOS)的关系,为哮喘的发病机制及治疗提供理论依据。方法 30例哮喘复发患儿(临床缓解期)作为哮喘组,30例健康儿童设为健康对照组,2组儿童均于清晨空腹留取外周静脉血1 mL,制备血涂片后提取全基因组DNA,应用聚合酶链反应及克隆、基因测序等方法分析2组儿童PTEN基因第5、第8外显子基因型。并于高倍镜下进行其外周血EOS计数。结果哮喘组患儿PTEN基因第8内含子(intron 8)发现突变,突变率为86.7%(26/30例),健康对照组未发现基因突变。哮喘组患儿外周血EOS计数明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.001);发生基因突变的哮喘患儿外周血EOS计数高于无突变的哮喘儿童,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PTEN基因在哮喘儿童中存在突变,可能通过影响RNA的选择性剪切及抑制EOS的活化和趋化在哮喘的发病中发挥作用。

关键词：支气管哮喘 PTEN基因突变 DNA序列分析

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支气管哮喘儿童的IL-17F基因突变分析

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中国实验诊断学 2014年第10期18卷 1649-1651页

作者：赵宏霞刘瑜庄哈娜南方医科大学附属深圳妇幼保健院儿内科广东深圳518028

目的探讨白细胞介素-17F基因多态性与儿童支气管哮喘的相关性,为支气管哮喘的易感基因筛选提供可能的理论依据。方法取本院门诊随诊的60例哮喘患儿设为哮喘组,60例健康儿童设为对照组,两组儿童均于清晨空腹留取外周静脉血2ml,提取全基因... 详细信息

目的探讨白细胞介素-17F基因多态性与儿童支气管哮喘的相关性,为支气管哮喘的易感基因筛选提供可能的理论依据。方法取本院门诊随诊的60例哮喘患儿设为哮喘组,60例健康儿童设为对照组,两组儿童均于清晨空腹留取外周静脉血2ml,提取全基因组DNA,应用聚合酶链反应及克隆、基因测序方法分析IL-17F基因序列rs763780(H161R)基因多态性。结果 IL-17F基因序列rs763780(H161R)基因型在两组内均未检测到突变型CC,rs763780(H161R)基因型(TC/TT)在两组间内的分布有明显的差异(χ2=5.71,P<0.05)。TC基因型OR和95%可信区间(CI)为2.09(1.12-3.90),TT基因型OR和95%CI为0.76(0.60-0.95)。结论 IL-17F基因多态性rs763780(H161R)基因型分布(TC/TT)在两组间存在差异,其多态性可能与哮喘相关,两组内均未发现基因型CC在,基因型TC可能是哮喘发病的危险因素。

关键词：哮喘 IL-17F基因突变 DNA序列分析

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