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sox9和LMP1基因慢病毒载体共转染兔骨髓间充质干细胞后的表达

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中国组织工程研究 2014年第50期18卷 8054-8060页

作者：刘伟王杰幸永明李纯志陈昌伟赵宏龚德军解放军第113医院骨科浙江省宁波市315040 解放军第二军医大学附属长海医院胸心外科实验室上海市200433

背景:与传统细胞因子诱导液诱导的方法相比,将基因通过慢病毒转染入宿主细胞,可以得到长期高效的持续表达,采取双/多基因共修饰治疗的策略,较采用单一的因子来诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞方向转化可获得更好的效果。目的:构建sox... 详细信息

背景:与传统细胞因子诱导液诱导的方法相比,将基因通过慢病毒转染入宿主细胞,可以得到长期高效的持续表达,采取双/多基因共修饰治疗的策略,较采用单一的因子来诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞方向转化可获得更好的效果。目的:构建sox9基因慢病毒载体以及LMP1基因慢病毒载体,并共转染兔骨髓间充质干细胞,观察SOX9和LMP1基因的表达情况。方法:双酶切从Gene Art提供的含sox9基因序列的质粒13ABIV6C_1366933并克隆到p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP载体,获得含sox9基因的质粒p LMIG-13GS0345-1。通过单链oligo设计及合成LMP1基因序列,并克隆到p Lenti6.3_MCS_IRES2-Ds Red-Monomer载体,获得含LMP1基因的质粒13GS0318-1。再通过293T细胞包装后获得绿色荧光蛋白标记的sox9基因慢病毒载体(Lenti-SOX9-GFP),以及红色荧光蛋白的LMP1基因慢病毒载体(Lenti-LMP1-RFP)。将Lenti-SOX9-GFP和Lenti-LMP1-RFP共转染兔骨髓间充质干细胞,观察sox9基因及LMP1基因的表达情况。结果与结论:测序结果显示质粒p LMIG-13GS0345-1和13GS0318-1中的插入序列与基因库中sox9(NM_000346)及LMP1(AF345904.1)基因序列完全一致,成功构建Lenti-SOX9-GFP和Lenti-LMP1-RFP慢病毒载体。Lenti-SOX9-GFP和Lenti-LMP1-RFP共转染兔骨髓间充质干细胞后同一视野下可观察到绿色和红色荧光蛋白的共表达,RT-PCR与Western Blot检测结果证明Lenti-SOX9-GFP和Lenti-LMP1-RFP可成功高效共转染目的细胞并可在m RNA及蛋白水平同时表达SOX9及LMP1。结果说明实验成功构建了绿色荧光蛋白标记的携带sox9基因的Lenti-SOX9-GFP慢病毒载体,以及红色荧光蛋白的携带LMP1基因的Lenti-LMP1-RFP慢病毒载体,为sox9和LMP1基因共修饰组织工程髓核的研究提供前期实验基础。

关键词：干细胞间质干细胞慢病毒感染 sox9转录因子骨髓干细胞慢病毒 sox9基因 LMP1基因椎间盘髓核细胞共转染组织工程

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股骨骨折骨不连三种治疗方法的比较

骨与关节损伤杂志 2001年第3期16卷 209-210页

作者：幸永明王杰李重茂赵宏周荣立王坚解放军第113医院骨科宁波市315040

我院1988～1998年收治股骨骨折骨不连46例,分别采用国产加压钢板、单臂外固定架、交锁髓内钉治疗.现将三种治疗方法进行分析比较.1 材料与方法1.1 临床资料男39例,女7例,年龄21～56岁,平均38.2岁.致伤原因:车祸伤34例,坠落伤5例,砸伤4例... 详细信息

我院1988～1998年收治股骨骨折骨不连46例,分别采用国产加压钢板、单臂外固定架、交锁髓内钉治疗.现将三种治疗方法进行分析比较.1 材料与方法1.1 临床资料男39例,女7例,年龄21～56岁,平均38.2岁.致伤原因:车祸伤34例,坠落伤5例,砸伤4例,机械伤3例.骨折部位:股骨上段11例,中段21例,下段13例.骨折类型:简单骨折2例,楔型骨折20例,复杂骨折24例.骨不连原因:普通钢板固定失败18例,梅花针固定失败11例,加压钢板固定失败15例,其他固定失败2例.骨不连时间8个月～3年,平均14个月.

关键词：股骨骨折骨不连治疗加压钢板单臂外固定架交锁髓内钉

老年人不稳定型粗隆间骨折人工股骨头置换和PFNA-Ⅱ内固定术的疗效比较

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浙江临床医学 2019年第4期21卷 476-478页

作者：卓孟川幸永明方贤聪王振林中国人民解放军第一一三医院 315040

目的比较人工股骨头置换与股骨近端防旋髓内针(PFNA-Ⅱ)治疗高龄患者不稳定股骨粗隆间骨折(IFF)的临床疗效.方法高龄不稳定型股骨粗隆间骨折患者90例,随机分为人工股骨头置换术组(置换组)及 PFNA-Ⅱ内固定手术组(内固定组).比较两组... 详细信息

目的比较人工股骨头置换与股骨近端防旋髓内针(PFNA-Ⅱ)治疗高龄患者不稳定股骨粗隆间骨折(IFF)的临床疗效.方法高龄不稳定型股骨粗隆间骨折患者90例,随机分为人工股骨头置换术组(置换组)及 PFNA-Ⅱ内固定手术组(内固定组).比较两组手术情况(手术时间、围手术期出血量)、术后Harris评分、住院天数、首次下地时间、完全负重时间及并发症发生情况.结果置换组手术时间和围手术期出血量明显多于内固定组(P0.05);置换组住院天数、首次下地时间及完全负重时间明显短于内固定组(P0.05).结论两种手术方式对高龄不稳定型IFF患者均有良好疗效,PFNA-Ⅱ内固定手术适用于大部分老年不稳定型IFF,而人工股骨头置换则适用于合并严重骨质疏松或对早期功能康复锻炼有特殊要求的患者.

关键词：股骨粗隆间骨折人工股骨头置换术股骨近端防旋髓内针老年

侧卧位椎间盘切除术治疗老年高风险腰椎间盘突出症

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局解手术学杂志 2011年第6期20卷 642-643页

作者：程继伟幸永明樊孝江解放军第113医院骨一科浙江宁波315040

目的探讨对老年高风险椎间盘突出症患者进行侧卧位开窗椎间盘切除手术治疗的可行性及疗效。方法 2006年4月至2010年4月间对我院17例合并心肺功能不全的老年腰椎间盘突出症患者行侧卧位小切口开窗椎间盘切除手术,观察术中生命体征、术后... 详细信息

目的探讨对老年高风险椎间盘突出症患者进行侧卧位开窗椎间盘切除手术治疗的可行性及疗效。方法 2006年4月至2010年4月间对我院17例合并心肺功能不全的老年腰椎间盘突出症患者行侧卧位小切口开窗椎间盘切除手术,观察术中生命体征、术后疗效及并发症,术前及术后3个月进行JOA评分,末次随访按Macnab标准评价疗效。结果术中及术后均未出现围手术期并发症。随访14～62(37.5±12.1)个月,术前JOA评分为6～12(9.8±1.6),术后3个月JOA评分18～28(22.3±3.8),与术前比较有显著差异(P<0.01),Macnab标准评价临床疗效优14例,良2例,可1例。结论老年高风险椎间盘突出症患者采用侧卧位开窗手术治疗可获得满意疗效。

关键词：腰推间盘突出症椎间盘切除术侧卧位

强直性脊柱炎髋关节强直的中期全髋关节置换术

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强直性脊柱炎髋关节强直的中期全髋关节置换术

椎体成形术治疗多发骨髓瘤椎体病理性骨折39例分析

浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十四次学术年会暨...

作者：幸永明王振林陈昌伟李重茂解放军第一一三医院骨科

强直性脊柱炎累及髋关节患者往往存在严重的髋关节疼痛,而且有一些患者髋关节强直,生活不能自理,承受着极大的疼痛和负担。全髋关节置换术已成为治疗强直性脊柱炎髋关节强直有效措施。我院近年对14例(20髋)强直性脊柱炎髋关节强直中期...

强直性脊柱炎累及髋关节患者往往存在严重的髋关节疼痛,而且有一些患者髋关节强直,生活不能自理,承受着极大的疼痛和负担。全髋关节置换术已成为治疗强直性脊柱炎髋关节强直有效措施。我院近年对14例(20髋)强直性脊柱炎髋关节强直中期的病例施行了全髋关节置换术疗效满意,其中男性

关键词：

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临床军医杂志 2013年第2期41卷 198-199页

作者：王振林幸永明卓孟川李重茂解放军第113医院骨科浙江宁波315040

目的探讨经皮椎体成形术缓解多发性骨髓瘤疼痛和预防截瘫的疗效。方法 2003年6月—2012年2月确诊多发性骨髓瘤合并椎体病理性骨折患者39例共63节段,均采取经皮椎体成形术配合化疗、双磷酸盐等治疗。结果术后3 d评估疗效,患者疼痛VAS评... 详细信息

目的探讨经皮椎体成形术缓解多发性骨髓瘤疼痛和预防截瘫的疗效。方法 2003年6月—2012年2月确诊多发性骨髓瘤合并椎体病理性骨折患者39例共63节段,均采取经皮椎体成形术配合化疗、双磷酸盐等治疗。结果术后3 d评估疗效,患者疼痛VAS评分由术前平均8.9±2.2降至术后2.3±0.9,随访时间3个月～5年,无一例发生截瘫。结论椎体成形术治疗多发性骨髓瘤椎体病理性骨折能有效缓解疼痛、预防发生截瘫。

关键词：椎体成形术多发性骨髓瘤椎体病理性骨折

经皮椎体成形术治疗胸腰椎压缩骨折350例临床研究

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经皮椎体成形术治疗胸腰椎压缩骨折350例临床研究

2012年浙江省骨科学术年会

作者：幸永明王振林刘伟陈昌伟卓孟川解放军第一一三医院骨一科

目的探讨经皮椎体成形术治疗胸腰椎压缩骨折的疗效、术中策略及并发症的预防.方法回顾性研究2004年6月010年6月采用经皮椎体成形术治疗胸腰椎压缩骨折350例,术后并发骨水泥渗漏2例术中骨水泥渗漏到椎管内,压迫脊髓神经产生腰背痛及下肢...

目的探讨经皮椎体成形术治疗胸腰椎压缩骨折的疗效、术中策略及并发症的预防.方法回顾性研究2004年6月010年6月采用经皮椎体成形术治疗胸腰椎压缩骨折350例,术后并发骨水泥渗漏2例术中骨水泥渗漏到椎管内,压迫脊髓神经产生腰背痛及下肢放射性疼痛,于术后12天及23天行椎管探查渗漏骨水泥清除术.结果随访122个月,平均14.5个月.VAS评分从术前平均9.2分到术后平均2.3分和最终随访平均2.6分(P<0.05).Oswestry功能评分由术前平均64分到术后平均25分和最终随访时平均27分(P<0.05).结论椎体成形术(PVP)是微创治疗椎体骨质疏松压缩骨折的有效方法.通过充分的术前准备及术中策略可有效减少并发症的发生.

关键词：

来源： cnki会议评论

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滑旱冰致股神经急性卡压症

临床军医杂志 2000年第2期28卷 56-57页

作者：幸永明周来杰庄剑波陈昌伟解放军第412医院骨科浙江宁波315132

临床上创伤性股神经损伤多见,但损伤性股神经卡压症少见,本文报告8例因滑旱冰致股神经卡压症,并结合文献就其损伤机理、临床特点、治疗方法进行探讨.

关键词：股神经急性卡压症外伤

椎间盘镜治疗腰椎间盘突出症术后疗效不佳原因分析

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骨与关节损伤杂志 2002年第6期17卷 441-442页

作者：陆志剀王杰李重茂幸永明陆锐解放军第113医院骨科浙江省宁波市315040

椎间盘镜(Micro Endoscopic Discectomy,MED)治疗腰椎间盘突出症是国内近年来开展起来的一项新技术.该技术具有创伤小、出血少、疗效确切、不干扰腰椎生物力学结构、并发症较少及术后恢复快等优点.但处理不当可致术后疗效不佳,需再次行... 详细信息

椎间盘镜(Micro Endoscopic Discectomy,MED)治疗腰椎间盘突出症是国内近年来开展起来的一项新技术.该技术具有创伤小、出血少、疗效确切、不干扰腰椎生物力学结构、并发症较少及术后恢复快等优点.但处理不当可致术后疗效不佳,需再次行MED手术或开放直视下手术治疗,给患者带来痛苦和经济损失.我们自2000年9月开始采用美国枢法模丹历公司制造的椎间盘镜治疗腰椎间盘突出症79例,其中7例术后疗效不佳,再次行MED手术3例,开放直视下手术4例,获优良效果.根据本组病例资料,对疗效不佳的原因进行分析.

关键词：椎间盘镜治疗腰椎间盘突出症术后疗效不佳原因分析