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miR-92a-1-p5对蚜虫翅发育的调控研究

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miR-92a-1-p5对蚜虫翅发育的调控研究

作者：常美玲南阳师范学院

学位级别：硕士

孤雌蚜在发育过程中呈现翅二型性。营养状况和虫口密度等外界条件都会刺激孤雌蚜后代从无翅型态转化为有翅型态。近年来研究表明,微小RNA（microRNA,miRNA）在有翅和无翅个体中存在差异表达,并参与蚜虫翅二型性分化。课题组于前期研究... 详细信息

孤雌蚜在发育过程中呈现翅二型性。营养状况和虫口密度等外界条件都会刺激孤雌蚜后代从无翅型态转化为有翅型态。近年来研究表明,微小RNA（microRNA,miRNA）在有翅和无翅个体中存在差异表达,并参与蚜虫翅二型性分化。课题组于前期研究中预测到miR-92a-1-p5的靶标基因可能为飞行肌flightin基因,但它们参与蚜虫翅发育的分子机制尚不清楚。为进一步研究miRNA及其靶基因在蚜虫翅发育过程的调控机制,本研究以豌豆蚜（Acyrthosiphon pisum）为研究对象,首先利用纳米载体介导的RNA干扰（RNAi）方法,筛选miRNA的模拟物、抑制剂及编码基因双链RNA（double strandRNA,dsRNA）导入蚜虫的最佳方式。其次在豌豆蚜个体中干涉miR92a-1-p5的靶标基因flightin,验证其对蚜虫翅发育的影响。最后在蚜虫个体中干涉和过表达miR-92a-1-p5,检测其对靶基因flightin的调控及对蚜虫翅发育的影响,探索miRNA参与蚜虫翅型发育的分子机制。主要研究结果如下:1.miRNA靶基因验证。成功构建flightin-CDS的过表达载体Pmir Glo[flightin-CDS]与flightin-CDS-mutant的过表达载体Pmir Glo[flightin-CDS-mutant]。在HEK293细胞系中,使用双荧光素酶报告系统检测miR-92a-1-p5与靶标基因flightin的互作关系。结果表明,共转染Pmir Glo[flightin-CDS]过表达载体与miR-92a-1-p5模拟物后,细胞荧光素酶活性与共转染Pmir Glo-[flightin-CDS-mutant]过表达载体和miR-92a-1-p5模拟物相比下降43.3%,差异达极显著水平。表明flightin是miR-92a-1-p5的真实靶标。2.编码基因dsRNA导入豌豆蚜个体的最佳方式。选择蚜虫表皮蛋白相关基因CHS2,肠道特异表达基因Vha Ac、Gut-specific水通道蛋白基因Wsa、组成型表达基因METTL14作为验证对象,在4龄蚜虫中注射不同浓度dsRNA,实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测干涉效果。结果发现当dsRNA浓度为50 ng/μL时,CHS2相对表达量下降47.1%,差异达极显著水平。当dsRNA浓度为50 ng/μL与200 ng/μL时,METTL14相对表达量分别下调79.9%与80.9%,差异达极显著水平。结合二者的干涉效果,后续以50 ng/μL浓度干涉Vha AC39基因和Wsa基因。结果显示,Vha AC39相对表达量下降53.4%,Wsa基因无显著干涉效果。综上,编码基因RNAi导入蚜虫个体的最佳浓度于50 ng/μL较适宜。随后,将4个编码基因的dsRNA以50 ng/μL浓度注射4龄无翅若虫后于6个不同时间点取样,q PCR法检测其相对表达量,结果发现与对照注射EGFP dsRNA的个体相比,注射CHS2、METTL14、Vha AC39dsRNA后,3个基因相对表达量均在注射后48 h下调最显著。而Wsa基因在注射后60 h下调最显著。表明dsRNA发挥干涉作用最佳时间在注射dsRNA后48 h至60 h。3.miRNA导入蚜虫的最佳方式。通过个体注射、饲喂、纳米材料介导三种不同形式将miR-92a-1-p5抑制剂导入4龄无翅若虫体内,筛选miRNA导入豌豆蚜体内的最佳方式。结果发现,由于蚜虫特殊的体壁结构,直接刺破体壁容易致使蚜虫体液大量溢出而死亡,不能作为注射方法使用。以饲喂的形式将2μM的miR-92a-1-p5抑制剂介导进4龄无翅若虫体内48 h时miRNA表达量下调56.5%,达显著水平。以纳米材料/变性剂携带的形式将miR-92a-1-p5抑制剂介导进豌豆蚜后发现,miR-92a-1-p5表达量显著下调83%,达极显著水平。因此,纳米材料/变性剂携带为miRNA导入蚜虫的最佳方式。通过将不同浓度的miR-92a-1-p5模拟物与抑制剂分别注射4龄有翅与无翅若虫个体,对miRNA导入蚜虫的最适浓度进行筛选。结果表明,miR-92a-1-p5模拟物注射有翅4龄若虫后,miRNA显著上调。而将miR-92a-1-p5抑制剂注射4龄无翅若虫后,只在160 ng/μL时miRNA相对表达量显著下调,差异达极显著水平。由此推测miR-92a-1-p5抑制剂在体内发挥干涉效果的最佳浓度为160 ng/μL。综合以上结果,以纳米材料介导的形式将160ng/μL浓度的miRNA模拟物和抑制剂导入豌豆蚜虫体内的效果最佳。4.翅发育相关基因flightin的功能研究。通过在有翅孤雌蚜中使用纳米材料介导的dsRNA注射法干涉flightin基因的表达,从蚜虫翅表型变化及内部组织形态变化中探索其参与翅发育的机制。首先检测不同时间点dsRNA干涉效果,结果发现,在4

关键词：豌豆蚜 miR-92a-1-p5 有翅型

评价理论视角下赵本山小品的评价资源与幽默研究

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评价理论视角下赵本山小品的评价资源与幽默研究

作者：常美玲电子科技大学

学位级别：硕士

小品是央视春晚舞台上不可或缺的语言类节目。赵本山是一名知名的小品表演者,他表演的小品连续十五年被评为观众最喜爱的春晚节目,成为了中国喜剧小品的杰出代表。目前,有关赵本山小品的语言学研究主要从语用学及认知语言学的角度对赵... 详细信息

小品是央视春晚舞台上不可或缺的语言类节目。赵本山是一名知名的小品表演者,他表演的小品连续十五年被评为观众最喜爱的春晚节目,成为了中国喜剧小品的杰出代表。目前,有关赵本山小品的语言学研究主要从语用学及认知语言学的角度对赵本山小品中的言语幽默进行解读。本论文在已有研究的基础上,尝试应用评价理论,从评价的角度来探究赵本山小品中所使用的评价资源以及评价资源在实现小品幽默效果中的作用。本文以赵本山在央视春晚舞台上所表演的21个小品文本作为研究语料,首先借助标注工具UAM Corpus Tool 3.3对小品中的态度、介入和级差资源分别进行了人工标注,得到了各类资源的使用频次和所占比例,用以考察小品中评价资源的分布特点。接着对小品中与三类评价资源相关的幽默言语进行了收集和集中分析,以揭示态度、介入和级差资源在制造幽默效果中的作用。本研究发现:（1）赵本山小品中使用了大量的态度、介入和级差资源。在态度资源中,负面类态度资源和判断资源使用较多;介入资源以借言性评价为主,其中对话压缩的使用多于对话扩展;在级差资源中,强化类级差资源和语势资源数量居多。（2）三类资源的使用都可以产生幽默,其中级差资源产生幽默的比重最大。（3）在态度资源中,角色用正面类的态度资源对自身做出夸张性的正面评价,从而使得其负面形象得以塑造;负面类的态度资源常用于对角色的外貌、能力等做出负面评价,以此形成一种幽默效果,引得观众发笑。（4）在介入资源中,自言性评价可以用来表达角色出人意料、可笑的主观性断言。借言分为对话性压缩和对话性扩展,角色通过对话性压缩资源,或将他人之短揭之于众,或限制对话空间,使得其他角色陷入无言的尴尬境地;而对话性扩展“包容”外部声音,角色利用归属资源转述负面的观点或立场,从而将责任推于他人,制造出滑稽可笑的幽默效果。（5）在级差资源中,小品通过强化类语势资源或强化与弱化类语势资源的共同作用,揭露角色的缺点或其人性中的弱点;聚焦资源用于明显或模糊角色话语中的态度范畴,凸显角色滑稽的人物性格,从而制造幽默效果。（6）单类评价资源与其他类评价资源或明喻、暗喻、同音换置的共同作用也可以产生幽默。

关键词：评价理论赵本山小品评价资源幽默

子午流注纳子法针刺改善慢性失眠患者睡眠情况及日间功能的临床研究

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子午流注纳子法针刺改善慢性失眠患者睡眠情况及日间功能的临床研...

作者：常美玲黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察子午流注纳子法针刺对慢性失眠的治疗效果,并分析其对慢性失眠患者日间情绪、日间疲劳状况及日间嗜睡情况的调节作用,从而提高临床治疗慢性失眠的疗效。方法:采用随机、对照、单盲的临床研究方法,将60例慢性失眠患者,随机分为... 详细信息

目的:观察子午流注纳子法针刺对慢性失眠的治疗效果,并分析其对慢性失眠患者日间情绪、日间疲劳状况及日间嗜睡情况的调节作用,从而提高临床治疗慢性失眠的疗效。方法:采用随机、对照、单盲的临床研究方法,将60例慢性失眠患者,随机分为试验组和对照组,每组各30例。试验组(子午流注纳子法针刺)取穴:按照患者就诊时间,根据纳子法开穴表,选取该时辰气血旺盛经脉的本经本穴及原穴针刺,依据患者病症的虚实,对相应的子母穴进行补泻。对照组(常规针刺)取穴:百会、内关、神门、四神聪,随症加减。两组患者均每日治疗1次,施平补平泻手法,得气后留针30分钟,每10分钟行针一次,连续治疗5天,休息2天,共治疗15天。两组治疗前后分别利用匹兹堡睡眠指数量表(PSQI)对睡眠情况进行评价,焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、疲劳量表-14(FS-14)、Epworth思睡量表(ESS)对日间功能进行评价。采用SPSS23.0统计软件进行数据分析。结果:1.疗效分析:本研究显示针刺能够有效改善慢性失眠患者的睡眠情况,试验组总有效率为86.70%,对照组总有效率为76.70%,差异具有统计学意义(P常规针刺。2.夜间睡眠情况评价:治疗前,试验组与对照组PSQI总分及各项因子评分比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),具有可比性。治疗后,试验组和对照组的PSQI总分及各项因子评分均降低,差异均具有统计学意义(均P0.05),提示子午流注纳子法针刺和常规针刺均能改善夜间睡眠情况,在提高睡眠质量、缩短入睡时间、减轻日间功能障碍方面子午流注纳子法针刺优于常规针刺,在延长睡眠时间、提高睡眠效率、减轻睡眠障碍方面两种针刺方法疗效相当。3.日间功能评价:治疗前,试验组和对照组患者的SAS、SDS、FS-14及ESS评分比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),具有可比性。两组患者治疗后的SAS、SDS、FS-14及ESS评分均低于治疗前,差异均有统计学意义(均P常规针刺均可以改善慢性失眠患者的焦虑抑郁情绪、缓解疲劳症状及日间嗜睡情况,且子午流注纳子法针刺优于常规针刺。结论:1.子午流注纳子法针刺和常规针刺都是治疗慢性失眠的有效方法,且子午流注纳子法针刺的疗效优于常规针刺。2.子午流注纳子法针刺不但可以改善夜间睡眠,而且对慢性失眠患者日间嗜睡、日间疲劳及焦虑抑郁情绪均有良好的改善作用。

关键词：慢性失眠子午流注纳子法日间情绪日间疲劳日间嗜睡

基于MDCK细胞模型的不同分子量透明质酸微球的肠道转运机制的研究

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基于MDCK细胞模型的不同分子量透明质酸微球的肠道转运机制的研究

作者：常美玲延边大学

学位级别：硕士

目的:氯雷他定（Loratadine,LOR）是第二代抗组胺药物,是一种高效的抗过敏药,属于BCSⅡ类药物。本研究将氯雷他定作为模型药物,以不同分子量的透明质酸（HA）制备氯雷他定微球,利用Transwell小肠跨膜转运模型,考察透明质酸的分子量对小... 详细信息

目的:氯雷他定（Loratadine,LOR）是第二代抗组胺药物,是一种高效的抗过敏药,属于BCSⅡ类药物。本研究将氯雷他定作为模型药物,以不同分子量的透明质酸（HA）制备氯雷他定微球,利用Transwell小肠跨膜转运模型,考察透明质酸的分子量对小肠跨膜转运的影响。方法:本实验通过HPLC法建立氯雷他定含量测定方法,采用喷雾干燥技术制备不同分子量透明质酸氯雷他定微球,以粒径,载药量,载药率,溶解度,体外释放度来评价微球。通过建立MDCK细胞跨膜转运模型,考察不同分子量透明质酸氯雷他定微球的跨膜转运效果,利用几种与药物跨膜转运和细胞功能有关的抑制剂盐酸阿米洛利、盐酸氯丙嗪、甲基毋环糊精、莫能菌素、脱氧胆酸钠、EDTA、碘乙酰胺、维拉帕米,来考察微球的跨膜转运的机制。结果:本实验所制备的透明质酸氯雷他定微球呈球形,其粒径随着透明质酸分子量的增大也随之增加。并且微球中氯雷他定在水中的溶解度随着透明质酸分子量的增大,其溶解度也增加,且均比原料药的溶解度高,其中处方Ⅲ微球中氯雷他定溶解度最大,为15.35±0.43 μg·mL-1,且12 h体外累积释放度最大,为83.19±1.82%。MDCK细胞Transwell跨膜转运模型的跨膜转运实验结果,不同分子量透明质酸氯雷他定微球,在相同浓度时的4h累积渗透量均高于原料药氯雷他定的累积透过量,且微球的累积透过量随着透明质酸分子量的增大而增加;而相同分子量透明质酸氯雷他定微球的累积透过量,随着其浓度的增加而增大。发现分别加入细胞功能有关的抑制剂盐酸氯丙嗪、甲基-β-环糊精、莫能菌素、脱氧胆酸钠、EDTA后,增加了 1.05×106Da透明质酸氯雷他定微球的累计透过量,说明高分子量透明质酸可以影响内吞作用（网格蛋白介导、脂筏或脂质微囊介导）、内涵体、细胞旁路转运对氯雷他定的吸收。结论:采用喷雾干燥法制备了不同分子量透明质酸氯雷他定微球,可以提高氯雷他定在水中的溶解度,改善其溶出速率。通过Transwell细胞模型吸收机制实验结果,发现透明质酸氯雷他定微球增大了累积透过量,且随着透明质酸分子量的增大而增加,1.05×106Da透明质酸影响细胞的内吞作用,进而促进了透明质酸氯雷他定微球的跨细胞膜转运效果。

关键词：透明质酸氯雷他定微球跨膜转运

品管圈在增强CT检查护理质量持续改进中的应用

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中国医药指南 2023年第17期21卷 142-145页

作者：常美玲福建省厦门市仙岳医院福建厦门361000

目的分析品管圈对增强CT检查护理质量持续改进中的应用效果。方法选取2020年1月至2022年6月在我院影像科接受增强CT检查的80例患者为研究对象,以随机数字表法分为对照组(n=40)与观察组(n=40),分别实施常规护理与品管圈质量管理护理,对... 详细信息

目的分析品管圈对增强CT检查护理质量持续改进中的应用效果。方法选取2020年1月至2022年6月在我院影像科接受增强CT检查的80例患者为研究对象,以随机数字表法分为对照组(n=40)与观察组(n=40),分别实施常规护理与品管圈质量管理护理,对比两组应用效果。结果观察组CT检查等候时间、增强扫描时间、CT平扫时间短于对照组,焦虑自评量表(SAS)评分、心率(HR)、收缩压(DBP)、舒张压(SBP)与对比剂渗漏发生率低于对照组,图像质量合格率与护理能力评分高于对照组,组间对比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论品管圈可持续改进增强CT检查护理质量,有效提高CT检查效率,减轻患者应激反应,降低对比剂渗漏发生率,改善图像质量,提高护理人员的护理能力。

关键词：品管圈增强CT检查应激反应图像质量护理能力

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民间文学德育资源及其利用研究

民间文学德育资源及其利用研究

作者：常美玲华中师范大学

学位级别：硕士

充分认识、挖掘及利用各类德育资源,想方设法促进德育成效是德育领域的一项长期课题。民间文学德育资源作为中国优秀道德传统的集成者和体现者,作为整个德育资源体系的重要组成部分,在德育载体的丰富、德育内容的传播、德育方法的借鉴... 详细信息

充分认识、挖掘及利用各类德育资源,想方设法促进德育成效是德育领域的一项长期课题。民间文学德育资源作为中国优秀道德传统的集成者和体现者,作为整个德育资源体系的重要组成部分,在德育载体的丰富、德育内容的传播、德育方法的借鉴及道德情感的激发和培养等方面具有独到价值,对当前的德育实践活动特别是对学校的德育实践活动具有一定的积极影响。不仅如此,这一研究还能客观上对充实和完善德育资源理论体系、深化德育资源理论研究起到积极的推动作用。正是出于民间文学德育资源的如上理论意义和实践价值的衡量,本文将民间文学德育资源作为研究对象,并从如下几方面形成论文：一、开展民间文学德育资源的基础研究。主要以明确民间文学德育资源的内涵、品类及特征为主要内容。这一研究是本论题开展的起点与前提。概括地讲,所谓民间文学德育资源即具有德育作用的民间文学,主要品类有民间德育谚语、民间德育故事、民间德育歌谣以及民间德育长诗等。口头性、艺术性、生活性、相对性及地域性是民间文学德育资源的基本特征。二、进行民间文学德育资源的价值研究。这一研究是本论题开展的必要性研究,具有承前启后的重要意义。本文以“价值”概念为切入点,在深入剖析“民间文学德育资源的价值”这一概念的基础上明确了民间文学德育资源具有的丰富德育载体、解读和传播德育内容、提供德育方法借鉴、激发和培养道德情感这四大价值。三、民间文学德育资源的利用。该研究是本论题研究的归宿,是论文的核心。本文认为方向性、效益性、生活性、开放性及动态性是民间文学德育资源的五大利用原则。“民间文学德育资源的储量”、利用难度及有用度是影响民间文学德育资源利用的三大内在因素,而资源观念与外在支持则是影响民间文学德育资源利用的两大外在影响因素。民间文学德育资源在学校、家庭及社会中的利用则构成了民间文学德育资源利用的基本途径。四、民间文学德育资源的利用示范。为了进一步说明民间文学德育资源该如何具体利用,本文以青海省的有关民间文学德育资源为素材,以民间文学德育资源在校本课程中的利用为例,具体设计了民间文学德育资源在校本教材中以及校本活动课程中利用的实例并提出了五条相应的优化策略,为民间文学德育资源在学校中的实际利用提供了新的参考。总之,本文通过民间文学德育资源的理论与实践研究,试图探索了一条贴近生活、贴近实际的新型德育路子,为当前德育方式的改革创新特别是学校德育方式的改革创新提供了思考与借鉴。

关键词：民间文学德育资源民间文学德育资源价值利用

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论设计思维在现代工业设计的应用研究

西部皮革 2022年第1期44卷 100-102页

作者：丁嘉昊常美玲郑州轻工业大学艺术设计学院

工业设计可以为理解和复制事物的人工过程。设计离不开创新,工业设计的过程需要足够的创意和设计思维,这样我们才能有效地结合和处理不同的事物,从而创造出新的想法和设计。设计与技术创新仍然是这个时代新的主题,创新不仅仅等同于某一... 详细信息

工业设计可以为理解和复制事物的人工过程。设计离不开创新,工业设计的过程需要足够的创意和设计思维,这样我们才能有效地结合和处理不同的事物,从而创造出新的想法和设计。设计与技术创新仍然是这个时代新的主题,创新不仅仅等同于某一技术或者发明。这一价值理念是在通过产品设计向用户直接呈现这一不断创造的创新过程。技术创新发展过程背后的基本理念也就是以工业设计师的思维方法为基本指导。工业设计师的思维方法是一种有效、高效、被广泛大众采用和不断创新的思维方法。作为设计的关键要素,我们可以有效地提供创新方案来解决设计问题,或发现机遇的态度及行为。

关键词：生态设计人的全面发展设计思维工业设计

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大学生生命价值观的理论探索及问题分析

大学生生命价值观的理论探索及问题分析

作者：常美玲北京化工大学

学位级别：硕士

本研究以马克思主义生命观和社会主义核心价值体系为理论支撑，采用质性研究的方法建构关于大学生生命价值观概念结构的理论，运用马克思辩证唯物主义和历史唯物主义分析大学生生命价值观的问题及成因，最后基于以上研究结果探讨对大学... 详细信息

本研究以马克思主义生命观和社会主义核心价值体系为理论支撑，采用质性研究的方法建构关于大学生生命价值观概念结构的理论，运用马克思辩证唯物主义和历史唯物主义分析大学生生命价值观的问题及成因，最后基于以上研究结果探讨对大学生命教育理论和实践的启示。首先，本研究采用质性研究的深度访谈法，收集大学生生命价值观的资料，并运用扎根理论对资料进行编码分析，归纳建构出关于大学生生命价值观概念结构的理论。质性研究结果表明：大学生生命价值观由生命意义观和死亡观两部分内容组成。第一，大学生的生命意义观具有多元维度，各维度均包含多样化的构成因素。大学生在与自我、他人及自然的关系三大维度中体验生命意义，其中与自我的关系是大学生生命意义观的核心维度，与他人及自然的关系实际上是与自我关系维度的延伸和拓展。第二，大学生的死亡观由死亡认知和死亡态度两部分内容构成。其中，死亡认知分为现世观和永生观两类;死亡态度分为坦然接受、害怕恐惧和逃避死亡三类。大学生的死亡观不是截然区分的单维度状态，而是呈重叠交错的复杂并存状态。继而，本研究运用马克思辩证唯物主义和历史唯物主义分析大学生生命价值观存在的问题及成因。研究结果显示：大学生生命价值观呈现出忽视生命价值内省、理想信仰意识弱化、盲目主义从众倾向、竞争主义人际关系、利己主义社会态度、物质主义价值取向和享乐主义生活态度七大问题。造成以上问题的原因包括社会转型引发新旧价值观念的冲突、全球化和互联网加速多元文化的冲突、市场经济带来的负面效应及大学生自身的内在因素。最后，基于以上结果，研究者提出开展大学生命教育必须坚持价值导向一元化的原则，坚持社会主义核心价值体系的引领方向，明确健全人格、培育德性和培养价值理性的三位一体的生命教育目标，实施与心理健康教育、德育和思想政治理论课堂三大平台相结合的策略，创新多样化的生命教育实现途径。

关键词：大学生生命价值观质性研究生命教育

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以情感需求为导向的宠物犬产品设计研究

明日风尚 2022年第7期 115-118页

作者：常美玲丁嘉昊郑州轻工业大学

从情感化的角度出发，分析人与宠物之间的内在关系，探索人宠之间交互体验。通过对宠物产品和宠物行为动作的分析，进行有针对性的设计研究。在满足用户情感需求的基础上，使宠物对产品也能产生一个良好的反馈，使得产品功能能够自然的... 详细信息

从情感化的角度出发，分析人与宠物之间的内在关系，探索人宠之间交互体验。通过对宠物产品和宠物行为动作的分析，进行有针对性的设计研究。在满足用户情感需求的基础上，使宠物对产品也能产生一个良好的反馈，使得产品功能能够自然的在使用中体现出来。将体验设计、情感化设计的方法相结合，特别针对小型宠物犬进行产品设计的实践，强化人与宠物、宠物产品三者之间的联系。

关键词：情感化设计体验设计宠物产品设计宠物行为