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产大分子levan的果糖基蔗糖转移酶的原核表达及酶学性质

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应用与环境生物学报 2016年第2期22卷 195-200页

作者：宋廷富姜腾飞李茜常斐斐黄国印付佳琪乔代蓉徐辉四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室成都610065

Levan型果聚糖是由微生物通过果糖组成的一个均聚物,寻找可以产均一度高的大分子果聚糖的果糖基蔗糖转移酶对其工业应用具有十分重要的意义.本研究克隆了来自运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis,SCTCC102250)的果糖基蔗糖转移酶基因,并... 详细信息

Levan型果聚糖是由微生物通过果糖组成的一个均聚物,寻找可以产均一度高的大分子果聚糖的果糖基蔗糖转移酶对其工业应用具有十分重要的意义.本研究克隆了来自运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis,SCTCC102250)的果糖基蔗糖转移酶基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功实现表达.通过His-tag柱层析对表达的果糖基蔗糖转移酶进行纯化,将纯化的酶与底物蔗糖反应,经乙醇沉淀得到多糖样品,利用凝胶色谱法确定了其分子量(Mr)的大小为2×106.多糖酸水解后的样品Rt与果糖标准品的Rt保持一致,表明该聚合物为levan果聚糖.最后,通过研究果糖基蔗糖转移酶的酶学性质,确定其最适温度为40℃,最适pH为6.0,Km值为3.95 mmol/L,Vmax为1 31.58μmol m L-1 min-1.本研究通过酶法合成得到levan果聚糖,为今后制备大分子levan果聚糖提供了理论依据.

关键词： levan果聚糖果糖基蔗糖转移酶原核表达蛋白纯化酶学性质

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褪黑素诱导拟南芥抗芸薹根肿菌

应用与环境生物学报 2018年第1期24卷 75-80页

作者：常斐斐曹曦跃彭婕谭筱醴陈天盈曾杰曹毅乔代蓉四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室成都610065 东北农业大学食品学院哈尔滨150036

芸薹根肿菌是一种土传性致病菌,严重时可导致作物死亡.利用荧光定量PCR的方法研究褪黑素诱导拟南芥对根肿病的抗病效果及分子机制.结果显示：不同的褪黑素诱导浓度对根肿病的诱抗效果不同,其中,10μmol/L的褪黑素溶液为最佳抗菌浓度,抗... 详细信息

芸薹根肿菌是一种土传性致病菌,严重时可导致作物死亡.利用荧光定量PCR的方法研究褪黑素诱导拟南芥对根肿病的抗病效果及分子机制.结果显示：不同的褪黑素诱导浓度对根肿病的诱抗效果不同,其中,10μmol/L的褪黑素溶液为最佳抗菌浓度,抗诱效果达到47.57%.褪黑素处理后的拟南芥根部的发病程度减轻并且根肿菌孢子囊数目减少.荧光定量PCR技术检测发现,褪黑素诱导拟南芥后,茉莉酸（JA）途径中的标记基因PR3、PR4有明显的过量表达,同时水杨酸（SA）途径中的PR1、PR2和PR5的表达量也呈上升趋势,但上调幅度不明显,表明褪黑素诱导拟南芥产生的抗病过程主要是以JA信号途径为主,SA途径起辅助作用.本研究认为褪黑素可有效抑制由芸薹根肿菌引起的根肿病,为褪黑素在植物防治中的作用提供了新认识.

关键词：芸薹根肿菌拟南芥褪黑素诱导抗病茉莉酸途径水杨酸途径

播娘蒿耐寒基因DsKIN1的克隆、序列分析及冷诱导表达分析

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应用与环境生物学报 2017年第3期23卷 467-473页

作者：田磊常斐斐秦世尚唐滋一陈麒名马晓瑞徐辉乔代蓉曹毅四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室成都610065

播娘蒿是极端耐寒的冷诱导植物,研究其低温胁迫下的冷响应基因对于揭示其抗寒性具有重要意义.根据拟南芥At KIN1和At KIN2同源比对,设计同源引物进行播娘蒿KIN基因克隆,通过RACE技术克隆得到Ds KIN1基因,利用Vector NTI11.5软件对其进... 详细信息

播娘蒿是极端耐寒的冷诱导植物,研究其低温胁迫下的冷响应基因对于揭示其抗寒性具有重要意义.根据拟南芥At KIN1和At KIN2同源比对,设计同源引物进行播娘蒿KIN基因克隆,通过RACE技术克隆得到Ds KIN1基因,利用Vector NTI11.5软件对其进行序列分析,采用Realtime-PCR测定Ds CBF1、Ds CBF2、Ds COR和Ds KIN1基因在不同处理方式[整株低温处理、同一植株局部低温处理和局部未受低温处理(两部分植株)]下各时间段(0.2 h、0.5 h、1 h、2 h、6 h、12 h、24 h)的表达,采用String数据库预测分析与Ds KIN1相互作用的蛋白.结果显示,Ds KIN1基因序列全长为462 bp,开放阅读框ORF长度为198 bp,编码66个氨基酸,分子量(Mr)为6.61×10~3,理论等电点为9.10,亲水性好.播娘蒿Ds CBF1和Ds CBF2在0.2 h开始表达,在2 h达到最大,随后下降.在冷诱导0.2 h后,Ds CBF调控的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1基因开始表达,均呈现上调的趋势.整株、局部冷诱导植株与同一植株上未受低温胁迫部位的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1表达模式类似.此外发现与Ds KIN1相互作用的蛋白大部分为低温诱导蛋白、盐和渗透压胁迫响应的信号蛋白、与渗透调节有关的家族蛋白、RING-H2锌指蛋白2B以及未知蛋白等.本研究说明播娘蒿局部冷诱导时,冷信号可进行传递,使未受冷诱导部位获得耐寒性能.

关键词：播娘蒿 DsKIN1 基因克隆低温胁迫 Realtime-PCR

广东革命政权税收整理问题论析(1917—1926)

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华中师范大学学报（人文社会科学版） 2024年第4期63卷 134-145页

作者：孙毓斐中国社会科学院近代史研究所北京100101

税收是广东革命政权财政改善的基础。广东革命政权税收整理历程可分为三个阶段:两次护法运动时期受限于地方军阀,仅对少数税项尝试争夺;陆海军大元帅大本营时期,各军阀把持税收,大本营政府真正控制的税源只有部分盐税、印花税、常关税... 详细信息

税收是广东革命政权财政改善的基础。广东革命政权税收整理历程可分为三个阶段:两次护法运动时期受限于地方军阀,仅对少数税项尝试争夺;陆海军大元帅大本营时期,各军阀把持税收,大本营政府真正控制的税源只有部分盐税、印花税、常关税和广州及其附近县域的杂税;随着广东军政统一,广州国民政府统一税收,并进行税政改革、开征新税,税收收入不断增长。广东革命政权的税收政策具有极强的现实主义特点,并在革命进程中逐渐建立起具有中央集权属性的税收体系,税收能力极大提升,为出师北伐提供了财政支持,也为后续南京国民政府初期的财政政策提供了历史经验。

关键词：广东革命政权孙中山税收整理财政变迁

成渝地区双城经济圈教育协同发展背景下地方高校工程造价人才创新培养路径研究

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改革与开放 2024年第12期 30-35,42页

作者：常斐胡姗内江师范学院基建处内江师范学院建筑工程学院

在成渝地区双城经济圈教育协同发展的大背景下,地方高校应积极探索工程造价人才的创新培养路径,以满足区域经济发展和地方企业的需要。文章通过分析地方高校工程造价人才培养的现状和问题,结合成渝地区双城经济圈发展情况以及企业、学... 详细信息

在成渝地区双城经济圈教育协同发展的大背景下,地方高校应积极探索工程造价人才的创新培养路径,以满足区域经济发展和地方企业的需要。文章通过分析地方高校工程造价人才培养的现状和问题,结合成渝地区双城经济圈发展情况以及企业、学校、学生的需求,提出了包括优化课程体系、加强实践教学、提升师资水平、推动产教融合等创新培养路径,形成“政府、行业、专业协同培养联盟、地方高校、企业”五位一体全过程协同人才培养模式,旨在为工程造价创新人才培养提供参考。

关键词：成渝地区双城经济圈教育协同工程造价创新

多周期常减压蒸馏装置换热网络用能变化与柔性优化

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石油炼制与化工 2024年第6期55卷 130-136页

作者：刘泽坤刘绍东赵卫东王彧斐中国石油大学(北京) 北京102249 中国石油塔里木油田分公司

常减压蒸馏装置能耗在整个炼油厂中最高,优化其换热网络是节能的有效手段。考虑到所加工油品会发生变化,以往针对特定原油设计的换热网络在处理其他原油时表现不再最优。提出一种多周期柔性优化方法:首先对不同原油周期进行流程模拟,随... 详细信息

常减压蒸馏装置能耗在整个炼油厂中最高,优化其换热网络是节能的有效手段。考虑到所加工油品会发生变化,以往针对特定原油设计的换热网络在处理其他原油时表现不再最优。提出一种多周期柔性优化方法:首先对不同原油周期进行流程模拟,随后模拟现行换热网络,辨识夹点位置偏移,发现不合理用能发生位置,通过改变管路结构并调节换热匹配,提高换热网络柔性,消除部分共有的跨夹点传热。在某炼油厂的应用结果表明,多周期柔性设计可在周期1、周期2、周期3、周期4分别节约1421,880,3842,3421 kW的加热炉热负荷和等量的冷却负荷。对多周期换热网络用能变化规律的深入研究和柔性设计,可为炼油厂节能降耗做出更大贡献。

关键词：常减压蒸馏流程模拟换热网络夹点技术多周期柔性优化

干扰素体外释放酶联免疫检验在结核病临床诊断中的应用

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实用检验医师杂志 2024年第3期16卷 266-269页

作者：常斐菏泽市传染病医院检验科山东菏泽274000

目的探讨干扰素体外释放酶联免疫检验(IGRA)在结核病临床诊断中的应用价值。方法选择2022年9月—2023年9月在菏泽市传染病医院经初步检查怀疑为结核病的530例患者作为研究对象,对所有患者实施IGRA和结核菌素皮肤试验,以结核杆菌DNA检测... 详细信息

目的探讨干扰素体外释放酶联免疫检验(IGRA)在结核病临床诊断中的应用价值。方法选择2022年9月—2023年9月在菏泽市传染病医院经初步检查怀疑为结核病的530例患者作为研究对象,对所有患者实施IGRA和结核菌素皮肤试验,以结核杆菌DNA检测结果作为诊断的“金标准”,比较应用IGRA与结核菌素皮肤试验诊断结核病所得诊断结果,分析两种方法诊断结核病的结果与结核杆菌DNA检测结果的一致性。结果在530例疑似结核病患者中,经结核杆菌DNA检测共412例患者确诊结核病(包括肺结核329例,肺外结核83例),检出率为77.74%。IGRA诊断结核病的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均显著高于结核菌素皮肤试验(敏感度:98.30%比95.15%;特异度:97.46%比88.98%;阳性预测值:99.26%比96.79%;阴性预测值:94.26%比84.00%;准确度:98.11%比93.77%;均P<0.05)。IGRA和结核菌素皮肤试验诊断结核病的结果与结核杆菌DNA检测结果的一致性分析表明,IGRA与结核杆菌DNA检测结果高度一致(κ值为0.894),结核菌素皮肤试验与结核杆菌DNA检测结果中度一致(κ值为0.657)。结论在对结核病进行诊断时,应用IGRA进行检测具有较高的诊断价值,可实现对结核病的灵敏和准确诊断。

关键词：结核病诊断干扰素体外释放酶联免疫检验结核菌素皮肤试验

毫不松懈抓紧抓实抓细各项防汛措施强化联防联控筑牢防汛“安全堤”

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毫不松懈抓紧抓实抓细各项防汛措施强化联防联控筑牢防汛“安全...

高标准、高质量如期完成各项筹备工作用心用情办好“家门口”的国际赛事

成都日报

作者：常斐

本报讯（成都日报锦观新闻记者常斐）据气象部门预测，未来几天成都还将出现持续性强降雨过程，累计雨量大。昨日，市委副书记、市长王凤朝在推进防汛减灾工作现场办公时强调，要深入学习贯彻习近平总书记关于防汛抗旱工作的重要指... 详细信息

本报讯（成都日报锦观新闻记者常斐）据气象部门预测，未来几天成都还将出现持续性强降雨过程，累计雨量大。昨日，市委副书记、市长王凤朝在推进防汛减灾工作现场办公时强调，要深入学习贯彻习近平总书记关于防汛抗旱工作的重要指示精神，严格落实党中央国务院、省委省政府......

关键词：防汛措施联防联控防汛减灾王凤朝毫不松懈

来源： cnki报纸评论

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高标准、高质量如期完成各项筹备工作用心用情办好“家门口”的...