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重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响

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中国兽医学报 2015年第8期35卷 1290-1292页

作者：王娅黄文华邓俊良左之才任志华王哲胡延春余树民四川农业大学动物医学院四川雅安625014 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062

为了探讨重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响,取72h培养良好的肝细胞培养板(6孔板),每孔分别接种重组牛抵抗素0,10,50,100,300,500ng/L(共6个梯度,每个梯度6个重复),继续培养12h,收集上清,采用乳酸脱氢酶偶联比色法测定PEPCK... 详细信息

为了探讨重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响,取72h培养良好的肝细胞培养板(6孔板),每孔分别接种重组牛抵抗素0,10,50,100,300,500ng/L(共6个梯度,每个梯度6个重复),继续培养12h,收集上清,采用乳酸脱氢酶偶联比色法测定PEPCK活性。结果显示,PEPCK酶活性随重组牛抵抗素浓度的升高而增强,10ng/L以上的重组牛抵抗素可明显提高PEPCK活性,这表明牛抵抗素具有生物学活性,能提高PEPCK活性。

关键词：牛重组抵抗素 PEPCK 肝细胞

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一株肉牛源致病肺炎克雷伯菌的分离鉴定

云南农业大学学报（自然科学版） 2020年第1期35卷 54-61页

作者：李嫣然苟丽萍任志华马晓平张欣怡左之才四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川温江611130 西昌学院动物科学学院四川西昌615000

【目的】确定导致某牛场牛呼吸系统疾病并引起急性死亡的病原。【方法】采集病牛鼻液样品并从中分离出1株优势菌株,进而对分离菌株进行形态鉴定、生化鉴定、16S rRNA鉴定、小鼠接种试验以及耐药性分析。【结果】分离菌镜检为革兰氏阴性... 详细信息

【目的】确定导致某牛场牛呼吸系统疾病并引起急性死亡的病原。【方法】采集病牛鼻液样品并从中分离出1株优势菌株,进而对分离菌株进行形态鉴定、生化鉴定、16S rRNA鉴定、小鼠接种试验以及耐药性分析。【结果】分离菌镜检为革兰氏阴性球杆菌;除精氨酸双水解试验呈阳性外,其他生化特性均与肺炎克雷伯菌相符合;其16S rRNA序列与GenBank中肺炎克雷伯菌株之间的同源性均达99%。因此,可将分离菌确定为肺炎克雷伯菌,并将其命名为7Y-1。在小鼠接种试验中,用1.01×108 CFU/mL菌液腹腔注射8只SPF级昆明鼠(0.2 mL/只),16~36 h内小鼠全部(8/8)死亡。剖检见肺、肝、脾和肾等多个组织器官充血肿大,肠道积气积液、部分肠段充血、肿胀;组织学观察可见肺、肝、脾淤血、出血、肾小球肾炎变化;药敏试验结果显示:分离菌株对人医常用碳青霉烯类的亚胺培兰、美罗培兰、氨基糖苷类的阿米卡星以及磺胺类的磺胺异噁唑等抗生素耐药,对兽医临床常用的头孢曲松、头孢西丁、头孢唑林、卡那霉素、庆大霉素和氟苯尼考等抗生素高度敏感。【结论】本试验从病牛分离到对小鼠强致死性的肺炎克雷伯菌株具有特殊耐药性,表明该菌可能为引起该肉牛呼吸道感染发病,甚至引起死亡的主要病菌或继发性感染菌,应引起高度重视。

关键词：肉牛肺炎克雷伯菌分离鉴定致病性病理组织学

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养牛场的生物安全措施和应用

兽医导刊 2020年第21期 63-64页

作者：陈曦奉鉴金叶刚郭曦易军左之才四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室611130 四川省农业机械研究设计院 610066 四川省畜牧科学研究院 610066

养牛业快速发展的重要基础之一是牛群的健康管理。受动物的全域性广泛流通等因素影响,疫病的传播渠道不断增加、传播速度不断加快,养牛场承受着非常大的疫病防控压力。本文从牛场建设、防疫措施、综合管理三个方面阐述了牛场生物安全防... 详细信息

养牛业快速发展的重要基础之一是牛群的健康管理。受动物的全域性广泛流通等因素影响,疫病的传播渠道不断增加、传播速度不断加快,养牛场承受着非常大的疫病防控压力。本文从牛场建设、防疫措施、综合管理三个方面阐述了牛场生物安全防护要点,以期防范新旧疫病的困扰,建立健全生物安全体系,从而维护牛群健康安全,确保养殖效益。

关键词：生物安全措施牛疫病

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绞股蓝皂苷体外抗牛病毒性腹泻病毒的作用

浙江农业学报 2024年第12期36卷 2687-2695页

作者：才冬杰申子凡左之才田斌叶刚李伟强卜庆龙四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 山东畜牧兽医职业学院宠物科技学院山东潍坊261061

为研究绞股蓝皂苷对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)的作用,采用体外细胞培养技术、细胞病变效应观察与CCK-8相结合的方法,首先确定绞股蓝皂苷和α-单月桂酸甘油酯的安全浓度,然后采用先加药后加病毒、先加病毒后... 详细信息

为研究绞股蓝皂苷对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)的作用,采用体外细胞培养技术、细胞病变效应观察与CCK-8相结合的方法,首先确定绞股蓝皂苷和α-单月桂酸甘油酯的安全浓度,然后采用先加药后加病毒、先加病毒后加药,及药和病毒预先作用这3种加药方式,利用Western blot和定量PCR检测BVDV E2蛋白基因和5′-UTR表达量的变化,探究其在体外对病毒的抑制作用。结果表明,当绞股蓝皂苷和α-单月桂酸甘油酯的浓度分别为16μmol·L-1和25μg·mL-1时,细胞活性与空白组相比的差异无统计学意义(P>0.05),将其确定为两种药物的最大安全浓度。与对照组相比,绞股蓝皂苷可极显著(P<0.01)抑制BVDV E2蛋白基因和5′-UTR的表达,且其直接灭活作用优于α-单月桂酸甘油酯。此外,绞股蓝皂苷还显示出了显著(P<0.05)的吸附阻断作用,但其复制阻断作用与单独病毒组无显著差异。

关键词：牛病毒性腹泻病毒绞股蓝皂苷抗病毒

抗胰岛素蛋白(resistin)促进体外培养的牛肺泡巨噬细胞炎症因子的产生及其机制

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细胞与分子免疫学杂志 2018年第8期34卷 673-677页

作者：阳明贤左之才李碧梁爽苟丽萍任志华马晓平四川农业大学动物医学院环境公害与动物疾病四川省高校重点实验室动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川温江611130

目的探讨抗胰岛素蛋白(resistin)与过氧化物酶体激活物受体γ(PPARγ)的关系及其促炎效应。方法采用100 ng/m L牛resistin诱导牛肺泡巨噬细胞0、1. 5、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量PCR检测牛肺泡巨噬细胞PPARγ、核因子κB(NF-κB)... 详细信息

目的探讨抗胰岛素蛋白(resistin)与过氧化物酶体激活物受体γ(PPARγ)的关系及其促炎效应。方法采用100 ng/m L牛resistin诱导牛肺泡巨噬细胞0、1. 5、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量PCR检测牛肺泡巨噬细胞PPARγ、核因子κB(NF-κB)、resistin的mRNA水平,Western blot法检测PPARγ、NF-κB蛋白的表达变化,ELISA检测培养细胞上清液促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果 Resistin处理1. 5 h后,牛肺泡巨噬细胞PPARγmRNA水平显著降低,且存在时间依赖效应; NF-κB、resistin的mRNA水平在6 h后显著升高,12 h达到峰值; PPARγ蛋白水平在12 h显著降低,NF-κB蛋白在12 h显著升高; IL-1β、TNF-α于1. 5 h后呈时间依赖效应极显著升高。结论 Resistin能促进牛肺泡巨噬细胞产生IL-1β和TNF-α等炎症因子,这可能与抑制PPARγ和激活NF-κB途径有关。

关键词：牛抗胰岛素蛋白牛肺泡巨噬细胞过氧化物酶体激活物受体γ(PPARγ) 核因子κB(NF-κB) 促炎细胞因子

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肉牛呼吸道皮特不动杆菌的生物学特性分析

浙江农业学报 2022年第2期34卷 300-309页

作者：樊利虹王之盛左之才才冬杰易军马晓平苟丽萍王巍四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川农业大学动物营养研究所四川成都611130 四川省畜牧科学研究院四川成都610066

为探究分离自四川南充、宜宾和什邡3个地区肉牛呼吸道的皮特不动杆菌之间生物学特性的差异,本实验对5株皮特不动杆菌分别进行了细菌染色、培养特性、生化试验、16S rDNA和gyrB基因序列聚类分析以及MLST分型等研究。结果显示,5株分离自... 详细信息

为探究分离自四川南充、宜宾和什邡3个地区肉牛呼吸道的皮特不动杆菌之间生物学特性的差异,本实验对5株皮特不动杆菌分别进行了细菌染色、培养特性、生化试验、16S rDNA和gyrB基因序列聚类分析以及MLST分型等研究。结果显示,5株分离自肉牛呼吸道皮特不动杆菌的菌体形态和不同培养基上的菌落形态均相似;5株菌的生化特性并非完全一致,主要表现在ZZCSF1807-9的枸橼酸盐、精氨酸双水解试验为阳性,丙二酸盐为阴性,与其余4株菌相反;16S rDNA系统进化树显示,5株菌均聚集在同一分支,而gyrB基因系统进化树显示,ZZCSF1807-9与其余4株菌未在同一分支,存在进化距离;MLST分型结果显示,ZZCSF1807-9为ST214型,而另4株菌均与ST321型最为接近。上述结果表明,来源于呼吸道疾病肉牛的5株皮特不动杆菌在生化特性表型和gyrB基因,以及MLST型上存在一定差异,发生这些差异是否与各菌株的环境适应或因毒力变化有关尚有待进一步研究。

关键词：皮特不动杆菌生化特性同源性分析多位点序列分型(MLST)

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一株牛源约翰逊不动杆菌的分离鉴定

中国病原生物学杂志 2021年第1期16卷 1-5,11页

作者：奉鉴金张玉龙左之才才冬杰崔耀成甘佳方东辉四川农业大学动物医学院/动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014 四川省畜牧科学研究院

目的分离并鉴定1株致2018年7月四川省某肉牛场肉牛患呼吸道疾病并死亡的约翰逊不动杆菌。方法采集发病牛鼻腔拭子并从中分离得到一株优势菌株,对其进行形态学鉴定、生化鉴定、测定16s rRNA基因序列,用MEGA-X软件进行同源性分析、构建进... 详细信息

目的分离并鉴定1株致2018年7月四川省某肉牛场肉牛患呼吸道疾病并死亡的约翰逊不动杆菌。方法采集发病牛鼻腔拭子并从中分离得到一株优势菌株,对其进行形态学鉴定、生化鉴定、测定16s rRNA基因序列,用MEGA-X软件进行同源性分析、构建进化树,并进行药敏检测。结果分离菌为革兰染色阴性短杆菌,生化特性与约翰逊不动杆菌相符合,16S rRNA序列与GenBank中约翰逊不动杆菌株的同源性均达99%,因此将分离菌确定为约翰逊不动杆菌,并命名为ZZCNC-7B。8只SPF级昆明小鼠用1.4×10^(8) CFU/ml的ZZCNC-7B菌液腹腔注射(0.2 ml/只)后出现精神沉郁、腹式呼吸、眼部出现黏性分泌物、眼睑粘连、畏寒抱团等症状,有6只小鼠在16~36 h内死亡,另2只小鼠出现相同的症状但仍存活。剖检死亡小鼠,大体观察肺、肾充血肿大;肝、脾淤血肿大,肠道积气积液;组织学观察肺充血、出血,肝淤血,脾淤血、出血,肾小管坏死等病变。药敏试验显示,分离菌对四环素类药物四环素和磺胺类药物磺胺异恶唑耐药,对氨苄西林、亚胺培南、左氧氟沙星以及庆大霉素等药物均敏感。结论病牛分离菌为约翰逊不动杆菌,对小鼠具有较强的致病性和致死性,可引起肉牛呼吸道感染,甚至导致肉牛死亡,应引起高度重视。

关键词：牛约翰逊不动杆菌分离鉴定 16S rRNA基因小鼠致病性试验耐药性分析

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中药治疗牛病毒性腹泻的研究进展

四川畜牧兽医 2021年第10期48卷 31-32页

作者：魏群吴梦瑶吴鑫岩叶刚左之才谢跃四川农业大学动物医学院四川成都611130

牛病毒性腹泻病是牛临床常见的传染性疾病,常常会引起牛腹泻、肠胃炎、消化道黏膜糜烂等症状,传播范围广,传播时间长,任何年龄的牛都易感,并且可以传播给其他反刍类动物,对养牛业存在较大的威胁。目前临床常用的西药疗法对牛病毒性腹泻... 详细信息

牛病毒性腹泻病是牛临床常见的传染性疾病,常常会引起牛腹泻、肠胃炎、消化道黏膜糜烂等症状,传播范围广,传播时间长,任何年龄的牛都易感,并且可以传播给其他反刍类动物,对养牛业存在较大的威胁。目前临床常用的西药疗法对牛病毒性腹泻的治疗效果不佳,本文总结了牛病毒性腹泻的流行情况及临床症状,综述了多种中药复方对牛病毒性腹泻的治疗基础,为牛病毒性腹泻的中药疗法提供科学依据。

关键词：牛病毒性腹泻中药复方治疗

肉牛源毛孢子菌Trichosporon loubieri的分离鉴定与药敏试验

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浙江农业学报 2018年第1期30卷 26-35页

作者：钟锐姜尧章马晓平左之才黄小丽邓俊良沈留红余树民四川农业大学动物医学院四川成都611130 2.四川农业大学动物科技学院四川成都611130

为探究肉牛真菌性皮肤病的病因并有效防治该病。取发生皮癣病肉牛患部的皮屑、被毛进行真菌学检查和分离。采用沙保弱氏培养法对皮屑和毛发样品进行分离纯化。对分离株进行形态学、分子生物学鉴定和小鼠致病性、药敏试验。最终从样本中... 详细信息

为探究肉牛真菌性皮肤病的病因并有效防治该病。取发生皮癣病肉牛患部的皮屑、被毛进行真菌学检查和分离。采用沙保弱氏培养法对皮屑和毛发样品进行分离纯化。对分离株进行形态学、分子生物学鉴定和小鼠致病性、药敏试验。最终从样本中分离到一株真菌(编号zrfg01)。对分离株进行PCR扩增,获得长度为542 bp的转录基因间隔区(intergenic spacer,IGS)序列片段,序列提交Gen Bank,获得序列号为MF401393.1。序列在Blast中比对结果显示,zrfg01与编号KT936593.1的Trichosporon loubieri的相似性为100%。根据形态学和分子生物学方法将其鉴定为***。动物实验表明该菌对小鼠有选择性致病作用。药敏试验表明,该菌在25℃环境条件下,对特比萘芬和氟胞嘧啶耐药,对克霉唑、两性霉素B、氟康唑、伏立康唑较为敏感。该研究可为诊断和治疗***引起的肉牛皮肤癣菌病提供重要参考。

关键词： Trichosporon loubieri 形态学 ITS序列 IGS序列致病性药敏试验