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环境条件对转基因高粱Cry1Ab蛋白含量的影响

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浙江农业科学 2012年第1期53卷 29-31页

作者：卢美贞崔海瑞浙江工业大学化学工程与材料学院浙江杭州310014 浙江大学原子核农业科学研究所浙江杭州310029

用Cry1Ab/Cry1Ac板式试剂盒测定了不同光照时间、不同温度和不同水平氮肥处理下,Cry1Ab蛋白在转基因高粱中的表达水平。结果表明,不同光照长度处理的Cry1Ab蛋白含量有较大差异,其顺序为12 h>16 h>18 h>14 h>10 h;不同温度处理对Cry1Ab... 详细信息

用Cry1Ab/Cry1Ac板式试剂盒测定了不同光照时间、不同温度和不同水平氮肥处理下,Cry1Ab蛋白在转基因高粱中的表达水平。结果表明,不同光照长度处理的Cry1Ab蛋白含量有较大差异,其顺序为12 h>16 h>18 h>14 h>10 h;不同温度处理对Cry1Ab蛋白含量也有较大差异,为25℃>30℃>20℃>35℃>40℃;不同施肥水平下对Cry1Ab蛋白量也有较大影响,作基肥的以300 ***-2纯氮效果最佳。

关键词： Cry1Ab蛋白含量光照温度施氮水平转基因高粱

Bt转基因水稻米粉对家蚕生长发育及中肠亚显微结构的影响

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中国农业科学 2002年第6期35卷 714-718页

作者：王忠华舒庆尧崔海瑞徐孟奎谢小波夏英武中国水稻研究所杭州310006 浙江大学原子核农业科学研究所杭州310029 浙江大学原子核农业科学研究所浙江大学原子核农业科学研究所浙江大学原子核农业科学研究所浙江大学蚕学系浙江大学原子核农业科学研究所

以 3龄家蚕为供食对象 ,用洒过转苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,Bt)基因水稻纯合品系KMD2生米粉或熟米粉的桑叶喂养 ,研究Bt抗虫水稻稻米对家蚕生长发育及中肠亚显微结构的影响 ,以明确生米粉与熟米粉之间的差异。结果发现 ,用前... 详细信息

以 3龄家蚕为供食对象 ,用洒过转苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,Bt)基因水稻纯合品系KMD2生米粉或熟米粉的桑叶喂养 ,研究Bt抗虫水稻稻米对家蚕生长发育及中肠亚显微结构的影响 ,以明确生米粉与熟米粉之间的差异。结果发现 ,用前者喂养的家蚕体重、熟蚕数、结茧数、全茧量和茧层量均明显低于后者和对照 ,熟蚕整齐度明显迟于后者和对照 ;而后者与对照之间无明显差异。进一步的病理切片电镜分析表明 ,用前者喂养的家蚕 ,其中肠细胞亚显微结构发生了明显的变化 ,杯形细胞和圆筒形细胞的微绒毛明显变短、变粗 ,线粒体和粗面型内质网的数量显著下降 ;而后者与对照之间无显著差异。由此表明 ,经蒸煮后Bt水稻稻米中的杀虫蛋白发生变性 ,失去活性 ,进而丧失致毒能力。

关键词：转苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)基因水稻家蚕中肠亚显微结构

转基因水稻中转录水平cry1Ab基因的沉默及其阶段复活

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中国科学（C辑） 2001年第6期31卷 487-496页

作者：吴刚崔海瑞舒庆尧夏英武高明尉吴刚李毅叶恭银 I.Altosaar 浙江大学原子核农业科学研究所杭州310029 北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室浙江大学植物保护系杭州310029 Department

以田间环境释放条件下农杆菌介导法转化而成的转cry1Ab基因水稻为研究对象,利用GUS组织化学染色法、Western杂交技术,在不抗虫转基因中8215株系后代中筛选到一个无Cry1Ab蛋白表达产物株系.分子杂交结果证实,转基因cry1Ab在中8215株系后... 详细信息

以田间环境释放条件下农杆菌介导法转化而成的转cry1Ab基因水稻为研究对象,利用GUS组织化学染色法、Western杂交技术,在不抗虫转基因中8215株系后代中筛选到一个无Cry1Ab蛋白表达产物株系.分子杂交结果证实,转基因cry1Ab在中8215株系后代中发生了转录水平沉默,整合过程中基因重排使两个拷贝的ubiquitin启动子同时插入到水稻基因组中.甲基化分析证实ubiquitin启动子区域发生了甲基化,从而导致cry1Ab基因沉默.利用去甲基化试剂5-氮胞苷处理转基因沉默水稻种子,并在苗期、分蘖期、孕穗期、灌浆期及成熟期检测了其对沉默基因的复活效应,结果表明:5-氮胞苷处理使沉默的cry1Ab基因在灌浆期恢复表达活性,复活率约为8％～30％,且以低浓度（45mg/L处理 1,2d）处理的复活率及恢复表达水平较高,复活基因表达的Cry1Ab蛋白最高可达可溶性总蛋白的0.147％.

关键词：转基因水稻 cry1Ab基因基因沉默基因复活 5-氮胞苷基因表达遗传转化技术

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水稻的转化：微粒轰击法

农业科技译丛（杭州） 1998年第1期 31-35页

作者： Chri.,P 崔海瑞

水稻染色体是全息中心染色体祖先的组成部分吗？

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农业科技译丛（杭州） 1998年第1期 9-11页

作者： Morr.,G 崔海瑞

高粱茎尖再生体系及其遗传转化影响因子的研究

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核农学报 2006年第1期20卷 23-26,5页

作者：张明洲崔海瑞舒庆尧夏英武浙江大学原子核农业科学研究所

本文对高粱茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究。不同基因型的茎尖再生频率有很大差异,说明基因型是影响茎尖再生的一个重要因素。在9种不同的激素组合中,以0.25MG/L KT、0.5MG/LBAP和0.25MG/L IAA对茎尖的再生效果最好。在MS培养... 详细信息

本文对高粱茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究。不同基因型的茎尖再生频率有很大差异,说明基因型是影响茎尖再生的一个重要因素。在9种不同的激素组合中,以0.25MG/L KT、0.5MG/LBAP和0.25MG/L IAA对茎尖的再生效果最好。在MS培养基的基础上,采用B5培养基维生素并添加200MG/L L-ASN,10MG/L抗坏血酸和100MG/L PVP可提高茎尖再生频率。对农杆菌介导高粱茎尖转化的因子进行了优化,获得较高转化频率的条件为:茎尖预培养时间3D,在OD600值为0.5农杆菌菌液中感染10MIN,共培养3D。

关键词：高梁茎尖离体培养遗传转化根癌农杆菌

六倍体山羊草与普通小麦杂种F_1细胞学研究

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Acta Botanica Sinica 1994年第9期36卷 714-719页

作者：李洪杰方仁郭北海王子宁裴翠娟崔海瑞河北省农林科学院粮油作物研究所石家庄050031 北京农业大学北京100094

粗厚山羊草［ＡｅｇｉｌｏｐｓｃｒａｓｓａＢｏｉｓｓ．（２ｎ＝６ｘ＝４２，ＤＤＤ２Ｄ２ＭＣｒＭＣｒ）］、叙利亚山羊草［Ａｅ．ｖａｖｉｌｏｖｉｉ（Ｚｈｕｋ．）Ｃｈｅｎｎ．（２ｎ＝６ｘ＝４２，ＤＤＭＣｒＭＣｒＳＰ ... 详细信息

粗厚山羊草［ＡｅｇｉｌｏｐｓｃｒａｓｓａＢｏｉｓｓ．（２ｎ＝６ｘ＝４２，ＤＤＤ２Ｄ２ＭＣｒＭＣｒ）］、叙利亚山羊草［Ａｅ．ｖａｖｉｌｏｖｉｉ（Ｚｈｕｋ．）Ｃｈｅｎｎ．（２ｎ＝６ｘ＝４２，ＤＤＭＣｒＭＣｒＳＰＳＰ）］与普通小麦［ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．（２ｎ＝６ｘ＝４２，ＡＡＢＢＤＤ）］杂种Ｆ１植株形态大多偏向山羊草亲本。４个叙利亚山羊草×普通小麦和１个粗厚山羊草×普通小麦杂种Ｆ１自交结实，结实率在０．１％ —６．５％之间。这些种子胚乳很少，生活力较弱，播种后，只有少数种子出苗。杂种Ｆ１ＰＭＣ减数分裂染色体配对水平较低，出现大量的单价体，二价体低于理论值，并且大多为棒形，说明两种山羊草的Ｄ组染色体已经过很大的修饰。在各杂种Ｆ１中还观察到少量的三价体，有些杂种还可见频率很低的四价体和五价体。以山羊草为母本的杂种Ｆ１染色体交叉频率优于反交。Ｆ１染色体分离极不正常，产生大量的多分孢子和微核。在叙利亚山羊草×冀麦３０号中还发现１株体细胞染色体为２１条的植株。

关键词：山羊草小麦属间杂种细胞学

植物DNA错配修复缺陷及其对诱变育种的意义

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核农学报 2014年第9期28卷 1606-1614页

作者：崔海瑞宋悦袁兵赵海军富昊伟舒庆尧浙江大学原子核农业科学研究所/农业部核农学重点开放实验室浙江杭州310029 嘉兴市农业科学研究院浙江嘉兴314016

DNA错配修复(MMR)是DNA损伤修复的一个重要途径,主要司职于DNA合成、遗传重组及损伤过程中新发生的单个及少数碱基的缺失、插入及错配的修复,对维持基因组稳定性和DNA复制保真度至关重要。原核生物的MMR系统主要由MutS、MutH和MutL组成... 详细信息

DNA错配修复(MMR)是DNA损伤修复的一个重要途径,主要司职于DNA合成、遗传重组及损伤过程中新发生的单个及少数碱基的缺失、插入及错配的修复,对维持基因组稳定性和DNA复制保真度至关重要。原核生物的MMR系统主要由MutS、MutH和MutL组成,在高等植物中也鉴定出MutS和MutL的同源物,但未发现MutH。本文介绍了近年来有关植物DNA错配修复及相关基因功能的研究进展,探讨了植物MMR功能缺陷产生的途径及其对植物诱变育种的意义,为进一步利用MMR缺陷突变体进行植物诱发突变与诱变育种研究提供借鉴。

关键词：植物错配修复功能缺陷诱变育种

GUS组织化学染色法——一种快速筛选抗二化螟转Btcry1Ab基因水稻的方法(英文)

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2000年第2期26卷 141-143页

作者：吴刚崔海瑞舒庆尧叶恭银夏英武浙江大学原子核农业科学研究所浙江杭州310029 浙江大学植保系浙江杭州310029

The time-consuming in vitro bioassay is the frequently used method to screen insect resistant transgenic rice and often remains a tedious task for us. Here we reported the resistance of Bt transgenic rice to striped stem borer by means of field natural infestation and in vitro bioassay. We found that there was a significant correlation between the number of GUS positive plants and the number of insect resistant plants, thus GUS histochemical assay could be used as a rapid and convenient method to screen insect resistant plants.

关键词：转基因水稻杭药性二化螟 GUS组织化学染色法