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河南省2019-2022年媒介伊蚊监测：幼蚊种群特征及登革热风险分析

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中国媒介生物学及控制杂志 2024年第3期35卷 303-307页

作者：赵奇张叶樊金星岳思宁王安琪刘吉起河南省疾病预防控制中心消毒与媒介生物控制研究所

目的了解河南省登革热媒介伊蚊的种群密度和季节消长，为登革热风险评估、监测预警及控制提供科学依据。方法 2019-2022年每年5-10月的伊蚊活动季节，采用布雷图指数（BI）法在河南省14个监测县（区）进行媒介伊蚊监测。使用Excel 201... 详细信息

目的了解河南省登革热媒介伊蚊的种群密度和季节消长，为登革热风险评估、监测预警及控制提供科学依据。方法 2019-2022年每年5-10月的伊蚊活动季节，采用布雷图指数（BI）法在河南省14个监测县（区）进行媒介伊蚊监测。使用Excel 2010软件汇总监测结果，判定风险等级，计算季节指数。使用SPSS 25.0软件，采用t检验和方差分析比较不同年度、不同地区BI的差异。结果 2019-2022年媒介伊蚊BI分别为15.31、14.27、11.34和12.32,7、8月为蚊密度高峰。4年累计330次监测中有85次（25.76%）的监测结果达到区域流行风险、70次（21.21%）达到暴发风险、77次（23.33%）达到传播风险、98次（29.70%）无传播风险，河南省南部达到区域流行风险的比例高于黄河以北和黄河沿线。2020-2022年各监测点的监测结果与2019年相比，差异均无统计学意义（均P>0.05），不同区域之间监测结果差异亦均无统计学意义（均P>0.05）。结论河南省媒介伊蚊密度偏高，伊蚊活动高峰季节大多数监测点具备潜在登革热传播条件，预计未来输入性登革热病例会有较大增加，需要密切关注国内国际登革热疫情变化，做好应急处置准备。

关键词：媒介伊蚊布雷图指数登革热

河南省家蝇种群对拟除虫菊酯类杀虫剂敏感性测定和击倒抗性基因突变研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2023年第3期34卷 308-313页

作者：赵奇樊金星张叶岳思宁刘吉起河南省疾病预防控制中心消毒与媒介生物控制研究所河南郑州450016

目的建立河南省家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感基线,分析部分野生家蝇种群的击倒抗性基因多态性。方法家蝇敏感品系为实验室饲养多年的家蝇种群,未接触过杀虫剂;野生种群为2019-2021年间采集自开封、安阳、南阳、驻马店和鹤壁市等地的... 详细信息

目的建立河南省家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感基线,分析部分野生家蝇种群的击倒抗性基因多态性。方法家蝇敏感品系为实验室饲养多年的家蝇种群,未接触过杀虫剂;野生种群为2019-2021年间采集自开封、安阳、南阳、驻马店和鹤壁市等地的野外家蝇。采用微量点滴法检测雌成蝇对氯菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯的半数致死剂量(LD50)。采用等位基因特异性PCR(AS-PCR)技术检测各家蝇种群击倒抗性基因的基因型及其突变率,并检验击倒抗性基因突变率与LD50的相关性。采用DNA测序方法验证AS-PCR的结果。结果氯菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯对家蝇敏感品系的LD50分别为0.1510、0.0772和0.1666µg/♀,对开封种群的LD50分别为0.3216、0.1306和2.2354µg/♀,对安阳种群的LD50分别为0.8677、0.4592和1.5916µg/♀,对南阳种群的LD50分别为5.1737、1.0372和0.4161µg/♀,对驻马店种群的LD50分别为0.6341、0.1082和0.2624µg/♀,对鹤壁种群的LD50分别为2.7450、1.1029和2.5560µg/♀。家蝇敏感品系仅检测到1种基因型,即敏感纯合子,野生种群共检测到5种基因型,分别为敏感纯合子(L/L)、敏感/1014F杂合子(L/F)、敏感/1014H杂合子(L/H)、1014F/1014H杂合子(F/H)和1014H纯合子(H/H)。野生种群的突变率分别为14.84%、17.97%、13.28%、10.16%和20.31%。相关性检验显示家蝇种群对高效氯氰菊酯的抗性与L1014H突变相关。对130个家蝇样本的5种基因型进行测序,AS-PCR检测结果的准确率为79.23%。结论建立了河南省家蝇敏感基线,可作为河南省家蝇抗药性监测的参考值。AS-PCR技术能够用于家蝇抗药性基因的日常监测。

关键词：家蝇敏感基线击倒抗性等位基因特异性聚合酶链式反应

灵芝ATP合酶介导产生的ATP在影响灵芝三萜合成中的分子机制研究

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灵芝ATP合酶介导产生的ATP在影响灵芝三萜合成中的分子机制研究

作者：岳思宁南京农业大学

学位级别：硕士

灵芝(Ganodermalucidum)是一种具有药用价值的真菌。灵芝三萜,又被称为灵芝酸(Ganodericacids,GAs),是灵芝主要的活性成分之一。但灵芝目前的基础研究并不深入,因此限制了灵芝发酵产业的发展。而近年来灵芝的全基因组也被报道出来,使灵... 详细信息

灵芝(Ganodermalucidum)是一种具有药用价值的真菌。灵芝三萜,又被称为灵芝酸(Ganodericacids,GAs),是灵芝主要的活性成分之一。但灵芝目前的基础研究并不深入,因此限制了灵芝发酵产业的发展。而近年来灵芝的全基因组也被报道出来,使灵芝可以进行更为细致的分子机制研究。腺嘌呤核苷三磷酸(Adenosine triphosphate,ATP)是生物中重要的“能量货币”,几乎参与了所有的生命过程。ATP合酶(ATP synthase)在所有真核生物的线粒体内膜上都有分布,是真核生物合成ATP的关键合酶。在动物和植物相关研究中,ATP在调控细胞代谢以及其它各种生命过程中都发挥了十分重要的作用,但是在真菌乃至微生物中,类似的研究却并不多见。本研究结果表明热胁迫(Heat stress,HS)、茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate,MeJA)、水杨酸(Salicylic acid,SA)以及氮饥饿(Nitrogen starvation)处理能使 WT 菌丝(Wild type)中ATP含量分别下降60.0%、74.5%、52.0%与67.0%;此时GAs的含量分别上升83.5%、68.0%、31.9%与35.5%。在此基础上,本研究通过外源添加2 μM寡霉素(Oligomycin,Oli)处理灵芝WT菌丝,使灵芝ATP含量下降91.1%,GAs含量上升66.5%;外源添加4 mM腺苷(Adenosine,Ade)处理灵芝WT菌丝使灵芝ATP含量上升102.0%,GAs含量下降53.5%。因此,根据上述结果推测灵芝胞内ATP的变化会影响灵芝GAs的合成。灵芝胞内ATP含量下降引起灵芝GAs含量上升具有实际生产意义,因此本研究继续探究了其具体的分子机制。首先,本研究在灵芝基因组库中鉴定并克隆了 ATP合酶β亚基,命名为GlATPsyn-β。该基因全长1626 bp,编码一个长度为542个氨基酸,大小为57.96 kDa的蛋白;然后,本研究使用RNAi技术构建了GlATPsyn-β沉默效率为53.3%与62.7%两个沉默转化子,分别命名为ATPsyn-beta-1i与ATPsyn-beta-12i。当沉默GlATPsyn-β时,两转化子胞内ATP含量分别下降69.3%与75.2%,GAs含量分别上升158.7%与142.1%。为了在代谢水平上探究灵芝胞内ATP含量下降引起灵芝GAs含量上升的机制,本研究检测了 GAs合成的最初底物乙酰辅酶A的含量变化,结果表明灵芝胞内ATP含量下降时乙酰辅酶A含量显著上升。为了探究乙酰辅酶A上升的来源,本研究检测了乙酰辅酶A的主要来源—糖酵解丙酮酸脱羧以及脂肪酸β氧化代谢的相关基因与酶活性变化,最终发现脂肪酸β氧化相关基因表达量与酶活性显著上升。为了证明脂肪酸β氧化参与了灵芝胞内ATP含量下降引起的灵芝GAs含量上升,本研究构建了ATP合酶β亚基与脂肪酸β氧化关键酶中链脂酰辅酶A脱氢酶ACD与β羟脂酰辅酶A脱氢酶HCD的双沉默菌株ATPsyn-ACD与ATPsyn-HCD,并与使用10 μM脂肪酸β氧化抑制剂etomoxir(eto.)处理GlATPsyn-β沉默菌株做药理学实验对比。结果表明ATPsyn-ACD、ATPsyn-HCD双沉默菌株和使用10 μM eto.处理GlATPsyn-β沉默菌株时GAs含量与GlATPsyn-β沉默菌株相比至少下降35.9%,并且与WT菌株相比无明显差异。而此时ATPsyn-ACD、ATPsyn-HCD双沉默菌株乙酰辅酶A含量与GlATPsyn-β沉默菌株相比也至少下降51.5%,并且与WT菌株相比无明显差异。因此,本研究认为在代谢水平上脂肪酸β氧化参与了灵芝胞内ATP含量下降引起的灵芝GAs含量上升的过程。在真核生物中ATP水平的变化常会影响胞内第二信使环腺苷酸cAMP的含量,为了在信号水平上探究灵芝胞内ATP含量下降引起灵芝GAs含量上升的机制,本研究检测了 ATP含量下降时灵芝胞内环腺苷酸-蛋白激酶A(cAMP-PKA)途径相关底物与酶活性的变化,结果表明GlATPsyn-β两个沉默菌株胞内cAMP含量上升分别上升316.2%与296.1%,PKA酶活性分别提高53.2%与50.9%。为了证明cAMP-PKA途径参与了灵芝胞内ATP含量下降引起灵芝GAs含量上升的过程,本研究构建了 ATP合酶β亚基与PKA催化亚基PKAc的双沉默菌株ATPsyn-PKAc,并与使用20 μM PKA抑制剂H89处理GlATPsyn-β沉默菌株做药理学实验对比。此时实验结果表明ATPsyn-PKAc和使用20 μM PKA抑制剂H89处理GlATPsyn-β沉默菌株时GAs的含量与GlATPsyn-β沉默菌株相比至少下降39.3%,并且与WT菌株相比无明显差异。因此,在信号水平上cAMP-PKA途径参与了灵芝胞内ATP含量下降引起的灵芝GAs含

关键词：灵芝 ATP GAs 乙酰辅酶A 脂肪酸β氧化 cAMP-PKA途径

2021年河南省白纹伊蚊对杀虫剂抗药性监测

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河南预防医学杂志 2022年第2期33卷 116-118页

作者：唐振强岳思宁赵奇河南省疾病预防控制中心消毒与媒介生物控制研究所河南郑州450016

目的了解河南省登革热传播媒介白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为杀虫剂的选择和合理使用提供科学依据。方法选取许昌、洛阳、开封、焦作及濮阳等5个市,在城区不同方位采集白纹伊蚊幼虫,采用浸渍法和成蚊接触桶法测定白纹伊蚊对常用... 详细信息

目的了解河南省登革热传播媒介白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为杀虫剂的选择和合理使用提供科学依据。方法选取许昌、洛阳、开封、焦作及濮阳等5个市,在城区不同方位采集白纹伊蚊幼虫,采用浸渍法和成蚊接触桶法测定白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平。结果白纹伊蚊幼虫对高效氯氰菊酯的抗性倍数为20.00~199.22,其中濮阳呈中抗水平,其它监测点均呈高抗水平;对溴氰菊酯的抗性倍数为320.00~525.00,均呈高抗水平;对双硫磷的抗性倍数为7.91~12.09,其中,焦作呈中抗水平,其它监测点均呈抵抗水平;对残杀威抗性倍数为0.24~3.32,其中,洛阳呈抵抗水平,其它监测点均呈敏感水平。白纹伊蚊成蚊暴露于马拉硫磷、残杀威、高效氯氰菊酯和溴氰菊酯后,24 h的死亡率分别为86.95%~98.67%、78.57%~88.06%、62.12%~88.06%和74.65%~89.04%。在濮阳监测点白纹伊蚊成蚊对马拉硫磷敏感,其它监测点白纹伊蚊成蚊均对四种杀虫剂呈现不同程度抗药性。结论白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂已产生不同程度抗性,对氨基甲酸酯类和有机磷类杀虫剂呈现敏感或可疑抗性。

关键词：登革热白纹伊蚊抗药性监测

河南省信阳地区家畜寄生蜱感染巴贝虫的分子流行病学调查

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2023年第5期41卷 567-572页

作者：纪鹏慧蒋甜甜贺志权王丹岳思宁李素华杨成运王昊张红卫周瑞敏河南省疾病预防控制中心河南省寄生虫病原与媒介医学重点实验室河南省传染病病原生物重点实验室郑州450016

目的了解河南省信阳地区家畜寄生蜱感染巴贝虫的情况。方法2022年6—8月在河南省信阳市光山县和商城县采集家畜动物体表寄生蜱,采用形态学和PCR扩增蜱虫16S rDNA鉴定蜱虫种类。提取蜱虫基因组DNA,采用巢式PCR扩增巴贝虫18S rRNA基因。... 详细信息

目的了解河南省信阳地区家畜寄生蜱感染巴贝虫的情况。方法2022年6—8月在河南省信阳市光山县和商城县采集家畜动物体表寄生蜱,采用形态学和PCR扩增蜱虫16S rDNA鉴定蜱虫种类。提取蜱虫基因组DNA,采用巢式PCR扩增巴贝虫18S rRNA基因。目的条带经测序后,进行BLAST比对分析,采用邻接法构建系统进化树,采用MEGA7.0软件进行同源性分析。结果共采集335只蜱,形态学和PCR扩增鉴定结果显示,长角血蜱49只、微小扇头蜱208只、褐黄血蜱1只、具环扇头蜱34只、刻点血蜱43只。PCR扩增结果显示,335份蜱虫样品中有2份样品扩增出巴贝虫400 bp大小的目的条带,蜱虫巴贝虫总阳性率为0.6%。BLAST比对分析结果显示,1份样品扩增出的18S rRNA序列与GenBank中来自美国(MK609547)、泰国(MG199181)、中国(KU204794)的田鼠巴贝虫序列相似性均达99.26%;另1份样品扩增出的18S rRNA序列与GenBank中来自美国(MH620203)、印度(MN161136)和中国(KP666166)的吉氏巴贝虫序列相似性均达100%。系统进化树分析结果显示,田鼠巴贝虫阳性样品与来自俄罗斯(KX987864)、中国(KU204794)、泰国(MG199179)等地的田鼠巴贝虫聚在同一分支上,同源性较高;吉氏巴贝虫阳性样品与来自中国(FJ769386)、美国(MH620203)和印度(KF606884)等地的吉氏巴贝虫聚在同一分支上,同源性较高。结论河南省信阳地区家畜寄生蜱存在田鼠巴贝虫和吉氏巴贝虫感染,可能对人和家畜有一定的致病风险。

关键词：蜱巴贝虫家畜分子流行病学信阳河南省

大型洪涝灾害后卫生消毒的应对措施与问题探讨

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中国消毒学杂志 2023年第9期40卷 695-697页

作者：刘吉起张叶岳思宁樊金星张文豪赵东阳河南省疾病预防控制中心河南郑州450016

卫生消毒是预防洪涝灾害等突发公共卫生事件后传染病暴发流行的重要手段。1998年长江沿岸特大洪涝灾害和2012年特大暴雨引发的华北城市内涝等灾害发生后,各级政府都通过采取有效的卫生消毒防疫措施确保了“大灾之后无大疫”^([1-2])。... 详细信息

卫生消毒是预防洪涝灾害等突发公共卫生事件后传染病暴发流行的重要手段。1998年长江沿岸特大洪涝灾害和2012年特大暴雨引发的华北城市内涝等灾害发生后,各级政府都通过采取有效的卫生消毒防疫措施确保了“大灾之后无大疫”^([1-2])。本文通过梳理2021年河南省疾控系统在洪涝灾害中的卫生消毒应对措施,探讨了区域性大型洪涝灾后消毒应对措施中存在的问题及解决办法,以期为近期京津冀地区和东北地区洪涝灾害后疫情防控提供经验借鉴,提高基层卫生消毒应急处置能力。

关键词：洪涝灾害卫生消毒应对措施问题探讨

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2020年河南省病媒生物监测

中华卫生杀虫药械 2022年第2期28卷 161-164页

作者：樊金星岳思宁张叶赵奇刘吉起河南省疾病预防控制中心河南郑州450016

目的了解2020年河南省病媒生物种群构成、密度及季节消长规律,为病媒生物防控提供科学依据。方法鼠类监测采用夹夜法,蚊虫监测采用诱蚊灯法,蝇类采用诱蝇笼法,蟑螂采用粘捕法。结果2020年河南省鼠类捕获率为0.57%,小家鼠为优势种,居民... 详细信息

目的了解2020年河南省病媒生物种群构成、密度及季节消长规律,为病媒生物防控提供科学依据。方法鼠类监测采用夹夜法,蚊虫监测采用诱蚊灯法,蝇类采用诱蝇笼法,蟑螂采用粘捕法。结果2020年河南省鼠类捕获率为0.57%,小家鼠为优势种,居民区、重点行业和农村自然村捕获率分别为0.53%、0.52%和0.66%。蚊类平均密度为9.20只/(灯·夜),淡色库蚊为河南省优势种,其中牲畜棚的蚊密度最高,为18.49只/(灯·夜)。蝇类平均密度为8.39只/笼,家蝇为河南省优势种群,农贸市场蝇密度最高,为10.43只/笼。蟑螂平均密度为0.12只/张,德国小蠊为优势种。鼠类和蟑螂全年均有活动,鼠类季节消长呈单峰分布,在9月达峰值0.91%;蟑螂季节消长呈双峰分布,在3月、9月为高峰,分别为0.24、0.15只/张。蚊、蝇季节消长均呈单峰分布。蚊虫在8月达峰值,为15.05只/(灯·夜);蝇类在6月达峰值,为22.40只/笼。结论掌握了2020年河南省病媒生物种群构成、密度及季节消长规律,为河南省病媒生物防控提供了科学依据。

关键词：病媒生物监测种群构成生境季节消长

2021年河南省疾控机构病媒生物控制工作能力调查

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现代疾病预防控制 2023年第9期34卷 682-685页

作者：樊金星李艳培岳思宁王安琪刘吉起河南省疾病预防控制中心河南郑州450016 河南省人民医院

目的了解河南省各级疾控机构病媒生物控制工作现状,为开展病媒生物工作提供依据和建议。方法2021年3月通过调查问卷收集全省疾控机构病媒科室设置、人员情况、实验室、工作经费等信息并进行统计分析。结果共调查全省173家疾控机构,87家... 详细信息

目的了解河南省各级疾控机构病媒生物控制工作现状,为开展病媒生物工作提供依据和建议。方法2021年3月通过调查问卷收集全省疾控机构病媒科室设置、人员情况、实验室、工作经费等信息并进行统计分析。结果共调查全省173家疾控机构,87家设置有病媒专业部门,专业部门设置率50.29%。从事病媒专业人员604人,学历以大专及以下为主,占68.71%;职称以初级及其他为主,占77.82%,高级占5.13%;工作年限以10年以下为主,占68.87%。市、县级疾控配置病媒专业平均为5.17人、3.26人。设置各类病媒实验室的机构占28.32%,配发工作经费的机构占41.04%。结论河南省疾控机构病媒生物控制工作能力现状不理想,应从部门设置、人力、经费、实验室等方面提高病媒生物控制工作能力。

关键词：疾控机构病媒生物现状调查

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灵芝转录因子AreA的生物学功能

菌物学报 2020年第1期39卷 57-65页

作者：朱静宋书琪岳思宁连玲丹赵明文南京农业大学生命科学学院农业农村部食用菌加工重点实验室

AreA作为丝状真菌氮代谢中的关键转录因子,在真菌响应外界氮源、生长发育、次级代谢及抗逆过程中发挥了重要作用。本研究通过生物信息学比对分析,获得了灵芝AreA的全长序列,研究了AreA对菌丝生长、抵御细胞壁胁迫以及次级代谢的影响,Are... 详细信息

AreA作为丝状真菌氮代谢中的关键转录因子,在真菌响应外界氮源、生长发育、次级代谢及抗逆过程中发挥了重要作用。本研究通过生物信息学比对分析,获得了灵芝AreA的全长序列,研究了AreA对菌丝生长、抵御细胞壁胁迫以及次级代谢的影响,AreA编码蛋白的C末端含有保守的GATA型锌指结构域,与其他担子菌中AreA的亲缘关系较近。通过qRT-PCR分析发现,外界氮源浓度的变化能够影响AreA的转录水平。在低氮源浓度条件下,AreA的转录水平显著高于氮源丰富的条件。利用前期构建的AreA沉默转化子研究发现,沉默AreA后菌株生长速率显著低于野生菌株,约下降70%;且AreA沉默菌株菌丝比野生菌株蓬松。细胞壁的组成成分检测发现,AreA沉默菌株的葡聚糖和几丁质含量比野生菌株(WT)和转入空载沉默质粒的菌株(CK)分别下降约65%和40%–60%。随后检测了对细胞壁胁迫的耐受性,结果发现AreA沉默转化子对刚果红和SDS极为敏感,几乎不能生长。在AreA沉默菌株中,灵芝三萜的含量相比于对照菌株下降了约23%。研究结果表明灵芝AreA能够响应环境中的氮源浓度,并且在灵芝的生长发育、次级代谢以及抵御细胞壁胁迫中发挥了重要作用。

关键词：转录因子AreA 氮源生长细胞壁胁迫次级代谢