检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

昆虫抗菌蛋白基因转录调控研究的新进展

生物化学与生物物理进展 1997年第1期24卷 22-26页

作者：屠益增蔡敏莺屈贤铭中国科学院上海生物工程研究中心上海200233

在自然或人为创伤和感染情况下 ,昆虫能迅速产生各种类型的抗菌因子 ,例如天蚕素(cecropin) ,果蝇抗菌蛋白 (diptericin) ,天蚕抗菌蛋白 (attacin)和防御素 (defensin)等 .这些活性多肽和蛋白从其被合成的脂肪体和某些血细胞中 ,分泌到... 详细信息

在自然或人为创伤和感染情况下 ,昆虫能迅速产生各种类型的抗菌因子 ,例如天蚕素(cecropin) ,果蝇抗菌蛋白 (diptericin) ,天蚕抗菌蛋白 (attacin)和防御素 (defensin)等 .这些活性多肽和蛋白从其被合成的脂肪体和某些血细胞中 ,分泌到血淋巴参与虫体对入侵物的免疫反应 .抗菌多肽和蛋白的诱导、表达及其协同作用于外源微生物 ,构成昆虫先天性防卫免疫系统中极为重要的环节 .近年的研究表明 ,昆虫的这种防卫免疫系统与哺乳动物急性期反应是相关的。

关键词：昆虫生物化学抗菌蛋白基因转录调控

用差异显示技术寻找家蚕诱导前后特异表达的基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物工程学报 1999年第1期15卷 59-63页

作者：刘振义屈贤铭中国科学院上海生物工程研究中心

分别抽取诱导和未诱导家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ）蛹脂肪体总ＲＮＡ进行ＤＤＲＴＰＣＲ反应。产物于非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳展开，得到的差异条带扩增后大多可以在２％琼脂糖凝胶上得到一条以上的带。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ... 详细信息

分别抽取诱导和未诱导家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ）蛹脂肪体总ＲＮＡ进行ＤＤＲＴＰＣＲ反应。产物于非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳展开，得到的差异条带扩增后大多可以在２％琼脂糖凝胶上得到一条以上的带。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证明为阳性的一条带克隆后得到６个阳性转化子，ＳＳＣＰ证明它们含有相同的插入片段。对其中之一进行测序，结果显示片段长２４１ｂｐ，没有发现同源性较高的基因。对此基因的进一步研究有望揭示它在昆虫免疫反应中可能扮演的角色。

关键词：家蚕免疫反应差异显示

注射大肠杆菌或超声波诱导家蚕及蓖麻蚕产生抗菌物质的比较研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

昆虫学报 1984年第3期27卷 275-279页

作者：屈贤铭祁国荣黄自然华南农学院蚕桑系中国科学院上海生物化学研究所

本文报道:1.蓖麻蚕Philosamia cynthia ricini、家蚕Bombyx mori及柞蚕Antheraea pernyi注射大肠杆菌Escherichia coli或超声波处理均能诱导血淋巴产生抗菌物质。同一蚕种诱导产物相同,不同蚕种间差异明显。2.家蚕不同发育阶段的个体诱... 详细信息

本文报道:1.蓖麻蚕Philosamia cynthia ricini、家蚕Bombyx mori及柞蚕Antheraea pernyi注射大肠杆菌Escherichia coli或超声波处理均能诱导血淋巴产生抗菌物质。同一蚕种诱导产物相同,不同蚕种间差异明显。2.家蚕不同发育阶段的个体诱导产生的抗菌物质基本相同;不同性别的家蚕蛹的诱导产物的相对量有差异;不同品种家蚕蛹对诱导的应答潜伏期也不尽相同。3.注射聚肌胞核苷酸(PolyI:C)诱导家蚕血淋巴产生一种明显地不同于其它诱导源诱导的抗菌物质,此物质在酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳中泳动速度较快。本研究的所有结果均表明,诱导绢丝昆虫产生抗菌物质的诱导源是非专一性的,即诱导源与诱导产物之间无对应的关系。

关键词：家蚕蓖麻蚕抗菌物质大肠杆菌超声波

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

重组GM-CSF/IL-3融合蛋白的纯化

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第3期32卷 235-238页

作者：张毅屈贤铭陆坚峰杨胜利中国科学院上海生物工程研究中心!上海200233

重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 /白细胞介素 3(GM CSF/IL 3)融合蛋白是一种很有发展潜力与应用前景的重组药物 ,它在大肠杆菌中是以包含体形式表达的。针对这一重组蛋白包含体的洗涤、变性、复性以及最终的纯化过程 ,进行了深入地研... 详细信息

重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 /白细胞介素 3(GM CSF/IL 3)融合蛋白是一种很有发展潜力与应用前景的重组药物 ,它在大肠杆菌中是以包含体形式表达的。针对这一重组蛋白包含体的洗涤、变性、复性以及最终的纯化过程 ,进行了深入地研究 ,重点分析和比较了不同条件及因素对于重组蛋白包含体变性及复性过程的影响。实验结果表明 ,8mol/L尿素及 10mmol/L的DTT可以使包含体充分溶解。在复性过程中 ,采用分步逐渐降低尿素浓度的方法 ,可以有效地提高复性的效率。与此同时 ,在复性溶液中加入氧化型及还原型的谷胱甘肽有助于提高变性蛋白质中二硫键的正确配对。复性好的蛋白质用DEAE离子交换层析进行分离 ,最后获得具有生物活性的高纯度的重组蛋白 ,最终的蛋白质回收率在 30 %以上。经还原、非还原电泳及反相HPLC检测 ,所纯化的蛋白质的纯度达 95 %以上。基本建立和完成了实验室规模的重组GM CSF/IL 3融合蛋白的纯化工艺 ,为这一重组药物进一步的开发与应用打下坚实的基础。

关键词：包含体蛋白质复性蛋白质纯化融合蛋白造血生长因子

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

穴居狼蛛毒中一个抗菌活性多肽的鉴定和纯化

动物学报 1989年第3期35卷 300-305页

作者：徐科吉永华屈贤铭中国科学院上海生理研究所中国科学院上海生物化学研究所

从我国新疆地区产穴居狼蛛的毒液中分离纯化了一种多肽——狼蛛抗菌肽(Lycosin)。穴居狼蛛的粗毒在酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳中可分出11条蛋白带,用0.6％的大肠杆菌琼脂胶覆盖在凝胶上进行鉴定表明,电泳迁移率最快的区带有抗菌活性。经鉴... 详细信息

从我国新疆地区产穴居狼蛛的毒液中分离纯化了一种多肽——狼蛛抗菌肽(Lycosin)。穴居狼蛛的粗毒在酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳中可分出11条蛋白带,用0.6％的大肠杆菌琼脂胶覆盖在凝胶上进行鉴定表明,电泳迁移率最快的区带有抗菌活性。经鉴定该多肽分子系由43至45个氨基酸残基组成,N-末端为丙氨酸,分子中的碱性和疏水性氨基酸分别占总氨基酸残基数的1/4和1/3。

关键词：穴居狼蛛毒液狼蛛抗菌肽

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3融合蛋白的表达研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物工程学报 2000年第3期16卷 316-319页

作者：张毅屈贤铭杨胜利中国科学院上海生命科学院生物工程研究中心上海200233

利用PCR扩增得到粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、白细胞介素 3(IL 3)完整基因片段 ,将其分别克隆至pGEM T ,构建成GM CSF/IL 3融合蛋白基因 ,DNA序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆至T7RNA聚合酶表达载体pT7zz,得... 详细信息

利用PCR扩增得到粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、白细胞介素 3(IL 3)完整基因片段 ,将其分别克隆至pGEM T ,构建成GM CSF/IL 3融合蛋白基因 ,DNA序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆至T7RNA聚合酶表达载体pT7zz,得到表达质粒pFu ,经转化至表达宿主E .coliBL2 1(DE3) ,在IPTG诱导下获得融合蛋白目的产物的直接表达。经SDS PAGE电泳鉴定扫描分析 ,目的基因产物表达量占菌体总蛋白量的 30 %以上 ,目的基因表达产物以包涵体的形式表达。Western blot鉴定表明 ,该表达产物可以与GM CSF抗体及IL 3抗体特异性结合。目的基因表达产物经过包涵体变性、透析复性及柱层析纯化 ,用GM CSF、IL 3依赖细胞株TF 1检测。

关键词：融合蛋白基因表达基因药物 GM-CSF IL-3

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

乳糖作为诱导剂对重组目的蛋白表达的影响

生物工程学报 2000年第4期16卷 464-468页

作者：张毅屈贤铭杨胜利中国科学院上海生物工程研究中心上海200233

将重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 /白细胞介素 3(GM CSF/IL 3)融合蛋白表达菌BL2 1(DE3) (pFu)作为研究对象 ,对于以乳糖作为诱导剂时重组目的产物的诱导表达规律进行了深入的研究。分析比较了不同培养基中 ,不同生长阶段进行诱导... 详细信息

将重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 /白细胞介素 3(GM CSF/IL 3)融合蛋白表达菌BL2 1(DE3) (pFu)作为研究对象 ,对于以乳糖作为诱导剂时重组目的产物的诱导表达规律进行了深入的研究。分析比较了不同培养基中 ,不同生长阶段进行诱导对于产物表达的影响。对诱导所需的乳糖浓度、诱导持续时间长短等因素亦进行了研究。实验结果表明 ,在对诱导条件进行优化控制的前提下 ,利用乳糖作为诱导剂可以达到与IPTG类似的诱导效果。随后的研究中 ,将乳糖作为诱导剂应用于高密度发酵过程。这些研究结果为乳糖作为诱导剂最终应用于重组基因工程药物的工业化生产提供了有益的参考和借鉴。

关键词：乳糖诱导剂重组基因工程药物蛋白质发酵

家蚕抗菌肽CM_2Ph_1的分离、纯化、结构及其性质的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国科学（B辑） 1989年第5期 473-480页

作者：屠益增屈贤铭许廷森中国科学院上海昆虫研究所中国科学院上海生物化学研究所

本文应用HPLC技术纯化家蚕蛹血淋巴以polyI:C诱导产生的一个抗菌肽CM_2Ph_1。氨基酸组成分析含16种氨基酸残基。自动Edman降解序列测定其一级结构为GNFFKDLEKMGQRVRDAVISAAPAVDTLAKAKALGQ。羧肽酶分析C-末端残基可能为α羧基酰胺化的Gl... 详细信息

本文应用HPLC技术纯化家蚕蛹血淋巴以polyI:C诱导产生的一个抗菌肽CM_2Ph_1。氨基酸组成分析含16种氨基酸残基。自动Edman降解序列测定其一级结构为GNFFKDLEKMGQRVRDAVISAAPAVDTLAKAKALGQ。羧肽酶分析C-末端残基可能为α羧基酰胺化的Gln。纯化后的CM_2Ph_1对多种细菌有不同程度的抑制作用,浓度在0.35μmol/L时,能抑制50％大肠杆菌D31株的生长。本文也比较了CM_2Ph_1与其它几种抗菌肽在结构与功能方面的异同,并讨论了它们之间的同源性。

关键词：抗菌肽一级结构昆虫免疫家蚕

抗菌肽Diptericin cDNA的克隆及在***中的融合表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 2001年第2期17卷 182-184页

作者：陈海旭胡泰山王新屈贤铭中国科学院上海生物工程研究中心上海200233

从果蝇成虫中抽提总 RNA,RT- PCR扩增编码伏蝇素 diptericin的 c DNA,克隆并测定了全序列 .将该 c DNA亚克隆到融合表达载体 p MAL- CR1上 ,转化大肠杆菌 BL2 1菌株 ,进行了高效的可溶性融合表达 .通过离子交换层析纯化融合蛋白 ,经 Xa... 详细信息

从果蝇成虫中抽提总 RNA,RT- PCR扩增编码伏蝇素 diptericin的 c DNA,克隆并测定了全序列 .将该 c DNA亚克隆到融合表达载体 p MAL- CR1上 ,转化大肠杆菌 BL2 1菌株 ,进行了高效的可溶性融合表达 .通过离子交换层析纯化融合蛋白 ,经 Xa因子酶切后得到的重组 diptericin具有抗菌活性 .

关键词：伏蝇素 MBP融合蛋白融合表达抗菌肽 cDNA克隆