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延安地区白色念珠菌流行病学及其对氟康唑耐药机制的研究

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延安地区白色念珠菌流行病学及其对氟康唑耐药机制的研究

作者：封小川延安大学

学位级别：硕士

目的:伴随临床中糖皮质激素、广谱抗生素及免疫抑制剂的广泛应用,器官移植、骨髓移植、介入诊疗等新技术的开展,以及免疫缺陷性疾病患者的增多,以白色念珠菌为主的侵袭性念珠菌感染人数逐年增加,但因目前临床上常用抗真菌药物种类有限,... 详细信息

目的:伴随临床中糖皮质激素、广谱抗生素及免疫抑制剂的广泛应用,器官移植、骨髓移植、介入诊疗等新技术的开展,以及免疫缺陷性疾病患者的增多,以白色念珠菌为主的侵袭性念珠菌感染人数逐年增加,但因目前临床上常用抗真菌药物种类有限,而氟康唑因其具有良好的安全性和生物利用度,被广泛用于治疗白色念珠菌感染。由于白色念珠菌感染患者及氟康唑用药频次的增多,导致白色念珠菌对以氟康唑为主的抗真菌药物产生耐药,且耐药率较高,严重影响了患者的治疗效果。近年来,有关白色念珠菌对氟康唑耐药机制文献报道较多的是药物靶点的改变和药物外排泵的过表达。但目前延安地区尚未针对本区域白色念珠菌感染的情况进行流行病学分析及其对氟康唑耐药机制研究的报道,本课题采用回顾性分析的方法对延安地区两家三级甲等医院临床分离的以白色念珠菌为主的侵袭性念珠菌感染的患者进行流行病学分析,并进一步探究了其及对氟康唑的耐药机制,旨在对本地区以白色念珠菌为主的侵袭性念珠菌感染的防治提供一定的依据。方法:（1）收集2012年1月至2021年12月延安地区两家三级甲等医院临床确诊白色念珠菌感染的病例1042例,其中男576例,女466例,年龄1天-96岁,平均年龄（61.72±18.11）岁,采用回顾性分析的方法,查阅相关病例、资料,以统一的Excel电子表格的形式进行记录,菌株的鉴定和药物敏感性分析采用科玛嘉（CHROMagar）念珠菌显色培养平板培养基及梅里埃ATB FUNGUS 3酵母样真菌药敏试剂进行鉴定,使用SPSS 25.0软件进行数据分析;（2）从回顾性分析病例中选取对氟康唑耐药和敏感的白色念珠菌菌株各10株,菌株菌种复核采用法国梅里埃VITEK MS基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行鉴定,菌株药物敏感性复核用赛默飞Yeast One plate真菌药敏板采用比色微量稀释法测MIC值;扩增靶酶编码基因ERG11,并对其产物进行DNA双向测通,分析突变位点;使用荧光染料罗丹明6G（Rhodamine 6G）通过Cytomics 500流式细胞仪测定细胞荧光强度,分析耐药组与敏感组菌株的外排情况;采用ABI 7300型全自动荧光定量PCR仪检测白色念珠菌外排泵编码基因的表达水平。结果:（1）临床分离的念珠菌中白色念珠菌的分离率最高,占73.48%,年度分布趋势整体呈先上升后下降,以2015年分离菌株数目最多,性别分布无显著差异,60岁以上人群（62.38%）明显比60岁以下人群（37.62%）易发生白色念珠菌感染,年龄主要分布在60-79岁之间,其中又主要集中在60-69岁年龄段,构成比为24.76%,临床标本分布中以痰液为主,占58.34%（608/1042）,患者科室分布中以呼吸内科为主（35.51%）。（2）通过危险因素（单因素和多因素）分析,最终筛选出患者年龄≥60岁、广谱抗生素使用、侵入性操作、各种插管和大型手术治疗史为延安地区感染白色念珠菌的主要危险因素。（3）临床治疗白色念珠菌感染抗真菌药物的预防性、广泛性、多频次使用,白色念珠菌耐药现象日趋严重,其对氟康唑耐药情况较其他抗真菌药物严重,十年期间,氟康唑耐药的菌株数量占比最高,为11.71%,年度分布趋势图显示2015年耐药率最高达27.13%。（4）靶酶编码基因ERG11的目的基因扩增测序结果显示,耐药C3号菌株的第414位碱基发生了突变G→A,但并未引起第118位甘氨酸（Gly）密码子的改变;耐药C7号菌株及敏感C12号菌株的第518位碱基均发生了突变C→G,引起第173位氨基酸密码子改变,致脯氨酸（Pro）变为精氨酸（Arg）,虽然引起氨基酸的改变,但耐药及敏感菌株中均存在,且不是既往文献报道与耐药相关的碱基突变,推测这个位点的突变在白色念珠菌对氟康唑耐药机制中为无意义突变。（5）荧光染料罗丹明6G检测白色念珠菌外排实验结果显示,耐药菌和敏感菌外排存在显著的差异;RT-PCR检测外排泵基因结果显示,CDR1与CDR2外排泵基因在耐药菌与敏感菌之间表达水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:（1）本研究分离的念珠菌中以白色念珠菌最多见,在过去十年间其感染率整体呈先上升后下降趋势,患者主要分布在60-79岁年龄段,临床上以呼吸内科病例居多,标本类型以痰液为主;（2）患者年龄≥60岁、广谱抗生素使用、侵入性操作、各种插管操作和大型手术治疗史为引起白色念珠菌感染的主要危险因素,临床应加强此类病人的监管;（3）白色念珠菌对抗真菌药物出现不同程度的耐药,且对氟康唑耐药率最高,耐药形势较为严峻;（4）本地区白色念珠菌对氟康唑的耐药机制主要为外排泵编码基因CDR1、CDR2的过表达,未发现靶酶编码基因有意义突变的。

关键词：白色念珠菌临床分布氟康唑 ERG11 CDR1

白念珠菌对临床常用抗真菌药物耐药机制研究进展

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中国真菌学杂志 2022年第3期17卷 251-254页

作者：张欠欠封小川张凯玄元航延安大学医学院延安716000 陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心延安716000

近年来,以白念珠菌感染为主的念珠菌属引起的侵袭性念珠菌病患者人数逐年增多,病死率高,成为恶性肿瘤、AIDS及器官移植等疾病致死的直接原因,严重危害全球人类的生命健康。全球念珠菌病的发病率在过去20年显著上升,从每10万人中有2例上... 详细信息

近年来,以白念珠菌感染为主的念珠菌属引起的侵袭性念珠菌病患者人数逐年增多,病死率高,成为恶性肿瘤、AIDS及器官移植等疾病致死的直接原因,严重危害全球人类的生命健康。全球念珠菌病的发病率在过去20年显著上升,从每10万人中有2例上升到14例[1]。ARTEMIS DISK全球抗真菌监测研究显示,在巴西,白念珠菌的发病率约占医院真菌感染的80%[2];在希腊,白念珠菌感染占念珠菌感染的41%[3]。

关键词：白念珠菌耐药机制唑类棘白菌素类多烯类

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布鲁菌病的流行现状及疫苗研究进展

中国病原生物学杂志 2023年第3期18卷 364-368,374页

作者：张欠欠元航张凯玄封小川延安大学医学院陕西延安716000 延安市人民医院

布鲁菌病是由布鲁菌感染引起的人畜共患慢性细菌传染病。其流行范围几乎遍布世界各地,且传染性强,严重影响公共健康和动物养殖业。因此,控制布鲁菌病的流行是消除布鲁菌病的关键,使用疫苗免疫是防控布鲁菌病的重要措施之一。本文就布鲁... 详细信息

布鲁菌病是由布鲁菌感染引起的人畜共患慢性细菌传染病。其流行范围几乎遍布世界各地,且传染性强,严重影响公共健康和动物养殖业。因此,控制布鲁菌病的流行是消除布鲁菌病的关键,使用疫苗免疫是防控布鲁菌病的重要措施之一。本文就布鲁菌病的流行现状及布鲁菌疫苗进行介绍、并对基因工程疫苗以及其它新型布病疫苗的研究进展进行概述。

关键词：布鲁菌病流行病学疫苗综述

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白念珠菌感染现状及抗真菌药物研究进展

中国真菌学杂志 2021年第5期16卷 356-360页

作者：张欠欠罗传玉陈嘉琪封小川延安大学医学院延安716000

念珠菌病主要是由白念珠菌(Canidia albicans)引起的急性、亚急性或慢性感染,临床症状错综复杂、急缓不一,严重威胁人类健康。临床常用的系统抗真菌药物主要包括三唑类、多烯类和棘白菌素类等,由于其毒性及耐药现象的日趋严重,加之近年... 详细信息

念珠菌病主要是由白念珠菌(Canidia albicans)引起的急性、亚急性或慢性感染,临床症状错综复杂、急缓不一,严重威胁人类健康。临床常用的系统抗真菌药物主要包括三唑类、多烯类和棘白菌素类等,由于其毒性及耐药现象的日趋严重,加之近年来广谱抗菌药物、化疗药物、糖皮质激素及免疫抑制剂的广泛应用,器官移植术的大量开展以及免疫缺陷类疾病患病率的上升,导致白念珠菌感染病例急剧增加,上述抗真菌药物已无法满足临床需求。

关键词：白念珠菌耐药抗真菌药物

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采用高频超声诊断胃癌骨转移瘤

采用高频超声诊断胃癌骨转移瘤

中国超声医学工程学会第十二届全国腹部超声医学学术大会

作者：封小川张建蕾延安市人民医院

患者,男,61岁,主因右手关节炎2月余入院。患者既往有胃癌手术史,并且双肺多发转移灶及腋窝淋巴结转移。专科查体:右手外观正常,皮肤完整,右手第5掌指关节可触及一椭圆形约1.5 cm×1.1cm肿物,质硬,局部略压痛,皮温不高,界限不清,活动欠佳...

患者,男,61岁,主因右手关节炎2月余入院。患者既往有胃癌手术史,并且双肺多发转移灶及腋窝淋巴结转移。专科查体:右手外观正常,皮肤完整,右手第5掌指关节可触及一椭圆形约1.5 cm×1.1cm肿物,质硬,局部略压痛,皮温不高,界限不清,活动欠佳,远端感觉及血运正常,右手余关节活动自如。化验检查均正常,辅助检查:X线片:右手第5掌指关节见不规则高密度影:超声检查:使用GE

关键词：

来源： cnki会议评论

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白色念珠菌粘附研究进展探究

中外女性健康研究 2020年第17期 13-14页

作者：封小川张欠欠延安大学陕西延安716000 陕西省延安市人民医院陕西延安716000

作为念珠菌的类型之一,白色念珠菌在临床上相对较为常见。主要分布于人类口腔、肠道、上呼吸道以及女性阴道中,在人体内的数量相对较少。因此,在免疫系统的抑制下,不会对人体造成影响。然而,若患者机体免疫能力降低,白色念珠菌会大量繁... 详细信息

作为念珠菌的类型之一,白色念珠菌在临床上相对较为常见。主要分布于人类口腔、肠道、上呼吸道以及女性阴道中,在人体内的数量相对较少。因此,在免疫系统的抑制下,不会对人体造成影响。然而,若患者机体免疫能力降低,白色念珠菌会大量繁殖,诱发全身系统性感染与皮肤黏膜感染等问题,不利于患者健康。白色念珠菌对于患者机体组织的粘附是侵入与感染的基础,因此,积极做好白色念珠菌粘附机制的研究与探索,有利于提高该病菌的治疗水平。

关键词：白色念珠菌粘附机制分子基础动力学规律免疫系统

高频超声联合弹性成像对甲状旁腺增生的诊断价值分析

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影像研究与医学应用 2019年第8期3卷 40-41页

作者：刘学琳封小川张建蕾延安市人民医院超声诊断科陕西延安716000

目的:对高频超声联合弹性成像对甲状旁腺增生的诊断价值进行分析研究。方法:选取我院2016年1月—2018年1月所收治的甲状旁腺增生患者62例,接受常规高频超声检查,然后接受超声弹性成像检查,并与病理结果予以对比分析,对两种检查方法的敏... 详细信息

目的:对高频超声联合弹性成像对甲状旁腺增生的诊断价值进行分析研究。方法:选取我院2016年1月—2018年1月所收治的甲状旁腺增生患者62例,接受常规高频超声检查,然后接受超声弹性成像检查,并与病理结果予以对比分析,对两种检查方法的敏感度、特异度、诊断准确率、漏诊率以及误诊率进行统计分析。结果:高频超声联合弹性成像在敏感度、特异度、诊断准确率、漏诊率以及误诊率上均优于常规超声检查,数据差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论:在甲状腺增生的诊断之中应用高频超声联合弹性成像检查,可以大幅提升诊断的准确性。

关键词：高频超声弹性成像甲状腺增生

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白念珠菌对氟康唑耐药机制的研究

中国真菌学杂志 2023年第6期18卷 481-486页

作者：封小川元航郑莹莹白江苗张欠欠延安大学医学院延安716000 延安市人民医院延安716000 延安大学附属医院延安716000

目的通过研究白念珠菌对氟康唑耐药相关基因ERG11、CDR1、CDR2和MDR1的表达水平及其与耐药的关系,旨在对本地区以白念珠菌感染为主的侵袭性念珠菌病的防治提供依据。方法选取延安地区两家三甲医院临床确诊的对氟康唑耐药及敏感的白念珠... 详细信息

目的通过研究白念珠菌对氟康唑耐药相关基因ERG11、CDR1、CDR2和MDR1的表达水平及其与耐药的关系,旨在对本地区以白念珠菌感染为主的侵袭性念珠菌病的防治提供依据。方法选取延安地区两家三甲医院临床确诊的对氟康唑耐药及敏感的白念珠菌各10株,扩增其靶酶编码基因ERG11,分析突变位点;使用荧光染料罗丹明6G分析耐药组与敏感组菌株的外排情况;采用荧光定量PCR检测白念珠菌外排泵编码基因的表达水平。结果ERG11扩增测序结果显示,耐药菌株C3号虽发生了碱基位点突变,但并未引起编码氨基酸的改变,耐药菌株C7号及敏感菌株C12号发生了碱基位点的突变,引起编码氨基酸的改变;荧光染料罗丹明6G检测白念珠菌外排实验结果显示,耐药菌和敏感菌无论加入葡萄糖与否外排均存在显著差异,且耐药组加入葡萄糖较未加入葡萄糖外排量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR检测外排泵基因结果显示,CDR1与CDR2外排泵基因表达水平在耐药菌与敏感菌之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论研究基因表达及外排泵功能检测结果均表明,本地区白念珠菌对氟康唑的耐药机制主要与外排泵基因过度表达相关,未发现靶酶编码基因有意义的突变。

关键词：氟康唑耐药机制 ERG11 CDR1 CDR2

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肌骨超声在关节增生检查中的应用研究

贵州医药 2023年第8期47卷 1301-1303页

作者：陈小军封小川张建蕾景磊延安市人民医院超声诊断科陕西延安716000

目的探究关节增生应用肌骨超声的诊断价值及其超声表现特点。方法选取30例关节增生患者作为关节增生组(n=30),同时选取同期与关节增生组患者年龄、性别、居住区域匹配、表现相似的30例非关节增生患者作为非关节增生组(n=30),应用肌骨超... 详细信息

目的探究关节增生应用肌骨超声的诊断价值及其超声表现特点。方法选取30例关节增生患者作为关节增生组(n=30),同时选取同期与关节增生组患者年龄、性别、居住区域匹配、表现相似的30例非关节增生患者作为非关节增生组(n=30),应用肌骨超声检查,观察腱鞘炎、软组织肿胀、滑囊骨化、滑膜增生、骨侵蚀等超声下表现,分析肌骨超声检查的诊断效能。结果两组患者在骨侵蚀、韧带内强回声、强回声点、双边征、骨赘形成、腱鞘炎、骨赘形成/韧带内强回声/强回声点/双边征(存在至少1项)中对比具有统计学差异(P<0.05)。骨赘形成/韧带内强回声/强回声点/双边征(存在至少1项)诊断关节增生疾病敏感性为64.54%,特异性为91.65%,阳性预测值为89.76%,阴性预测值为72.53%,明显高于其他超声表现诊断效能(P<0.05)。ROC曲线下面积为0.782,Kappa为0.713,呈中等。结论骨赘形成/韧带内强回声/强回声点/双边征中单一超声表现诊断关节增生疾病敏感性较低,特异性较高,但是出现两种或者两种以上可提高诊断效能,一致性为中等。

关键词：关节增生肌骨超声诊断价值超声表现特点骨赘形成