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复方中草药对兔生长性能和肠道健康的影响

中国兽医杂志 2024年第1期60卷 134-143页

作者：徐翔飞黄盼崔雪梅季权安肖琛闻韦强黄叶娥鲍国连刘燕浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江杭州311300 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021

为了研究复方中草药对兔生长性能、免疫功能、肠道消化酶活性、抗氧化能力、肠道形态和肠道微生物的影响,本试验选取72只5周龄健康新西兰大白兔,随机分成对照组(CN,饲喂基础饲粮)和中草药组(CM,基础饲粮中添加600 mg/kg复方中草药),每... 详细信息

为了研究复方中草药对兔生长性能、免疫功能、肠道消化酶活性、抗氧化能力、肠道形态和肠道微生物的影响,本试验选取72只5周龄健康新西兰大白兔,随机分成对照组(CN,饲喂基础饲粮)和中草药组(CM,基础饲粮中添加600 mg/kg复方中草药),每组36只,试验周期为42 d。每周测定各组兔的采食量和体增重,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G);试验第21、42天,每组随机选择4只健康兔,采血分离血清,检测生化指标和免疫指标;试验结束(第42天),收集兔小肠肠段,通过ELISA检测小肠黏膜消化酶活性和抗氧化指标,苏木精-伊红(H.E.)染色观察小肠绒毛形态,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白mRNA的相对表达量,高通量测序分析盲肠微生物多样性。结果显示,两组间ADFI、ADG和F/G均差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,在试验第21天时,中草药组兔血清中总胆固醇(Tchol)含量极显著降低(P<0.01);在试验第42天时,中草药组兔血清中免疫球蛋白M(IgM)含量和回肠黏膜中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著升高(P<0.05);肠道中消化酶(α-淀粉酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶)活性显著升高(P<0.05);空肠中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05),十二指肠和空肠中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);空肠绒毛长度(V)显著增长(P<0.05),隐窝深度(C)显著降低(P<0.05),绒毛长度与隐窝深度比值(V/C)极显著升高(P<0.01);十二指肠中闭锁蛋白(Occludin)mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),回肠中膜周蛋白(ZO-1)和Occludin mRNA相对表达量也显著上调(P<0.05);盲肠内容物细菌16S rRNA基因的菌群丰富度指数(Chaol)丰度值显著升高(P<0.05);盲肠在属水平分类上的主要优势菌群为梭菌属(Clostridiales)和阿克曼菌属(Akkermansia)等。结果表明,兔日粮中添加中草药饲料添加剂能增强机体免疫力和抗氧化能力,维持肠道黏膜形态的完整,提高肠道消化酶活性,改善肠道菌群。

关键词：复方中草药兔生长性能消化酶肠道发育肠道微生物

PEX10基因缺失对兔须癣毛癣菌生长及致病性的抑制作用

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农业生物技术学报 2024年第1期32卷 189-199页

作者：潘瑶肖琛闻刘燕张蓬军应淑敏黄叶娥季权安韦强王静王教瑜鲍国连中国计量大学生命科学学院浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所/农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室

须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)又称石膏样毛癣菌，对家兔(Oryctolagus cuniculus)具有严重危害性。过氧化物酶体生物合成因子10(peroxisomal biogenesis factor 10, PEX10)与植物病原真菌的药物敏感性具有密切关系，但是其... 详细信息

须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)又称石膏样毛癣菌，对家兔(Oryctolagus cuniculus)具有严重危害性。过氧化物酶体生物合成因子10(peroxisomal biogenesis factor 10, PEX10)与植物病原真菌的药物敏感性具有密切关系，但是其影响动物病原真菌如须癣毛癣菌生长及致病性的机制尚不明晰。本研究首先构建PEX10基因敲除载体，通过根癌农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation, AtMT)和转化子筛选，获得须癣毛癣菌PEX10基因敲除株；生长特性等表型分析显示，PEX10基因敲除株的生长速率显著减慢(P<0.01)，对盐酸小檗碱的敏感性显著提高(P<0.001)，侵染兔皮肤组织的能力减弱，致病性降低。本研究结果为真菌PEX10基因功能的研究和兔须癣毛癣菌病的防治提供参考。

关键词：须癣毛癣菌过氧化物酶体生物合成因子10(PEX10) 过氧化物酶体耐药性

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兔病鉴别诊断与防治

鸭疫里默氏杆菌强、弱菌株外膜蛋白的比较蛋白质组学研究

2005年

作者：鲍国连季权安等

本书内容包括兔病诊断的基本方法及防治的基本措施，家兔传染病、寄生虫病、普通病和中毒病的鉴别诊断与防治。

ISBN: (纸本)7508235754

本书内容包括兔病诊断的基本方法及防治的基本措施，家兔传染病、寄生虫病、普通病和中毒病的鉴别诊断与防治。

关键词：兔病学科:鉴别诊断学科:防治鉴别诊断

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生物化学与生物物理进展 2008年第6期35卷 691-694页

作者：刘燕韦强鲍国连季权安浙江省农科院畜牧兽医研究所杭州310021

应用双向电泳及质谱技术对血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒株及其体外传代200代(RA200)的弱毒菌株的外膜蛋白进行比较蛋白质组学研究,借此分析鸭疫里默氏杆菌的外膜蛋白表达特点,研究差异表达蛋白与细菌毒力的关系.在实验中检测到血清2型鸭... 详细信息

应用双向电泳及质谱技术对血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒株及其体外传代200代(RA200)的弱毒菌株的外膜蛋白进行比较蛋白质组学研究,借此分析鸭疫里默氏杆菌的外膜蛋白表达特点,研究差异表达蛋白与细菌毒力的关系.在实验中检测到血清2型鸭疫里默氏杆菌原代及其体外传代获得的弱毒菌株的外膜蛋白约表达60个蛋白质点(n=3),其中相差5倍以上3个.胶内酶解和肽质量指纹图谱分析后鉴定,W1为热休克蛋白Hsp20家族成员,W2、W3为转座酶,推测它们可能与里默氏杆菌的毒力密切相关.

关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白双向电泳毒力因子

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鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白生物学特性研究

生物工程学报 2008年第4期24卷 586-591页

作者：刘燕韦强鲍国连季权安浙江省农科院畜牧兽医研究所杭州310021

血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒菌株体外传200代获得了无毒力无免疫原性菌株,采用超声波裂解和超速离心法提取二株菌的外膜蛋白,以比较分析鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白的生物学特性。电镜观察细菌超微结构显示传代菌株外膜膜密度降低,外膜泡的... 详细信息

血清2型鸭疫里默氏杆菌强毒菌株体外传200代获得了无毒力无免疫原性菌株,采用超声波裂解和超速离心法提取二株菌的外膜蛋白,以比较分析鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白的生物学特性。电镜观察细菌超微结构显示传代菌株外膜膜密度降低,外膜泡的数量明显减少,细胞质不均匀、内有空泡产生;免疫印迹结果表明二株菌的外膜蛋白免疫原性多肽存在明显区别;原代菌株的外膜蛋白仅与2型RA抗体出现特异性凝集,而传代菌株的外膜蛋白与1、2、10与11型RA抗体均出现凝集;二株菌的外膜蛋白均可诱导雏鸭产生抗体,但原代菌株外膜蛋白诱导雏鸭产生抗体滴度显著高于200代次菌株;原代菌株外膜蛋白免疫鸭对同源RA菌株的攻击可产生100%的免疫保护,而传代菌株外膜蛋白免疫鸭对同源RA菌株的攻击不产生免疫保护。序列分析显示两者的外膜蛋白A同源性达到99.9%。结果表明强毒菌株的外膜蛋白为良好的亚单位疫苗候选,体外连续传代对RA外膜蛋白生物学特性影响显著。

关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白血清型

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体内繁殖禽巴氏杆菌的提取及其交叉保护特性

中国兽医学报 2005年第1期25卷 16-18页

作者：韦强鲍国连佟承刚季权安浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021

通过不同攻毒途径、不同攻毒剂量、不同采血时间及不同采血途径的试验表明 ,以翅静脉途径攻击多杀巴氏杆菌 ,剂量 10亿 /只 ,在鸡濒死挣扎时的即刻颈静脉无菌放血 ,可以自鸡体采集到最大量的含菌血 ,每只鸡 37～ 39m L ,再将血液进行差... 详细信息

通过不同攻毒途径、不同攻毒剂量、不同采血时间及不同采血途径的试验表明 ,以翅静脉途径攻击多杀巴氏杆菌 ,剂量 10亿 /只 ,在鸡濒死挣扎时的即刻颈静脉无菌放血 ,可以自鸡体采集到最大量的含菌血 ,每只鸡 37～ 39m L ,再将血液进行差速和蔗糖密度梯度离心 ,可最大限度地提取到血液中的巴氏杆菌 ,每只鸡 30 0～ 4 0 0亿的总菌量。该结果与报道的提取方法相比 ,效率提高了 10 0 0倍以上。提取的细菌灭活后免疫鸡 ,经异型菌交叉攻毒试验表明 ,体内繁殖的巴氏杆菌具有交叉保护特性 ,而体外培养菌则没有。用该方法提取的巴氏杆菌 ,其总蛋白和总糖含量均高于培养基培养菌。

关键词：体内血液交叉保护剂量颈静脉静脉途径采血时间巴氏杆菌养菌繁殖

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从实验感染鸡血液中最大量提取巴氏杆菌试验

中国家禽 2003年第3期25卷 11-13页

作者：韦强鲍国连佟承刚季权安浙江省农科院牧医所浙江310021

通过对AA鸡不同途径攻毒及不同时间不同途径的采血试验,结果表明:通过翅静脉攻毒,在鸡濒死挣扎时的即刻颈静脉无菌放血,再通过差速和蔗糖密度梯度离心,可以从攻毒鸡的血液中提取到最大量的体内培养的巴氏杆菌。用这样的方法,每只鸡可提... 详细信息

通过对AA鸡不同途径攻毒及不同时间不同途径的采血试验,结果表明:通过翅静脉攻毒,在鸡濒死挣扎时的即刻颈静脉无菌放血,再通过差速和蔗糖密度梯度离心,可以从攻毒鸡的血液中提取到最大量的体内培养的巴氏杆菌。用这样的方法,每只鸡可提取到约300～400亿菌,比以前用的方法提高1000倍以上。提取的细菌灭活后免疫鸡,经异型菌交叉攻毒试验,结果表明体内繁殖的巴氏杆菌具有交叉保护特性。

关键词：实验感染鸡血液巴氏杆菌试验

快速检测兔支气管败血波氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立及应用

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中国兽医学报 2013年第7期33卷 1003-1006,1041页

作者：李科刘燕肖琛闻韦强鲍国连季权安浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021 浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004

利用Primer ExplorerV4软件,针对兔波氏杆菌16SrRNA基因设计4条LAMP引物,优化反应条件,检测特异性、敏感性并对临床样品进行检测。结果显示,LAMP反应在62℃恒温扩增1h即可完成,操作简便,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观... 详细信息

利用Primer ExplorerV4软件,针对兔波氏杆菌16SrRNA基因设计4条LAMP引物,优化反应条件,检测特异性、敏感性并对临床样品进行检测。结果显示,LAMP反应在62℃恒温扩增1h即可完成,操作简便,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观察;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的100倍,最低可检测到1.65×10-6 mg/L的细菌基因组DNA。用建立LAMP检测方法对32份疑似兔支气管败血波氏杆菌(Bb)样品检测呈阳性,与PCR检测结果相符。该方法的建立为Bb的临床快速检测提供了新的思路。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌 16S rRNA LAMP

Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立

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浙江农业学报 2009年第5期21卷 434-438页

作者：邵泽香韦强鲍国连崔言顺刘燕季权安浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

参考GenBank中Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)的基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了一对引物,建立了适合DHV-Ⅰ快速检测的RT-PCR检测方法。以该方法对实验室分离并保存的DHV强毒株Z10株的RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到了预期大小... 详细信息

参考GenBank中Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)的基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了一对引物,建立了适合DHV-Ⅰ快速检测的RT-PCR检测方法。以该方法对实验室分离并保存的DHV强毒株Z10株的RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到了预期大小为699 bp的目的片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果与GenBank中的DHV-Ⅰ的相应基因序列比对分析,同源性均达90%以上,表明为DHV-Ⅰ的基因序列,对NDV,IBDV,DPV和GPV等常见病毒扩增结果为阴性。该方法敏感性检测结果表明,最低RNA模板检出量为24 pg。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于I型鸭病毒性肝炎病毒的快速诊断。

关键词： Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ) RT-PCR 检测