检索结果-南通市图书馆

作者：郭韵婷江西财经大学

学位级别：硕士

现有文献表明,原油市场是复杂的非线性混沌系统,原油价格容易受到军事、政治、经济和外交等各种因素的综合影响,使得原油价格变化具有随机、突变和混沌等特征。中国作为全球原油进口量最大的国家,持续变化的国际原油价格对中国经济发展... 详细信息

现有文献表明,原油市场是复杂的非线性混沌系统,原油价格容易受到军事、政治、经济和外交等各种因素的综合影响,使得原油价格变化具有随机、突变和混沌等特征。中国作为全球原油进口量最大的国家,持续变化的国际原油价格对中国经济发展有着巨大的影响,基于此,准确地把握原油价格的发展趋势具有重要的意义。混沌经济时序存在于社会生活的方方面面,由于混沌数据不能直接应用于非线性技术建模,同时,根据初始灵敏度定律,混沌系统在长期内是不可预测的,那在预测原油价格序列的研究中应该先分析该非线性系统是否混沌。基于原油价格序列的混沌特性,本文提出了一种结合相空间重构技术(PSR)、变分模态分解算法(VMD)、卷积神经网络(CNN)和双向长短期记忆网络(BILSTM)的PSR-VMD-CNN-BILSTM模型来预测原油价格。首先,利用PSR技术对原油价格序列进行重构,采用自相关系数法和虚假最近邻点法来确认相空间的两个参数时间延迟(τ)和嵌入维度(m),并计算最大Lyapunov指数为正,验证了序列的混沌性;接下来,使用VMD算法对数据进行高频去噪处理以提高预测精度;其次,将重构去噪后的相空间序列输入到CNN-BILSTM的混合预测模型中,分别进行一天、一周、半个月和19天的多步预测,并与其他基准模型、未重构模型、未去噪模型和处理后模型进行比较以验证提出模型的优越性和适用性。本文使用从2002年1月4日至2021年12月31日共5638天的Brent原油价格数据进行实证分析,并用MSE、RMSE、MAE和MAPE作为评价指标对模型进行评价。实证结果表明:所提出的PSR-VMD-CNN-BILSTM模型相比其他对照模型,预测精度得到了显著提升,在每个时间步都有更好的预测效果,同时DM检验的结果充分说明了模型的优越性。该模型不仅为原油价格预测领域提供了新思路,同时可推广到其他具有混沌特性的经济时序中。

关键词：深度学习相空间重构原油价格变分模态分解算法

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基于字典学习的图像处理方法研究

基于字典学习的图像处理方法研究

作者：许松婷哈尔滨理工大学

学位级别：硕士

现实生活里,大家获得信息最直接的视觉形式便是图像。稀疏表示对于图像的分类至关重要,其中,字典的选择仍是一个值得探讨的问题。在图像处理与模式辨别领域里,学习出的字典可以以更加精确简单的数据形式应用于稀疏表示里。稀疏表示字典... 详细信息

现实生活里,大家获得信息最直接的视觉形式便是图像。稀疏表示对于图像的分类至关重要,其中,字典的选择仍是一个值得探讨的问题。在图像处理与模式辨别领域里,学习出的字典可以以更加精确简单的数据形式应用于稀疏表示里。稀疏表示字典学习的目的是学习出一个能紧凑的表示原始训练样本数据且具有越强识别水平的字典。最近几年大家开始参照数据以及信息自身来学习完备字典,此种字典通过学习得到字典原子数量会更多,形式和状态更加多彩,可以更好的同信息以及图片自身构造相对应,稀疏表示更充分。最近这些年通过探讨分析看得出,利用字典学习取得的图像去燥、修整以及超分辨率等方面体现出了出色性能。本论文主要的工作核心与方向概括为以下三个方面:针对字典学习中没有考虑同类样本的稀疏编码具有关联性这一问题,提出了基于自调式学习机制的关联性约束字典学习算法。这种算法过程结构是建立在自己调试学习体制上形成的,第一步就是利用这种体制找出最简单的样本,然后把每一次挑选出的样本都当成是metaface字典学习算法最开始矩阵,同时把相同类别样本相邻两个稀疏编码之间关联性成为全新制约项目引入到原来稀疏表示里,最后分别在Extended Yale B和AR两个人脸数据集上展开实验,然后与另外一些相对经典的字典学习算法来对比,实验结果表明,运用这种算法所获得的识别率更高,鲁棒性更强。针对超分辨率重建需要建立庞大图片块库以学习过完备字典,而通常非常繁冗的过完备字典在稀疏分解中拥有隐藏的不确定因素,易产生视觉伪影这一现象,提出了基于块分类的加权字典学习的图像超分辨率重建算法。该算法首先通过计算图像块间的方差,将其大致分成细节块和轮廓块,而后对细节块利用K-means进一步进行聚类,并针对所有子类展开字典学习,提高了字典的有效程度。同时在图像重新建立过程中,根据每个图像块包含细节多少给予不同的稀疏约束权重,最后根据非局部相似性的办法来展开后续处理,从而更加增强重建的效果。实验结果表明,该算法更好的保留了重建图像的细节信息,降低了重建图像与真实图像的偏差,提高了重建质量。针对字典学习算法判别能力较弱这一方面,提出了基于Fisher脸的判别性核字典学习算法。该算法将特征提取与字典学习算法相融合,首先将主成分分析法和Fisher线性判别分析法相结合得到投影矩阵,并将该投影矩阵作为核字典学习算法中的初始矩阵;而后为了使字典更具有判别性,给出了相似性约束误差项并加在核字典学习的目标函数中,最后利用最小均方误差进行分类。分别在在ORL,AR以及Extended Yale B三个人脸数据集上开展实验,实验结果表明,该算法优于Gabor特征稀疏表示算法(GSRC),K奇异值算法(K-SVD)等其他几种经典算法的识别率。

关键词：字典学习相似性约束超分辨率 Fisher脸

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幼儿特级教师特征及发展路径的个案研究

幼儿特级教师特征及发展路径的个案研究

作者：曾佳婷上海师范大学

学位级别：硕士

特级教师是一项表彰各级各类特别优秀教师的荣誉称号,它是为了提高人民教师的社会地位,充分发挥教师的积极作用而设立的,是中国所特有的一种评选制度。作为“金字塔”顶端的教师群体,特级教师的专业发展无疑是成功的,是值得普通教师学... 详细信息

特级教师是一项表彰各级各类特别优秀教师的荣誉称号,它是为了提高人民教师的社会地位,充分发挥教师的积极作用而设立的,是中国所特有的一种评选制度。作为“金字塔”顶端的教师群体,特级教师的专业发展无疑是成功的,是值得普通教师学习和借鉴的。通过梳理以往有关文献发现,针对特级教师的研究大多集中在中小学义务教育阶段,而对幼儿园特级教师专业发展的研究却屈指可数。幼儿园作为基础教育的有机组成部分,是学校教育制度的基础阶段,尽管幼儿园特级教师群体人数较少,但对幼儿园特级教师专业发展的研究不仅能丰富教师专业发展理论,而且实践上可为幼儿园教师群体发展提供重要的参考和借鉴价值。本研究采用个案研究法,以三位幼儿园特级教师作为研究对象。通过对三位幼儿园特级教师专业成长中关键事件进行研究,试图分析她们身上所呈现出的特征,以及这些特征形成的原因。进而寻找幼儿园特级教师与其他层次的教师专业发展路径的异同,最后为幼儿园教师专业成长提供理论和实践的依据。考虑拟研究的问题,在文献综述的基础上,本研究主要通过四个方面展开:不同群体眼中的幼儿园特级教师、幼儿园特级教师专业阶段、影响幼儿园特级教师专业发展的因素以及幼儿园特级教师专业发展的路径四个方面展开。具体而言如下:第一部分:不同群体眼中的幼儿园特级教师。通过对特级教师同事的访谈,发现有以下维度可以对幼儿园特级教师进行诠释和理解:专业能力(理论知识、课堂教学、教学科研、观察评价、课程开发、家园沟通)、专业学习、专业态度和团队建设。第二部分:幼儿园特级教师专业发展阶段。幼儿园特级教师专业发展与普通教师专业发展存在普遍性特征,也存在特殊性。本部分在教师专业发展的相关理论的基础上,通过对三位幼儿园特级教师成长阶段进行分类、归纳,认为三位教师的专业发展阶段可概括为四个时期:虚心学习的适应期——寻找优势的成长期——参与研究的成熟期——指导引领的卓越期。第三部分:影响幼儿园特级教师专业发展的因素。在影响教师专业发展因素相关理论的基础上,通过分析研究对象的有关描述,认为影响幼儿园特级教师成长主要归纳为内外部两方面因素。内部因素主要指与幼儿园特级教师个体相关的因素,如认真执着的性格、钻研挑战的精神、本职工作的热爱等。外部因素主要是指幼儿园特级教师成长的外部支持环境,如良好的环境氛围、关键事件的转折、优秀的教师团队等。第四部分:通过三位特级教师对自身专业发展经历的描述以及影响其专业发展的内外原因,研究者总结以下特征:人格特征中的好学、坚持、钻研,专业特征中的不断学习、善于反思、发挥所长。第五部分:幼儿园特级教师专业发展的路径。通过考察有关教师专业发展的路径以及三位特级教师的实际成长轨迹。研究者将幼儿园特级教师的主要发展路径归纳为以下几个方面:勤于学习不断积累、团队互助相互提升、专业培训拓展视野、潜心研究敢于挑战、笔耕不辍善于反思。最后,结合已有研究成果及本研究所得发现,研究者从幼儿园教师个体成长、幼儿园管理两个方面为幼儿园教师的专业发展及卓越幼儿园教师的培养提出参考建议。

关键词：幼儿特教教师关键事件特征发展路径个案研究

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基于集成学习的工业产品质量控制方法研究

基于集成学习的工业产品质量控制方法研究

作者：张莉婷华南理工大学

学位级别：硕士

工业产品质量控制是工业产品获得稳定质量要求的重要手段。传统的工业产品质量控制是独立分析各种潜在信息或价值数据对质量指标的影响,而在工业生产过程中会产生海量数据,其数据具有数据脏乱、变量类型混合(数值型、类别型等)、特征判... 详细信息

工业产品质量控制是工业产品获得稳定质量要求的重要手段。传统的工业产品质量控制是独立分析各种潜在信息或价值数据对质量指标的影响,而在工业生产过程中会产生海量数据,其数据具有数据脏乱、变量类型混合(数值型、类别型等)、特征判别性不足、数据分布不平衡等特点,难以发现数据之间内在的联系。本文将产品质量控制问题转化为典型的机器学习问题,以工业中的制造业产品质量控制为研究对象,基于对生产流程中不同进度下的产品关键质量指标(良品率)的预测,及可调工艺参数最优预设值的推荐来进行应用研究,提出基于集成学习的工业产品质量控制方法。主要创新工作如下:1)针对数据分布不平衡的难点,在数据层面,本文通过过采样和改良版欠采样的方式来调整训练样本分布不均匀的问题;在算法层面,本文选取了代价敏感学习的方法,选取Boosting集成学习算法作为基础算法模型,提出了基于代价敏感的梯度增强树算法(CSXGBoost),形成了一种数据层面和算法层面相结合的处理方案。2)针对关键质量指标预测问题,本文通过利用集成学习中随机森林、XGBoost算法及引入深度学习的DART算法进行回归模型线性融合,同时利用分类模型后处理的结合方式,提出了一套基于集成学习算法的多模型融合的关键质量指标预测方案。3)针对可调整工艺参数推荐问题,本文提出了在关键质量指标最大化下的参数统计量特征分析方法和基于不可调整参数特征的相似性匹配方法,实现对可调整工艺参数的最优组合推荐。实验结果表明提出的方法能在较小RMSE评估指标下对制造业不同进度下的产品数据关键质量指标进行较好的预测,及能较优地对生产过程中可调整工艺参数预设值进行推荐,进而对其产品质量控制有深刻的指导意义。

关键词：质量控制集成学习数据分布不平衡代价敏感学习 XGBoost

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论董启章小说中的香港想像

论董启章小说中的香港想像

作者：张炜婷暨南大学

学位级别：硕士

作为香港新生代作家的代表之一，董启章的创作量非常丰富，但是大陆有关他的小说研究仍然很少。本文试图以董启章小说中的城市书写作为切入点，研究讨论作家的本土性叙事策略和身份建构的欲望。“V城”是董启章小说中经常出现的香港的... 详细信息

作为香港新生代作家的代表之一，董启章的创作量非常丰富，但是大陆有关他的小说研究仍然很少。本文试图以董启章小说中的城市书写作为切入点，研究讨论作家的本土性叙事策略和身份建构的欲望。“V城”是董启章小说中经常出现的香港的代名词，在“V城”的历史书写中，作家有别于把香港历史框定为鸦片战争开始，“九七”回归终止的百年历史，强化个人成长的记忆和经验。在“V城”的空间书写中，董启章的小说努力规避城市空间景观的宏大叙述，强调本地传统文化习俗，并且试图通过记忆去建立香港人的文化认同。在小说场景选择上，董启章偏好“V城”的边缘地域，关注日常生活叙述，去除外界对香港的自动化想像。在小说的形式技巧运用上，丰富的后现代主义技巧、人物角色强烈的主体性和混杂的语言均增强了小说多元、去中心化的局面。

关键词：董启章小说香港想像身份

认知闭合需要与成就动机对大学生风险决策的影响

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认知闭合需要与成就动机对大学生风险决策的影响

作者：李宵婷西北师范大学

学位级别：硕士

决策是行为的导引,决策的结果充满了不确定性,使得人类做出的大部分决策充满了风险,进而形成了风险决策。人们为了完成某项目标而制定了多项计划与方案,并通过从这些计划或方案中选择某项作为实现目标的行为过程,进而构建了一个系统化... 详细信息

决策是行为的导引,决策的结果充满了不确定性,使得人类做出的大部分决策充满了风险,进而形成了风险决策。人们为了完成某项目标而制定了多项计划与方案,并通过从这些计划或方案中选择某项作为实现目标的行为过程,进而构建了一个系统化的决策流程。自期望效用理论被提出以来,人们对“理性人假设”的质疑未曾停止过,大量的因素被人们界定为决策结果的相关性因素,例如:决策的时间、决策的质量、决策的偏好、决策者对决策的自信程度等。近些年来,学术界高度关注认知闭合需要、成就动机等决策者自身特质对决策影响的相关研究。并通过大量的实证研究来证实这些因素与决策行为之间的相关性。在认知闭合需要的理论中,人们为了脱离当前的在模糊情境下的压力,而尽可能探索一个更加明确的答案。成就动机是行动者为完成一项对自己有积极影响的目标,而产生的一系列活动,同时在活动中取得的成果使其能够逐渐超越他人的动机。认知闭合需要推动着决策者尽快找到明确答案从而摆脱模糊环境所带来的压力,成就动机则推动着决策者找到最佳答案同时超越他人。那么,在决策时,决策者所做的决策究竟是做出最快的决策以求摆脱模糊状态呢,还是尽可能做出最明智的决策而不论所用时间长短?这是我们在现实中面临决策时可能采用的不同策略。因此,本研究意在探明决策者在进行风险决策时最常出现的两种策略“做最好的决策”还是“做最快的决策”,这两种冲突是如何作用于决策行为的。已有的研究均未将认知闭合需要与成就动机作为决策者自身内在动力结合起来纳入决策行为的考量范围,使得这两个因素的研究成为了空白。本文在明确前人研究成果的基础上,将这两个因素纳入到决策研究中,并通过开展实验性研究分析,来深入探讨两者于决策偏好的影响关系,以及两者间可能存在的交互作用。研究一与研究二分别用以收益框架与损失框架两种不同框架所表述的风险决策问卷,通过将被试的认知闭合需要与成就动机水平进行高低分组,探寻三个变量间的关系;研究三则采用气球模拟风险决策任务这一行为实验,同样将被试的认知闭合需要与成就动机水平进行高低分组,探寻并验证了研究一、二中三个变量间的关系,涉及到风险决策行为的更多特征。进而得出以下结论:（1）风险决策行为受到认知闭合需要水平的影响显著。认知闭合需要水平较高的个体在决策时耗费的时间成本越少,在风险决策时倾向于做出规避风险的行为;认知闭合需要水平较低的个体决策耗时则多,在风险决策行为中倾向于风险寻求。（2）风险决策与成就动机同样存在显著相关性。成就动机较高的个体具有较强的冒险精神,存在较强烈的风险偏好,成就动机不足的个体则善于规避风险。决策所用时间与成就动机高低并不存在显著相关;在决策质量上,高成就动机个体所做决策质量更高。（3）认知闭合需要与成就动机对风险决策具有交互作用,且无论风险决策情境是以收益框架还是损失框架所呈现,这种交互作用都存在。具体表现为:高成就动机会促使低认知闭合需要个体在决策中通过冒险来实现成就的倾向,低成就动机则会促进认知闭合需要较高的个体在决策过程中更多地规避风险。（4）认知闭合需要、成就动机与框架作用三者对风险决策具有交互作用。

关键词：风险决策成就动机认知闭合需要风险偏好

中国钢铁产业全球价值链地位及其影响因素研究

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中国钢铁产业全球价值链地位及其影响因素研究

作者：吴旭婷河北大学

学位级别：硕士

随着国际分工的不断深化,全球价值链覆盖了产品的研发设计、原材料的供给、中间产品贸易及最终产品的销售和服务等多个环节。我国钢铁产业自改革开放以来,已经连续十几年成为钢铁产量世界第一的国家,钢铁产业涉及行业范围广,产业链条长... 详细信息

随着国际分工的不断深化,全球价值链覆盖了产品的研发设计、原材料的供给、中间产品贸易及最终产品的销售和服务等多个环节。我国钢铁产业自改革开放以来,已经连续十几年成为钢铁产量世界第一的国家,钢铁产业涉及行业范围广,产业链条长,对经济消费拉动作用大,是一国的基础型,也是支柱型产业。从产品创新的角度看,我国钢铁产业的自主创新能力与国外先进水平仍然存在一定差距,且产业发展效益仍然比较低,钢铁工业产能过剩的问题仍有待解决。其次,我国钢铁行业在国际分工地位中处于低端锁定环节,出口附加值比例有待提高。因此,对中国钢铁产业全球价值链地位的攀升进行研究,有利于解决产品附加值低、产能过剩,高端产品供给不足等问题,提升中国钢铁产业在国际市场上的竞争力,逃出价值链低端锁定陷阱。本文首先对2000～2017年我国钢铁产业全球价值链地位指数和全球价值链参与度指数进行测算,并且对指数进行排序,以了解我国钢铁产业在国际分工中的参与程度和参与水平。发现虽然我国是钢铁大国,但处于大而不强的局面,价值链地位和参与度水平处于中下游,说明我国钢铁产业存在结构发展不合理的问题。其次,对中国钢铁产业全球价值链地位影响因素进行实证分析,发现出口规模与钢铁产业的全球价值链地位呈现出显著正相关性,而知识产权数量、外商投资与该行业的国际分工地位间呈现出显著负相关性。最后,从技术创新、产业升级和扩大对外开放的角度对我国钢铁产业全球价值链地位的攀升提出针对性建议。

关键词：钢铁产业全球价值链地位全球价值链参与度

积极老龄化视阈下低龄老年人就业的影响因素与促进政策研究

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积极老龄化视阈下低龄老年人就业的影响因素与促进政策研究

作者：张攀婷安徽财经大学

学位级别：硕士

随着我国人口老龄化程度进一步加深,人口老龄化问题日益凸显,为了缓解人口老龄化问题我国提出了积极老龄化战略。在渐进延迟退休年龄成为养老保险制度改革势在必行的趋势下,低龄老年人就业问题越来越被人们关注。人口老龄化逐渐加深为... 详细信息

随着我国人口老龄化程度进一步加深,人口老龄化问题日益凸显,为了缓解人口老龄化问题我国提出了积极老龄化战略。在渐进延迟退休年龄成为养老保险制度改革势在必行的趋势下,低龄老年人就业问题越来越被人们关注。人口老龄化逐渐加深为我国经济发展带来了压力与挑战,如何应对人口老龄化挑战,合理有效的解决低龄老年人就业问题,对实现低龄老年人高质量就业与充分利用低龄老年人力资源具有重大现实意义。基于此,本文以积极老龄化作为研究视角,以人力资本理论、马斯洛需求层次理论、生命周期假说理论作为研究的理论基础,在运用文献研究法对文献进行整理的同时,利用统计分析法和实证分析法研究数据。本文通过查找并梳理参考文献、整理数据等相关资料,介绍了我国低龄老年就业现状。选用2021年中国社会状况综合调查(CSS)进行数据筛选和处理,运用Stata统计软件进行交叉列联表分析、使用Logistic回归模型分析个人、家庭、社会3个层面14个影响因素对低龄老年人就业的影响,并运用Probit回归模型进行稳健性检验,据此进行低龄老年就业人员的促进政策研究。研究结果表明:低龄老年人的年龄、性别、居住地、受教育程度、个人总收入、家庭成员工作状况、社会经济地位、总体社会公平8个影响因素对其就业有显著的影响。在个人层面,年龄越高其就业的可能性就越低;女性就业的可能性小于男性;居住在农村的低龄老年人就业的可能性高于城市居住者;受教育程度为文盲的低龄老年人就业意愿高;个人总收入对低龄老年人就业有正向影响。在家庭层面,家庭成员有工作的低龄老年人相对于家庭成员没有工作的低龄老年人就业概率更高。在社会层面,自评社会经济地位、总体社会公平对低龄老年人就业有正向影响。根据实证分析结果,本文提出促进我国低龄老年人就业的具体相关政策建议:第一,政府要加大政策扶持及完善相关法律,建立健全低龄老年人就业机制。第二,社会要改善低龄老年人的就业环境。企业要勇于雇用低龄老年人,民间组织要发挥其社会扶持作用,提高低龄老年人的社会参与率。第三,个人要提高自身综合素养能力。低龄老年人要增强自我学习意识和转变思想观念,树立终身学习理念,积极投身于社会建设。

关键词：积极老龄化低龄老年人老年人就业

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有限责任公司人力资本出资初论

有限责任公司人力资本出资初论

作者：汤云婷华东政法大学

学位级别：硕士

二战后，德日等战败国家经济的快速崛起，使经济学家注意到人才在推动经济发展中的重要作用，“人力资本理论之父”西奥多·舒尔茨研究认为人力资本是决定一国经济发展的关键因素。经过后继学者的不断完善，一般认为人力资本是凝结在所... 详细信息

二战后，德日等战败国家经济的快速崛起，使经济学家注意到人才在推动经济发展中的重要作用，“人力资本理论之父”西奥多·舒尔茨研究认为人力资本是决定一国经济发展的关键因素。经过后继学者的不断完善，一般认为人力资本是凝结在所有者身上具有创造价值和增值能力的知识、经验、技能的总和，并通过法律上的认可转化而成的资本形式。各国公司法对无限责任股东的出资形式一般限制较少，人力资本是合法的出资标的。但对于有限责任股东，各国态度不一。境外立法中，英美国家许可有限责任股东以未来履行服务的承诺出资，即许可人力资本出资，并设置了股权寄存、信息披露等配套措施。德国公司法规定有限责任公司和股份有限公司一概不允许人力资本出资。我国《公司登记管理条例》禁止劳务出资，并未对人力资本出资作出明确规定，从理论上来说，人力资本作为特殊形态的劳务也属于被禁止的范围。但在实践中，上海、温州等经济发展较快的地区纷纷以试行的方式许可了人力资本在新兴的现代服务业、高科技创新型产业中的出资。地方性的政策和办法以人力资本与劳务概念并不等同的方式避免了与上位法的直接冲突。上位法的模糊规定与实践中企业发展的迫切需求相矛盾，人力资本出资的合法性问题亟待解决。资本信用理论认为，公司的注册资本承担着债权担保的功能，人力资本无法满足变现清偿的要求因而遭到否定。应该看到，正常经营毕竟是公司的常态，出资形式首先应该满足公司运营的需要，其次才是偿付债务。况且注册资本数额只是公司运营的初始状态，在公司正常经营过程中不断发生变化。真正对外承担责任的是公司的净资产而非注册资本。法律是冲突着的利益的调节器，对出资标的范围的限定就是为了平衡公司这个拟制法人与各相关人员的利益冲突。既然可以通过承担无限责任，追及股东个人财产的制度设计来保护债权人的利益，也可以通过法律制度上的精思巧设来解决人力资本无法变现清偿与有限责任之间的矛盾，进而实现债权人利益的有效保护，使人力资本出资形式得到法律的认可。本文在前人研究的基础上初步探讨了在我国推行人力资本出资的企业类型、出资标的价值的评估、信息披露、人力资本出资股东的权利与限制等问题，并提出了完善相关配套制度的建议。希望对破解人力资本出资与有限责任之间的矛盾、健全我国公司制度、促进现代企业制度的发展完善有所裨益。

关键词：人力资本有限责任出资

Rhobtb3对急性髓系白血病细胞U937的功能及药物敏感性影响

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Rhobtb3对急性髓系白血病细胞U937的功能及药物敏感性影响

作者：寇丹婷延安大学

学位级别：硕士

目的:本实验通过构建过表达Rhobtb3的U937细胞模型,研究Rhobtb3对急性髓系白血病细胞U937的增殖与凋亡及药物敏感性影响。方法:1.体外培养HL60细胞和U937细胞,用qRT-PCR法检测RhoBTB3 mRNA的表达量,选定靶细胞进行后续实验。2.转染:通... 详细信息

目的:本实验通过构建过表达Rhobtb3的U937细胞模型,研究Rhobtb3对急性髓系白血病细胞U937的增殖与凋亡及药物敏感性影响。方法:1.体外培养HL60细胞和U937细胞,用qRT-PCR法检测RhoBTB3 mRNA的表达量,选定靶细胞进行后续实验。2.转染:通过慢病毒感染法感染靶细胞,应用预实验选取的浓度合适的MOI进行后续实验。将慢病毒感染液加入U937细胞培养5d后,用倒置荧光显微镜观察,以发现带有荧光的细胞比例超过80%为转染成功标准。转染成功后,提取细胞的RNA,用qRT-PCR检测RhoBTB3 mRNA的表达量,若检测到实验组RhoBTB3mRNA的表达量为对照组3-10倍,则表明成功构建了过表达RhoBTB3 U937细胞模型。3.增殖实验:CCK8实验用酶标仪测RhoBTB3组与NC组0h、24h、48h、72h的OD值。细胞计数法用细胞计数仪测RhoBTB3组与NC组0h、24h、48h、72h的细胞数。每个时间点细胞测试重复三次。根据测试数值绘制生长曲线图。4.凋亡实验:选取培养72h的RhoBTB3组与NC组U937细胞,用Annexin V与PI标记,流式细胞仪上机检测RhoBTB3组与NC组凋亡情况。***对RhoBTB3组与NC组U937细胞作用:选取1、10、100umol/L浓度的DAC,作用于RhoBTB3组与NC组细胞。将两组细胞分别培养24h、48h、72h,用CCK8法检测不同时间点细胞OD值。选取培养72h后的两组细胞,用Annexin V与PI双色荧光标记后,流式细胞仪上机检测凋亡情况。实验重复三次。6.选用0、1、10、100umol/L浓度的DAC作用于U937细胞,培养72h后收集细胞RNA,qRT-PCR检测不同浓度DAC作用后的U937细胞RhoBTB3 mRNA的表达量。结果：***-PCR检测U937细胞和HL60细胞RhoBTB3 mRNA的表达量,HL60细胞的RhoBTB3 mRNA表达量高于U937细胞,故后续选择U937细胞做为实验的靶细胞。2.慢病毒载体转入U937细胞后,qRT-PCR检测Rhobtb3组Rhobtb3 mRNA的表达量是空白对照组的26162倍(P照组相比,实验组Rhobtb3 mRNA的表达量升高,差异有统计学意义(P<0.001),说明DAC可以上调U937细胞中的RhoBTB3 mRNA水平。结论:1.成功构建了RhoBTB3过表达的U937细胞载体。***3基因可以促进U937细胞凋亡、减慢细胞增殖。***可上调U937细胞中的RhoBTB3 mRNA水平。***3基因可增强U937细胞对DAC的敏感性。

关键词：急性髓系白血病 RhoBTB3 DAC