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Mfn-2在人类精子中的定位及在精子冷冻中的作用初探

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Mfn-2在人类精子中的定位及在精子冷冻中的作用初探

作者：孟天庆华中科技大学

学位级别：硕士

背景线粒体有“细胞动力工厂”之称，是真核细胞内合成三磷酸腺苷（ATP）的主要场所，为细胞的活动提供了能量。除了合成ATP为细胞提供能量，线粒体还可以储存钙离子，通过与内质网、细胞外基质等结构的协同作用，维持细胞中的钙离子... 详细信息

背景线粒体有“细胞动力工厂”之称，是真核细胞内合成三磷酸腺苷（ATP）的主要场所，为细胞的活动提供了能量。除了合成ATP为细胞提供能量，线粒体还可以储存钙离子，通过与内质网、细胞外基质等结构的协同作用，维持细胞中的钙离子浓度的动态平衡。线粒体也参与细胞凋亡时的钙离子信号转导，并通过调节膜电位控制细胞凋亡。线粒体还参与调控细胞生长和细胞周期。线粒体是一种高度动态的细胞器，通过不断融合和分裂来满足各种生理状态的需要。线粒体融合蛋白2（Mfn-2）通过调节线粒体融合，维持线粒体形态，调节线粒体功能，而且在细胞能量代谢、细胞凋亡、信号传导、胚胎发育、心血管疾病、冷冻保护等方面也起着重要作用。能量代谢、细胞凋亡、信号传导、氧化应激都是影响精子质量的至关因素，Mfn-2可能通过这些方面来调节精子的功能或影响精子的质量。但是目前Mfn-2在人类精子中的研究还尚未见报道，本论文主要研究Mfn-2在人精子中的分布和定位，及在精子冷冻保护中的作用。目的本研究主要是明确Mfn-2在人类精子中的定位与分布，初步探讨Mfn-2在人类精子冷冻过程中的保护作用，为进一步分析人类精子在冷冻过程中的保护机制提供依据。方法征集精液参数正常志愿者，精液液化后经过涂片、固定、透化，用Mfn-2多克隆抗体以间接免疫荧光通过激光共聚焦显微镜进行观察Mfn-2在人精子中的定位。精液参数正常精液（n=10），液化后进行4℃（实验组）或37℃（对照组）1h、2h、4h、8h、12h处理，对两组各时间点进行精子活力测定，并用Western Blot比较两组各时间点的Mfn-2表达量。采用半定量Western Blot比较冷冻复苏率＞40%和复苏率＜40%的两组精子的Mfn-2表达量。结果通过激光共聚焦显微镜，可见Mfn-2免疫荧光仅出现在人类精子的尾部中段，且颈段与主段之间的长约5～7μm的尾部中段全部均见阳性着色。经过4℃4h处理的精子Mfn-2表达量明显高于其他处理组，4℃4h处理组的精子活力也优于其他组（P40%组的精子Mfn-2表达量明显高于复苏率<40%组的精子Mfn-2表达量（P<0.05）。结论在人类精子，Mfn-2位于尾部中段且整个中段均有分布，为研究Mfn-2在人类精子中的生物功能奠定了基础。精子在4℃4h时相对表达量增加，提示Mfn-2可能在此时冷冻精子活力的恢复中起一定作用。复苏率＜40%组的精子Mfn-2表达量明显高于复苏率＜40%组的精子Mfn-2表达量，Mfn-2可能在人类精液冷冻保护中起到关键作用，其作用机制尚待进一步研究。

关键词：线粒体融合蛋白-2 人类精子定位分布冷冻

n-Butanol Extract of Rhynchosia volubilis Lour: A Potent Spermicidal Agent In Vitro

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2014年第3期34卷 398-402页

作者：官黄涛方芳熊哲孟天庆黄世兴 Family Planning Research Institute Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Medical College Jianghan University Wuhan Tongji Reproductive Medicine Hospital Chongqing Three Gorges Central Hospital

Summary： Rhynchosia volubilis Lout has been a major drug in a folk prescription for contraception in China, whereas its mechanism remains unknown. Its antifertility effects on male mice and antimicrobial activities on sexually transmitted infection （STI） pathogens were previously reported. This study was undertaken to develop the n-Butanol extract of Rhynchosia volubilis Lour （BERVL） as a spermicidal agent with STI prevention. The spermicidal activities of BERVL with different doses were assessed using selected high-motile sperms of normal human semen samples, and their inhibitory effects on Lactobacillus acidophilus were determined. The mechanism of the spermicidal activity was explored by aqueous Eosin Y and Hoechst 33342/PI staining. The results showed spermicidal activities and inhibi- tory effects of BERVL on Lactobacillus acidophilus were dose-dependent. Dose of 90 mg/mL BERVL terminated all progressive sperm motility within 2 min, and had slight inhibitory effect on Lactobacillus acidophilus, suggesting it was an effective and safe dose for contraception use. About 80% sperms exposed to BERVL displayed changes consistent with high permeability of head membrane. It is concluded that BERVL as spermicide has advantages over N-9 with strong ability to instantaneously kill human sperm and possesses light inhibitory effect on Lactobacillus acidophilus.

关键词： Rhynchosia volubilis Lour contraception spermicide Lactobacillus acidophilus

血清抗缪勒管激素在梗阻性和非梗阻性无精子症鉴别诊断中的应用价值

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中华男科学杂志 2019年第9期25卷 823-827页

作者：熊哲叶臻涂剑孟天庆任宁江汉大学医学院生理教研室湖北武汉430056 武汉同济生殖医学专科医院泌尿外科室湖北武汉430013 岳阳市妇幼保健院生殖医学科湖南岳阳414000 华中科技大学同济医学院生殖健康研究所湖北武汉430030

目的:通过测定正常生育男性、梗阻性无精子症(OA)患者、非梗阻性无精子症(NOA)患者血清抗缪勒管激素(AMH)水平,探讨其是否作为血清标志物鉴别诊断OA和NOA。方法:选择2018年9月至2019年4月男性不育门诊就诊的患者作为研究对象,采用化学... 详细信息

目的:通过测定正常生育男性、梗阻性无精子症(OA)患者、非梗阻性无精子症(NOA)患者血清抗缪勒管激素(AMH)水平,探讨其是否作为血清标志物鉴别诊断OA和NOA。方法:选择2018年9月至2019年4月男性不育门诊就诊的患者作为研究对象,采用化学发光免疫法测定正常生育组(n=43)、OA组(n=14)、NOA组(n=45)患者血清中的AMH、抑制素B、FSH水平,经阴囊B超测量睾丸体积。并对正常生育组、OA组和NOA组均进行AMH、抑制素B、FSH、睾丸体积的统计分析。结果:AMH正常生育组[(8.13±3.95) ng/ml]和OA组[(8.51±4.77) ng/ml]均明显高于NOA组[(5.65±3.13) ng/ml,P0.05)。Pearson相关分析结果显示,抑制素B与AMH呈正相关(r=0.326,P=0.01),与FSH呈负相关(r=-0.662,P<0.01);FSH与AMH呈负相关(r=-0.468,P<0.01);睾丸体积与AMH呈正相关(r=0.339,P<0.01),与抑制素B呈正相关(P<0.01,r=0.733),与FSH呈负相关(P<0.01,r=0.597);精子浓度与抑制素B呈正相关(r=0.522,P<0.01),与FSH呈负相关(r=-0.421,P<0.01),与睾丸体积呈正相关性(r=0.605,P<0.01)。结论:AMH可作为睾丸精子发生的血清标志物之一,并单独或与抑制素B和FSH三者联合用于OA和NOA的鉴别诊断。

关键词：抑制素B 卵泡刺激素非梗阻性无精子症梗阻性无精子症

1145例捐精者筛查结果与未完成捐精流程原因分析

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中华男科学杂志 2014年第2期20卷 124-128页

作者：官黄涛王钊孟天庆夏伟熊承良李翠玲华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心湖北武汉430030 武汉同济生殖医学专科医院湖北武汉430010 湖北省人类精子库湖北武汉430010

目的:分析人类精子库的接待和招募工作质量,以及精源不足的问题。方法:本研究对湖北省人类精子库2011年9月至2012年4月的1 145例捐精者的招募工作进行统计,对捐精者淘汰原因进行分析,并对合格而未捐精者进行面谈和电话回访。结果:1 145... 详细信息

目的:分析人类精子库的接待和招募工作质量,以及精源不足的问题。方法:本研究对湖北省人类精子库2011年9月至2012年4月的1 145例捐精者的招募工作进行统计,对捐精者淘汰原因进行分析,并对合格而未捐精者进行面谈和电话回访。结果:1 145例捐精者中,学生551例(48.12%),社会人群594例(51.88%);参与第一次精液质量检查后未继续捐精503例(43.93%),其中学生202例(占学生筛查人数36.67%),社会人群301例(占社会筛查人群50.67%);两次精液质量筛查均不合格432例(37.73%);实验室检查不合格45例(3.93%),其中解脲脲原体阳性16例;通过精液筛查和实验室检查的合格捐精者165例(14.41%),未能完成整个捐精流程21例(12.73%),最终完成捐献流程的捐精者144例。结论:人类精子库普遍存在筛查合格率低、捐精完成率低,如能让捐精者有效地完成捐精流程,有利于提高捐精者合格率及降低精子库的运行成本;通过接待时的面谈和电话回访对他们不能按流程完成捐精的原因进行分析表明,精子库需加强招募工作及捐精者第一次来精子库时的讲解,提高捐精者对精子库的满意度和信任度,以提高捐精者完成捐精流程率。

关键词：精子库捐精流程精液筛查

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抓好军训保持成果

卫生职业教育 2013年第1期31卷 33-34页

作者：李丹孟天庆华中科技大学同济医院附属卫生学校湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院计划生育研究所湖北武汉430030

军训时期学生可塑性强,军训特有的气氛有利于培养学生良好的组织性、纪律性。作为班主任,应思考如何抓好军训期间学生的管理,并长久保持军训的良好成果,创建一个班风优良的班集体。

关键词：军训班主任班风

络合铜宫内节育器对大鼠子宫内膜形态学的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2015年第1期44卷 69-73页

作者：彭祥炽杨瑞峰孟天庆刘燕胡珊珊索进平熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所武汉430030 华中科技大学同济医学院生殖医学中心武汉430022 华中科技大学材料科学与工程学院武汉430074

目的研究络合铜生物高分子复合材料宫内节育器（CuCl2/SiO2/PVA IUD）对大鼠子宫内膜及重要脏器的形态学影响,以初步探讨络合铜宫内节育器的安全性。方法 50只性成熟SPF级雌性SD大鼠,10-12周龄,随机分为5组,每组10只：金属裸铜组（Cu组... 详细信息

目的研究络合铜生物高分子复合材料宫内节育器（CuCl2/SiO2/PVA IUD）对大鼠子宫内膜及重要脏器的形态学影响,以初步探讨络合铜宫内节育器的安全性。方法 50只性成熟SPF级雌性SD大鼠,10-12周龄,随机分为5组,每组10只：金属裸铜组（Cu组）、生物基体材料组（SiO2/PVA组）、络合铜低剂量组[CuCl2/SiO2/PVAⅠ,Cu^2＋释放率为5-10μg/（220mm^2·d）]、络合铜高剂量组[CuCl2/SiO2/PVAⅡ,Cu^2＋释放率为10-20μg/（220mm^2·d）]和空白对照组（NC组）。在大鼠左侧子宫近阴道段作一切口,朝卵巢方向置入不同材料,分别于置器30d和60d后取置器侧子宫内膜、卵巢及心、肝、脾、肺、肾组织,采用苏木精-伊红染色在光镜下观察其组织病理的形态学改变。结果各组大鼠心、肝、脾、肺、肾、子宫及卵巢组织的大体观察均正常;置器后30d和60d后大鼠子宫内膜均可见上皮细胞的形态和结构发生了改变,但未见全身其他重要脏器病理改变;与裸铜组比较络合铜组炎症反应轻,其中络合铜低剂量组在置器后30d和60d均呈现轻度炎症反应。结论与裸铜宫内节育器相比,置低剂量络合铜生物高分子复合材料宫内节育器（CuCl2/SiO2/PVA IUD）大鼠子宫内膜组织病理的形态学改变较小,证明其对子宫内膜的刺激作用较轻微,因而可能减少置器初期的不良反应。

关键词：络合铜宫内节育器子宫内膜形态学大鼠

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季节因素对供精志愿者合格率的影响

季节因素对供精志愿者合格率的影响

中华医学会生殖医学分会人类精子库管理学组第三届年会全国男性生殖医学和精子库管理新进展第四次研讨会

作者：胡思珩孟天庆夏伟湖北省人类精子库武汉同济生殖医学专科医院

目的:探讨季节气温变化是否对精子库志愿者捐精的精液质量造成影响。方法:根据中国气象频道对武汉地区季节划分的资料显示,平均气温稳定在10C以下为冬季,稳定于22C以上为夏季,在10～22℃之间为春秋过度季。以此为标准,将本地区1、2、12...

目的:探讨季节气温变化是否对精子库志愿者捐精的精液质量造成影响。方法:根据中国气象频道对武汉地区季节划分的资料显示,平均气温稳定在10C以下为冬季,稳定于22C以上为夏季,在10～22℃之间为春秋过度季。以此为标准,将本地区1、2、12月划分为冬季,3、4月划分为春季,5、6、7、8、9为夏季,10、11为秋季,我们对精子库2010年3月012年7月共6614人次精液筛查合格情况进行分析,计算得出每季节所占总合格人数的百分比例。其分析方法根据《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》(第四版)及2003年卫生部修订的《人类精子库基本标准和技术规范》标准进行,并进行统计学处理。结果春季合格率为(5.30±1.28)%、夏季合格率为(2.73±0.30)%、秋季合格率为(5.01±1.68)%、冬季合格率为(2.12±1.33)%,春季>秋季>夏季>冬季,用spss17.0统计软件进行统计学处理,检测数据用x±s表示,采用方差分析进行多组均数比较,P<0.05,其差异具有统计学意义。结论结果表明季节因素对供精志愿者精液合格率有显著影响,武汉地区春秋季节为志愿者最佳捐精时期。

关键词：

来源： cnki会议评论

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鹿藿正丁醇提取物体外杀精及机制探讨

鹿藿正丁醇提取物体外杀精及机制探讨

络合铜生物高分子复合材料宫内节育器对大鼠避孕效果及子宫内膜的影响

中华医学会第八次全国计划生育学术会议

作者：黄世兴孟天庆王骁熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所

目的研究鹿藿正丁醇提取物(n-Butanol extract of Rhynchosia Volubilis Lour,BERVL)体外杀精及机制和该提取物体外对嗜酸乳杆菌的影响。方法以生理盐水为阴性对照,壬苯醇醚栓(NP-9)为阳性对照,显微镜下观测BERVL浓度为500,250,125,100,...

目的研究鹿藿正丁醇提取物(n-Butanol extract of Rhynchosia Volubilis Lour,BERVL)体外杀精及机制和该提取物体外对嗜酸乳杆菌的影响。方法以生理盐水为阴性对照,壬苯醇醚栓(NP-9)为阳性对照,显微镜下观测BERVL浓度为500,250,125,100,90,62.5mg/ml对精子活率的改变;用试管稀释法和琼脂稀释法观测BERVL体外对

关键词：

来源： cnki会议评论

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络合铜生物高分子复合材料宫内节育器对大鼠避孕效果及子宫内膜的...