检索结果-南通市图书馆

中国标准化 2021年第22期 238-243页

作者：孙世雄孙翔翔樊晓旭魏润宇张培培王毓秀孙淑芳中国动物卫生与流行病学中心

压力蒸汽灭菌器属压力容器,是病原微生物实验室常用的消毒灭菌设备。本文结合病原微生物实验室的特点,从特种设备管理、灭菌效果监测、排气口生物安全性等方面,探讨压力蒸汽灭菌器的规范使用和安全管理。

关键词：病原微生物实验室压力蒸汽灭菌器特种设备灭菌效果

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广西野鸟H9N2亚型流感病毒的分离与鉴定

南方农业学报 2011年第5期42卷 539-543页

作者：黄胜斌蒋家霞何奇松付薇孙翔翔马琳熊毅广西动物疫病预防控制中心南宁530001 广西大学动物科学技术学院南宁530005

【目的】探讨H9N2亚型流感病毒在野鸟中的存在与传播,为广西流感疫情动态监测和防控及人流感预防监测提供重要依据。【方法】采集广西野鸟肺脏组织,将病料接种于9~11日龄SPF鸡胚尿囊腔进行分离培养,血清学试验鉴定HA和NA亚型,并克隆扩增... 详细信息

【目的】探讨H9N2亚型流感病毒在野鸟中的存在与传播,为广西流感疫情动态监测和防控及人流感预防监测提供重要依据。【方法】采集广西野鸟肺脏组织,将病料接种于9~11日龄SPF鸡胚尿囊腔进行分离培养,血清学试验鉴定HA和NA亚型,并克隆扩增其HA和NA基因。【结果】该分离株能被H9亚型阳性血清抑制,神经氨酸酶抑制（NI）试验结果将其鉴定为N2亚型,判断该病毒属于H9N2亚型流感病毒,命名为A/wildbird/Guangxi/H2/07,对HA和NA基因进行序列分析,发现与流感病毒H9亚型和N2亚型同源性最高,分别达到82.4%~99.0%和83.1%~99.9%。【结论】H9N2亚型流感病毒已在广西野鸟中存在,该结论为广西流感疫情动态监测和防控提供了重要依据。

关键词：野鸟 H9N2亚型流感病毒分离鉴定 HA基因 NA基因广西

白鹭源禽Ⅰ型副粘病毒L基因的克隆与序列分析

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广西农业科学 2010年第5期41卷 481-484页

作者：何奇松孙翔翔易春华蒋家霞付薇马琳熊毅广西大学动物科学技术学院南宁530005 广西动物疫病预防控制中心南宁530001

根据GenBank中已发表的鹅副粘病毒GPV-SF02株全基因组序列设计5对引物,采用RT-PCR扩增出白鹭源禽I型副粘病毒(W13株)L基因的LA(1121 bp)、LB(1481 bp)、LC(1439 bp)、LD(1476 bp)、LE(1608 bp)5个片段,用DNA Star软件比较分析后进行拼接,获得长约6760 bp包含有L基因全长的核苷酸序列,而W13株L基因的mRNA全长为6704 bp、开放阅读框(ORF)为6615个碱基、编码2204个氨基酸。氨基酸同源性分析表明:W13株L基因与鹅源SF02、ZJl、NA-1株及鸡源Guangxi7株的同源性均超过97.0%;而核苷酸同源性分析表明:W13株L基因与鹅源SF02、ZJl、NA-1株及鸡源Guangxi7株的同源性均超过93.0%。可见,W13株与鹅源SF02、ZJl、NA-1株及鸡源Guangxi7株的亲缘关系较近。

关键词：禽I型副粘病毒 L基因克隆序列分析

2018-2019年山东部分地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒感染血清学调查

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中国兽医杂志 2021年第5期57卷 10-14页

作者：张宇名王君娜迟丽丽李树凡陈志远王昆王广辉刘锡武孙翔翔樊晓旭徐守振青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 青岛高通农业科技有限公司山东青岛266109 青岛市畜牧兽医研究所山东青岛266041 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032

为了了解2018年4月—2019年12月山东省部分地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况,采用商品化酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒对山东省13个地市5901份送检样品进行了BVDV抗原检测,879份送检样品(823份血样、56份大缸奶样)进行了B... 详细信息

为了了解2018年4月—2019年12月山东省部分地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况,采用商品化酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒对山东省13个地市5901份送检样品进行了BVDV抗原检测,879份送检样品(823份血样、56份大缸奶样)进行了BVDV抗体检测。结果显示,所检BVDV抗原样本总阳性率为0.49%、血样BVDV抗体样本总阳性率为75.94%、大缸奶BVDV抗体样本总阳性率为94.64%。菏泽地区BVDV抗原样本阳性率最高,为1.07%;滨州地区血样BVDV抗体样本阳性率最高,为96.77%;德州、聊城、潍坊、日照、威海、泰安地区均在送检奶样中检测到BVDV抗体,样本阳性率达100%。2018年4—6月送检样品BVDV抗原阳性率最高,为1.94%;2019年1—3月送检血样BVDV抗体阳性率最高,为90.91%。中规模牧场送检样品BVDV抗原阳性率最高,为0.79%;大规模牧场送检血样BVDV抗体阳性率最高,为84.47%。结果表明山东地区BVDV的感染情况较为严重,存在地域和季节性差异,应引起有关单位高度重视,本调查以期为山东省牛病毒性腹泻病毒的防控与净化提供帮助。

关键词：牛病毒性腹泻病毒血清学调查 ELISA

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奶牛肺外结核病的综合诊断与病原分离鉴定

中国动物检疫 2017年第12期34卷 1-4,19页

作者：许芳田莉莉齐亚银孙世雄孙翔翔剡根强曾巧英范伟兴中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266114 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

为揭示牛型提纯结核菌素(PPD)检测阳性牛与剖检肺脏病变不吻合的真实原因,综合运用皮内变态反应(SIT)、比较变态反应(SICCT)、IFN-γ试验,以及牛型PPD点眼反应、ELISA抗体检测等5种免疫学方法,对我国西部5个奶牛场进行牛结核病综合诊断... 详细信息

为揭示牛型提纯结核菌素(PPD)检测阳性牛与剖检肺脏病变不吻合的真实原因,综合运用皮内变态反应(SIT)、比较变态反应(SICCT)、IFN-γ试验,以及牛型PPD点眼反应、ELISA抗体检测等5种免疫学方法,对我国西部5个奶牛场进行牛结核病综合诊断,然后对锁定的后期感染牛进行扑杀、剖检,采集病料进行病理学和病原学诊断。结果显示:用5种方法综合检测确诊的95头后期感染牛中,有84头(88.42%)剖检可见明显结核病变,其中12头(14.29%)的病变发生在肺和肺门淋巴结,72头(85.71%)的病变发生在肝、脾、肠系膜淋巴结等肺外组织器官;95头后期感染牛中,有54头病料培养阳性;阳性菌经Xpert MTB/RIF和Enigma鉴定,均为牛分枝杆菌。该研究结果表明:我国牛结核病存在肺结核和肺外结核两种,因而增加了牛结核病的诊治难度;牛结核病确诊仅靠单一检测方法十分困难,需运用多种免疫学方法进行综合诊断;该结果可以解释目前出现的检测阳性与肺部剖检病变结果不一致的困惑。

关键词：牛结核病综合诊断病原学诊断肺外结核

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电视胸腔镜下食管癌根治并胸内吻合术60例

中国胸心血管外科临床杂志 2013年第5期20卷 614-615页

作者：孙翔翔徐美清郭明发柳常青魏大中马冬春徐世斌梅新宇田介勇张正华安徽医科大学附属安徽省立医院胸外科合肥230036

我院自2011年3～12月率先实施电视胸腔镜辅助（VATS）经右胸食管癌根治术并行胸内吻合60例，效果良好，现总结其经验。

关键词：电视胸腔镜食管癌根治术胸内吻合术

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流产衣原体RAA快速检测方法的建立

中国动物检疫 2024年第11期41卷 118-123页

作者：李嘉琪王亚鹏张皓博张研博张培培孙世雄亓菲孙翔翔中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部) 山东青岛266032 农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方) 山东青岛266032 青岛市现代生物工程及动物疫病研究重点实验室山东青岛266032

流产衣原体(Chlamydia abortus)是一种可造成羊、牛、猪等多种动物和人感染的原核微生物,广泛分布于世界各地,是危害畜牧业最严重的衣原体病原之一。为实现流产衣原体的快速准确鉴别,提高检测效率,提升应急响应速度,根据流产衣原体ompA... 详细信息

流产衣原体(Chlamydia abortus)是一种可造成羊、牛、猪等多种动物和人感染的原核微生物,广泛分布于世界各地,是危害畜牧业最严重的衣原体病原之一。为实现流产衣原体的快速准确鉴别,提高检测效率,提升应急响应速度,根据流产衣原体ompA基因保守区域,设计特异性引物和探针,建立了流产衣原体重组酶介导等温核酸扩增检测技术(recombinase aided amplification,RAA)。该方法仅需在39℃条件下扩增20 min,即可完成检测;最低检测限可达1.13 copies/μL,且与常见细菌核酸无交叉反应;8次重复试验组内变异系数(CV)约为5%;临床样品检测结果显示,建立的RAA方法与荧光PCR符合率为100%。结果表明,本研究建立的RAA快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,操作简便,为流产衣原体的现场快速检测提供了新的技术手段,具有良好的应用前景。

关键词：流产衣原体重组酶介导等温扩增快速检测

微滴式数字PCR定量检测伯氏考克斯氏体方法的建立及应用

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广西农学报 2024年第2期39卷 26-33页

作者：王亚鹏曲瑶张皓博李嘉琪焉鑫孙淑芳孙翔翔欧阳康广西大学广西南宁530005 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 山东农业大学山东泰安271000 农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方) 山东青岛266032 农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部) 山东青岛266032

为建立伯氏考克斯氏体(Coxiella burnetii,Cb)微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR, ddPCR)检测方法,研究以Cb IS1111基因为靶基因,并针对基因保守区域设计了特异性引物和探针,以使反应的条件更加完善,从而构建了ddPCR检测方法,并对该方... 详细信息

为建立伯氏考克斯氏体(Coxiella burnetii,Cb)微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR, ddPCR)检测方法,研究以Cb IS1111基因为靶基因,并针对基因保守区域设计了特异性引物和探针,以使反应的条件更加完善,从而构建了ddPCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性及重复性作出了评估。结果显示,所采用的ddPCR方法最低可检测的浓度为0.52 copies/μL,敏感性较高;与动物布鲁氏菌、牛结核分枝杆菌、土拉杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌无交叉反应,特异性强;组内重复和组间重复变异系数均小于10%,重复性好。使用本实验建立的方法检测了42份疑似感染的临床样品,检测结果与荧光PCR鉴定结果一致。表明建立的ddPCR方法的特异性强、敏感性高、重复性和准确性好,可用于Cb的快速检测和精准定量,对Cb感染的防控具有重要意义。

关键词：伯氏考克斯氏体 Q热微滴式数字PCR 临床检测

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一种有效采集核酸气溶胶的方法

中国动物检疫 2024年第3期41卷 102-106页

作者：孙世雄焉鑫孙翔翔孙明军高玉斌孙静张培培王毓秀孙淑芳中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266114

本试验旨在确定一种有效采集核酸气溶胶的方法,用于实验室核酸气溶胶污染的监测。将100μL pBR322质粒DNA均匀喷洒在体积为23 m^(3)的房间内,模拟核酸气溶胶污染。分别于喷洒后0 d(即喷洒当天)、5 d,在6个采样点上同时以对照组和试验组... 详细信息

本试验旨在确定一种有效采集核酸气溶胶的方法,用于实验室核酸气溶胶污染的监测。将100μL pBR322质粒DNA均匀喷洒在体积为23 m^(3)的房间内,模拟核酸气溶胶污染。分别于喷洒后0 d(即喷洒当天)、5 d,在6个采样点上同时以对照组和试验组方法采样,然后用实时荧光定量PCR检测样品。对照组用装有超纯水的离心管进行采样,试验组用气体采样泵连接过滤吸头进行采样。结果显示:在喷洒后0d采样检测时,试验组6个采样点的Ct平均值为22.732,低于对照组的25.027;在喷洒后5 d采样检测时,对照组只有3个采样点检测到Ct值,且皆高于相应试验组数据。在对布鲁氏菌分子生物学实验室核酸气溶胶的日常监测中,试验组方法同样显示出较高的敏感性。结果表明,试验组方法具有较高的采样效率,适用于实验室核酸气溶胶污染的监测。本研究为实验室核酸气溶胶污染监测提供了技术支撑。

关键词：核酸气溶胶气体采样泵实时荧光定量PCR 污染监测

来自5种动物禽Ⅰ型副粘病毒HN基因的序列分析

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上海畜牧兽医通讯 2013年第5期 8-11页

作者：潘杰冯淑萍孙翔翔张欣明李春英梁丹洁吴军曾咏芳周师师欧莹黄胜斌胡巧云徐贤坤熊毅广东永顺生物制药股份有限公司广东广州510000 广西区动物疫病预防控制中心广西南宁530001 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

本研究对从广西5种不同动物体内分离到的禽Ⅰ型副粘病毒毒株,进行了HN基因的扩增、克隆和序列分析.5个APMV-Ⅰ分离株HN基因的核苷酸序列同源性为94.7％～98.4％,推导氨基酸序列同源性为96.3％～99％,同源性较高；5个毒株的HN基因与国内... 详细信息

本研究对从广西5种不同动物体内分离到的禽Ⅰ型副粘病毒毒株,进行了HN基因的扩增、克隆和序列分析.5个APMV-Ⅰ分离株HN基因的核苷酸序列同源性为94.7％～98.4％,推导氨基酸序列同源性为96.3％～99％,同源性较高；5个毒株的HN基因与国内广东、山东、福建等地的当前流行株同源性较高,但与经典毒株同源性较低；遗传分析表明HN基因相对保守,都源于同一个基因亚群.

关键词：禽Ⅰ型副粘病毒 HN基因序列分析同源性