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表达SmERF1调节烟草种子大小及耐盐性

西北植物学报 2024年第2期44卷 229-235页

作者：化文平孔维维韩立敏曹晓燕陕西学前师范学院生命科学与食品工程学院西安710061 陕西师范大学生命科学学院西北濒危药材资源开发国家工程实验室药用资源与天然药物化学教育部重点实验室西安710062

【目的】ERF转录因子生物功能广泛,在调控植物生长发育和响应胁迫中发挥重要作用。前期研究显示,丹参SmERF1参与植物响应胁迫反应。该研究旨在进一步明确SmERF1潜在的生物功能,并为药用植物抗性及种子发育研究奠定基础。【方法】该研究... 详细信息

【目的】ERF转录因子生物功能广泛,在调控植物生长发育和响应胁迫中发挥重要作用。前期研究显示,丹参SmERF1参与植物响应胁迫反应。该研究旨在进一步明确SmERF1潜在的生物功能,并为药用植物抗性及种子发育研究奠定基础。【方法】该研究采用农杆菌介导的方法在模式植物烟草中异源表达了丹参SmERF1基因;通过抗性相关酶活性变化检测,对转基因植株抗性进行评价;通过酶联免疫方法和qPCR方法分析GA和ABA等激素含量及合成途径关键酶基因的表达变化。【结果】(1)表达SmERF1的烟草植株在幼苗期表现出生长缓慢、生物量和叶绿素减少,而在其他生长阶段与对照植株没有明显差异;此外,表达SmERF1的烟草植株种子比野生对照的种子小、轻;(2)在盐处理下,转基因烟草株系中脯氨酸含量、SOD和POD活性高于对照株系,而MDA含量低于对照株系,转基因烟草株系表现出较高的耐盐性;(3)在转烟草株系中,ABA含量上调,GA水平降低。实时定量PCR结果显示,表达SmERF1调节了与植物激素生物合成相关的关键酶基因的表达,如NtSDR、NtGA20ox、NtACO和NtACS。【结论】SmERF1通过ABA依赖途径增强了烟草对盐胁迫的耐受性,并调控种子大小。

关键词：烟草 SmERF1 植物抗性种子大小 ABA

基于移动互联网思维的集装箱码头智能无人闸口解决方案研究及应用

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价值工程 2024年第3期43卷 125-127页

作者：王炳森张建芳孔维维张强山东港口科技集团青岛有限公司青岛266000

集装箱码头闸口是集装箱码头的核心业务汇聚地,是集装箱码头、海关、船公司等各单位业务数据集中处理的核心场所,是集装箱码头最重要的关键地带。传统的集装箱码头闸口多为人工操作,存在缺乏信息处理不及时、等待时间长、通过效率低等... 详细信息

集装箱码头闸口是集装箱码头的核心业务汇聚地,是集装箱码头、海关、船公司等各单位业务数据集中处理的核心场所,是集装箱码头最重要的关键地带。传统的集装箱码头闸口多为人工操作,存在缺乏信息处理不及时、等待时间长、通过效率低等问题。相对应的,智能无人闸口打通集卡、码头、司机等多个关键节点,自动信息处理、与集卡司机实时交互,从平面工艺布局和完整的业务流程层面出发,从根本上提高闸口通行效率。本文主要讨论基于移动互联网思维方式的集装箱码头无人化闸口模式,将闸口整条链路贯通起来,通过移动互联网实时协同作业,形成一站式智能无人闸口解决方案。

关键词：集装箱码头智能闸口无人闸口互联网+闸口解决方案

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丹参抗性基因SmERF1的功能研究

丹参抗性基因SmERF1的功能研究

作者：孔维维陕西师范大学

学位级别：硕士

植物AP2/ERF家族是一个庞大的植物转录因子超家族,广泛存在于植物中。该家族蛋白均含有1或2个由60-70个氨基酸组成的高度保守的AP2结构域,广泛参与植物生长发育、衰老、抗性、代谢等众多生物学过程。丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)为... 详细信息

植物AP2/ERF家族是一个庞大的植物转录因子超家族,广泛存在于植物中。该家族蛋白均含有1或2个由60-70个氨基酸组成的高度保守的AP2结构域,广泛参与植物生长发育、衰老、抗性、代谢等众多生物学过程。丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)为唇形科(Labiatae)鼠尾草属多年生草本药用植物。具有抗血栓、消炎、抗病毒、抗肿瘤、镇痛等作用,在临床上被广泛用于心脑血管疾病的治疗。丹参作为一种重要的药用模式植物,目前关于其转录因子的研究较少,众多转录因子,尤其是ERF基因家族成员的功能尚不明了。在实验室数字表达谱筛选的基础上,本研究克隆并分析了一条ERF转录因子基因SmERF1 (unigene46389),通过超表达该基因,对其在丹参生长发育、胁迫响应、次生代谢调控等方面的生物学功能做了初步研究。本研究的主要内容与结果如下：1.依据本实验室丹参转录组数据库基因序列(unigene46389),通过PCR扩增从丹参中克隆得到了SmERF1基因,该基因含有一个长度为549 bp开放阅读框,编码182个氨基酸,含有一个由63个氨基酸组成的保守的AP2结构域,三级结构中含有3个反向平行的p折叠和一个几乎与之相平行的α螺旋,并且其AP2结构域中第14、19位的氨基酸残基分别是丙氨酸和天冬氨酸,属于典型的AP2/ERF家族中的ERF家族成员。实时定量PCR结果表明,SmERF1的表达受到茉莉酸甲酯(MeJA)以及酵母提取物(YE)的强烈诱导。2.采用Gateway法成功构建了pEarleyGate100-SmERF1重组质粒,并且通过农杆菌介导法分别对丹参和烟草进行遗传转化,经筛选培养和DNA检测分别获得丹参和烟草阳性转化株系15个和5个。进一步分析其表达水平,获得高表达基因的丹参和烟草阳性转化株系8个和4个。在组织培养状态下,过表达SmERF1基因的烟草植株与野生型烟草相比出现了老叶泛黄、早花、生长缓慢等现象。3.对转基因丹参和烟草中ABA、GA含量及其合成途径中相关关键基因表达量进行检测,结果显示,与野生型相比,转基因丹参和烟草中ABA含量均明显升高,同时GA含量降低;ABA合成途径中的关键酶基因NtSDR和乙烯合成途径NtACS, NtACO等关键酶基因的表达在过表达株系中高于野生型株系;赤霉素合成途径关键酶基因GA20ox的表达明显下降。因此,我们推测,SmERF1基因可能通过调控ABA合成关键基因.NtSDR促进了ABA的生物合成。ABA含量的增加一方面可能抑制了GA20ox基因的表达减少了GA的合成,另一方面可能促进了乙烯合成关键基因ACS和ACO表达,可能促进乙烯合成。4.转SmERFl基因烟草种子变小,千粒重约是野生型的0.55～0.63倍;且转基因烟草种子萌发速度较野生型慢。结合ABA和GA含量分析结果,我们推测转基因烟草种子变小的表型可能源于ABA含量的增加;种子的萌发变慢,一方面可能受到种子大小的影响,另一方面也可能受到了ABA的抑制。5.用400mmol/LNaCl对转基因丹参和烟草进行盐胁迫处理,结果表明转基因株系抗盐胁迫能力明显高于野生型植株。处理7d后,转基因株系长势明显优于野生对照株系,其脯氨酸含量、SOD、POD活性较野生型高;MDA含量与野生型相比较低。我们推测SmERFl可能通过促进ABA的生物合成,增强了转基因丹参和烟草对高盐的耐受性。6.采用HPLC法检测丹参中主要有效成分的含量,结果显示,转基因株系1、16中隐丹参酮、丹参酮ⅡA含量较野生型有所提高,但提高幅度很小,而转基因株系11中四种次生代谢产物含量较野生型都有所减少。我们推测株系11可能是由于插入位置不同,导致其他丹参酮合成途径相关的基因表达下降所致。综上所述,SmERFl基因作为AP2/ERF转录因子家族成员,在植物种子大小决定、抵御盐胁迫中起着重要作用,而在丹参次生代谢调控中的作用不大。

关键词： AP2/ERF 丹参盐胁迫基因功能

互联网金融发展对企业融资约束影响的测度研究

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互联网金融发展对企业融资约束影响的测度研究

作者：孔维维南京邮电大学

学位级别：硕士

近些年来,为了帮助企业走出融资约束的困境,政府推出了一系列的金融改革政策,调控市场助力企业发展,但是融资约束仍是限制企业发展的主要因素。在企业深陷筹资难、筹资贵困境的同时,互联网金融的发展鼎故革新。互联网金融的发展是金融... 详细信息

近些年来,为了帮助企业走出融资约束的困境,政府推出了一系列的金融改革政策,调控市场助力企业发展,但是融资约束仍是限制企业发展的主要因素。在企业深陷筹资难、筹资贵困境的同时,互联网金融的发展鼎故革新。互联网金融的发展是金融市场的创新升级,它打破传统金融业不可撼动的垄断局面,翻开了世界金融新篇章,是金融界的革命。互联网金融依托于先进的互联网技术,针对企业在融资过程中出现的信息不对称,融资成本高且途径单一,融资效率低这些方面问题,利用互联网金融的优势缓解融资约束。由此观之,研究互联网金融对融资约束的影响以及在不同的效应影响下互联网金融对融资约束的差异性具有重要的理论和现实意义。本文从信息不对称、代理成本、产权性质三个方面研究互联网金融发展对融资约束的影响差异,选取2013-2019年所有上市公司的季度数据作为研究样本,利用词云图和因子分析法合成互联网金融发展指数,通过AWC模型,测度互联网金融发展对企业融资约束影响程度。实证结果表明:(1)互联网金融发展对企业融资约束具有缓解作用;(2)企业信息不对称程度越高,互联网金融对企业融资约束的缓解效果越好;(3)企业代理成本越高,互联网金融对企业融资约束的缓解效果越好;(4)互联网金融对民营企业融资约束的缓解程度大于国有企业。据此,本文从互联网金融、企业自身以及国家层面出发,提出加快建设完善的金融市场体系,巩固互联网金融发展基础;规范外部融资环境,促进互联网金融规范发展;加强企业自我完善,开拓创新融资理念;健全法律法规等政策建议,以此推动互联网金融良性发展与完善企业融资服务。

关键词：互联网金融金融发展融资约束

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L针纺织品有限公司营销策略研究

L针纺织品有限公司营销策略研究

作者：孔维维青岛大学

学位级别：硕士

针纺织业在我国国民经济中占有重要地位,不论是过去还是将来,针纺织业都将在促进就业、扩大内需以及确保出口方面起到积极的推动作用。随着贸易保护主义的抬头,我国的针纺织品企业必须更直接地面对复杂的市场环境,形势不容乐观。在这种... 详细信息

针纺织业在我国国民经济中占有重要地位,不论是过去还是将来,针纺织业都将在促进就业、扩大内需以及确保出口方面起到积极的推动作用。随着贸易保护主义的抬头,我国的针纺织品企业必须更直接地面对复杂的市场环境,形势不容乐观。在这种背景下,如果不采取有效的营销措施,将严重影响我国针纺织品企业的发展。因此,有必要对相关的营销环境进行分析,制定出合适的营销策略,从而进一步提升该公司市场竞争力。L针纺织品有限公司是一家集织面、印染、成衣于一体的综合性针纺织企业。产品主要分为成人、儿童、婴儿三大系列150多个品种。月可生产加工各种针织面料700吨,年出口交货量达8800余万件,远销欧美、澳洲、日本、中东及南美等多个国家和地区。文章综合运用4P营销理论,研究分析了L针纺织品有限公司产品营销环境,并结合SWOT分析结果,制定了L针纺织品有限公司在产品价格策略,渠道策略,促销策略等4个方面的营销策略。同时,从人才保障、组织保障、建立技术创新服务体系三个维度提出了相应的保障措施。

关键词： L针纺织品有限公司 4P SWOT 营销策略

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项目教学法在高中信息技术课程中的应用研究

项目教学法在高中信息技术课程中的应用研究

作者：孔维维华中师范大学

学位级别：硕士

信息科技的高速发展给信息技术课程教学创造了机遇同时也带来了挑战。随着科技的不断发展、学生能力的不断提高,新课标较之以往有了更高层次的要求,传统的信息技术教学模式已经无法满足现代学生的学习兴趣和知识要求,信息技术课程教学... 详细信息

信息科技的高速发展给信息技术课程教学创造了机遇同时也带来了挑战。随着科技的不断发展、学生能力的不断提高,新课标较之以往有了更高层次的要求,传统的信息技术教学模式已经无法满足现代学生的学习兴趣和知识要求,信息技术课程教学模式改革势在必行。项目教学法在国内外教育中的成功应用引起了众多教育者的关注,能否将项目教学法应用于高中信息技术课程教学中,是一个值得深入研究的问题,该研究也具有重要的应用价值。根据高中信息技术的课程特点和教学需求,确定高中信息技术课堂项目教学法的具体实施策略。通过文献研究、问卷调查和访谈等研究方法,制定高中信息技术项目教学法的具体实施策略。将项目教学法的教学效果分为特点分析、模式设计、教学实验、效果检验4部分,以《VB编程》为案例贯彻每一部分的具体研究。最后,根据spss软件分析学生在考试中的分数,再对比传统课堂和项目教学法课堂的作品提交、学生表现以及学生主观意愿调查问卷分析,四方面进行综合分析发现项目教学法在高中信息技术课堂中的应用对教学效果的提升具有显著的正面影响。项目教学法能够有效提高学生的自学、探索、创新能力以及学习兴趣,这样的课堂更能够促进学生知识的掌握和能力的培养。此研究对于我校信息技术教学模式改革提供了参考,希望能对项目教学法实践起到一定的启示作用。

关键词：高中信息技术项目教学法教学设计

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全膝关节置换术后急性疼痛的影响因素研究

全膝关节置换术后急性疼痛的影响因素研究

作者：孔维维兰州大学

学位级别：硕士

研究目的:在现有多模式镇痛方案下,全面探索及分析影响全膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)患者术后急性疼痛(Acute post-surgical pain,APSP)的保护因素和危险因素,为TKA患者APSP的预防和管理提供依据。研究方法:本研究为横断... 详细信息

研究目的:在现有多模式镇痛方案下,全面探索及分析影响全膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)患者术后急性疼痛(Acute post-surgical pain,APSP)的保护因素和危险因素,为TKA患者APSP的预防和管理提供依据。研究方法:本研究为横断面研究。于2018年1月至2019年1月,采用便利抽样方法,选取在甘肃省兰州市某三级甲等综合医院关节外科以膝骨性关节炎收治拟行TKA的患者,将符合纳入排除标准的360例作为研究对象。于术前1 d采用一般资料问卷面对面收集研究对象的性别、年龄等人口学资料;术前1 d运用相关量表面对面评估研究对象手术恐惧、焦虑、抑郁等心理学资料;术前1 d、术后3 d内面对面评估和查阅病历收集疾病病程、手术部位等临床学相关资料。采用简易疼痛评估尺测量术后3 d内活动状态时的疼痛程度,取以上3个数的平均值为结果变量,以≥4分表示有APSP。研究对象不同特征与有无APSP关系采用单因素分析,将差异有统计学意义的因素作为自变量,以是否发生APSP为因变量,纳入到二元logistic回归中进行分析,进一步明确影响TKA患者APSP的保护及危险因素。研究结果:本研究354例TKA患者中,发生APSP者198例,APSP发生率为55.93%。研究对象不同特征有无APSP差异比较得出:性别、年龄、宗教信仰、文化程度、疼痛部位、术前中医特色疗法、中医特色疗法类型、术前关节软骨损伤程度、超前镇痛、术后患者静脉自控镇痛、术后加用镇痛药物、术前活动时平均疼痛程度、术前疼痛持续时间、镇痛药使用时长、术前膝关节功能评分、手术恐惧、焦虑、抑郁、术前疼痛灾难化等19个因素差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析显示:宗教信仰(OR=0.73)、就医疾病病程(OR=0.80)、中医特色疗法(OR=0.41)、术前膝关节功能评分(OR=0.98)、术后患者静脉自控镇痛(OR=0.37)、术后加用镇痛药物(OR=0.15)是TKA患者APSP的独立保护因素;文化程度(OR=1.23)、术前关节软骨损伤程度(OR=1.78)、手术时长(OR=1.02)、手术恐惧(OR=1.36)、抑郁(OR=2.48)、疼痛灾难化(OR=1.13)是TKA患者APSP的独立危险因素。研究结论:本研究通过从社会-生理-心理因素对TKA患者APSP综合作用的角度,分析影响TKA患者APSP的41个相关因素,明确了12个独立影响因素,作为预防和管理APSP实施的基础。其中宗教信仰、就医疾病病程、中医特色疗法、术前膝关节功能评分、术后患者静脉自控镇痛、术后加用镇痛药物是TKA患者APSP的保护因素,建议临床医护人员积极应用;文化程度、术前关节软骨损伤程度、手术时长、手术恐惧、抑郁、疼痛灾难化等是TKA患者APSP的危险因素,建议按危险因素分层进行预防性干预。

关键词：全膝关节置换术术后急性疼痛影响因素

有机蒙脱土改性硬质聚氨酯泡沫复合材料的研究

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有机蒙脱土改性硬质聚氨酯泡沫复合材料的研究

作者：孔维维浙江大学

学位级别：硕士

硬质聚氨酯泡沫塑料是聚氨酯合成材料的主要品种之一,具有重量轻、保温隔热性好、缓冲抗震性优良、比强度高、加工成型方法简单且灵活多变,并与大多数材料粘结容易等优点,广泛应用于国民经济各部门。然而,硬质聚氨酯泡沫塑料在应用中还... 详细信息

硬质聚氨酯泡沫塑料是聚氨酯合成材料的主要品种之一,具有重量轻、保温隔热性好、缓冲抗震性优良、比强度高、加工成型方法简单且灵活多变,并与大多数材料粘结容易等优点,广泛应用于国民经济各部门。然而,硬质聚氨酯泡沫塑料在应用中还存在着许多不足,如力学性能与结构材料相比较差、容易积累静电、容易燃烧造成火灾等。为此,采用有机蒙脱土对其进行改性,既可提高材料的力学性能,还可提高材料的热稳定性及阻燃性。用水为发泡剂,首先探讨了全水发泡硬质聚氨酯泡沫塑料的配方及工艺,得出了一个优化实验方案。在此基础上,为了研究不同的改性剂处理后的蒙脱土对复合材料的结构、力学性能、热稳定性及阻燃性的影响,分别采用经十六烷基三甲基溴化铵、甲基牛脂基双(2-羟乙基)季铵氯和三羟甲基氨基甲烷改性所得的三种不同的有机蒙脱土CMMT、Cloisite 30B和OMMT,制备出相应的硬质聚氨酯泡沫/有机蒙脱土复合材料。研究结果表明,由于改性剂中含有可与异氰酸根反应的羟基,Cloisite 30B和OMMT有部分剥离分散于复合材料中;而改性剂中不含有反应性基团的CMMT则主要表现为插层分散。在较低含量时,RPUF/CMMT复合材料的比压缩强度比RPUF/Cloisite 30B及RPUF/OMMT复合材料的稍高些;但是在较高含量时,RPUF/Cloisite 30B及RPUF/OMMT复合材料拥有比RPUF/CMMT复合材料更高的比压缩强度和储能模量,且其泡孔更小、孔径分布更窄。有机蒙脱土的加入使得材料的热稳定性及阻燃性能都有所提高,其中RPUF/OMMT的阻燃性能最好。

关键词：硬质聚氨酯泡沫塑料有机蒙脱土复合材料力学性能热稳定性阻燃性

秦艽5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因(GmDXR)的克隆和表达分析

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中草药 2014年第12期45卷 1758-1763页

作者：化文平岑文孔维维药用资源与天然药物化学教育部重点实验室西北濒危药材资源开发国家工程实验室陕西师范大学生命科学学院陕西西安710062 陕西学前师范学院生物科学与技术系陕西西安710100

目的从药用植物秦艽Gentiana macrophylla中克隆了萜类成分合成途径的关键酶——5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因,分析其序列特征及表达方式。方法克隆了秦艽DXR基因(GmDXR),分析... 详细信息

目的从药用植物秦艽Gentiana macrophylla中克隆了萜类成分合成途径的关键酶——5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因,分析其序列特征及表达方式。方法克隆了秦艽DXR基因(GmDXR),分析了GmDXR编码蛋白序列的特征,并采用实时定量分析了GmDXR的表达模式。结果秦艽GmDXR基因包含1个完整的长1 428 bp的ORF框,编码475个氨基酸;GmDXR与萝芙木、番茄等植物DXR蛋白具有很高的同源性(≥85%),无跨膜结构域、信号肽等结构,主要定位于叶绿体中。定量PCR结果显示,GmDXR主要在秦艽的叶中进行表达,受到植物激素茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)的诱导。结论 GmDXR含有DXR蛋白的保守结构特征;在秦艽不同器官中GmDXR基因表达不同,且受到MeJA的诱导。该研究为今后研究秦艽环烯醚萜类化合物的生物合成机制提供了依据。

关键词：秦艽 5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶序列分析表达模式 ORF框