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教育数字化转型背景下临床微生物检验学实验教学模式的探索

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CRISPR/Cas9介导的adeG基因敲除大肠杆菌细菌模型的建立

科教导刊（电子版） 2024年第16期 211-213页

作者：焦红梅阴银燕孔桂美李国才扬州大学医学院江苏扬州 225009

随着大数据、人工智能等数字技术的快速发展,数字化技术与医疗卫生行业结合日益紧密,实现了有机融合.在此背景下,医疗服务行业也逐渐从信息化向智慧化跨越式发展.这一转变对新医科背景下医学检验人才的培养提出了更高的要求.数字技术与... 详细信息

随着大数据、人工智能等数字技术的快速发展,数字化技术与医疗卫生行业结合日益紧密,实现了有机融合.在此背景下,医疗服务行业也逐渐从信息化向智慧化跨越式发展.这一转变对新医科背景下医学检验人才的培养提出了更高的要求.数字技术与教学实践的深度融合,已成为提升教学质量和培养新医科创新人才的重要途径.文章分析了教育数字化转型背景下临床微生物检验学实验教学面临的现状,探讨了教育数字化和临床微生物学检验实验教学的有机融合使教学内容更加丰富、生动.通过进一步明确教学目标、优化整合教学内容以及变革教学模式以提升学生的学习效率和创新能力,为新医科背景下实验教学改革提供思路.

关键词：教育数字化临床微生物检验学实验教学教学模式融合

来源：博看期刊评论

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生物技术通报 2024年第2期40卷 55-64页

作者：朱恬仪孔桂美焦红梅郭停停乌日汗刘翠翠高成凤李国才扬州大学医学院扬州225100 江苏省人兽共患病学重点实验室扬州225100

【目的】鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)是引起医院内感染的重要条件致病菌之一,耐药性AB是目前防治的棘手问题。细菌外排泵是引起耐药性的重要原因之一,拟通过PCR检测鲍曼不动杆菌耐药结节分化家族(resistance-nodulation-d... 详细信息

【目的】鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)是引起医院内感染的重要条件致病菌之一,耐药性AB是目前防治的棘手问题。细菌外排泵是引起耐药性的重要原因之一,拟通过PCR检测鲍曼不动杆菌耐药结节分化家族(resistance-nodulation-division,RND)外排泵基因adeLFGH的分布,探索其与耐药性的关系;建立adeG耐药基因模型,利用CRISPR/Cas9系统对其进行靶向敲除的初步研究。【方法】运用肉汤微量稀释法检测耐药性分布;PCR筛查13株临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌adeLFGH外排泵基因并分析其分布;扩增RND外排泵关键基因adeG并构建耐药细菌模型;设计特异性sgRNA,利用CRISPR/Cas9系统进行靶向敲除,药敏实验检测其敲除效果。【结果】13株临床鲍曼不动杆菌对多黏菌素E敏感,对左氧氟沙星耐药率较低,仅为38.5%,对头孢他啶的耐药率为92.3%,对妥布霉素耐药率为84.6%,对其他临床常见药物耐药率均为100%。13株多重耐药鲍曼不动杆菌adeLFGH携带率为100%。药敏实验结果显示adeG模型耐药菌株的哌拉西林、替卡西林/克拉维酸以及哌拉西林/他唑巴坦由敏感转为耐药,氯霉素、美罗培南、米诺环素由敏感转为中介。特异性sgRNA介导CRISPR/Cas9系统靶向敲除效率不同。pCas9-sgRNA1(adeG)靶向后哌拉西林/他唑巴坦的耐药性得到了逆转,对妥布霉素、四环素、多西环素、米诺环素的耐药性也有不同程度的降低;pCas9-sgRNA2(adeG)和pCas9-sgRNA3(adeG)使哌拉西林/他唑巴坦由耐药恢复到了中介,但对其他药物的耐药性逆转效果并不显著。【结论】特异性CRISPR/Cas9系统可以特异性敲除耐药基因,提示可为耐药菌的治疗提供新的思路和方法。

关键词： CRISPR/Cas9 耐药性 sgRNA adeG

第三届海峡两岸中西医结合学术研讨会会议纪要

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中国中西医结合杂志 2006年第5期26卷 475-476页

作者：孔桂美单位不详

中国中西医结合学会和台湾中西整合医学会联合主办,扬州大学医学院承办的第三届海峡两岸中西医结合学术研讨会于2005年8月13-16日在江苏省扬州市扬州大学隆重召开,来自两岸三地的70多位知名专家学者出席了会议.中国科学院院士、中国中... 详细信息

中国中西医结合学会和台湾中西整合医学会联合主办,扬州大学医学院承办的第三届海峡两岸中西医结合学术研讨会于2005年8月13-16日在江苏省扬州市扬州大学隆重召开,来自两岸三地的70多位知名专家学者出席了会议.中国科学院院士、中国中西医结合学会会长陈可冀教授,台湾中西整合学会秘书长李春兴教授,台湾台南市立医院黄中一教授,台湾秀传纪念医院陈明丰教授,香港大学党毅教授,香港中西医结合学会秦鸿教授,扬州大学副校长封超年教授,扬州大学医学院院长卜平教授等出席了开幕式.陈可冀院士致开幕词,李春兴教授,封超年副校长、卜平教授、秦鸿教授分别在开幕式上讲话.

关键词：海峡两岸会议中西医结合学术研讨会

蛋白质精氨酸甲基转移酶5在肿瘤中的作用及其临床应用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2018年第5期25卷 533-537页

作者：孙国壮毛海燕孔桂美扬州大学医学院微生物与免疫学实验室江苏扬州225100

蛋白质精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltransferase 5,PRMT5)是一种Ⅱ型蛋白质精氨酸甲基转移酶,在胃癌、肝癌、结直肠癌、肺癌和乳腺癌等多种肿瘤中异常表达。异常表达的PRMT5通过调节细胞周期蛋白、PI3K细胞信号通路等途... 详细信息

蛋白质精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltransferase 5,PRMT5)是一种Ⅱ型蛋白质精氨酸甲基转移酶,在胃癌、肝癌、结直肠癌、肺癌和乳腺癌等多种肿瘤中异常表达。异常表达的PRMT5通过调节细胞周期蛋白、PI3K细胞信号通路等途径影响肿瘤细胞,通过对相关肿瘤抑制基因的调控进而影响肿瘤的发生和发展。本文围绕近年来肿瘤中PRMT5的最新研究进展,包括对雄激素受体、免疫细胞、E2F-1-Bcl-2途径、PTEN和P16等的作用及其机制,并结合目前相关抑制剂的研究,讨论如何在未来临床治疗中靶向PRMT5达到治疗肿瘤的目的。

关键词：蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5) 肿瘤 Foxp3 EPZ015666 10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN) PR5-LL-CM01

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老年晚期胃癌的靶向治疗新进展

中国老年学杂志 2019年第7期39卷 1767-1771页

作者：刘心意孔桂美扬州大学医学院江苏扬州225001

胃癌是全世界第五大常见的恶性肿瘤,尤其是在亚洲发病率更高,据报道,死于胃癌的患者居2012年癌致死亡原因的第3位[1]。虽然当前胃癌的治疗方法很多,但是由于胃癌发现较晚,错过了最佳的手术时间,且诸多患者对放化疗极易产生耐药性。因此... 详细信息

胃癌是全世界第五大常见的恶性肿瘤,尤其是在亚洲发病率更高,据报道,死于胃癌的患者居2012年癌致死亡原因的第3位[1]。虽然当前胃癌的治疗方法很多,但是由于胃癌发现较晚,错过了最佳的手术时间,且诸多患者对放化疗极易产生耐药性。因此靶向治疗成为临床治疗胃癌尤其是晚期胃癌的最主要二线药物[2]。

关键词：晚期胃癌靶向治疗表皮生长因子受体2 酪氨酸激酶抑制剂

肠易激综合征中医病证与肠胆囊收缩素、细胞癌基因fos、P物质的相关性

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中医杂志 2008年第9期49卷 803-805页

作者：张瑜卜平孔桂美陈洁徐敏李娜扬州大学医学院中西医结合研究所江苏省扬州市淮海路11号225009

目的探讨肠易激综合征(IBS)中医病证与肠胆囊收缩素(CCK)、细胞癌基因fos(c-fos)、P物质(Substance P)的相关性。方法采用SCL-90量表对IBS患者和正常对照组进行测试,评定心理状况;采用免疫组化法分析IBS患者及对照组乙状结肠和回盲部黏... 详细信息

目的探讨肠易激综合征(IBS)中医病证与肠胆囊收缩素(CCK)、细胞癌基因fos(c-fos)、P物质(Substance P)的相关性。方法采用SCL-90量表对IBS患者和正常对照组进行测试,评定心理状况;采用免疫组化法分析IBS患者及对照组乙状结肠和回盲部黏膜CCK、c-fos、P物质的含量。结果IBS患者存在明显的焦虑、抑郁、敌对负性情感;肝相关证型和非肝相关证型在焦虑、抑郁方面差异有统计学意义(P<0.01);回盲部P物质的平均阳性面积和OD值实证虚证两组间差异均有统计学意义(P<0.05);回盲部c-fos的OD值实证虚证两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论肠易激综合征患者中医病证与肠黏膜c-fos、P物质的表达相关。

关键词：肠易激综合征中医病证胆囊收缩素 c-fos P物质

三维超声观察5-Fu治疗前后兔乳腺VX2移植瘤的血流和体积改变

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中国介入影像与治疗学 2010年第3期7卷 301-304页

作者：王颖夏炳兰吴志峰曹丽孔桂美扬州大学医学院临床医院超声科江苏扬州225000 扬州大学医学院临床医院放化疗科江苏扬州225000 扬州大学医学院临床医院病理科江苏扬州225000 扬州大学中医科教研室江苏扬州225000

目的应用三维超声探讨5-Fu局部治疗前后兔乳腺VX2移植瘤的血流、体积变化。方法16只新西兰大白兔,每侧乳腺均种植一个VX2移植瘤共建立32个乳腺VX2移植瘤模型,分别于肿瘤移植后第2、3、4周经皮注射5-Fu至右侧移植瘤的瘤内及瘤周。应用三... 详细信息

目的应用三维超声探讨5-Fu局部治疗前后兔乳腺VX2移植瘤的血流、体积变化。方法16只新西兰大白兔,每侧乳腺均种植一个VX2移植瘤共建立32个乳腺VX2移植瘤模型,分别于肿瘤移植后第2、3、4周经皮注射5-Fu至右侧移植瘤的瘤内及瘤周。应用三维超声监测肿瘤生长情况,于第1次治疗前及治疗后瞬间、第4周治疗结束后分析左右侧肿瘤血供的分级,利用VOCALⅡ功能量化分析肿瘤内部及周边的血供,并测量容积指数(VI);同时测量肿瘤的体积,并进行自身左右侧对照。4周后处死瘤兔,用免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达,了解肿瘤凋亡情况,评价三维超声相关检测指标的价值。结果治疗前兔两侧乳腺VX2移植瘤的血供及VI值基本一致,治疗后瞬间及第4周治疗结束后右侧(治疗侧)血供及VI值明显减小(P<0.05);治疗前左右侧乳腺VX2移植瘤的体积差异无统计学意义,治疗后右侧肿瘤体积增长减慢(P<0.05);免疫组化显示:治疗侧乳腺肿瘤组织凋亡明显(P<0.05)。结论三维超声能够更客观地反映5-Fu治疗前后兔乳腺移植瘤的血流和体积变化,5-Fu局部治疗兔乳腺VX2移植瘤有效。

关键词：超声检查 VX2肿瘤氟尿嘧啶 Bcl-2

蜂毒素联合杜仲黄酮外用治疗类风湿关节炎的实验研究

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时珍国医国药 2016年第8期27卷 1833-1836页

作者：杨亚旭孔桂美朱琦卜平扬州大学医学院江苏扬州225001 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225001 上海光华中西医结合医院上海200052

目的观察蜂毒素联合杜仲黄酮外用对于胶原诱导型(CIA)类风湿关节炎小鼠的影响,并观察杜仲黄酮能否有效抑制蜂毒素的溶血作用。方法 1动物实验:采用CIA法诱导40只类风湿关节炎的小鼠,将其随机分为PBS组、蜂毒素组、杜仲黄酮组和蜂毒素联... 详细信息

目的观察蜂毒素联合杜仲黄酮外用对于胶原诱导型(CIA)类风湿关节炎小鼠的影响,并观察杜仲黄酮能否有效抑制蜂毒素的溶血作用。方法 1动物实验:采用CIA法诱导40只类风湿关节炎的小鼠,将其随机分为PBS组、蜂毒素组、杜仲黄酮组和蜂毒素联合杜仲黄酮混合给药组,同时取5只未经过任何处理的小鼠组成空白对照组。蜂毒素组每日外用蜂毒素5μl/爪(含药浓度1μg/μl),杜仲黄酮组每日外用杜仲黄酮5μl/爪(含药浓度1μg/μl),混合给药组给药剂量相同(为蜂毒素与杜仲黄酮等比例混合制成,含药浓度为1μg/μl),PBS组每日给等量的PBS,空白对照组不给予任何治疗,连续给药15天观察小鼠的相关变化。2溶血实验:2%红细胞悬浊液中分别加入100μl的蜂毒素溶液,杜仲黄酮溶液,蜂毒素联合杜仲黄酮1∶1溶液,蜂毒素联合杜仲黄酮2∶1溶液,蜂毒素联合杜仲黄酮1∶2溶液,37℃水浴加热后过夜,肉眼及紫外分光光度计检测OD值。结果蜂毒素组、杜仲黄酮组和混合给药组均对类风湿关节炎CIA小鼠在大体观察、足垫厚度、足踝宽度、TNF-α、IL-1β、IL-2、GM-CSF及影像学方面与PBS组相比,均有好转,差异有统计学意义;蜂毒素联合杜仲黄酮组治疗效果好于两种药物单独外用;蜂毒素联合杜仲黄酮1∶1,1∶2溶液不产生红细胞溶血现象,蜂毒素组、蜂毒素联合杜仲黄酮2∶1溶液会使红细胞悬浊液产生溶血现象。结论蜂毒素、杜仲黄酮、蜂毒素联合杜仲黄酮外用对于类风湿关节炎CIA小鼠有治疗效果,其中联合用药效果更好;杜仲黄酮可以有效的抑制蜂毒素的溶血现象。

关键词：风湿病关节炎模型蜂毒素杜仲黄酮溶血

汉黄芩素调控胆绿素还原酶A对结肠癌细胞的抑制作用

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中成药 2021年第8期43卷 2181-2188页

作者：毛海燕殷旭东乔大伟孔桂美卜平扬州大学附属医院肿瘤科江苏扬州225000 扬州大学医学院中西医结合系江苏扬州225009

目的探讨汉黄芩素对结肠癌HT29及SW620细胞的抑制作用及可能机制。方法取筛选出的结肠癌HT29及SW620细胞,分别予不同质量浓度汉黄芩素(0、20、40、80、160μg/mL)及5⁃FU(12.5μg/mL)干预后,采用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,... 详细信息

目的探讨汉黄芩素对结肠癌HT29及SW620细胞的抑制作用及可能机制。方法取筛选出的结肠癌HT29及SW620细胞,分别予不同质量浓度汉黄芩素(0、20、40、80、160μg/mL)及5⁃FU(12.5μg/mL)干预后,采用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测凋亡因子BAX、Bcl⁃2及EMT相关蛋白表达,Western blot、RT⁃PCR检测BLVRA蛋白及mRNA表达。结果汉黄芩素能抑制结肠癌HT29及SW620细胞的增殖,且呈时间及浓度依赖性(P<0.01);促进细胞凋亡,抑制Bcl⁃2蛋白的表达,促进BAX蛋白的表达,抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭能力,呈浓度依赖性(P<0.01);汉黄芩素能够增加E⁃Cadherin的表达,降低Vimentin及snail蛋白的表达,抑制EMT进程,呈浓度依赖性(P<0.05,P<0.01);不同浓度汉黄芩素均能降低两种CRC细胞中BLVRA的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论汉黄芩素能够抑制结肠癌HT29及SW620细胞的增殖及迁移和侵袭能力,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤EMT进程,且随着药物浓度升高其抑制作用呈现出时间和浓度依赖性,这些作用可能是通过下调胆绿素还原酶A(BLVRA)的表达发生。

关键词：汉黄芩素结肠癌抑制作用胆绿素还原酶A