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巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的作用及基于网络药理学的机制研究

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药学实践与服务 2024年第7期42卷 285-290,296页

作者：姜涛徐卫凡蒋益萍夏天爽辛海量海军军医大学药学系生药学教研室上海200433 福建中医药大学药学院福建福州350122

目的探讨巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的骨形成作用及其机制。方法以新生24 h Wistar大鼠所分离的成骨细胞为研究对象,用Aβ1-42寡聚体对成骨细胞进行损伤,并用巴戟天丸组方水提物进行药物干预。分别采用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)活... 详细信息

目的探讨巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的骨形成作用及其机制。方法以新生24 h Wistar大鼠所分离的成骨细胞为研究对象,用Aβ1-42寡聚体对成骨细胞进行损伤,并用巴戟天丸组方水提物进行药物干预。分别采用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)活性检测、过氧化氢酶(CAT)活性检测、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测、谷胱甘肽(GSH)活性检测以及丙二醛(MDA)活性检测。采用蛋白质印迹法检测骨形成相关蛋白骨形态发生蛋白2(BMP2)、成骨特异性转录因子(RUNX-2)、骨保护蛋白(OPG)的表达水平;明确巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的作用后,采用网络药理学方法对潜在的作用机制进行预测。结果巴戟天丸组方可显著促进Aβ损伤成骨细胞的增殖,提高ALP、SOD、GSH活性,抑制MDA活性,并促进骨形成相关蛋白BMP2、RUNX-2、OPG的表达。网络药理学分析显示,巴戟天丸组方发挥改善Aβ损伤成骨细胞的作用主要与AGE-RAGE信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路以及神经活性配体与受体的相互作用通路等有关。结论明确巴戟天丸组方具有改善Aβ损伤成骨细胞的作用,并通过网络药理学方法探究其相关作用通路,为传统方剂巴戟天丸抗骨质疏松的临床应用提供借鉴。

关键词：成骨细胞巴戟天丸 Aβ沉积网络药理学

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中药青蒿抗氧化活性的谱效关系研究

药学实践与服务 2024年第5期42卷 203-210,216页

作者：赖立勇夏天爽徐圣焱蒋益萍岳小强辛海量海军军医大学药学系生药学教研室上海200433 海军军医大学中医系上海200433 海军军医大学第二附属医院中医科上海200003

目的通过考察11批青蒿的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱与体外抗氧化活性的谱效关系,筛选出青蒿体外抗氧化作用的药效物质基础成分。方法色谱柱为Aglient C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.2%磷酸水-甲醇,流速为1 ml/min;柱温... 详细信息

目的通过考察11批青蒿的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱与体外抗氧化活性的谱效关系,筛选出青蒿体外抗氧化作用的药效物质基础成分。方法色谱柱为Aglient C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.2%磷酸水-甲醇,流速为1 ml/min;柱温为室温;检测波长为220 nm;进样量为10μl。以异绿原酸A为参照,采用《中药指纹图谱相似度评价系统》(2012版)确定并记录11批青蒿样品的共有峰。检测不同青蒿样品对DPPH自由基和ABTS自由基的清除效率,作为其抗氧化评价,利用SIMCA14.1软件构建PLSR模型并分析谱效关系。结果11批青蒿样品中共检测出48个共有峰,鉴定11个成分,分别为东莨菪内酯、滨蒿内酯、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、木犀草素、芹菜素、猫眼草黄素、青蒿素、艾黄素和青蒿酸。检测11批青蒿样品的DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力,谱效关系显示,异绿原酸A、B、C和滨蒿内酯峰面积与青蒿的DPPH自由基和ABTS自由基清除能力正相关,且变量投影值大于1,表明这些成分在青蒿的体外抗氧化方面有显著贡献。结论本研究考察了青蒿中不同物质的体外抗氧化能力,证明异绿原酸A、B、C和滨蒿内酯为青蒿的体外抗氧化活性的药效物质基础。

关键词：青蒿高效液相色谱法抗氧化谱效关系药效物质基础

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黑蒜药食功能研究进展

食品与药品 2024年第1期26卷 I0011-I0017页

作者：关梦瑶林丽娟蒋益萍夏天爽辛海量福建中医药大学药学院福建福州350000 海军军医大学药学院上海200433

黑蒜是大蒜经高温高湿发酵制得的一种食品,具有较高的营养价值,近年逐渐受到青睐。研究表明,黑蒜含有类黑精、蛋白质、多酚、含硫化合物、多糖等活性化学成分,有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血脂等药理作用,具有较好的开发前景。本文对黑... 详细信息

黑蒜是大蒜经高温高湿发酵制得的一种食品,具有较高的营养价值,近年逐渐受到青睐。研究表明,黑蒜含有类黑精、蛋白质、多酚、含硫化合物、多糖等活性化学成分,有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血脂等药理作用,具有较好的开发前景。本文对黑蒜的化学成分、药理作用、加工工艺及相关产品品类等相关内容进行综述,并对黑蒜未来的开发应用进行展望。

关键词：黑蒜化学成分药理作用加工工艺产品品类研究进展

基于抗氧化机制的中药及其化学成分在骨质疏松中的应用

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海军军医大学学报 2022年第8期43卷 943-950页

作者：赖立勇徐圣焱夏天爽蒋益萍辛海量海军军医大学(第二军医大学)中医系上海200433 海军军医大学(第二军医大学)药学系生药学教研室上海200433

目前,氧化应激在骨质疏松发病中的地位日益突出。研究发现高水平的活性氧及相关氧化产物的蓄积可打破骨代谢平衡,造成骨质疏松症的发生。近年来,中药及其化学成分通过改善氧化应激防治骨质疏松的研究日益增多,并取得较多进展。本文在对... 详细信息

目前,氧化应激在骨质疏松发病中的地位日益突出。研究发现高水平的活性氧及相关氧化产物的蓄积可打破骨代谢平衡,造成骨质疏松症的发生。近年来,中药及其化学成分通过改善氧化应激防治骨质疏松的研究日益增多,并取得较多进展。本文在对氧化应激与骨质疏松症关系进行总结的基础上,对常见中药及其抗氧化化学成分如黄酮类、多酚类、皂苷类等经由抗氧化应激机制防治骨质疏松症的研究做出简要综述,以期为临床应用、新药研发等提供借鉴。

关键词：氧化性应激骨质疏松中药化学成分抗氧化剂

巴戟天和熟地黄抗糖皮质激素性骨质疏松的代谢组学研究

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巴戟天和熟地黄抗糖皮质激素性骨质疏松的代谢组学研究

作者：夏天爽中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

糖皮质激素性骨质疏松(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)是由于长期服用糖皮质激素(glucocorticoid,GC)所致的骨密度及骨质量下降,且易于诱发骨折的全身代谢性骨病,其高发病率和高致残率使得抗GIOP药物的研发成为当今被广泛... 详细信息

糖皮质激素性骨质疏松(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)是由于长期服用糖皮质激素(glucocorticoid,GC)所致的骨密度及骨质量下降,且易于诱发骨折的全身代谢性骨病,其高发病率和高致残率使得抗GIOP药物的研发成为当今被广泛关注的热点。中药具有安全、有效且副作用小的特点,中医根据“肾主骨”理论,采用补肾中药防治糖皮质激素诱导的骨质疏松症已获得越来越多的认可。中药巴戟天为茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How.的干燥根,具有补肾助阳、祛风除湿的功效,是我国传统的补肾阳中药。中药熟地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.干燥块根的炮制加工品,具有补血滋阴、益精填髓的功效,是我国传统的补肾阴中药。研究表明,巴戟天、熟地黄及其活性成分具有确切的抗老年性骨质疏松和绝经后骨质疏松的作用,二者抗GIOP的作用有待阐明。更为重要的是巴戟天和熟地黄作为补肾阳和补肾阴中药,其防治GIOP的作用的作用特点和机制有待阐明。本研究以地塞米松诱导的骨质疏松大鼠和地塞米松损伤的成骨细胞为模型,通过药效学观察及基于UHPLC-Q-TOF/MS代谢组学分析,揭示巴戟天和熟地黄防治糖皮质激素诱导的骨质疏松症的作用特点和机制,以期为其临床应用提供科学的依据。一、巴戟天和熟地黄对GIOP大鼠的作用及其代谢组学研究采用尾静脉注射地塞米松(DEX)的方法造成大鼠骨质疏松症,观察巴戟天和熟地黄对GIOP大鼠血清中骨代谢相关生化指标、骨密度和骨组织形态计量参数的影响及尿液代谢组学变化。结果显示,巴戟天和熟地黄均可显著改善GIOP大鼠的骨组织形态、增加骨密度,并在一定程度上调节骨形成标志物碱性磷酸酶(ALP)、骨形态蛋白2(BMP-2)的表达,降低骨吸收标志物I型胶原C端肽(CTX-I)、尿脱氧吡啶磷(DPD)的表达,表明巴戟天和熟地黄均可减少糖皮质激素诱导的骨丢失。尿液代谢组学研究结果显示DEX可引起27个内源性代谢物水平发生显著的变化,巴戟天作用后可使参与花生四烯酸(AA)代谢、逆行内源性大麻素信号通路以及氨基酸代谢等的15个差异代谢物发生显著回调;熟地黄作用后可使参与类固醇生物合成及氨基酸代谢等10个差异代谢物发生显著回调。进一步的代谢通路分析表明巴戟天通过AA代谢通路调控GIOP模型大鼠的骨代谢,熟地黄通过类固醇生物合成路径调控GIOP模型大鼠的骨代谢。二、巴戟天和熟地黄对DEX损伤成骨细胞的作用及其代谢组学研究以DEX损伤的新生大鼠颅盖骨成骨细胞为模型,观察巴戟天和熟地黄及其主要活性成分对DEX损伤的成骨细胞形成、分化和骨矿化结节形成的影响及基于代谢组学的调控机制。结果显示,巴戟天及其主要活性成分水晶兰苷(Mon)、甲基异茜草素-1-甲醚(Rub),及熟地黄及其主要活性成分梓醇(Cat)、毛蕊花糖苷(Act)均可显著提高DEX损伤成骨细胞的增殖、分化及骨矿化水平,促进成骨细胞的骨形成。代谢组学研究结果显示DEX可引起成骨细胞23个内源性代谢物水平发生显著的变化。巴戟天可使参与花生四烯酸代谢及谷氨酰胺代谢等7个差异代谢物水平发生回调;熟地黄可使参与氨基酸代谢及生物合成等通路的11个差异代谢物水平发生显著回调,表明在成骨细胞水平上巴戟天通过花生四烯酸通路调控DEX损伤的成骨细胞的代谢,熟地黄通过氨基酸通路调控DEX损伤的成骨细胞的代谢。三、巴戟天、熟地黄及其主要成分对主要代谢通路关键蛋白表达的影响以DEX损伤的成骨细胞为模型,应用Western blotting观察巴戟天、熟地黄及其主要活性成分Mon、Rub、Cat、Act对代谢通路上的关键蛋白表达的影响,以进一步确证巴戟天和熟地黄防治GIOP的机制。结果显示,与DEX模型组相比,巴戟天可显著增加AA代谢通路中5-脂氧合酶(5-LOX)和白三烯A4水解酶(LTA4H)的表达,显著抑制环氧合酶2(Cox-2)及前列腺素E2受体3(EP3)的表达。熟地黄可显著促进类固醇生物合成途径中芳香化酶(CYP19A1)和细胞色素P450 17A1(CYP17A1)的表达,显著降低11β-羟基类固醇脱氢酶(HSD11B1)的表达水平。这些结果进一步表明巴戟天通过干预AA代谢通路减少糖皮质激素诱导的骨丢失;熟地黄通过类固醇生物合成途径减少糖皮质激素诱导的骨丢失。

关键词：糖皮质激素性骨质疏松巴戟天熟地黄代谢组学花生四烯酸类固醇

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的中药海龙血清药物化学分析

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中华中医药学刊 2023年第8期41卷 191-195页

作者：白换换蒋益萍夏天爽王娜妮辛海量海军军医大学药学院上海200433 陕西中医药大学药学院陕西咸阳712046 浙江省中医药研究院中药研究中心浙江杭州310007

目的基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(Ultra Performance LC-Quadrupole-Time of Flight-Mass Spectrometry, UPLC-Q-TOF-MS)技术对海龙醇提物进行血清药物化学分析。方法健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠按1 g/kg剂量经口给予海龙醇提物,给药3 d后采集尾静脉血清样品。采用UPLC-Q-TOF-MS技术,在色谱柱为XBridge BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm, 2.5μm);流动相为0.1%甲酸水和乙腈梯度2洗脱;流速为0.4 mL/min;柱温为40℃,正负离子检测模式下对血清样品进行总离子检测、二级碎片离子扫描,初步鉴定大鼠灌胃海龙醇提物后的血中原型成分及其代谢产物。结果在大鼠血清中共检测到5个甾体成分,包括1个原型4个代谢产物。分别为胆甾醇(M0)、胆甾-4-烯-3-酮(M1)、雄甾烷二醇(M2)、胆甾-4,6-二烯-3-酮(M3)和5-胆甾烯-3β-醇-7-酮(M4)。结论胆甾醇为海龙醇提物的主要入血成分,以羟基化和重排产物等形式被代谢。

关键词：海龙 UPLC-Q-TOF-MS 入血成分代谢产物甾体

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基于网络药理学的青蒿治疗肾阴虚型糖皮质激素性骨质疏松机制研究

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药学实践与服务 2023年第11期41卷 672-679页

作者：赖立勇夏天爽岳小强辛海量海军军医大学药学院生药学教研室上海200433 海军军医大学中医系上海200433 海军军医大学第二附属医院中医科上海200003

目的通过网络药理学和体外实验,对青蒿治疗肾阴虚型糖皮质激素性骨质疏松(GIOP)的潜在作用靶点及相关信号通路进行预测和初步验证。方法通过TCMSP数据库和Uniprot数据库获取青蒿药物靶点并确定目标靶点基因名;通过GeneCards数据库、O... 详细信息

目的通过网络药理学和体外实验,对青蒿治疗肾阴虚型糖皮质激素性骨质疏松(GIOP)的潜在作用靶点及相关信号通路进行预测和初步验证。方法通过TCMSP数据库和Uniprot数据库获取青蒿药物靶点并确定目标靶点基因名;通过GeneCards数据库、OMIM数据库和Drugbank数据库获取肾阴虚型GIOP的靶点基因,与药物靶点基因交叉分析获得共同作用靶点基因;利用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并利用Cytoscape软件进行可视化分析和核心靶点筛选;通过Metascape数据库对所有共同靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,最后通过体外实验对预测结果进行验证。结果筛选出98个青蒿治疗肾阴虚型GIOP的作用靶点,其中核心基因17个。GO和KEGG功能富集分析结果表明,青蒿治疗肾阴虚型GIOP与激素应答、细胞死亡的正向调节和细胞外刺激应答等生物过程,以及PI3K/AKT、AGE/RAGE、MAPK和IL-17等信号通路有关,其中PI3K/AKT信号通路上富集的基因数最多。体外实验结果显示,青蒿可以促进地塞米松(DEX)损伤的成骨细胞的增殖,提高碱性磷酸酶(ALP)活性,激活PI3K/AKT通路,促进AKT的磷酸化。结论青蒿治疗肾阴虚型GIOP具有多靶点-多通路的特点,可以通过多条途径促进成骨细胞的增殖、分化,其中PI3K/AKT信号通路是一条重要的通路,青蒿治疗肾阴虚型GIOP可能与其能够促进PI3K/AKT信号通路,促进AKT的磷酸化有关。

关键词：青蒿肾阴虚糖皮质激素性骨质疏松地塞米松成骨细胞

中国城市PM_(2.5)污染暴露不平等及其驱动因素——基于Theil指数和LMDI分解

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中国环境科学 2024年第1期44卷 555-566页

作者：马本秦露夏天辰中国人民大学环境学院北京100872

聚焦大气污染物PM_(2.5),对2015~2021年污染物浓度进行人口规模赋权,构建中国城市PM_(2.5)污染暴露水平指标,基于GINI系数和Theil指数测度污染暴露不平等,并按城市行政层级、省份进行差异分解;基于对数平均迪氏指数分解法(LMDI),分别对... 详细信息

聚焦大气污染物PM_(2.5),对2015~2021年污染物浓度进行人口规模赋权,构建中国城市PM_(2.5)污染暴露水平指标,基于GINI系数和Theil指数测度污染暴露不平等,并按城市行政层级、省份进行差异分解;基于对数平均迪氏指数分解法(LMDI),分别对污染暴露水平、不平等程度进行驱动因素分解,探究其变化背后的社会经济因素.结果表明:中国城市PM_(2.5)污染暴露不平等总体温和,GINI系数保持在0.2以内且呈递减趋势.不同行政级别城市间未表现出污染暴露不平等,而省际差异对污染暴露不平等的贡献达68.4%;总体上能源的污染暴露乘数、政府绿色支出能耗强度是PM_(2.5)污染暴露水平的主要抑制因素,对污染暴露水平的驱动贡献超过60%.政府支出结构、支出规模、经济发展和人口因素对PM_(2.5)污染暴露起促增作用,但各因素在不同层级的城市间具有异质性;能源的污染暴露乘数、绿色支出能耗强度对不平等的动态抑制作用弱化,主要依靠能源绿色化的治污策略面临挑战.据此提出更好发挥政府作用,持续降低中国PM_(2.5)污染暴露水平,实现环境公共服务更加均等化的政策启示.

关键词：大气质量污染暴露水平环境不平等泰尔指数动态因素分解 PM_(2.5)

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动物药抗骨质疏松研究概况

药学实践与服务 2023年第1期41卷 8-13页

作者：张警文夏天爽蒋益萍辛海量福建中医药大学药学院福建福州350122 海军军医大学药学院上海200433

骨质疏松症是以骨量低下,骨微结构破坏,骨脆性增加,易发生骨折为特征的全身性骨代谢疾病,多见于老年人群。动物药作为天然药物的重要组成部分,具有来源广泛、化学成分复杂、药理作用广等特点,在抗骨质疏松领域具有广泛的应用。本文对几... 详细信息

骨质疏松症是以骨量低下,骨微结构破坏,骨脆性增加,易发生骨折为特征的全身性骨代谢疾病,多见于老年人群。动物药作为天然药物的重要组成部分,具有来源广泛、化学成分复杂、药理作用广等特点,在抗骨质疏松领域具有广泛的应用。本文对几种主要动物药抗骨质疏松的药理作用及其应用进行概述,并就目前存在的问题进行探讨,以期为动物药抗骨质疏松的发展提供借鉴。

关键词：动物药骨质疏松药理作用补益活血化瘀