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抗鼻咽癌单克隆抗体BAC5单链抗体原核表达载体的构建和表达

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中山大学学报（医学科学版） 2005年第B3期26卷 6-9页

作者：吴涛唐彩华肖锡宾梁昌盛刘长征中山大学中山医学院实验核医学教研室广东广州510080 中山大学肿瘤防治中心实验研究部广东广州510080

【目的】构建抗鼻咽癌单克隆抗体 BAC5单链抗体的原核表达载体并观察其表达,为开展抗鼻咽癌单链抗体的进一步研究奠定基础。【方法】应用 RT-PCR 技术,扩增出鼻咽癌单克隆抗体 BAC5的轻链、重链可变区基因,通过一段编码肽的序列进行连接... 详细信息

【目的】构建抗鼻咽癌单克隆抗体 BAC5单链抗体的原核表达载体并观察其表达,为开展抗鼻咽癌单链抗体的进一步研究奠定基础。【方法】应用 RT-PCR 技术,扩增出鼻咽癌单克隆抗体 BAC5的轻链、重链可变区基因,通过一段编码肽的序列进行连接,构建 BAC5单链抗体表达载体 pET22b-scFv,导入 BL21(DE3)表达菌,并进行诱导表达。SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达。【结果】克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET22b-scFv 表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主。【结论】成功构建了能表达 BAC5单链抗体的原核表达载体。

关键词：单链抗体基因克隆鼻咽癌

狂犬病毒5aG株核蛋白基因的克隆及序列分析

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中华实验和临床病毒学杂志 1997年第1期11卷 13-15页

作者：欧阳沁春唐彩华郑坚朱家鸿卫生部武汉生物制品研究所

用ＲＴ、ＲＡＣＥ、ＰＣＲ等方法，从中国狂犬疫苗株（５ａＧ）病毒感染的鼠脑组织中扩增病毒核蛋白基因，用双链测序法进行了全基因核酸序列分析。结果表明：该基因开放阅读框架全长１３５３ｂｐ，编码４５０个氨基酸。与其它３株狂犬... 详细信息

用ＲＴ、ＲＡＣＥ、ＰＣＲ等方法，从中国狂犬疫苗株（５ａＧ）病毒感染的鼠脑组织中扩增病毒核蛋白基因，用双链测序法进行了全基因核酸序列分析。结果表明：该基因开放阅读框架全长１３５３ｂｐ，编码４５０个氨基酸。与其它３株狂犬病毒核蛋白相比，核酸序列同源性为９０％～９６％，氨基酸序列同源性为９５％～９６％。表明核蛋白保守性较好。

关键词：狂犬病毒序列分析聚合酶链反应基因病毒

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梅开二度?

咬文嚼字 2002年第3期 35-36页

作者：唐彩华

2001年3月16日《科学时报》有篇杂文说:“有人把考场比作足球赛,其实再激烈再紧张再扣人心弦的足球赛,输了还可以东山再起、卷土重来、梅开二度。”把“考场”比作“足球赛”是否恰当,我们姑且不论;这“梅开二度”实在令人费解。这个典... 详细信息

2001年3月16日《科学时报》有篇杂文说:“有人把考场比作足球赛,其实再激烈再紧张再扣人心弦的足球赛,输了还可以东山再起、卷土重来、梅开二度。”把“考场”比作“足球赛”是否恰当,我们姑且不论;这“梅开二度”实在令人费解。这个典故来源于“梅花

关键词：足球赛球员考场

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CpG基元作为免疫佐剂

国际生物制品学杂志 1999年第5期 236-237页

作者：唐彩华

非甲基化的CpG基元（5’侧翼为两个嘌吟,3’侧翼为两个嘧啶）能够诱发免疫应答,诱生IgM、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素6(IL-6）、IL-12、IL-18、σ肿瘤坏死因子（TNF-α）。据此,作者设计了两段含该基元的寡核苷酸GCTAGACGTTAGCGT和T... 详细信息

非甲基化的CpG基元（5’侧翼为两个嘌吟,3’侧翼为两个嘧啶）能够诱发免疫应答,诱生IgM、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素6(IL-6）、IL-12、IL-18、σ肿瘤坏死因子（TNF-α）。据此,作者设计了两段含该基元的寡核苷酸GCTAGACGTTAGCGT和TCAACGTT。作者构建了编码疟疾环子孢子蛋白（CSP）的DNA疫苗1012/PyCSP,去除1012/PyCSP的多接头,并用人组织纤溶酶原激活物基因的5’非翻译区和前导序列替代之,获得1020/PyCSP。在1020/PyCSP的增强子上游引入两拷贝的

关键词：基元 OVA 甲基化疫苗 CSP 烷基化菌苗 CPG CpG

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狂犬病病毒载体稳定表达外源基因

国际生物制品学杂志 1997年第5期 228-229页

作者：唐彩华

以DNA病毒及正链RNA病毒为载体的研究已取得很大进展,而以负链RNA病毒为载体的研究直到近几年才获得较大突破.在以前的研究中,作者从已克隆的狂犬病病毒(RV)全长.cDNA获得了具有感染性的活RV,这为RV作为基因工程载体铺平了道路.在本研究... 详细信息

以DNA病毒及正链RNA病毒为载体的研究已取得很大进展,而以负链RNA病毒为载体的研究直到近几年才获得较大突破.在以前的研究中,作者从已克隆的狂犬病病毒(RV)全长.cDNA获得了具有感染性的活RV,这为RV作为基因工程载体铺平了道路.在本研究中,作者以克隆的SAD B19株全长cDNA为基础,在RV基因组的G和(?)基因间插入一段N/P基因边界序列(含转录终止子及新的转录起始信号).然后将氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因克隆在此序列下游,或者用以上序列(N/P基因边界序列及CAT全基因)替换(?)基因,从而获得两株克隆了外源基因的重组RV cDNA pSADXCAT及pSADXCAT.用表达RV N、P及L蛋白的

关键词：外源基因 RV 狂犬病病毒弹状病毒病毒载体

用单克隆抗体对亚洲乙型脑炎病毒作抗原性分析

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国际生物制品学杂志 1996年第5期 228-229页

作者：唐彩华

作者制备了两组分别抗乙型脑炎病毒(JEV)Muar株和691004株的单克隆抗体(McAb)来分析亚洲分离到的JEV株的抗原性关系。

关键词：单克隆抗体乙型脑炎病毒虫媒病毒抗原性亚洲

SL-环糊精/鲨烷/水作为一种新型安全的疫苗佐剂

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国际生物制品学杂志 1999年第4期 189-190页

作者：唐彩华

合成的含有硫酸基及脂质基因（SL）的多糖（SL-Ficoll400）与鲨烷/水构成的复合物具有较好的佐剂性,但它存在两个问题:（1）引起局部反应;（2）在不同温度下的稳定性。为此,作者试图找出更合适的多糖替代Fi-coll400,以解决上述问题。

关键词：环糊精多糖矿物油多聚糖碳水化合物鲨烷佐剂性 SL 反应原性

BAC_5-scFv的表达、复性及活性检测

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第1期22卷 67-70页

作者：唐彩华肖锡宾吴涛梁昌盛刘长征中山大学基础医学院实验核医学教研室广东广州510080 中山大学肿瘤防治中心实验研究部广东广州510080

目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱... 详细信息

目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱纯化变性的scFv。经稀释、透析及尿素梯度凝胶层析柱3种方法进行复性。用细胞免疫组化染色和蛋白印迹法(Western blot),鉴定复性后的BAC5-scFv的免疫活性。结果Ni-NTA His Bind亲和层析柱能有效纯化变性的scFv。以尿素梯度凝胶层析柱复性的蛋白回收率最高。免疫细胞化学染色法检测及Western blot分析证实,复性后的BAC5-scFv可与CNE2细胞上的抗原特异性结合。结论以包涵体形式表达的BAC5-scFv经变性、纯化及复性后,获得良好的免疫活性,为大量制备具有活性的BAC5-scFv,并用于鼻咽癌的放射免疫显像和治疗研究奠定了基础。

关键词：包涵体单链抗体复性鼻咽癌

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《生活中的轴对称》第一课时教学设计与点评

新教育（海南） 2011年第12期 32-33页

作者：唐彩华魏婕海口市第九中学

一、教学分析(一)教学内容分析本节课是华东师大版七年级下册第十章《轴对称》中的第一节内容,它是小学学习"对称图形"的进一步拓展学习,同时也为今后研究"图形的平移""等腰三角形"的轴对称性及相关性质的学习打下基础。因此。

关键词：轴对称图形对称轴等腰三角形教学设计第一课