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文艺生活（艺术中国） 2021年第9期 153-154页

作者：周雪平不详

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周雪平（习平）

文艺生活（艺术中国） 2019年第10期 132-133页

作者：周雪平(习平) 不详

在中国广东侵染胜红蓟的中国胜红蓟黄脉病毒的鉴定和全基因组分析

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植物保护 2024年第3期50卷 266-271页

作者：乔蕊周雪平李方方中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害综合治理全国重点实验室北京100193

2022年9月在广东省罗定市发现了叶片表现为黄色网状症状的胜红蓟病株。为了明确胜红蓟叶片的黄脉症状是否由双生病毒感染引起,本研究使用检测双生病毒的简并引物PA/PB进行PCR扩增,获得约500 bp的片段。根据该序列设计特异性引物扩增并... 详细信息

2022年9月在广东省罗定市发现了叶片表现为黄色网状症状的胜红蓟病株。为了明确胜红蓟叶片的黄脉症状是否由双生病毒感染引起,本研究使用检测双生病毒的简并引物PA/PB进行PCR扩增,获得约500 bp的片段。根据该序列设计特异性引物扩增并且克隆得到了病毒DNA-A的全基因组序列。通过BLAST比对发现,获得的DNA-A与中国胜红蓟黄脉病毒(ageratum yellow vein China virus,AYVCNV)海南分离物(OQ421190)的DNA-A的相似性最高,相似度为98.11%。系统进化树分析显示,获得的病毒DNA-A与海南分离物(OQ421190)在同一分支,说明具有较近的亲缘关系。以上研究结果表明侵染胜红蓟的病毒是AYVCNV的分离物。这是关于AYVCNV在广东地区侵染胜红蓟的首次报道,可为当地病毒病的防控提供参考。

关键词：中国胜红蓟黄脉病毒 PCR技术基因组序列系统发育分析

侵染中国河北大豆的大豆花叶病毒的鉴定和全基因组序列分析

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植物保护 2024年第4期50卷 39-47页

作者：杨菲张明振周雪平李方方中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害综合治理全国重点实验室北京100193 河北省农林科学院植物保护研究所农业农村部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室河北省农业有害生物综合防治技术创新中心河北省作物有害生物综合防治国际科技联合研究中心保定071000

本研究利用小RNA深度测序技术在河北卢龙大豆叶片上检测到6株大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV),命名为SMV-Gm1~SMV-Gm6。根据小RNA深度测序结果和参考基因组序列设计引物克隆了SMV河北分离物的基因组序列。测序结果经拼接后获得... 详细信息

本研究利用小RNA深度测序技术在河北卢龙大豆叶片上检测到6株大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV),命名为SMV-Gm1~SMV-Gm6。根据小RNA深度测序结果和参考基因组序列设计引物克隆了SMV河北分离物的基因组序列。测序结果经拼接后获得了6个SMV基因组全长序列,大小分别为9588 nt(SMV-Gm1、SMV-Gm3和SMV-Gm5)和9584 nt(SMV-Gm2、SMV-Gm4和SMV-Gm6)。开放阅读框位于基因组第132位至第9332位核苷酸,编码一个多聚蛋白(分子量约为350 kD)。BLAST比对和系统发育分析发现,SMV-Gm1、SMV-Gm3和SMV-Gm5与江苏SMV分离物(登录号:MH919386)的基因组核苷酸序列相似性最高,为98.06%~98.07%,且遗传距离较近,并与江苏、浙江和山西SMV分离物聚为一小簇;SMV-Gm2、SMV-Gm4和SMV-Gm6与韩国SMV分离物(登录号:FJ640954)的基因组核苷酸序列相似性最高,为98.48%~98.51%,且遗传距离较近。

关键词：大豆花叶病毒小RNA深度测序基因组序列

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m^(6)A修饰与植物RNA病毒侵染

中国科学：生命科学 2024年第3期54卷 447-458页

作者：葛林豪潘福安何浩贾明轩李方方周雪平中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害综合治理全国重点实验室北京100193 浙江大学生物技术研究所水稻生物学国家重点实验室杭州310058

N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)是真核生物m RNA中丰度最高的RNA转录后化学修饰.RNA的m^(6)A修饰主要由甲基化转移酶(writers)、去甲基化酶(erasers)以及阅读蛋白(reader proteins)共同调控.近年的研究表明,m^(6)A修饰在植物病毒侵染中发挥了重要作用,相关调控机制成为植物病毒领域的研究热点.本文概述了植物RNA m^(6)A修饰相关蛋白的基本组成和m^(6)A修饰的检测技术,重点阐述了m^(6)A修饰在植物与RNA病毒互作中的作用,并提出了今后植物RNA病毒m^(6)A修饰功能研究的方向.

关键词： m^(6)A修饰植物植物RNA病毒

侵染北京、宁夏和内蒙古番茄的番茄黄曲叶病毒的鉴定和全基因组分析

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植物保护 2024年第5期50卷 56-62页

作者：陈威赵鑫茹周惠史娟杨长楷杨育揆江彤周雪平杨秀玲安徽农业大学植物保护学院合肥230036 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害综合治理全国重点实验室北京100193 宁夏大学农学院银川750021 云南思农蔬菜种业发展有限责任公司楚雄651300 浙江大学生物技术研究所杭州310058

为明确从北京、宁夏和内蒙古采集的15份疑似病毒感染的番茄样本是否感染番茄黄曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV),利用TYLCV的特异性引物对采集的样本进行检测,结果从8个样本中扩增到TYLCV片段,并获得了8个样本TYLCV的全... 详细信息

为明确从北京、宁夏和内蒙古采集的15份疑似病毒感染的番茄样本是否感染番茄黄曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV),利用TYLCV的特异性引物对采集的样本进行检测,结果从8个样本中扩增到TYLCV片段,并获得了8个样本TYLCV的全长序列。序列分析发现,样本NS-1、NS-5、NS-8、NS-9、NS-13和NS-14的全长核苷酸序列与北京分离物TYLCV-BJTZ的相似性最高,达99.03%~99.42%;NS-2与陕西分离物TYLCV-JY-2的相似性最高,为99.60%;NS-7与江苏分离物TYLCV-YZ02的相似性最高,为99.35%。表明这8个TYLCV全基因组均为TYLCV的不同分离物。系统进化树分析发现,这8个TYLCV分离物与2017年鉴定的北京分离物聚成一个单独的分支,说明与北京分离物的亲缘关系最近。研究结果显示,TYLCV已经扩散到宁夏和内蒙古,在我国分布范围不断扩大。

关键词：番茄黄曲叶病毒 PCR 基因组序列

缺失GDD保守区的黄瓜花叶病毒复制酶基因的克隆及植物表达载体构建

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2001年第5期27卷 531-534页

作者：温瑞郑重周雪平浙江大学生物技术研究所浙江杭州310029 浙江大学植物保护系浙江杭州310029

以 CMV亚组 1株系 Fny- CMV RNA2基因组为模板 ,根据其序列设计引物进行 PCR扩增 ,得到 2 .5 kb的全长复制酶基因扩增产物 .对此产物进行纯化 ,并用 N co I和 Bsp HI进行双酶切 ,得到 3个片段 .将不含有 GDD保守区的 2个片段用 T4 DNA... 详细信息

以 CMV亚组 1株系 Fny- CMV RNA2基因组为模板 ,根据其序列设计引物进行 PCR扩增 ,得到 2 .5 kb的全长复制酶基因扩增产物 .对此产物进行纯化 ,并用 N co I和 Bsp HI进行双酶切 ,得到 3个片段 .将不含有 GDD保守区的 2个片段用 T4 DNA连接酶连接 ,并对连接产物进行 PCR扩增 ,得到 2 .2kb左右缺失 GDD保守区的黄瓜花叶病毒复制酶基因的扩增产物 .将其克隆到 p GEM- T Easy Vector上 ,进行序列测定 ,结果表明 GDD保守区确已缺失 .该缺失不导致开放阅读框架的移码 .将缺失 GDD保守区的基因定向克隆到植物表达载体 p BI12 1中 ,并经三亲交配导入根癌农杆菌中 ,经 PCR及酶切鉴定。

关键词：黄瓜花叶病毒复制酶植物表达载体基因克隆 GDD保守区缺失

马铃薯X病毒云南分离物单克隆抗体的制备及其检测应用

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2005年第5期31卷 608-612页

作者：吴建祥周雪平浙江大学生物技术研究所浙江杭州310029

用马铃薯X病毒(Potato virusX,PVX)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗PVX单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞2B12和4E7,并分别制备它们的单抗腹水.2株单克隆抗体腹水间接ELISA效价在10-6以上... 详细信息

用马铃薯X病毒(Potato virusX,PVX)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗PVX单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞2B12和4E7,并分别制备它们的单抗腹水.2株单克隆抗体腹水间接ELISA效价在10-6以上,2B12和4E7的抗体类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链.利用这些单克隆抗体建立了抗原包被的间接ELISA(ACP-ELISA)检测PVX的方法.病叶经1∶600倍稀释、提纯PVX病毒浓度为2 ng/mL(每孔的病毒绝对量为0.2 ng)时,该方法仍能检测到病毒.利用ACP-ELISA方法测定了田间样品,发现PVX在马铃薯上发病很普遍.

关键词：马铃薯X病毒单克隆抗体 ACP—ELISA

病毒诱导的基因沉默及其在植物基因功能研究中的应用

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生物化学与生物物理进展 2004年第9期31卷 777-783页

作者：陶小荣周雪平崔晓峰钱亚娟浙江大学生物技术研究所杭州310029

RNA介导的基因沉默是近年来在生物体中发现的一种基于核酸水平高度保守的特异性降解机制 .病毒诱导的基因沉默 (virusinducedgenesilencing ,VIGS)是指携带植物功能基因cDNA的病毒在侵染植物体后 ,可诱导植物发生基因沉默而出现表型突... 详细信息

RNA介导的基因沉默是近年来在生物体中发现的一种基于核酸水平高度保守的特异性降解机制 .病毒诱导的基因沉默 (virusinducedgenesilencing ,VIGS)是指携带植物功能基因cDNA的病毒在侵染植物体后 ,可诱导植物发生基因沉默而出现表型突变 ,进而可以研究该目的基因功能 .至今 ,已经建立了以RNA病毒、DNA病毒、卫星病毒和DNA卫星分子为载体的VIGS体系 ,这些病毒载体能在多种寄主植物 (包括拟南芥、番茄和大麦 )上有效抑制功能基因的表达 .VIGS已开始应用于N基因和Pto基因介导的抗性信号途径中关键基因的功能研究、抗病毒相关的寄主因子研究以及植物代谢和发育调控研究 .在当前植物基因组或EST序列大量测定的情况下。

关键词：病毒诱导的基因沉默基因功能病毒载体

以直接斑点免疫结合测定法检测灰飞虱体内的水稻条纹病毒

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2005年第1期31卷 37-40页

作者：王贵珍周益军周雪平浙江大学生物技术研究所浙江杭州310029 江苏省农科院植保所江苏南京210014

利用过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记了水稻条纹病毒(RSV)的3株单克隆抗体,3株酶标抗体(HRP-3B9、HRP-2H2、HRP-2E5)的效价分别达到1:25600、1:1600、1:3200,直接ELISA方阵试验确定HRP-3B9的最佳工作浓度分别为1:5000.用HRP-3B9在硝酸... 详细信息

利用过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记了水稻条纹病毒(RSV)的3株单克隆抗体,3株酶标抗体(HRP-3B9、HRP-2H2、HRP-2E5)的效价分别达到1:25600、1:1600、1:3200,直接ELISA方阵试验确定HRP-3B9的最佳工作浓度分别为1:5000.用HRP-3B9在硝酸纤维素膜上采用直接和间接斑点免疫结合试验(DIBA)对灰飞虱体内RSV进行了检测.结果表明,DIBA法可有效地用于检测灰飞虱的带毒率,直接DIBA法比间接DIBA法灵敏度更高.故采用直接DIBA法对采自江苏10个县、市的灰飞虱带毒率进行了检测.

关键词：水稻条纹病毒 DIBA 酶标抗体灰飞虱