检索结果-南通市图书馆

6株牛传染性鼻气管炎病毒BICP4基因序列的同源性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2003年第2期25卷 92-95页

作者：李继昌童光志仇华吉薛强周艳君东北农业大学黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术室黑龙江哈尔滨150001

牛传染性鼻气管炎病毒的立即早期启动基因IER4 .2编码感染细胞蛋白BICP4基因。各种疱疹病毒的BICP4基因的Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ区变异性较大 ,并为其特征区。为了比较分离自不同牛种、不同部位的 5种病毒株BICP4蛋白I区基因的差异性 ,本文根据已... 详细信息

牛传染性鼻气管炎病毒的立即早期启动基因IER4 .2编码感染细胞蛋白BICP4基因。各种疱疹病毒的BICP4基因的Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ区变异性较大 ,并为其特征区。为了比较分离自不同牛种、不同部位的 5种病毒株BICP4蛋白I区基因的差异性 ,本文根据已发表的IBRVK2 2毒株重复序列IRs中BICP4的基因序列设计了一对特异性引物 ,对各毒株进行PCR扩增 ,均得到约 5 4 0bp的片段 ,将其克隆、测序并连同K2 2株进行同源性比较。结果表明 ,6株病毒的核苷酸序列及氨基酸序列同源性均在 98%以上 ,说明这些毒株重复序列中的早期基因高度保守。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 BICP4基因重复序列同源性分析

猪γ干扰素的体外表达及其多克隆抗血清的制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2004年第4期26卷 252-255页

作者：闫丽萍周艳君仇华吉魏萍童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

从健康仔猪前腔静脉无菌采血 ,分离外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,用猪γ干扰素 (IFN_γ)基因特异性引物通过RT_PCR扩增猪IFN_γ的全长cDNA序列 ,将其克隆到pMD18_T载体中 ,再亚克隆到pUC18和表达载体pET_30a中 ,经测序发现其序列与... 详细信息

从健康仔猪前腔静脉无菌采血 ,分离外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,用猪γ干扰素 (IFN_γ)基因特异性引物通过RT_PCR扩增猪IFN_γ的全长cDNA序列 ,将其克隆到pMD18_T载体中 ,再亚克隆到pUC18和表达载体pET_30a中 ,经测序发现其序列与GenBank报道的IFN_γ基因序列基本一致。将重组质粒pET_30a_IFN_γ转化大肠杆菌BL2 1,于 37℃经IPTG诱导表达 ,IFN_γ基因获得表达 ,表达产物以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 39%。经SDS_PAGE及Westernblot分析表明 ,表达的融合蛋白分子量约为 2 5ku。将包涵体用 8mol/L脲变性 ,用ProBondTMPurificationSysterm纯化 ,经透析复性 ,得到纯化的目的蛋白 ,含量可达 0 3mg/mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔三次 ,制备了高滴度的猪IFN_γ抗血清。本实验表达和纯化了猪IFN_γ ,并制备兔抗猪IFN_γ的抗血清 ,为下一阶段关于猪γ干扰素重组蛋白其应用奠定了基础。

关键词：猪γ干扰素重组细胞因子抗血清

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

统筹发展和安全提升数字化治理效能

人民论坛 2020年第33期 46-47页

作者：龙卿吉魏钰胡坚波孔祥涛汪玉凯周艳(整理) 江西省应急管理厅党委广东省佛山市应急管理局党委中国信息通信研究院中国应急管理学会中共中央党校(国家行政学院) 中国行政体制改革研究会清华大学公共安全研究院人民论坛

党的十九届五中全会提出,把安全发展贯穿国家发展各领域和全过程,防范和化解影响我国现代化进程的各种风险,筑牢国家安全屏障。统筹社会发展和安全,增强忧患意识,做到居安思危,是我们党治国理政的一个重大原则。在第七届国家治理高峰论... 详细信息

党的十九届五中全会提出,把安全发展贯穿国家发展各领域和全过程,防范和化解影响我国现代化进程的各种风险,筑牢国家安全屏障。统筹社会发展和安全,增强忧患意识,做到居安思危,是我们党治国理政的一个重大原则。在第七届国家治理高峰论坛年会上,领导干部和专家学者从实践和理论的角度对安全发展进行了深入研讨。

关键词：治理效能安全屏障治国理政统筹发展安全提升忧患意识数字化我国现代化进程

猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆与原核表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科学 2003年第11期36卷 1352-1356页

作者：吴丹童光志仇华吉薛强周艳君李景鹏东北农业大学生物工程系哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 哈尔滨150030

根据猪细小病毒 (porcineparvovirus ,PPV)NADL 2株非结构蛋白基因NS1序列设计引物 ,扩增出了PPVSY 99株的NS1基因 ,将其克隆到原核表达载体pET2 8a中 ,得到重组质粒SYNS1/pET2 8a。将SYNS1/pET2 8a转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,经IPTG... 详细信息

根据猪细小病毒 (porcineparvovirus ,PPV)NADL 2株非结构蛋白基因NS1序列设计引物 ,扩增出了PPVSY 99株的NS1基因 ,将其克隆到原核表达载体pET2 8a中 ,得到重组质粒SYNS1/pET2 8a。将SYNS1/pET2 8a转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,经IPTG诱导 ,使PPVNS1基因获得了表达 ,运用ELISA和Westernblotting证实了表达产物的特异性。经表达产物细胞定位分析 ,表达的NS1蛋白是以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变诱导时间或诱导剂IPTG的浓度 ,确定了表达NS1蛋白的最佳诱导条件 :IPTG终浓度为 0 .6mmol·L-1,诱导时间为 3h ,在大肠杆菌中最高表达含量为 17.8%。亲和层析后 ,得到了纯化的NS1蛋白 ,在Westernblotting检测中 ,纯化蛋白大大降低了反应背景。表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂来检测PPV的发生 ,而且还可用于鉴别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪

关键词：猪细小病毒 NS1

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

骨科患者术后疼痛舒适护理措施

解放军医药杂志 2012年第4期24卷 68-70页

作者：邹吉睿周艳解放军59医院脊柱创伤外科云南开远661600

舒适护理是护理活动加舒适的研究,可使患者在心理、生理、社会交往等方面达到愉快的状态或降低不愉快的程度,使患者身心处于最佳状态,以便更好地配合治疗,减少并发症,早日康复。

关键词：医院,骨科疼痛,手术后舒适护理

羽毛球大单元教学对初中学生注意力影响的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

羽毛球大单元教学对初中学生注意力影响的实验研究

日本脑炎病毒NS1基因在大肠杆菌中的高效表达

第十三届全国体育科学大会

作者：吉邵阳周艳丽河南大学体育学院

研究目的:"教育部关于全面深化课程改革落实立德树人根本任务的意见"指出,研制学生发展核心素养体系和学业质量标准是着力推进改革的关键领域和环节,核心素养驱动的课程改革已经成为世界多国教育领域的战略议题。体育与健康课程标准对... 详细信息

研究目的:"教育部关于全面深化课程改革落实立德树人根本任务的意见"指出,研制学生发展核心素养体系和学业质量标准是着力推进改革的关键领域和环节,核心素养驱动的课程改革已经成为世界多国教育领域的战略议题。体育与健康课程标准对知识学习的结果指向关键能力、必备品格与价值观念,这是核心素养时代课程改革的全新命题,《义务教育体育与健康课程标准(2022)》提出"加强课程内容的整体设计""专项运动技能的大单元教学"已成为核心素养下体育与健康课堂转型的核心。注意力在学生成长过程中不容忽视,它促进学生接受新知识、新事物,与个体认知和情感的发展互相促进,螺旋上升。然而,事实上我国青少年的注意力现状并不乐观,《全国青少年注意力状况调查》的数据显示我国绝大多数中小学生都存在注意力不集中的问题。虽然目前对青少年注意力发展的干预研究已日渐深入,但大多干预措施,比如仪器训练等从"运动-生理"的视角切入,实施干预的普遍性仍存局限。由于注意力是复杂的心理活动,加之近年来体育学领域对"身心一体"的价值回归,体育运动作为感知统合训练的注意力干预愈加受到业界和学界的重视。为进一步探索体育活动对注意力干预的方法形式、实施效果,对羽毛球大单元教学对青少年注意力的干预效果进行研究,以期为羽毛球相关的锻炼活动对注意力的干预提供实践依据。研究方法:研究以"羽毛球大单元教学对初中学生注意力的影响"为研究对象,实验过程中选取xx市xx中学七年级2个教学班共80名学生为实验对象,实验过程中实验组和对照组的安排均按照教学班的自然分组进行。(1)文献资料法:厘清"注意力影响干预"相关研究的背景,以及注意力测量工具的现状,并掌握实验法的一般流程和原则;(2)问卷调查法:研究采用殷恒婵(2004)等编制的"注意力测验",分别在实验前和实验后对实验组学生进行现场发放并回收问卷,使用"注意力测试表"调查工具,分别在实验前和实验后对两组学生的数据进行收集并做统计学分析;(3)实验法:采用羽毛球大单元教学方案对实验组学生进行长达12周共计36课时的2个连续的羽毛球大单元教学干预,对照组学生则采用传统课时计划的羽毛球教学设计,实验过程做到实验组与对照组教学内容、教学环境等因素的统一;(4)数理统计法:使用SPSS22.0统计软件对实验前和实验后收集的数据进行处理,研究对问卷收集的数据进行录入、筛查并做了ANCOVA分析,采用比较均值、独立样本T检验等统计学方法检验实验前、后实验组和对照组学生的注意力差异性。研究结果:(1)实验组和对照组学生注意力的前测结果呈现相似的特征,但在注意力广度、注意力转移、注意力稳定性、注意力分配等四个方面均无显著差异(P>0.05)。在实验开始前,对两组学生的注意力水平进行总体调查,实验组学生在"注意力广度"上得分最高(M=56.09, SD=10.04),其次是"注意力转移"(M=42.39,SD=8.01)和"注意力分配"(M=14.92,SD=2.43),"注意力稳定性"得分最低(M=9.01,SD=1.74);对照组学生在"注意力广度"上得分最高(M=55.09,SD=11.01),其次是"注意力转移"(M=43.14,SD=10.15)和"注意力分配"(M=15.12,SD=2.13),"注意力稳定性"得分最低(M=8.76,SD=2.14)。(2)对照组学生在传统课时计划的羽毛球教学后,注意力水平并无显著性提升。对照组学生在"注意力广度"上得分最高(M=56.95,SD=14.32),其次是"注意力转移"(M=45.44,SD=12.03)和"注意力分配"(M=18.13,SD=3.73),"注意力稳定性"得分最低(M=11.96,SD=3.71),差异分析得出,对照组学生注意力水平未显示明显提升(P>0.05)。(3)在对实验组学生进行长达12周共计36课时的2个连续的羽毛球大单元教学干预后,实验组学生注意力水平有明显提升,并在注意力广度、注意力转移、注意力稳定性、注意力分配等四个方面呈现出显著性差异。实验后对实验组学生的注意力水平进行总体调查,并做T检验,实验组学生在"注意力广度"上得分最高(M=65.05,SD=11.34),其次是"注意力转移"(M=45.84,SD=10.13)和"注意力分配"(M=23.13,SD=4.73),"注意力稳定性"得分最低(M=13.96,SD=2.34),差异分析得出,实验前后实验组学生注意力转移(P<0.001),注意力广度(P<0.05),注意力稳定性(P<0.001),注意力分配(P<0.01)均得到明显提升。研究结论:(1)经过12周共计36课时的2个连续的羽毛球大单元教学干预后,实验组学生的注意力水平有显著提升,组间差异性检验显示两组的注意力差距由实验前的没有显著差异变成有显著性差异;(2)组内差异性检验显示

关键词：羽毛球大单元教学初中生注意力

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

兽医大学学报 2003年第3期23卷 255-257页

作者：金吉东仇华吉田志军周艳君张守发童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 延边大学农学院动物医学系吉林龙井133400

提取日本脑炎病毒弱毒株 SA1 4 - 1 4 - 2的基因组 RNA,用 RT- PCR扩增其 NS1基因 c DNA,将其克隆到原核表达载体 p ET- 30 b(+)中 ,转化大肠杆菌 BL - 2 1 (DE3) ,经 IPTG诱导 ,NS1基因获得高效表达。 SDS- PAGE分析显示 ,表达的融合... 详细信息

提取日本脑炎病毒弱毒株 SA1 4 - 1 4 - 2的基因组 RNA,用 RT- PCR扩增其 NS1基因 c DNA,将其克隆到原核表达载体 p ET- 30 b(+)中 ,转化大肠杆菌 BL - 2 1 (DE3) ,经 IPTG诱导 ,NS1基因获得高效表达。 SDS- PAGE分析显示 ,表达的融合蛋白表观相对分子质量约为 4 6 0 0 0 ,重组 NS1蛋白占菌体总蛋白的 30 .8%。 Western blotting分析表明。

关键词：日本脑炎病毒 NSl基因大肠杆菌表达乙型脑炎

牛疱疹病毒1型洛精株gD基因的分子克隆及序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科技 2002年第6期32卷 3-6页

作者：李继昌童光志仇华吉周艳君薛强刘忠贵中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院

根据已发表的牛疱疹病毒 1型 (BHV 1)P8 2株 gD基因的核苷酸序列设计了 1对特异性引物 ,对我国BHV 1洛精株 gD基因进行PCR扩增 ,并对其克隆、测序和分析。结果表明 ,gD基因的核苷酸长度为 12 5 1bp ,其编码 417个氨基酸 ;BHV 1洛精株gD... 详细信息

根据已发表的牛疱疹病毒 1型 (BHV 1)P8 2株 gD基因的核苷酸序列设计了 1对特异性引物 ,对我国BHV 1洛精株 gD基因进行PCR扩增 ,并对其克隆、测序和分析。结果表明 ,gD基因的核苷酸长度为 12 5 1bp ,其编码 417个氨基酸 ;BHV 1洛精株gD与国外报道的P8 2株的 gD基因的核苷酸的同源性高达 99.92 % ,氨基酸的同源性高达 10 0 %。这说明BHV 1的

关键词：牛疱疹病毒 gD糖蛋白基因克隆序列分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核蛋白基因在原核系统中的高效表达与初步应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2002年第6期24卷 401-404页

作者：周艳君童光志薛强仇华吉王云峰赵永刚王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中 ,经鉴定后得到重组质粒pET30a_N ,将此重组质粒转化到受体菌BL2 1中 ,用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导 ,并在不同诱导时间进行采样 ,经处理后做S... 详细信息

将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中 ,经鉴定后得到重组质粒pET30a_N ,将此重组质粒转化到受体菌BL2 1中 ,用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导 ,并在不同诱导时间进行采样 ,经处理后做SDS_PAGE、Western_blot分析 ,并以此为包被抗原进行ELISA检测 ,结果发现以终浓度为 1mmol/L的IPTG进行诱导 ,4小时后表达可达到高峰 ,其大小约为 2 3kD ,薄层扫描结果表明该蛋白表达量约占菌体蛋白总量的 32 % ,该蛋白不仅与PRRSV阳性血清能发生特异性反应 ,而且可被PRRSV抗N蛋白单抗所识别 ,证实此大量表达的蛋白为核蛋白。将此表达产物应用ProBondTM纯化系统进行纯化 ,其纯度可达到 91% ,纯化后的蛋白以 5 0 μg/孔包被 96孔板 ,检测来自不同地区送检的猪血清 ,同时以全病毒ELISA为对照 ,结果发现二者的符合率高达 93.3% ,而应用该蛋白进行检测其反应更为敏感 ,且背景低 ,制备过程简单 ,这将为今后应用该蛋白作诊断抗原检测PRRSV奠定了基础。

关键词：猪 CH-1a株核蛋白基因原核系统应用 PRRSV 繁殖呼吸综合征病毒基因表达