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鼠伤寒沙门菌诱导巨噬细胞RAW264.7铜死亡机制研究

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中国病原生物学杂志 2025年第1期 14-18+24页

作者：李丽袁西露程龙云谢荣现祝姚姚李冰清宋楠楠山东第一医科大学(山东省医学科学院)临床与基础医学院(基础医学研究所)病原生物学系

目的讨论病原菌感染后诱导巨噬细胞发生铜死亡的现象并分析该细胞反应对细菌胞内生存影响，探索细胞铜死亡的机制及其对鼠伤寒沙门菌胞内生存和致病性的影响。方法鼠伤寒沙门菌入侵、加铜离子载体伊利司莫（Elesclomol, ES）和氯化铜2... 详细信息

目的讨论病原菌感染后诱导巨噬细胞发生铜死亡的现象并分析该细胞反应对细菌胞内生存影响，探索细胞铜死亡的机制及其对鼠伤寒沙门菌胞内生存和致病性的影响。方法鼠伤寒沙门菌入侵、加铜离子载体伊利司莫（Elesclomol, ES）和氯化铜24 h后，收集细胞并设置未处理细胞对照组、ES对照组、WT感染组，用电感耦合等离子质谱检测细胞内铜离子浓度变化；细胞内铜染色后，使用共聚焦显微镜观察铜离子的分布情况；细胞入侵48 h后，设置未处理细胞对照组、细胞中和感染的细胞中加入不同浓度铜离子（1μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L）,采用乳酸脱氢酶法检测了添加铜离子前后感染细胞死亡率的差异；细胞入侵24 h后，免疫荧光和Western blot方法检测铜死亡关键指标硫辛酰化修饰的DLAT蛋白寡聚体产生及分布情况。结果感染和加入药物干预的RAW264.7细胞内的铜元素的含量无差异，细胞内铜元素含量分别为NC组0.06533±0.008327,ES组0.1580±0.002646,WT组为0.07367±0.007572;共聚焦显微镜显示感染后细胞内铜离子分布形态发生变化，铜离子聚集成点状；细胞感染48 h后，Cell组细胞死亡率为19.60±9.758,Cell+1μmol/L CuCl2组细胞死亡率为17.27±7.130,Cell+2.5μmol/L CuCl2组细胞死亡率为40.13±5.650,Cell+5μmol/L CuCl2组细胞死亡率为65.50±1.241,WT+1μmol/L CuCl2组细胞死亡率为65.44±1.329,WT+2.5μmol/L CuCl2组细胞死亡率为80.56±4.543,WT+5μmol/L CuCl2组细胞死亡率为76.42±1.316,鼠伤寒沙门菌入侵后细胞死亡率随培养基添加铜离子浓度增加而增高；共聚焦显微镜和Western blot显示鼠伤寒沙门菌入侵后铜死亡关键蛋白丙酮酸脱氢酶DLAT亚基发生寡聚化形成多聚体。结论感染后RAW264.7细胞启动铜死亡，抑制鼠伤寒沙门菌胞内生存，为铜死亡的机制研究提供了理论研究基础。

关键词：鼠伤寒沙门菌巨噬细胞RAW264.7 铜死亡铜离子 DLAT蛋白

糖尿病发病时间趋势及其与中国内脏脂肪指数的关系:一项前瞻性队列研究

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中国全科医学 2025年第2期28卷 183-192页

作者：刘庆平柯居中宋家慧高娇娇李智韬王小楠邱桦周弋阮晓楠吴抗上海市浦东新区疾病预防控制中心慢性病防治科、复旦大学浦东预防医学研究院 200132

背景糖尿病仍是全球重大公共卫生问题,横断面研究发现内脏脂肪与糖尿病患病密切相关,但糖尿病发病时间趋势及其与中国内脏脂肪指数(CVAI)关系的前瞻性队列研究较少。目的通过前瞻性队列研究分析上海市浦东新区居民糖尿病发病时间趋势及... 详细信息

背景糖尿病仍是全球重大公共卫生问题,横断面研究发现内脏脂肪与糖尿病患病密切相关,但糖尿病发病时间趋势及其与中国内脏脂肪指数(CVAI)关系的前瞻性队列研究较少。目的通过前瞻性队列研究分析上海市浦东新区居民糖尿病发病时间趋势及其与CVAI的关系,为其科学防治提供依据。方法本研究为前瞻性队列研究。选取2013年1—7月参与浦东新区慢性病危险因素监测项目的12个乡镇街道的35个村、居委的居民5236人为研究队列。收集其基线资料,内容包括CVAI、内脏脂肪指数(VAI)、BMI、腰围(WC)、腰臀比(WHR)、腰高比(WHtR)、身体形态指数(ABSI)和身体肥胖指数(BAI),分别于2016年和2019年进行追踪随访;截至随访结束(2019年10月),通过问卷调查、实验室检查、医疗系统就诊信息和生命统计信息系统判断该研究队列糖尿病新发情况。依据基线CVAI、VAI、BMI、WC、WHR、WHtR、ABSI、BAI四分位数将纳入人群分别分为第Q1~Q4四分位数:CVAI各组人数依次为1306、1307、1307、1307人;VAI各组人数依次为1300、1316、1306、1306例;BMI各组人数依次为1305、1302、1312、1311人;WC各组人数依次为1302、1273、1287、1367人;WHR各组人数依次为1180、1203、1332、1514人;WHtR各组人数依次为1199、1393、1400、1237人;ABSI各组人数依次为1316、1302、1302、1308人;BAI各组人数依次为1310、1304、1308、1307人。采用多因素Cox回归分析CVAI和其他肥胖指标与糖尿病发病的关系;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)比较CVAI与其他肥胖指标的预测作用。结果浦东新区居民2013—2016年糖尿病发病密度为33.55/1000人年,2017—2019年糖尿病发病密度为23.25/1000人年,随着年龄的增长,糖尿病总发病密度呈现出升高趋势(2013—2016年:χ^(2)=28.503,P_(趋势)<0.001;2017—2019年:χ^(2)=25.600,P_(趋势)<0.001)。截至2016年,基线CVAI四分位数越高,糖尿病累积发病率(CVAI:χ^(2)=131.865,P_(趋势)<0.001)和发病密度(CVAI:χ^(2)=100.105,P_(趋势)<0.001)均越高。调整相关混杂因素后的多因素Cox回归分析结果显示,与CVAI处于Q1相比,CVAI处于Q4的男性糖尿病的发病风险增加79.4%(HR=1.794,95%CI=1.044~3.083,P<0.05),女性糖尿病的发病风险增加371.2%(HR=4.712,95%CI=2.601~8.538,P<0.05)。ROC曲线结果显示,在预测男性糖尿病发病情况中,CVAI对男性糖尿病预测的ROC曲线下面积(AUC)为0.600(95%CI=0.561~0.640),识别男性糖尿病的约登指数为0.181,截断值为104.118;Delong检验结果显示,CVAI对女性糖尿病预测的准确性最高(AUC=0.699),且在识别女性糖尿病时有最大的约登指数值0.317,最佳截断值为104.609。结论2013—2019年上海市浦东新区居民糖尿病发病密度随年龄的增长呈升高趋势;且相较于其他肥胖指标,CVAI可作为预测糖尿病发病风险的指标。

关键词：糖尿病中国内脏脂肪指数浦东新区前瞻性队列研究影响因素分析

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基于DEM-MBD耦合的马铃薯排种性能提升研究

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农机化研究 2025年第4期47卷 18-27页

作者：蔡皓轩周建国赵开元陈超李传林陈军西北农林科技大学机械与电子工程学院陕西杨凌712100

针对播种所用的切块薯形状不规则、流动性差,导致充种困难、排种效果差等问题,在测定切块薯物料特性的基础上,对种勺取种过程进行仿真分析,阐明了加设偏心抬种装置可提高排种性能的机理。通过DEM-MBD耦合单因素仿真试验,分析播种转速、... 详细信息

针对播种所用的切块薯形状不规则、流动性差,导致充种困难、排种效果差等问题,在测定切块薯物料特性的基础上,对种勺取种过程进行仿真分析,阐明了加设偏心抬种装置可提高排种性能的机理。通过DEM-MBD耦合单因素仿真试验,分析播种转速、种层高度、偏心抬种装置转速的改变对排种性能的影响;在此基础上,以播种转速、种层高度、偏心抬种装置转速为试验因素,以排种器的合格指数、重种指数、漏种指数为试验指标,进行了二次回归正交旋转组合的台架试验,建立了3个指标的回归模型,并利用模型对排种器的工作参数进行了优化。试验结果表明:当播种速度为1.986 km/h、偏心抬种装置转速为41.91 r/min、种层高度为177.549 mm时排种性能达到最佳,合格指数为91.21%,漏种指数为2.02%,重种指数为6.76%,满足马铃薯种植要求。

关键词：马铃薯排种器种箱 DEM-MBD耦合

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大蒜收获机设计与试验研究

农机化研究 2025年第4期47卷 167-173,196页

作者：耿令新李洋张利娟胡潇楠王恒一河南科技大学农业装备工程学院河南洛阳471003 河南科技大学车辆与交通工程学院河南洛阳471003

针对大蒜收获过程中蒜农劳动强度大、收获效率低、蒜茎未被收获等问题,设计了一种大蒜收获机,阐述了其主要结构与工作原理,并对挖掘输送装置和蒜茎切割装置等关键部件进行了研究。以前进速度、入土角和切割速度为试验因素,以大蒜挖出率... 详细信息

针对大蒜收获过程中蒜农劳动强度大、收获效率低、蒜茎未被收获等问题,设计了一种大蒜收获机,阐述了其主要结构与工作原理,并对挖掘输送装置和蒜茎切割装置等关键部件进行了研究。以前进速度、入土角和切割速度为试验因素,以大蒜挖出率和收集蒜茎率为试验指标,进行响应面试验设计及其参数优化,完成大蒜和蒜茎收获试验。结果表明:当前进速度0.25 m/s、入土角15°、切割速度0.3 m/s时,大蒜挖出率为94.2%,收集蒜茎率为92.4%。研究结果可为大蒜收获机的研发提供设计依据。

关键词：大蒜收获机挖掘输送蒜茎切割大蒜挖出率收集蒜茎率

MiR-1306-5p对鸡前脂肪细胞增殖与分化的影响

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 157-165页

作者：孙楠桢张蕾陈若楠张若彤孙杰石河子大学动物科技学院

miR-1306-5p对肿瘤细胞的增殖具有促进作用，对脂肪细胞增殖与分化的影响尚不明确。课题组前期采集玫瑰冠鸡(Gallus gallus)和科宝鸡胚胎期第8天胸肌组织进行高通量测序，本研究选择测序数据中筛选出的差异表达的miR-1306-5p，旨在探究m... 详细信息

miR-1306-5p对肿瘤细胞的增殖具有促进作用，对脂肪细胞增殖与分化的影响尚不明确。课题组前期采集玫瑰冠鸡(Gallus gallus)和科宝鸡胚胎期第8天胸肌组织进行高通量测序，本研究选择测序数据中筛选出的差异表达的miR-1306-5p，旨在探究miR-1306-5p在鸡前脂肪细胞增殖与分化过程中的功能。利用Targetscan和miRanda软件预测miR-1306-5p的靶基因，以脂肪代谢相关基因—骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2, BMP2)为靶基因构建野生型和突变型载体，与miR-1306-5p模拟物共转染鸡成纤维细胞，利用荧光素酶报告基因检测系统验证二者的靶标关系。以miR-1306-5p模拟物和抑制物分别转染鸡前脂肪细胞，利用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒检测细胞增殖能力，通过油红O染色检测油酸诱导的分化情况。结果显示，BMP2野生型与miR-1306-5p模拟物共转染组的荧光素酶活性较阴性对照极显著下降(P<0.01)，而突变型没有显著变化；miR-1306-5p模拟物转染鸡前脂肪细胞48、72和96h，细胞增殖能力极显著低于阴性对照(P<0.01)；在鸡前脂肪细胞的油酸诱导分化过程中，脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4, FABP4)基因表达量极显著升高(P<0.01)，而内源性miR-1306-5p和BMP2在诱导分化48和72 h的基因表达量极显著降低(P<0.01)；在鸡前脂肪细胞中转染miR-1306-5p模拟物后脂滴较对照小，转染miR-1306-5p抑制物后脂滴增多。因此，miR-1306-5p可能通过靶向BMP2而抑制鸡前脂肪细胞的分化。本研究为深入探讨miR-1306-5p在鸡前脂肪细胞分化中的作用机制提供基础资料。

关键词：鸡前脂肪细胞 miR-1306-5p 骨形态发生蛋白2(BMP2) 细胞增殖细胞分化

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随机突变文库构建策略研究进展

化学与生物工程 2025年

作者：柴迎楠刘丽霞宋亚妮闫德琛刘占英内蒙古自治区发酵产业节能减排工程技术研究中心生物发酵绿色制造内蒙古自治区工程研究中心内蒙古自治区生物发酵专业化研发与中试平台内蒙古工业大学化工学院内蒙古阜丰生物科技有限公司

构建突变文库是定向进化研究中的一个关键步骤。随机突变是通过变异使DNA序列发生变化从而影响生物体性状和功能的人工诱导基因变异的方法,基于突变发生的环境和后续筛选过程,可分为体外突变和体内突变。综述了随机突变文库构建策略体... 详细信息

构建突变文库是定向进化研究中的一个关键步骤。随机突变是通过变异使DNA序列发生变化从而影响生物体性状和功能的人工诱导基因变异的方法,基于突变发生的环境和后续筛选过程,可分为体外突变和体内突变。综述了随机突变文库构建策略体外突变技术(如易错PCR、DNA改组、转座子插入和CRISPR/Cas系统等)和体内突变技术(如MAGE、Ortho Rep和Cas PER体系等)的优缺点和应用进展,为促进酶工程与合成生物学技术的发展和推动新药研发、生物能源生产等领域的创新提供了参考。

关键词：突变文库随机突变体内突变体外突变

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我国不动产让与担保公示问题研究

佳木斯大学社会科学学报 2025年第01期 64-66页

作者：金梦楠张慧敏北京观韬(厦门)律师事务所厦门大学嘉庚学院法学院

不动产具有经济价值大且位置固定不易流通等特征，通过公示手段取得优先受偿权的不动产让与担保在中小企业融资领域被大量应用。然而系统性法律规定的缺乏，导致司法实践中存在着公示效果不明、担保功能难以充分发挥的问题。因此有必要... 详细信息

不动产具有经济价值大且位置固定不易流通等特征，通过公示手段取得优先受偿权的不动产让与担保在中小企业融资领域被大量应用。然而系统性法律规定的缺乏，导致司法实践中存在着公示效果不明、担保功能难以充分发挥的问题。因此有必要考察不动产让与担保制度的设置初衷与目前的公示效果，有针对性地提出完善对策，构建不动产让与担保的公示制度。

关键词：让与担保不动产让与担保公示效力

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酸枣仁配方饮品的制备工艺优化及成分分析

食品工业科技 2025年

作者：陈尧楠董露露衡依然李宏宇闫艳杜晨晖山西中医药大学中药与食品工程学院山西大学中药现代研究中心

为深度挖掘酸枣仁的营养价值，通过优化酸枣仁配方饮品的制备工艺，并对优化后的配方饮品进行成分分析，以提高饮品的品质和功能性。以感官评分为标准，采用单因素实验及响应面试验优化酸枣仁饮品工艺配方，采用高效液相色谱法测定酸枣... 详细信息

为深度挖掘酸枣仁的营养价值，通过优化酸枣仁配方饮品的制备工艺，并对优化后的配方饮品进行成分分析，以提高饮品的品质和功能性。以感官评分为标准，采用单因素实验及响应面试验优化酸枣仁饮品工艺配方，采用高效液相色谱法测定酸枣仁配方饮品中助眠类有效成分及脂肪酸类成分，采用凯氏定氮法测定粗蛋白含量，采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量。结果表明：酸枣仁配方饮品最佳配方为220 ℃温度下炒制酸枣仁26 min，按照1.2:1:1质量比添加乳粉、冻干粉、植脂末。酸枣仁饮品中乌药碱、木兰花碱、维采宁Ⅱ、斯皮诺素、6?-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B等7种助眠类有效成分总含量为2.838 mg/g。主要营养成分脂肪酸总量为19.961 mg/g，蛋白质含量10.2%，共检出氨基酸种类18种，总含量5.904 g/100 g，以氨基酸评分、化学评分为标准，第一限制性氨基酸均为色氨酸。所开发的酸枣仁饮品冲调后颜色呈深棕色，有酸枣仁独特的风味，营养成分丰富，且具有多种助眠类有效成分，进一步丰富了酸枣仁冲调饮品的商品形式，有利于促进以酸枣仁为基础的大健康产业发展。

关键词：酸枣仁配方饮品工艺优化咖啡风味成分分析

汝城白毛茶加工红碎茶过程中主要滋味物质动态变化

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食品工业科技 2025年

作者：石琳琳赵楠楠朱俊烨肖力争文海涛湖南农业大学茶学教育部重点实验室国家植物功能成分利用工程技术研究中心湖南植物功能成分利用协同创新中心

为探究汝城白毛茶加工红碎茶过程中主要滋味物质的动态变化，以汝城白毛茶春季一芽二叶为原料，按照萎凋、揉切、发酵、干燥工序加工红碎茶，采用高效液相色谱法测定儿茶素、茶黄素、氨基酸组分的含量，结合感官审评探讨滋味属性与主要... 详细信息

为探究汝城白毛茶加工红碎茶过程中主要滋味物质的动态变化，以汝城白毛茶春季一芽二叶为原料，按照萎凋、揉切、发酵、干燥工序加工红碎茶，采用高效液相色谱法测定儿茶素、茶黄素、氨基酸组分的含量，结合感官审评探讨滋味属性与主要滋味成分之间的相关性，并计算滋味活度值（taste active value， TAV）分析关键滋味成分。结果表明：在红碎茶加工过程中，色差L*（亮度）值下降，a*（红绿度）、b*（黄蓝度）和E*（综合色差）逐渐升高，茶多酚和儿茶素含量下降，茶红素、茶黄素、茶褐素含量上升，水浸出物、咖啡碱、游离氨基酸、茶多酚、茶黄素与红碎茶滋味品质显著（P1），氨基酸组分对红碎茶滋味无显著贡献，该研究结果丰富了汝城白毛茶风味品质的化学理论基础，为生产实践提供理论支撑。

关键词：汝城白毛茶红碎茶滋味成分动态变化滋味活度值(TAV)