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不同饲养方式对阿勒泰马产乳量及乳成分的影响

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中国动物保健 2024年第5期26卷 99-101页

作者：黑孜别克·哈孜别克古丽巴合提·达吾列提汗塔布斯·比阿汗恰布旦·阿孜拜薛利阿丽玛·阿布德克吾热力哈孜.哈孜汗李振伟新疆富蕴县喀拉布勒根乡农业(畜牧业)发展服务中心新疆阿勒泰836101 新疆阿勒泰地区畜牧工作站新疆阿勒泰836500 新疆富蕴县畜牧工作站新疆阿勒泰836100 新疆富蕴县兽医站新疆阿勒泰836100 新疆富蕴县恰库尔图镇农业(畜牧业)发展服务中心新疆阿勒泰836108 新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

本试验旨在探究不同饲养方式对阿勒泰马产乳性能的影响,以求筛选出最优饲养方式。现选取60匹健康状态良好,年龄、胎次、体重相近的产驹30 d左右的阿勒泰母马,随机分为4组,每组15匹。分别为山区放牧组(SQFM)、山区放牧+精料组(SQJL)、农... 详细信息

本试验旨在探究不同饲养方式对阿勒泰马产乳性能的影响,以求筛选出最优饲养方式。现选取60匹健康状态良好,年龄、胎次、体重相近的产驹30 d左右的阿勒泰母马,随机分为4组,每组15匹。分别为山区放牧组(SQFM)、山区放牧+精料组(SQJL)、农区半圈养组(NQJY)、农区半圈养+精料组(NQJL)。两组精料组在放牧和半圈养的基础上每天每匹马早晚两次喂精饲料各2 kg。并对产乳量进行记录。结果表明:SQJL匹均总产乳量比SQFM高77.20 kg,且两组间的产乳量差异极显著(0.05)。NQJL匹均总产乳量比NQJY高70.43 kg,且两组间的产乳量差异极显著(0.05)。说明在山区放牧和农区半圈养补饲精料,阿勒泰马日均产乳量显著提高,且补饲精料后马乳的乳脂率和乳蛋白率有所提高,乳糖率和固形物含量没有显著变化。其中山区放牧+精料组产乳量最高,为四组中最优饲养方式。

关键词：阿勒泰马产乳量乳成分饲养方式

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也木勒白羊INHα基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备

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中国畜牧杂志 2015年第11期51卷 74-77页

作者：黄增文阿曼太木尔扎提吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 四川省达川区畜牧食品局四川达州635000

实验旨在验证INHα基因真核表达载体的表达、纯化以及多克隆抗体的制备。利用基因重组技术构建也木勒白羊INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα),并将质粒(pEGFP-INHα)作为抗原免疫,制备抗INHα的多克隆抗体。结果表明:成功构建了INH... 详细信息

实验旨在验证INHα基因真核表达载体的表达、纯化以及多克隆抗体的制备。利用基因重组技术构建也木勒白羊INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα),并将质粒(pEGFP-INHα)作为抗原免疫,制备抗INHα的多克隆抗体。结果表明:成功构建了INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα);该抗体能特异性地与INHα的抗原以及卵巢组织产生明显免疫亲和反应,说明(pEGFP-INHα)能够有效提高家兔的排卵率。本研究建立了高效稳定的INHα真核表达系统,获得具有生物学活性的蛋白,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。

关键词： INHα基因真核表达载体多克隆抗体也木勒白羊

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也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达

中国畜牧兽医 2015年第6期42卷 1340-1347页

作者：黄增文木尔扎提吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院石河子832003

为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,... 详细信息

为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列。并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的ScalⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体。将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性。用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达。

关键词：也木勒白羊卵泡抑制素真核表达同源性分析

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抑制素对促卵泡素作用机制的研究进展

黑龙江畜牧兽医 2023年第1期 37-41,126,127页

作者：马继福巴合提·博代贾昊天吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

抑制素(inhibins)是一种主要由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的性腺激素,可以选择性抑制垂体促卵泡素(FSH)的合成与分泌。文章综述了众多学者建立的抑制素对FSH的作用机制,以及该作用机制与近年来研究结果的矛盾之处,并依据近年来的... 详细信息

抑制素(inhibins)是一种主要由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的性腺激素,可以选择性抑制垂体促卵泡素(FSH)的合成与分泌。文章综述了众多学者建立的抑制素对FSH的作用机制,以及该作用机制与近年来研究结果的矛盾之处,并依据近年来的研究结果修正了抑制素对FSH的作用机制模型,以期为将来研究抑制素提供新的思路。

关键词：抑制素激活素Ⅱ型受体 β-多糖促卵泡素促性腺激素细胞

绵羊lncRNA-MRLN基因的克隆和蛋白编码能力分析

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动物医学进展 2018年第12期39卷 37-42页

作者：刘芝瑾曹洋吾热力哈孜.哈孜汗倪伟王大伟胡圣伟石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

为了验证长链非编码MRLN基因具有蛋白编码能力,通过提取哈萨克羊胚胎期比目鱼肌总RNA,用RT-PCR获得lncRNA-MRLN基因;用EGFP自身发光及不影响目的蛋白特性的特点,构建了pcD-MRLN-EGFP融合表达载体,且转染293T细胞对lncRNA-MRLN是否具有... 详细信息

为了验证长链非编码MRLN基因具有蛋白编码能力,通过提取哈萨克羊胚胎期比目鱼肌总RNA,用RT-PCR获得lncRNA-MRLN基因;用EGFP自身发光及不影响目的蛋白特性的特点,构建了pcD-MRLN-EGFP融合表达载体,且转染293T细胞对lncRNA-MRLN是否具有蛋白编码能力进行分析。结果表明,重组质粒经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切成1 059bp和5 428bp片段,真核表达载体pcDNA 3.1(+)中插入MRLN和EGFP基因,经测序编码框正确;转染293T细胞后,在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光,且通过RT-PCR在RNA水平上可检测到lncRNA-MRLN的表达,说明lncRNA可以编码蛋白。

关键词：长链非编码RNA MRLN 克隆转染真核表达

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抑制素α亚基特异性纳米抗体基因筛选与鉴定

中国畜牧兽医 2023年第4期50卷 1532-1542页

作者：马继福巴合提·博代黑子别克·哈孜别克李振伟吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院石河子832000 新疆阿勒泰地区富蕴县喀拉布勒根乡农业发展服务中心富蕴836103

【目的】从新疆双峰驼淋巴细胞基因组中筛选出抑制素α亚基(INHα)特异性纳米抗体(VHH)基因,制备新型抑制素免疫制剂,以期间接提高动物血液促卵泡素(FSH)水平、排卵率和产羔率。【方法】利用pET32a-INHA原核表达载体诱导表达INHα蛋白... 详细信息

【目的】从新疆双峰驼淋巴细胞基因组中筛选出抑制素α亚基(INHα)特异性纳米抗体(VHH)基因,制备新型抑制素免疫制剂,以期间接提高动物血液促卵泡素(FSH)水平、排卵率和产羔率。【方法】利用pET32a-INHA原核表达载体诱导表达INHα蛋白并纯化,纯化后的INHα蛋白经尿素溶液复性后免疫新疆双峰驼。通过对免疫前和免疫后全血中淋巴细胞VHH基因进行巢式PCR扩增、高通量测序并建立VHH氨基酸差异数据库;分别对免疫前和免疫后血清及从免疫后血清中筛选出的INHα特异性抗体进行液相色谱质谱/质谱联用(LC-MS/MS)分析获得质谱数据;对质谱数据进行蛋白数据库检索和数据分析后建立INHα特异性抗体和免疫后特异性抗体的肽段库和蛋白库;通过将VHH氨基酸差异数据库分别与INHα特异性抗体和免疫后特异性抗体的肽段库进行序列比对,筛选出INHα特异性纳米抗体基因;对筛选出的VHH基因进行序列比对、三维结构预测和蛋白-蛋白模拟对接。【结果】试验成功诱导表达并纯化了INHα蛋白,INHα蛋白免疫新疆双峰驼获得的抗体效价达1∶1024000;成功从淋巴细胞中克隆出VHH基因,从免疫后血清中筛选出INHα特异性抗体;通过高通量测序、质谱分析及数据处理筛选出5个INHα特异性VHH基因,其氨基酸序列比对结果显示,整体相似性为70.98%,其中互补决定区1(CDR1)长10~13个氨基酸,CDR2长12~13个氨基酸,CDR3长12~22个氨基酸,CDR3在3个互补决定区中氨基酸序列差异最大;系统进化树显示,选择的5条氨基酸序列具有丰富的多样性;蛋白-蛋白模拟对接结果表明,除VHH-267外其余4株纳米抗体均可与INHα配对连接,且主要作用力为疏水相互作用和氢键。【结论】本研究首次通过高通量测序技术联合质谱分析从新疆双峰驼淋巴细胞基因组中筛选出5个INHα特异性VHH基因。本研究结果可为提高动物机体FSH水平及排卵率提供理论指导和技术支持,对繁殖免疫学的发展具有一定参考价值。

关键词：抑制素α亚基(INHα) 双峰驼纳米抗体高通量测序质谱分析

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新疆北疆亚洲璃眼蜱贝纳柯克斯体的检测

中华地方病学杂志 2017年第8期36卷 547-551页

作者：刘丹尹小平吾热力哈孜.哈孜汗涂长春陈创夫王远志石河子大学动物科技学院人兽共患病教研室石河子832000 石河子大学动物科技学院遗传育种与繁殖教研室石河子832000 新疆阿拉山口出入境检验检疫局卫生检疫科阿拉山口833418 中国人民解放军军事医学科学院长春130062 石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室石河子832000

目的检测新疆北疆亚洲璃眼蜱贝纳柯克斯体感染情况，为减少人和家畜Q热病的发生提供依据。方法2016年4-7月，利用布旗法和动物体表检查法采集北疆福海县、阿拉山口市、石河子市、呼图壁县和克拉玛依市5个县（市）蜱类样本，形态学鉴定... 详细信息

目的检测新疆北疆亚洲璃眼蜱贝纳柯克斯体感染情况，为减少人和家畜Q热病的发生提供依据。方法2016年4-7月，利用布旗法和动物体表检查法采集北疆福海县、阿拉山口市、石河子市、呼图壁县和克拉玛依市5个县（市）蜱类样本，形态学鉴定蜱种后提取优势蜱的全基因组DNA，采用PCR方法进行蜱种分子学鉴定以及病原体的检测．阳性产物进行16SrRNA测序与BLAST分析，利用Mega6．0软件构建分子遗传进化树。结果新疆北疆5个县（市）共采集蜱822只，其中优势蜱为亚洲璃眼蜱，共采集580只，经16SrRNA测序分析表明，序列均为亚洲璃眼蜱指名亚种，与新疆尉犁县的亚洲璃眼蜱（KF527439）有较高的同源性。应用PCR方法扩增亚洲璃眼蜱贝纳柯克斯体的特异性DNA片段，总阳性率为19．48％（113／580）。BLAST分析表明。扩增的阳性序列与贝纳柯克斯体的同源性最高，达99．66％（296／297）；分子遗传进化树显示，贝纳柯克斯体核酸序列种类较多．具有遗传多样性。结论新疆北疆5个县（市）亚洲璃眼蜱中均存在贝纳柯克斯体感染，提示新疆各县（市）应加强人和家畜Q热的监测。

关键词：亚洲璃眼蜱 Q热贝纳柯克斯体

新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析

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石河子大学学报（自然科学版） 2018年第1期36卷 45-50页

作者：加米拉.吐尔逊陈云蕾吾热力哈孜.哈孜汗马亚茹赛务加甫石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

本研究通过新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析,为研究绵羊NYD-SP27表达调控机制奠定基础。根据Genbank中公布的人类的NYD-SP27基因序列设计引物,本研究以新疆哈萨克羊的睾丸组织的总DNA为模板,采用RT-PCR扩增方法对绵羊NYD-SP2... 详细信息

本研究通过新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析,为研究绵羊NYD-SP27表达调控机制奠定基础。根据Genbank中公布的人类的NYD-SP27基因序列设计引物,本研究以新疆哈萨克羊的睾丸组织的总DNA为模板,采用RT-PCR扩增方法对绵羊NYD-SP27基因序列进行研究。结果显示:哈萨克羊NYD-SP27基因全长为1901 bp,其中只含有1617 bp组成的开放阅读框(ORF),共编码538个氨基酸;相对分子质量61995.66,理论PI值为6.16,正电荷残基数(Arg+Lys)为61,负电荷残基数(Asp+Glu)为67;分子式C2798H4319N737O819S19;体外半衰期为30 h,不稳定系数46.96(不稳定);总平均吸水性-0.403。结论:哈萨克羊NYD-SP27基因属于PLCζ家族;同时将所得序列已提交到Gene Bank(登录号:KX905090)。

关键词：哈萨克羊 NYD-SP27基因基因克隆序列分析

哈萨克羊INHβA基因克隆及生物信息学分析

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中国畜牧兽医 2019年第5期46卷 1290-1298页

作者：解津刚巴合提.博代热衣扎别克.哈德坎吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院石河子832000 哈萨克国立农业大学动物生物资源系阿拉木图050010

试验旨在克隆哈萨克羊抑制素βA(inhibin beta A,INHβA)基因序列,并探究其序列特征及编码蛋白的结构和功能。根据GenBank中绵羊INHβA基因序列(登录号:NM_001009458.1)设计1对特异性引物,通过RT-PCR方法对哈萨克羊INHβA基因进行扩增,... 详细信息

试验旨在克隆哈萨克羊抑制素βA(inhibin beta A,INHβA)基因序列,并探究其序列特征及编码蛋白的结构和功能。根据GenBank中绵羊INHβA基因序列(登录号:NM_001009458.1)设计1对特异性引物,通过RT-PCR方法对哈萨克羊INHβA基因进行扩增,将获得的INHβA基因片段插入到pMD19-T载体中进行克隆测序,并结合生物信息学方法预测和分析其核苷酸序列、氨基酸序列、蛋白跨膜、蛋白修饰位点及二级结构、三级结构模型等。结果显示,哈萨克羊INHβA基因长1 278 bp,编码425个氨基酸。哈萨克羊INHβA基因与绵羊、牛、野猪、小鼠、人、大鼠、猫、兔、马的同源性分别为98.6%、97.7%、90.4%、87.9%、91.1%、88.2%、91.8%、89.8%和91.8%,表明INHβA基因在不同物种之间具有较高的保守性。INHβA蛋白分子式为C_(2072)H_(3325)N_(603)O_(628)S_(26),分子质量为47.57 ku,理论等电点(pI)为7.87,不稳定系数为66.16,脂溶指数为78.47,亲水值为-0.507。INHβA是一种碱性不稳定的亲水性脂溶性蛋白,没有跨膜结构,含有信号肽。二级结构预测显示,INHβA蛋白α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延伸链分别占22.59%、4.47%、54.12%和18.82%。三级结构预测显示,INHβA蛋白以α-螺旋为主,是含有8种蛋白修饰位点的β-桶状蛋白。本试验结果为深入研究哈萨克羊INHβA蛋白功能及探讨INHβA基因对提高哈萨克羊繁殖力的影响提供参考数据。

关键词：哈萨克羊 INHβA基因克隆序列分析