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聚合酶链反应－单链构象多态性用于耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变的研究

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中华结核和呼吸杂志 1996年第6期19卷 338-341页

作者：何秀云庄玉辉李国利吴雪琼张晓刚北京解放军第三○九医院结核病研究室

目的研究结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变及其与利福平（ＲＦＰ）耐药性的关系。方法以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析了４０株结核分支杆菌临床分离株。ＰＣＲ－Ｓ... 详细信息

目的研究结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变及其与利福平（ＲＦＰ）耐药性的关系。方法以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析了４０株结核分支杆菌临床分离株。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法由ＰＣＲ扩增和扩增产物ＤＮＡ单链多态性分析组成。结果两对引物ＰＣＲ扩增产物分别为４１１和２５８ｂｐ，其敏感性分别为５ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ和１ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ；均为属特异性。４０株结核分支杆菌临床分离株２５８ｂｐ扩增片段ＳＳＣＰ图谱的特点：以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，１０株敏感株均无区别；单耐ＲＦＰ或包括ＲＦＰ多种抗结核药３０株，除３株外，其余２７株ＳＳＣＰ图谱有明显的区别；检测阳性率为９０％，特异性为１００％。结论ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法可检测出耐ＲＦＰ结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变；该基因是ＲＦＰ的药物靶编码基因，它的突变与ＲＦＰ耐药性有密切关系。

关键词：利福平结核分支杆菌聚合酶链反应基因突变

基于无人机视频图像快速辨析的配电网设备巡检安防识别方法

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电测与仪表 2022年

作者：吴雪琼于海平范延赫国网电力科学研究院有限公司天津大学电气自动化与信息工程学院

针对智能配电网设备种类多样、日常安防巡检工作量大、隐患多等特点，且传统的人工巡检方式难以快速识别配电网设备多类型安防漏洞的难题，文章提出了一种基于四旋翼无人机的智能配电网设备巡检安防识别方法，应用无人机视频图像快速辨... 详细信息

针对智能配电网设备种类多样、日常安防巡检工作量大、隐患多等特点，且传统的人工巡检方式难以快速识别配电网设备多类型安防漏洞的难题，文章提出了一种基于四旋翼无人机的智能配电网设备巡检安防识别方法，应用无人机视频图像快速辨析技术，对配电网设备的安防问题进行快速巡检，从而保障系统的运行安全和稳定。针对高效率、低成本的配电网设备安防巡检需求，从坐标变换原理、摄像机成像模型、基于视觉的位姿估计原理和AprilTag位姿估计原理等多角度全方位设计了无人机的视觉定位算法。采用KCF跟踪算法实现对目标的跟踪，并用卡尔曼滤波器建立目标物的运动模型对传统的KCF算法进行了改进，克服了边缘效应，提高了对目标物的跟踪可靠性。最后，实际案例验证了文章方法的可行性，以期为配电网设备精益化管理提供一定的借鉴。

关键词：配电网无人机智能巡检图像识别

钙离子通道调节细胞在抗结核作用方面的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第4期34卷 327-330页

作者：宋乐乐崔瑞娜阳幼荣吴雪琼解放军第309医院全军结核病研究所/全军结核病防治重点实验室北京100091 博尔诚北京科技有限公司 100176

结核病是由结核分枝杆菌（ MTB ）感染引起的慢性传染病。 MTB可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病。目前，全球已有20亿人感染MTB，仅在2012年，新发结核患者达860万，有130万人因结核病死亡［1］。2012年我国结... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌（ MTB ）感染引起的慢性传染病。 MTB可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病。目前，全球已有20亿人感染MTB，仅在2012年，新发结核患者达860万，有130万人因结核病死亡［1］。2012年我国结核病新发患者人数约为90万，占全球的10．5％，位居全球第二位［1］。目前结核病的预防和治疗遇到的主要挑战在于：（1）流动人口感染及隐性感染患者数量庞大；（2）在应对耐多药结核病（ MDR-TB）方面取得的进展仍然十分缓慢；（3）免疫低下人群合并感染［2］。单凭目前已有的化疗方案很难应对上述挑战，因此应当致力于开发新的治疗方法，这包括新药的研发、免疫治疗以及基因治疗等综合方法的运用。

关键词：抗结核作用钙离子通道节细胞肺结核病隐性感染结核分枝杆菌耐多药结核病 MDR-TB

MnSOD的基因多态性与抗结核药物性肝损害关系的研究

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中国抗生素杂志 2012年第11期37卷 I0001-I0004页

作者：安慧茹吴雪琼王仲元解放军第309医院全军结核病研究所北京100091

目的研究药物代谢酶锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的基因多态性与抗结核药物肝损害的关系,阐明抗结核药物诱导肝损害的分子机制。方法通过聚合酶链反应-直接测序(PCR-DS)方法分析101例有抗结核药物性肝损害的结核病患者(病例组)及107例无抗... 详细信息

目的研究药物代谢酶锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的基因多态性与抗结核药物肝损害的关系,阐明抗结核药物诱导肝损害的分子机制。方法通过聚合酶链反应-直接测序(PCR-DS)方法分析101例有抗结核药物性肝损害的结核病患者(病例组)及107例无抗结核药物性肝损害的结核病患者(对照组)的MnSOD的基因多态性,并分析它们与抗结核药物性肝损害之间的关系。结果与MnSOD编码基因47位碱基T/T基因型(OR:0.68,P>0.05)、T/C基因型(OR:1.03,P>0.05)比较,47位碱基C/C基因型患者更易发生抗结核药物性肝损害,OR值为5.77(P<0.05)。结论 MnSOD编码基因的47位碱基CC基因型有可能是发生抗结核药物性肝损害的易感基因。

关键词：抗结核药物肝损害 MNSOD 基因多态性

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分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展

中国防痨杂志 2002年第4期24卷 227-230页

作者：梁建琴吴雪琼张广宇河北省胸科医院石家庄050041 解放军第309医院北京100091

由于全球范围内肺结核及非结核分支杆菌病的发病呈逐年上升趋势,准确而快速的菌种鉴定技术对结核病的诊断和鉴别诊断及有效化疗都有极其重要的意义。目前国内外采用传统的分支杆菌菌种鉴定方法需依据细菌生长速度、色素产生及多种生化... 详细信息

由于全球范围内肺结核及非结核分支杆菌病的发病呈逐年上升趋势,准确而快速的菌种鉴定技术对结核病的诊断和鉴别诊断及有效化疗都有极其重要的意义。目前国内外采用传统的分支杆菌菌种鉴定方法需依据细菌生长速度、色素产生及多种生化试验等结果综合分析才能获得结果;而ＢＡＣＴＥＣＴＢ460、ＴＢ960培养基系统虽快速(2～6ｄ),但只能初步鉴定结核分支杆菌复合群和非结核分支杆菌,不能将细菌鉴定至种。近年来建立的色谱方法虽能达到部分菌种鉴定的目的,但需特殊仪器,临床尚未普遍开展。目前国内外研究者都致力于使分支杆菌菌种鉴定从细胞表型水平进入分子基因水平。现对分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展综述如下。

关键词：分支杆菌分子菌种鉴定方法研究进展 PCR

BACTEC MGIT960培养及分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用

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第一军医大学学报 2002年第9期22卷 830-832页

作者：周劲松陈建庭金大地吴雪琼第一军医大学南方医院脊柱骨科广东广州510515 解放军309医院结核病研究室北京100091

目的探讨 BACTEC MGIT 960系统、分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用价值。方法对31例脊柱结核标本分别应用 BACTEC MGIT 960及罗氏培养基培养,对所得分离株行IS986扩增及16S rRNA PCR-SSCP分析进行菌种鉴定,并与常规方法对照。... 详细信息

目的探讨 BACTEC MGIT 960系统、分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用价值。方法对31例脊柱结核标本分别应用 BACTEC MGIT 960及罗氏培养基培养,对所得分离株行IS986扩增及16S rRNA PCR-SSCP分析进行菌种鉴定,并与常规方法对照。结果 BACTEC MGIT 960系统、罗氏培养法分支杆菌培养阳性率分别为83.87％、61.29％,两者平均报告时间分别为11.3d、26.7d;分子菌种鉴定结果与常规方法一致。结论BACTEC MGIT960系统是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法,快速培养与分子菌种鉴定联合应用可能是目前结核病临床细菌学诊断的较佳策略。

关键词： BACTECMGIT960系统聚合酶链反应单链构象多态性分支杆菌脊柱结核诊断

免疫活性物质:结核病和非结核分枝杆菌病治疗的新选择

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中国防痨杂志 2022年第11期44卷 1107-1121页

作者：龚文平米洁吴雪琼中国人民解放军总医院第八医学中心结核病医学部研究所/结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

结核病不仅是一种传染性疾病,也是一种免疫性疾病。免疫疗法是一种潜在的结核病和非结核分枝杆菌病治疗手段,可以通过影响和调节人体的免疫系统来抑制甚至清除结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。本文中,笔者就治疗结核病和非结核分枝杆菌... 详细信息

结核病不仅是一种传染性疾病,也是一种免疫性疾病。免疫疗法是一种潜在的结核病和非结核分枝杆菌病治疗手段,可以通过影响和调节人体的免疫系统来抑制甚至清除结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。本文中,笔者就治疗结核病和非结核分枝杆菌病的免疫活性物质如细胞因子、抗体、小分子活性肽、溶菌酶及免疫阻滞剂等的研究进展进行总结和凝练,以期为结核病和非结核分枝杆菌病的治疗提供新思路。

关键词：结核分枝杆菌感染免疫疗法,主动佐剂,免疫总结性报告(主题)

结核分支杆菌耐吡嗪酰胺分离株pncA基因突变的研究

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中华结核和呼吸杂志 2000年第1期23卷 40-42页

作者：吴雪琼张俊仙钟敏俞伟丁北川张军芝贾树林解放军第三○九医院结核病研究室北京100091 北京市结核病防治所解放军第三○九医院北京100091

目的　了解我国结核分支杆菌耐吡嗪酰胺 (PZA)分离株pncA基因突变情况 ,研究其与耐PZA之间的关系。方法　通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)和PCR -循环测序法(AS)分析 74株结核分支杆菌临床分离株的pncA基因。以结核分支... 详细信息

目的　了解我国结核分支杆菌耐吡嗪酰胺 (PZA)分离株pncA基因突变情况 ,研究其与耐PZA之间的关系。方法　通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)和PCR -循环测序法(AS)分析 74株结核分支杆菌临床分离株的pncA基因。以结核分支杆菌H37RV 标准株为对照。结果　 3 2株药物敏感株pncA基因SSCP分析未发现异常。 2 0株耐非PZA药物的分离株中 ,16株pncA基因SSCP泳动正常 ;4株异常 ,其中 2株测序分析分别为 5 8位密码子TTC→TTA突变和 68位密码子TGG→CGG突变。 2 2株耐PZA分离株中 ,10株pncA基因SSCP泳动异常 ,其中 2株测序分析均为 5 8位密码子TTC→TTA突变 ;12株未发现异常。结论　PncA基因突变是结核分支杆菌耐PZA产生的一种分子机制 ,通过检测pncA基因突变可快速检测部分结核分支杆菌耐PZA基因型。

关键词：分支杆菌药物耐受性吡嗪酰胺肺结核

复合PCR-膜芯片技术对结核分枝杆菌链霉素耐药性的快速检测

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中国抗生素杂志 2004年第5期29卷 303-306页

作者：梁建琴吴雪琼曹立雪李洪敏张俊仙解放军第三零九医院结核病研究中心北京100091

目的　应用复合聚合酶链反应 (复合 PCR) -膜芯片技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素 ( SM)的耐药性。方法　设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐 SM基因 rps L和 rrs的寡核苷酸探针制作膜芯片 ,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的 rps L和 ... 详细信息

目的　应用复合聚合酶链反应 (复合 PCR) -膜芯片技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素 ( SM)的耐药性。方法　设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐 SM基因 rps L和 rrs的寡核苷酸探针制作膜芯片 ,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的 rps L和 rrs基因复合 PCR产物进行反向斑点杂交 ,并与 PCR-单链构象多态性 ( PCR- SSCP)和 PCR-直接测序 ( PCR- DS)结果比较。结果　 5 2株结核分枝杆菌临床分离株中 ,9株敏感株rps L和 rrs基因的 SSCP图谱、膜芯片杂交结果与标准株完全相同 ;4 3株耐 SM菌株中 ,33株存在 rps L 基因4 3位密码子 AAG→ AGG突变 ,5株有 rrs基因 5 13位 A→C突变 ,1株有 rrs基因 5 13位 A→ T突变 ,突变率为 90 .7%。结论　膜芯片技术检测结核分枝杆菌耐 SM基因型灵敏度高、特异性强、简便、快速。

关键词：结核分枝杆菌链霉素 rpsL基因 rrs基因药物耐受性聚合酶链反应膜芯片