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聚合酶链反应和DNA探针联合检测临床标本中结核杆菌的研究

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中华结核和呼吸杂志 1996年第1期19卷 37-40页

作者：吴雪琼庄玉辉张晓刚李国利解放军第三○九医院结核病研究室北京100091

目的为提高聚合酶链反应(PCR)检测未培养临床标本中结核杆菌的敏感性和特异性。方法首先通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,然后用Southern法转移至膜上,与地高辛标记的人型结核杆菌DNA探针杂交。结果 PCR电泳检测的灵敏度为1pg,而DNA... 详细信息

目的为提高聚合酶链反应(PCR)检测未培养临床标本中结核杆菌的敏感性和特异性。方法首先通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,然后用Southern法转移至膜上,与地高辛标记的人型结核杆菌DNA探针杂交。结果 PCR电泳检测的灵敏度为1pg,而DNA探针检测将灵敏度提高到100fg。24种受试菌株中,只有结核分支杆菌复合体和蟾分支杆菌有245hp扩增带,其中牛型结核分支杆菌与188bp探针不杂交。对225例临床标本进行涂片、PCR电泳和探针检测,51例非结核性标本三者均阴性;1例非结核分支杆菌感染者的痰标本涂片和培养均阳性,PCR电泳和探针检测均阴性。菌种鉴定为快生长分支杆菌;173例结核性标本三者阳性率分别为16.2%、37.6%和50.3%。此外,将PCR电泳图谱分为四型,并探讨了其影响因素。结论结果表明PCR是结核病早期诊断和鉴别诊断的一种有价值的检测手段,而与探针联合检测可提高阳性检出率,避免漏判和误判。

关键词：结核杆菌痰液检验聚合酶链反应 DNA探针

《活动性结核病患者免疫功能状态评估和免疫治疗专家共识(2021年版)》免疫功能状态评估部分解读

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中国防痨杂志 2023年第2期45卷 134-138页

作者：薛勇吴雪琼中国人民解放军总医院第八医学中心结核病医学部研究所/全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

越来越多的临床证据表明结核病不只是一种感染性疾病,也是一种免疫性疾病。许多活动性结核病患者存在免疫功能低下,因此,对其进行免疫功能状态评估十分必要,可为临床免疫干预提供依据。发表于《中国防痨杂志》2022年第1期的《活动性结... 详细信息

越来越多的临床证据表明结核病不只是一种感染性疾病,也是一种免疫性疾病。许多活动性结核病患者存在免疫功能低下,因此,对其进行免疫功能状态评估十分必要,可为临床免疫干预提供依据。发表于《中国防痨杂志》2022年第1期的《活动性结核病患者免疫功能状态评估和免疫治疗专家共识(2021年版)》,为结核病患者进行免疫功能状态评估和免疫辅助治疗提供了建议,并形成共识。笔者针对共识中免疫功能状态评估部分进行解读,为读者介绍在共识之外更多的免疫评价新进展,以丰富读者对结核病患者免疫功能评估的认识。

关键词：结核免疫测定总结性报告(主题)

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分枝杆菌分子生物学

2010年

作者：吴雪琼张宗德乐军

本书共分4章，介绍了分枝杆菌的基因组的结构和功能；基因表达及其调控；分枝杆菌的代谢和生长；应用研究等方面的内容。

ISBN: (纸本)9787509134023

本书共分4章，介绍了分枝杆菌的基因组的结构和功能；基因表达及其调控；分枝杆菌的代谢和生长；应用研究等方面的内容。

关键词：生物科学微生物学微生物分类学(系统微生物学)

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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核电厂乏燃料池一体化测量装置设计与验证

核动力工程 2015年第2期36卷 127-129页

作者：孙益晖谢晶晶吴雪琼文继孙琳成都中核鑫星应用技术研究所成都610041 上海核工程研究设计院上海200233

根据乏燃料池环境条件,乏燃料池液位、温度测量装置运行需求,针对丧失外电源情况下测量装置不能使用的安全风险,进行核电厂乏燃料池液位、温度一体化测量装置设计,并对工程样机进行功能、性能、环境试验验证。验证结果表明,装置测量精... 详细信息

根据乏燃料池环境条件,乏燃料池液位、温度测量装置运行需求,针对丧失外电源情况下测量装置不能使用的安全风险,进行核电厂乏燃料池液位、温度一体化测量装置设计,并对工程样机进行功能、性能、环境试验验证。验证结果表明,装置测量精度高、实时,具备丧失外电源下的数据传输功能,满足乏燃料池的监测要求。

关键词：一体化测量装置有线、无线测量通道无外电源工况运行

GSTM1和GSTT1基因多态性与抗结核药物性肝损害的关系

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中国抗生素杂志 2011年第11期36卷 864-868页

作者：朱冬林席云吴雪琼中山大学附属第三医院检验科广州510630 解放军第309医院全军结核病研究所北京100091

目的探讨汉族人群谷胱甘肽S转移酶MI（GSTM1）和T1（GSTT1）基因多态性与抗结核药物性肝损害（ATDLI）易感性的关系。方法回顾性分析抗结核治疗后发生肝损害的结核病患者228例（病例组）及未发生肝损害的结核病患者300例（对照组，应用... 详细信息

目的探讨汉族人群谷胱甘肽S转移酶MI（GSTM1）和T1（GSTT1）基因多态性与抗结核药物性肝损害（ATDLI）易感性的关系。方法回顾性分析抗结核治疗后发生肝损害的结核病患者228例（病例组）及未发生肝损害的结核病患者300例（对照组，应用多重PCR技术检测其GSTM1和GSTT1基因多态性。结果病例组与对照组GSTM1基因缺失型频率分别为58．3％和50．7％，差异无统计学意义（OR=I．363，95％CI=0．963-1．929）；GSTT1基因缺失型频率分别为45．2％和49.3％，差异也无统计学意义。联合分析也未发现两种基因在抗结核药物性肝损害发生中具有协同作用。结论汉族人群GSTM1和GSTT1基因多态性与抗结核药物性肝损害的发生无关。

关键词： GSTM1 GSTT1 结核肝损害基因多态性

应用PCR-直接测序法测定结核分支杆菌rpsL基因突变的研究

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中国抗生素杂志 1999年第3期24卷 202-204页

作者：吴雪琼张俊仙庄玉辉张军芝贾树林解放军309医院

目的：了解我国结核分支杆菌耐链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ，ＳＭ）分离株ｒｐｓＬ基因突变情况，建立快速检测结核分支杆菌耐药基因型的分子药敏试验方法。方法：通过聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉ... 详细信息

目的：了解我国结核分支杆菌耐链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ，ＳＭ）分离株ｒｐｓＬ基因突变情况，建立快速检测结核分支杆菌耐药基因型的分子药敏试验方法。方法：通过聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）－单链构象多态性（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＳＣＰ）、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＦｒａｇｍｅｎｔＬｅｎｇｔｈＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ－直接测序法（ＤｉｒｅｃｔＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ，ＤＳ）分析３８株结核分支杆菌耐ＳＭ分离株的ｒｐｓＬ基因。结果３８株耐ＳＭ分离株中，２５株ＳＳＣＰ异常、不被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析４３位密码子ＡＡＧ→ＡＧＧ突变；１株ＳＳＣＰ异常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析３３位密码子ＧＴＡ→ＡＴＡ突变；１２株ＳＳＣＰ正常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析未见异常；未发现８８位密码子突变。结论：大多数结核分支杆菌耐ＳＭ是由于其ｒｐｓＬ基因４３位密码子突变所致，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＤＳ方法可快速测定部分结核分支杆菌ＳＭ耐药基因型。

关键词：聚合酶链反应结核分枝杆菌 rpsL基因耐药性

脱氧核糖核酸聚合酶链反应快速检测结核临床标本中结核菌的评价

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中华结核和呼吸杂志 1993年第1期16卷 26-29+62-63页

作者：庄玉辉李国利张小刚吴雪琼中国人民解放军第三○九医院

应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测结核菌脱氧核糖核酸(DNA),其敏感性为 1pg～100fg或10～100个细菌。所用的引物序列与17种抗酸分支杆菌和10种非分支杆菌 DNA 进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳证实,只有人型结核菌、牛型结核菌和卡介苗(BCG)产... 详细信息

应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测结核菌脱氧核糖核酸(DNA),其敏感性为 1pg～100fg或10～100个细菌。所用的引物序列与17种抗酸分支杆菌和10种非分支杆菌 DNA 进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳证实,只有人型结核菌、牛型结核菌和卡介苗(BCG)产生16.5b.p 特异性区带,其它被试细菌未见此区带。比较了三种不同方法检测痰、脑脊液标本中结核菌的效果:75例痰标本,PCR 阳性率比萋尼氏染色镜检法高28%,比培养高32%。58例结核性脑膜炎脑脊液标本,涂片镜检、培养、PCR的阳性率分别为8.6%、1.7%、51.7%。结果表明,PCR 直接检测未培养临床标本中结核菌显示出快速、敏感、特异的优点。同时还研究和讨论了影响 PCR 敏感性、特异性的某些因素。

关键词：结核杆菌聚合酶链反应

结核病患者外周血淋巴细胞亚群检测及临床应用专家共识

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中国防痨杂志 2020年第10期42卷 1009-1016页

作者：无吴雪琼初乃惠《中国防痨杂志》编辑委员会中国医疗保健国际交流促进会结核病防治分会基础专业和临床专业学术部解放军总医院第八医学中心全军结核病研究所北京100091 首都医科大学附属北京胸科医院 101149

结核病(TB)的发生、发展及转归取决于入侵结核分枝杆菌(MTB)的数量、毒力及机体免疫抵抗力。通过流式细胞术分析TB患者外周血淋巴细胞亚群有助于评估患者的免疫状况、免疫功能和免疫平衡,为临床制定免疫干预措施、观察疗效及判断预后等... 详细信息

结核病(TB)的发生、发展及转归取决于入侵结核分枝杆菌(MTB)的数量、毒力及机体免疫抵抗力。通过流式细胞术分析TB患者外周血淋巴细胞亚群有助于评估患者的免疫状况、免疫功能和免疫平衡,为临床制定免疫干预措施、观察疗效及判断预后等方面提供实验室检测依据。本专家共识简要地介绍了我国临床常用的淋巴细胞亚群分析项目(包括百分比和绝对计数);提出了TB患者淋巴细胞亚群检测及结果正确判读的建议;简介了淋巴细胞亚群分析在TB患者临床诊疗中的用途,并对未来淋巴细胞亚群检测的发展前景进行了展望。

关键词：结核淋巴细胞亚群流式细胞术免疫实验室技术和方法

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分支杆菌耐乙胺丁醇分子机制的研究进展

中华结核和呼吸杂志 2001年第2期24卷 126-128页

作者：梁建琴吴雪琼王孟山河北省胸科医院石家庄050041 解放军第三○九医院结核病研究室

分支杆菌耐药性的出现一直是结核病治疗中的棘手问题，许多感染了耐药性分支杆菌的患者，都因缺乏及时的诊断和治疗而使病情加重甚至死亡。近年来国内外学者从分子遗传学的角度对利福平（RFP）、异烟肼（INH）、链霉素（SM）、吡嗪酰胺... 详细信息

分支杆菌耐药性的出现一直是结核病治疗中的棘手问题，许多感染了耐药性分支杆菌的患者，都因缺乏及时的诊断和治疗而使病情加重甚至死亡。近年来国内外学者从分子遗传学的角度对利福平（RFP）、异烟肼（INH）、链霉素（SM）、吡嗪酰胺（PZA）、喹诺酮类（FQ）的耐药分子机制做了详尽的研究，分支杆菌耐药基因检测方法也日趋成熟。乙胺丁醇（EMB）是具有广谱抗分支杆菌活性的一线抗结核合成药物，是和INH、RFP、SM、PZA联合治疗结核病的药物之一，被广泛用于治疗鸟分支杆菌、堪萨斯分支杆菌、蟾蜍分支杆菌、海分支杆菌和马尔摩分支杆菌感染，所以它比只对结核分支杆菌有效的INH应用更广泛。美国最新研究结果表明，EMB在原发和复发结核病人的耐药率分别为2.3%和3.8%［1］。1985年和1994年所做的抗结核药物耐药情况调查显示，获得性EMB耐药率在一些国家已达13.7%［2］。但分支杆菌耐EMB的分子机制尚不十分清楚，目前国内外学者都在致力于这方面的研究。文中对分支杆菌耐EMB的分子机制做一综述。一、EMB抗分支杆菌作用机制

关键词：分支杆菌耐药分子机制乙腔丁醇结核病治疗