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1株马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌致病性分析

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畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 718-726页

作者：吴自豪蔡依龙陀海欣陈伟塔里木大学生命科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 塔里木大学动物科学与技术学院阿拉尔843300

国内鲜有马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)相关报道,本研究对1株新疆马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌的致病性进行评估,以期为马乳源金黄色葡萄球菌的相关研究提供基础数据。使用选择性培养基从新疆健康马乳中分... 详细信息

国内鲜有马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)相关报道,本研究对1株新疆马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌的致病性进行评估,以期为马乳源金黄色葡萄球菌的相关研究提供基础数据。使用选择性培养基从新疆健康马乳中分离金黄色葡萄球菌,然后通过生化鉴定和分子鉴定方法对金黄色葡萄球菌进行鉴定。对所获得的金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、spa分型、药物敏感性检测、生物被膜形成能力、溶血活性、毒力基因检测、小鼠皮肤脓肿和致病性试验。再对分离株进行小鼠细胞的黏附、侵袭和胞内增殖试验,以评估其致病性。结果显示,从马乳中分离得到1株PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(1/65,1.5%),spa分型为t304。仅对青霉素耐药,无生物被膜形成能力,但携带9种毒力基因(sec、seg、seh、tsst-1、hla、hlb、clfA、clfB和cna),并且具有溶血活性。小鼠皮肤脓肿和致病性试验表明,其可导致小鼠形成皮肤脓肿,并且在高剂量感染时可导致小鼠死亡。ST22型金黄色葡萄球菌可在小鼠巨噬细胞中黏附(4.26%)、侵袭(6.45%)和胞内增殖,并可造成细胞凋亡。综上,马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌具有较强的致病力,可能在宿主致病和公共卫生安全等方面存在隐患。

关键词：马乳 PVL+ ST22型金黄色葡萄球菌致病性

新疆库车市和皮山县驴乳源金黄色葡萄球菌的MLST分型、毒力基因和耐药性检测

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黑龙江畜牧兽医 2024年第11期 78-83页

作者：吴自豪刘英杰蔡依龙陈伟塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为了了解驴乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的流行情况,试验对从新疆驴乳中分离得到的金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST分型)、药敏试验,以及生物被膜形成能力、毒力基因和溶血活性检测。结果表明:金黄色葡萄球菌在健... 详细信息

为了了解驴乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的流行情况,试验对从新疆驴乳中分离得到的金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST分型)、药敏试验,以及生物被膜形成能力、毒力基因和溶血活性检测。结果表明:金黄色葡萄球菌在健康驴乳中的分离率为8%(6/75),6株金黄色葡萄球菌分别属于5个MLST分型(STs),即ST6238、ST8115、ST8116、ST8126和ST1660(其中ST8115、ST8116和ST8126为新发现的STs)。所有分离株对青霉素、克林霉素、红霉素和利福平等有不同程度的耐受,其中4株为耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA),并且有2株MRSA对利奈唑胺耐药;4株金黄色葡萄球菌具有生物被膜形成能力。在驴乳金黄色葡萄球菌中检测到11种毒力基因,分别为sea、sec、seh、sei、tsst-1、hla、hlb、eta、clfA、clfB和cna基因,并且均具有溶血活性。说明驴乳源金黄色葡萄球菌具有较强的耐药性,而且在宿主致病和食品生产安全等方面具有潜在威胁。

关键词：驴乳 MLST分型耐药性 MRSA 毒力基因

阿合奇县猎鹰粪源海氏肠球菌的分离鉴定及其生物学特性分析

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中国畜牧兽医 2024年第10期51卷 4587-4595页

作者：孟竹何江李静李涛吴自豪陈荣齐萌冯昕炜塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 塔里木大学生命科学与技术学院阿拉尔843300

【目的】自健康猎鹰粪便中分离具有益生作用的乳酸菌,为益生菌制剂的开发研究提供候选菌株。【方法】自阿合奇县采集6份猎鹰粪便样本,采用选择性培养基进行细菌分离培养,通过革兰染色、生化鉴定和16S rDNA PCR扩增和序列分析对分离菌进... 详细信息

【目的】自健康猎鹰粪便中分离具有益生作用的乳酸菌,为益生菌制剂的开发研究提供候选菌株。【方法】自阿合奇县采集6份猎鹰粪便样本,采用选择性培养基进行细菌分离培养,通过革兰染色、生化鉴定和16S rDNA PCR扩增和序列分析对分离菌进行鉴定,并对其进行生长曲线、产酸曲线、抗逆性、药物敏感性、体外抑菌、自聚集能力和表面疏水性等生物学特性测定和动物安全性试验。【结果】自猎鹰粪便中分离出3株分离菌,经革兰染色镜检为蓝紫色阳性球菌。分离菌生化鉴定结果显示,棉籽糖、葡萄糖和甲基红试验呈阳性,触酶试验、硫化氢试验、吲哚试验和V-P试验结果均为阴性,初步鉴定为肠球菌属。16S rDNA测序结果显示,分离株与NCBI登录的海氏肠球菌相似性均在99%以上,确定3株分离株均为海氏肠球菌,分别命名为EH1、EH2和EH3株。EH1、EH2和EH3株对数生长期分别为8~16、8~19和8~14 h,菌液产酸pH均稳定为4.5,具有较好的产酸性能。3株海氏肠球菌在pH为3.0和0.5%胆盐处理下均能存活,具有较好的抗逆性。3株海氏肠球菌无细胞上清液均对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有较好抑菌效果,对链霉素和头孢噻呋呈中介,对环丙沙星、庆大霉素、红霉素、替米考星、青霉素、氨苄西林和氯霉素敏感。以EH1株的自凝集能力较高,为28.00%,以EH2株的疏水性较高,为52.10%;3株海氏肠球菌对昆明小鼠均无致病性。【结论】本研究分离获得3株猎鹰粪源海氏肠球菌,均具有良好的益生性,可作为益生菌制剂的候选菌株。

关键词：海氏肠球菌分离鉴定生物学特性益生性猎鹰

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建材行业“六零工厂”项目水泥熟料生产零化石燃料消耗阶段性探索与实践

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水泥 2024年第2期 1-4页

作者：汪宣乾侯记伟章鹏吴自豪华新水泥股份有限公司湖北武汉430070

介绍了华新水泥地维有限公司承接并实施建材行业揭榜挂帅项目“建材制造企业零化石能源技术装备研发与应用示范”的情况。截至2023年8月,华新地维工厂窑尾热量替代率达50%,熟料单位产品综合能耗由115kgce/t降低至84 kgce/t,单位熟料生... 详细信息

介绍了华新水泥地维有限公司承接并实施建材行业揭榜挂帅项目“建材制造企业零化石能源技术装备研发与应用示范”的情况。截至2023年8月,华新地维工厂窑尾热量替代率达50%,熟料单位产品综合能耗由115kgce/t降低至84 kgce/t,单位熟料生产二氧化碳排放强度由861 kg/t降低至776 kg/t。后续通过替代燃料预处理二期的建设及窑头替代燃料混合燃烧器的使用,能够完全实现水泥熟料生产零化石燃料消耗,可节约标煤6.72万t/a,降低二氧化碳排放18.55万t/a。

关键词：六零工厂替代燃料零化石燃料消耗二氧化碳

新疆维吾尔自治区阿克苏地区某屠宰场羊源大肠杆菌MLST分型、耐药性分析和毒力基因检测

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畜牧与饲料科学 2024年第2期45卷 95-102页

作者：李广西韩婷婷吴自豪吴静塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300

[目的]了解新疆维吾尔自治区阿克苏地区屠宰场羊源大肠杆菌的流行情况以及耐药性和毒力基因分布特征。[方法]从阿克苏地区某屠宰场采集健康羊的淋巴结、胴体拭子、粪便样本共30份,使用选择性培养基分离大肠杆菌,然后采用大肠杆菌特异性p... 详细信息

[目的]了解新疆维吾尔自治区阿克苏地区屠宰场羊源大肠杆菌的流行情况以及耐药性和毒力基因分布特征。[方法]从阿克苏地区某屠宰场采集健康羊的淋巴结、胴体拭子、粪便样本共30份,使用选择性培养基分离大肠杆菌,然后采用大肠杆菌特异性phoA基因对其进行分子生物学鉴定;利用PCR扩增及测序技术对大肠杆菌分离株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST);采用K-B纸片扩散法开展分离菌株对抗菌药物的敏感性试验;应用PCR技术检测分离菌株的耐药基因和毒力基因携带情况;使用96孔板微量肉汤法测定分离菌株的生物被膜形成能力。[结果]从30份样本中分离得到14株大肠杆菌,分离率为46.67%;14株分离株分属于10个MLST型别;对复方新诺明(100%)、青霉素(85.71%)和四环素(50.00%)耐药率较高,9株菌具有多重耐药表型(64.29%);在14株大肠杆菌中检测到blaTEM(85.71%)、aph(3′)(71.43%)、tetA(64.29%)、sul1(57.14%)和sul2(57.14%)等12种耐药基因,并且8株菌携带Ⅰ型整合子int-Ⅰ基因(57.14%);在14株大肠杆菌中检测到fimH(100%)、yijP(92.86%)、mat(92.86%)、sheA(92.86%)、stx1(35.71%)和ibeB(28.57%)等10种毒力基因;10株大肠杆菌具有生物被膜形成能力(71.43%)。[结论]该屠宰场羊源大肠杆菌种内分型丰富,具有较强的耐药性,还可形成生物被膜,并且携带多种耐药基因和毒力基因,对动物性食品安全可能存在潜在威胁。

关键词：大肠杆菌 MLST分型耐药性毒力基因生物被膜

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大替代比分解炉的设计开发与运用实践

水泥 2024年第5期 52-56页

作者：汪宣乾章鹏张谋侯记伟吴自豪华新水泥股份有限公司湖北武汉430070

在水泥窑中大比例使用替代燃料是目前水泥行业降低水泥生产过程中碳排放的重要技术手段。本文在对RDF的燃烧特性及燃烧动力学研究分析的基础上,并结合CFD软件进行模拟优化,设计开发出了使用大替代比多元异质替代燃料的低碳低氮环保型分... 详细信息

在水泥窑中大比例使用替代燃料是目前水泥行业降低水泥生产过程中碳排放的重要技术手段。本文在对RDF的燃烧特性及燃烧动力学研究分析的基础上,并结合CFD软件进行模拟优化,设计开发出了使用大替代比多元异质替代燃料的低碳低氮环保型分解炉。水泥工厂的运行结果表明,水泥窑系统生产运行稳定,窑尾热量替代率80%,NOx本底值降低至249 mg/Nm3(未使用氨水)。该型分解炉对复杂多元异质替代燃料具有较好的适应性。

关键词：大替代比替代燃料分解炉燃烧特性

新疆驼乳源金黄色葡萄球菌MLST分型与毒力基因检测

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塔里木大学学报 2024年第2期36卷 12-18页

作者：吴自豪蔡依龙池昊明陈伟塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为了解驼乳源金黄色葡萄球菌多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)与毒力基因携带情况,本试验对新疆驼乳源分离得到的金黄色葡萄球菌进行MLST、药物敏感性检测、生物被膜形成能力和溶血性检测以及毒力基因检测。结果表明,... 详细信息

为了解驼乳源金黄色葡萄球菌多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)与毒力基因携带情况,本试验对新疆驼乳源分离得到的金黄色葡萄球菌进行MLST、药物敏感性检测、生物被膜形成能力和溶血性检测以及毒力基因检测。结果表明,金黄色葡萄球菌在健康生驼乳中的分离率为5%(4/80);4株金黄色葡萄球菌分别属于ST8114、ST8119、ST2073和ST130(其中ST8114和ST8119为新的序列型),对12种抗菌药物全部敏感;在4株驼乳源金黄色葡萄球菌中可检测到sei、hla、hlb、clfA和clfB等毒力基因,并且均具有生物被膜形成能力和溶血活性。说明新疆驼乳源金黄色葡萄球菌分型丰富,在宿主致病和食品生产安全等方面存在隐患。本研究可为新疆驼乳源金黄色葡萄球菌的相关研究提供基础试验数据。

关键词：驼乳金黄色葡萄球菌 MLST分型毒力基因生物被膜

新疆塔额垦区牛羊粪源志贺菌耐药性、毒力基因检测及其致病性分析

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中国草食动物科学 2024年第5期44卷 37-42页

作者：吴自豪王雪刘鹏彭健朱婷婷李静张秀萍齐萌吴静塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 塔里木大学生命科学与技术学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团第九师农业科学研究所(畜牧科学研究所) 额敏834601

为了解新疆塔额垦区牛羊粪源志贺菌的耐药性、毒力基因携带情况和致病性,对从335份牛羊腹泻粪便中分离鉴定到的32株志贺菌(10株福氏志贺菌和22株宋内志贺菌)进行药敏试验、耐药基因与毒力基因检测、生物被膜形成能力和小鼠致病性检测。... 详细信息

为了解新疆塔额垦区牛羊粪源志贺菌的耐药性、毒力基因携带情况和致病性,对从335份牛羊腹泻粪便中分离鉴定到的32株志贺菌(10株福氏志贺菌和22株宋内志贺菌)进行药敏试验、耐药基因与毒力基因检测、生物被膜形成能力和小鼠致病性检测。结果显示,32株志贺菌对四环素、多西环素和氨苄西林等药物的耐药率较高,分别为87.50%、87.50%和84.38%;29株(90.63%)呈现多重耐药。从分离株中检测到15种耐药基因,其中blaTEM(96.88%)和blaCXT-M(68.75%)基因的检出率较高;检测到14种毒力基因,其中yijP(93.75%)、ibeB(90.63%)和ipaBCD(78.13%)基因的检出率较高。部分志贺菌具有生物被膜形成能力(2/32,6.25%),并引起小鼠死亡。说明新疆塔额垦区牛羊源志贺菌具有较强的耐药性,携带多种耐药基因和毒力基因,具有一定的致病性,在牛羊健康养殖中具有潜在威胁。

关键词：志贺菌腹泻耐药性毒力基因牛羊

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新疆维吾尔自治区呼图壁县驼乳源乳酸菌分离鉴定及其对金黄色葡萄球菌的抑制作用

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畜牧与饲料科学 2024年第2期45卷 1-8页

作者：苏帆帆毛相清赵耀邢国锋吴自豪吴静塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300

[目的]分离、鉴定新疆维吾尔自治区呼图壁县驼乳源乳酸菌,评价其对金黄色葡萄球菌的抑制作用。[方法]从呼图壁县某驼场采集健康驼乳样本45份,使用MRS培养基分离乳酸菌,采用细菌16S rDNA序列PCR扩增及测序方法进行分子生物学鉴定。利用... 详细信息

[目的]分离、鉴定新疆维吾尔自治区呼图壁县驼乳源乳酸菌,评价其对金黄色葡萄球菌的抑制作用。[方法]从呼图壁县某驼场采集健康驼乳样本45份,使用MRS培养基分离乳酸菌,采用细菌16S rDNA序列PCR扩增及测序方法进行分子生物学鉴定。利用点种法、琼脂斑点法和牛津杯双层琼脂扩散法筛选对金黄色葡萄球菌ATCC 29213具有抑制作用的乳酸菌。将MRS培养基的pH值调节至1~10,测定乳酸菌的耐酸能力;在MRS培养基中添加0~0.30%的牛胆盐,测定乳酸菌的耐胆盐能力。应用微量肉汤倍比稀释法测定乳酸菌无细胞上清液(cell-free culture supernatant,CFCS)对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和亚抑菌浓度(subinhibitory concentration,SIC);考查CFCS在不同pH值条件下及经酶处理后对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的抑制作用变化,初步分析CFCS的抑菌活性物质;利用牛津杯双层琼脂扩散法测定CFCS对驼乳源和奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌野生株的抑制作用。[结果]从45份驼乳中分离得到5种20株乳酸菌,分别为粪肠球菌(Enterococcus faecalis,n=13)、鼠李糖乳杆菌(Lacticaseibcillus rhamnsus,n=1)、发酵黏液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum,n=3)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei,n=1)和融合魏斯氏菌(Weissella confusa,n=2)。经3种方法筛选,鼠李糖乳杆菌KC4株对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的抑菌作用最强,且具有良好的耐酸和耐胆盐特性,在pH值为4~7和牛胆盐浓度为0~0.20%的条件下均可正常生长。KC4株的CFCS对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的MIC和SIC分别为62.5 mg/mL和7.8125 mg/mL;在pH值为2~5时仍具有抑菌效果,经过胃蛋白酶、过氧化物酶、胰蛋白酶、肽酶、蛋白酶K、过氧化氢酶和木瓜蛋白酶处理后抑菌效果极显著(P<0.01)降低;对驼源和牛源金黄色葡萄球菌野生株均具有良好的抑菌效果。[结论]在呼图壁县驼乳中筛选出1株对金黄色葡萄球菌标准菌株以及驼源和牛源金黄色葡萄球菌野生菌株均具有较强抑制作用的鼠李糖乳杆菌,具有较强的耐酸和耐胆盐能力,其抑菌活性物质可能包括酸、过氧化物和蛋白类物质等。研究结果为驼乳源乳酸菌的开发利用提供了潜在菌种资源。

关键词：驼乳乳酸菌金黄色葡萄球菌抑菌活性