检索结果-南通市图书馆

黑曲霉脂肪酶A在毕赤酵母细胞表面的展示研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑曲霉脂肪酶A在毕赤酵母细胞表面的展示研究

作者：吴慧娟华中科技大学

学位级别：硕士

黑曲霉被美国食品和药品管理局（FDA）认定为GRAS生物，其产生的脂肪酶催化水解或合成甘油三酯具有高度的1,3-位置特异性，广泛应用于食品添加剂、油脂改性、手性化合物拆分及清洁添加剂等领域。然而，目前其主要以游离态形式予以应用... 详细信息

黑曲霉被美国食品和药品管理局（FDA）认定为GRAS生物，其产生的脂肪酶催化水解或合成甘油三酯具有高度的1,3-位置特异性，广泛应用于食品添加剂、油脂改性、手性化合物拆分及清洁添加剂等领域。然而，目前其主要以游离态形式予以应用，在有机溶剂中易失活，并难以回收重复利用，生产成本高。针对游离态酶在应用中的上述缺陷，拟利用微生物表面展示技术将黑曲霉脂肪酶A（ANLA）展示于酵母细胞表面，在提高酶稳定性的同时，实现脂肪酶的表达、固定及纯化一体化、简单化。同时，考虑到有诸多因素影响着展示脂肪酶的活力，本研究在前期实验室筛选的酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1锚定蛋白的基础上，以毕赤酵母X-33（酿酒酵母存在过度糖基化现象）为宿主，探讨了不同连接序列和启动子对展示ANLA酶活力的影响，以期为开发性能良好的黑曲霉脂肪酶全细胞催化剂提供新的理论探讨和技术支持。主要研究工作和结果摘要如下： 1.以酵母细胞壁蛋白Sed1为锚定蛋白，在Sed1与ANLA之间插入不同的连接序列，构建六种基于不同连接序列的表面展示系统。经过筛选各获得1株酶活力较高的重组菌株，分别为X-33/pAOX-A0S89#, X-33/pAOX-AGS44#, X-33/pAOX-AS1S44#, X-33/pAOX-AS2S32#, X-33/pAOX-AS3S42#, X-33/pAOX-AS4S62#。采用Fisher法（α＝0.05）对六株重组菌株的酶活力进行多重比较，结果显示X-33/pAOX-AGS44#酶活最高，可达到24.96U/g干细胞，略大于X-33/pAOX-AS1S44#酶活（22.74U/g干细胞），两者均显著大于其余四株重组菌株的酶活。利用流式细胞仪对六株重组菌株展示效率进行检测分析，X-33/pAOX-AGS44#的展示率最高，达94.58%，而X-33/pAOX-AS1S44#的展示率最低，仅为61.57%。上述结果表明，选用(G4S)3为连接序列构建的重组菌株X-33/pAOX-AGS44#展示ANLA的效果最佳。展示ANLA的最适温度和最适pH分别为45°C, pH7.5，与游离酶一致，但稳定性有所提高。 2.构建诱导型表面展示载体pFLD-AGS和组成型表面展示载体pGAP-AGS,pTEF-AGS，分别将其电转入毕赤酵母X-33中，经筛选各获得1株酶活力较高的重组菌株，分别为X-33/pFLD-AGS35#, X-33/pGAP-AGS19#, X-33/pTEF-AGS77#。对三株重组菌与之前获得的X-33/pAOX-AGS44#酶活力进行多重比较分析，结果表明X-33/pAOX-AGS44#与X-33/pFLD-AGS35#之间酶活无显著差别，但显著大于另两株的酶活，而X-33/pTEF-AGS77#酶活显著小于其它三株重组菌株。 3.分别对X-33/pAOX-AGS44#, X-33/pFLD-AGS35#, X-33/pGAP-AGS19#的摇瓶发酵条件进行优化，在甲醇诱导时间为72h，初始pH为6.0，每24h甲醇添加量为1%，接种量为6%，装液量为50mL的条件下，X-33/pAOX-AGS44#展示ANLA的酶活力最高可达到38.02U/g干细胞;在甲醇诱导时间为72h，初始pH为7.5，每24h甲醇添加量为2%，接种量为2%，装液量为40mL的条件下，X-33/pFLD-AGS35#展示ANLA的酶活力可达30.46U/g干细胞;在以油酸作为碳源，氮源蛋白胨及酵母提取物浓度分别为4%,1%，初始pH为6.5，接种量为2%，装液量为50mL，培养时间为48h的条件下，X-33/pGAP-AGS19#展示ANLA的酶活力达到27.06U/g干细胞。对三者优化后的酶活进行多重比较发现，X-33/pAOX-AGS44#的酶活力显著高于另外两株重组菌株。上述结果表明，选用PAOX1调控融合蛋白的表达时，展示ANLA酶活力最高。

关键词：黑曲霉脂肪酶A 毕赤酵母表面展示连接序列启动子

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

权吉浩《京剧印象》的创作特点及立意阐释

中国音乐 2015年第4期 143-147页

作者：吴慧娟陈静竞福州大学人文学院福州大学人文学院音乐系

权吉浩为琵琶和民族管弦乐队而作的《京剧印象》完成并首演于2005年,共有三个乐章。整个作品的构思来源于京剧,但却是作者本人的主观印象并"借景发挥"。笔者从四个方面分析该曲的创作特点,并从立意上对该曲进行阐释。

关键词：标题性印象对比交互弥撒写意

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于煤炭企业建立风险防范机制的研究

煤炭技术 2013年第8期32卷 264-265页

作者：吴慧娟郑州大学西亚斯国际学院法学院郑州451150

煤炭行业是一个风险压力极大的行业,而煤炭企业除了需要承担市场竞争的压力和安全事故的风险之外,还需要面对法律风险可能引发的问题。若想健康长久地发展下去,煤炭企业就必须正视法律风险,对可能造成法律问题的因素做到及时发现和解决... 详细信息

煤炭行业是一个风险压力极大的行业,而煤炭企业除了需要承担市场竞争的压力和安全事故的风险之外,还需要面对法律风险可能引发的问题。若想健康长久地发展下去,煤炭企业就必须正视法律风险,对可能造成法律问题的因素做到及时发现和解决,同时制定完善的法律风险防范机制,使企业在健全的防范制度下蓬勃发展。

关键词：煤炭企业安全事故合同法律风险防范机制

黎曼流形上关于p-Laplacian的ν-Euclidean类型的Faber-Krahn不等式

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

信阳师范学院学报（自然科学版） 2019年第2期32卷 185-190页

作者：张留伟吴慧娟信阳师范学院数学与统计学院河南信阳464000

首先利用Federer-Fleming定理研究了黎曼流形上p-Laplace算子的解析Faber-Krahn不等式;其次利用余面积公式和Cavalieri原理研究了黎曼流形上p-Laplace算子的解析Faber-Krahn不等式的一般化.

关键词： p-Laplace算子 Federer-Fleming定理 Faber-Krahn不等式等周常数 Cheeger常数

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

晚期非小细胞肺癌23例NP方案治疗体会

郑州大学学报（医学版） 2005年第6期40卷 1178-1179页

作者：邹宏志吴慧娟河南省肿瘤医院内科郑州450003

异长春花碱（NVB）是一种半合成的长春碱类抗癌药,在非小细胞肺癌治疗中单药有效率达29%～33%.1994年12月美国FDA批准将单制剂的NVB或与顺铂（DDP）合用作为不可切除的晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的一线治疗药物.本院从2003年4月至2... 详细信息

异长春花碱（NVB）是一种半合成的长春碱类抗癌药,在非小细胞肺癌治疗中单药有效率达29%～33%.1994年12月美国FDA批准将单制剂的NVB或与顺铂（DDP）合用作为不可切除的晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的一线治疗药物.本院从2003年4月至2005年4月以NVB＋DDP（NP）治疗NSCLC 23例,观察了临床疗效和不良反应,报道如下.[第一段]

关键词：晚期非小细胞肺癌去甲长春碱顺铂

中国碳市场价格特征及其成因分析:高低性、均衡性与稳定性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界林业研究 2021年第3期34卷 123-128页

作者：吴慧娟张智光南京林业大学经济管理学院南京210037 南京林业大学环境与发展系统工程研究所南京210037

文中对中国8个碳交易市场现状分析发现,碳市场价格呈现总体偏低、均衡性差、稳定性弱的特征;剖析中国碳价形成机制表明,碳政策缺失或过于宽松、林业碳汇抵消占比过低、经济过度依赖高能耗产业及环保投入不足等是形成目前碳价特征的关键... 详细信息

文中对中国8个碳交易市场现状分析发现,碳市场价格呈现总体偏低、均衡性差、稳定性弱的特征;剖析中国碳价形成机制表明,碳政策缺失或过于宽松、林业碳汇抵消占比过低、经济过度依赖高能耗产业及环保投入不足等是形成目前碳价特征的关键原因,可为中国统一碳市场、完善价格机制提供参考。

关键词：碳价特征效应成因林业碳汇中国

继往开来推陈出新——第十三届中日音乐比较研究国际学术研讨会综述

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人民音乐 2020年第4期 58-61页

作者：吴慧娟高媛福州大学

2019年11月23日至11月24日,第十三届中日音乐比较研究国际学术研讨会在福州大学成功举办。共有来自东京文化财研究所、冲绳县立艺术大学,埼玉大学、法政大学、京都市立艺术大学、东京艺术大学、东京大学等12所院校和研究机构的17名日本... 详细信息

2019年11月23日至11月24日,第十三届中日音乐比较研究国际学术研讨会在福州大学成功举办。共有来自东京文化财研究所、冲绳县立艺术大学,埼玉大学、法政大学、京都市立艺术大学、东京艺术大学、东京大学等12所院校和研究机构的17名日本学者和中国在日留学生以及来自福建师范大学、武汉音乐学院、上海音乐学院、新疆艺术学院、中国戏曲学院、中国音乐学院、台湾艺术大学、台湾师范大学及福建省内各高校等百余名学者出席本次会议。

关键词：福建师范大学福州大学东京艺术大学中国音乐学院中国戏曲学院武汉音乐学院东京大学上海音乐学院

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

一类捕食者具有传染病的时滞生态模型

信阳师范学院学报（自然科学版） 2014年第1期27卷 8-11页

作者：吴慧娟宋强信阳师范学院数学与信息科学学院河南信阳464000 信阳水利技工学校河南信阳464000 信阳职业技术学院数学与计算机科学系河南信阳464000

研究了一类捕食者内部传播疾病且带时滞的捕食系统.分析了非负不变集、边界平衡态和正平衡态.当时滞τ足够小时,无病平衡点和正平衡点是局部渐近稳定的,随着时滞的增加,将产生Hopf分支.

关键词：捕食模型,传染病模型时滞 Hopf分支

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

一带一路上的梨形琵琶

音乐艺术（上海音乐学院学报） 2022年第4期 143-148,M0004页

作者：吴慧娟宋婉忻福州大学福州350000 福州大学人文学院福州350000 福建医科大学文理艺术学院艺术系福州350000

一带一路上的梨形弹拨乐器,起源于史前美索不达米亚的一种叫“乌德”也称“巴尔伯特”的弹拨乐器。在中国演变成被称为“琵琶”的乐器。不仅乐器本身发生了很大的变化,而且演奏姿势由横抱、斜抱转为竖抱,演奏方法由指肉或加内指甲触弦,... 详细信息

一带一路上的梨形弹拨乐器,起源于史前美索不达米亚的一种叫“乌德”也称“巴尔伯特”的弹拨乐器。在中国演变成被称为“琵琶”的乐器。不仅乐器本身发生了很大的变化,而且演奏姿势由横抱、斜抱转为竖抱,演奏方法由指肉或加内指甲触弦,转为以指甲面触弦的奏法,这是符合中国人的欣赏习惯、审美观念的转变。一带一路促成了沿途各种梨形式弹拨乐器的产生,其间主要是西洋的琉特琴属和中国的琵琶属。这一切都是一带一路带来的开放、包容、接受、变化的结果,对今人有着极大的启示。

关键词：一带一路乌德琉特琴梨形琵琶演奏姿势演奏法