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TLR4-NOD2协同信号传递增强树突状细胞抗结核分枝杆菌感染的作用研究

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中国病原生物学杂志 2017年第7期12卷 601-604页

作者：李萍吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

目的研究TRL4-NOD2(T4N2)信号传递增强树突状细胞(dendritic cell,DC)抗结核分枝杆菌(MTB)感染机制,为结核病(tuberculosis,TB)的免疫防治提供参考。方法分别用TLR4配体LPS、NOD2配体MDP和T4N2双配体刺激DC后,ELISA法定量检测1h、6h、12h、24h和48h上清液中IL-6和IL-12。DC经MTB感染再用LPS、MDP以及T4N2双配体刺激,24h后分别收集细胞培养并计数细胞内生长的菌落数,判断细菌生长的抑制率。结果ELISA显示T4N2双信号刺激DC后,细胞因子IL-6在1h、6h、12h、24h和48h浓度分别为(86.4±0.34)pg/ml、(92.2±0.69)pg/ml、(93.6±0.69)pg/ml、(96.0±1.73)pg/ml和(107.8±4.53)pg/ml;IL-12在1h、6h、12h、24h和48h浓度分别为(94.6±4.07)pg/ml、(100.9±4.45)pg/ml、(97.9±2.96)pg/ml、(112.4±9.28)pg/ml和(132.8±1.49)pg/ml。不同时间段T4N2双信号刺激较LPS、MDP刺激显著增多(P<0.05);T4N2双信号活化的DC对MTB生长抑制率显著增强。结论 T4N2信号传递能协同增强DC的活化,活化的DC可抑制MTB的生长。

关键词：结核分枝杆菌树突状细胞 TLR4-NOD2 协同信号

大理地区结核分枝杆菌MIRU-VNTR位点的多态性分析

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中国病原生物学杂志 2014年第4期9卷 312-315页

作者：董毅吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的了解大理地区结核分枝杆菌基因组中的数目可变串联重复序列(variable number tandem repeat,VNTR)即MIRU(mycobacterium interspersed repetitive unit)基因多态性,探讨MIRU-VNTR位点多态性的应用价值。方法采用PCR和琼脂糖凝胶电泳检测大理地区临床分离的60株结核分枝杆菌7个VNTR位点,采用MIRU-VNTR技术进行分型,利用Hunter-Gaston指数(HGI)对各MIRU进行分辨力评价,并应用Quantity one软件和BioNumerics6.6软件进行数字化和聚类分析。结果 60株结核分枝杆菌分为5个基因群(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ群)52个基因型。Ⅰ群占56.77%,含有29个基因型;Ⅱ群占25.00%,含有13个基因型;Ⅲ群占8.33%,含有5个基因型;Ⅳ群占6.67%,含有3个基因型;Ⅴ群占3.33%,含有2个基因型。7位点组合总分辨力为0.900,最高ETR-E位点0.735,最低ETR-C位点0.455。结论大理地区分离株结核分枝杆菌存在基因多态性,7位点MIRU-VNTR分型简便快速,分辨力高,适合用于大理地区结核分枝杆菌的基因分型检测。

关键词：结核分枝杆菌基因分型多位点可变串联重复序列多态性 Hunter-Gaston指数

结核分枝杆菌重组Mtb8.1蛋白自诱导表达与抗原性分析

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中国人兽共患病学报 2014年第5期30卷 535-537页

作者：聂恒吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室大理671000

目的通过自诱导表达系统重组表达结核分枝杆菌H37Rv菌株可溶性蛋白抗原Mtb8.1,并对其抗原性进行分析。方法应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37Rv菌株Mtb81蛋白抗原编码序列,将其插入克隆载体pMD18-T,酶切后插入表达载体PET28a,通过优化培... 详细信息

目的通过自诱导表达系统重组表达结核分枝杆菌H37Rv菌株可溶性蛋白抗原Mtb8.1,并对其抗原性进行分析。方法应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37Rv菌株Mtb81蛋白抗原编码序列,将其插入克隆载体pMD18-T,酶切后插入表达载体PET28a,通过优化培养基和发酵工艺,摸索出一条高效的可溶表达方法,以间接ELISA法研究其免疫学特性。结果与结论重组的Mtb81高效可溶性表达,纯化后纯度达95%以上;用纯化的重组蛋白抗原作为包被抗原建立的间接ELISA法检测200份血清样本,阳性率达34.0%,阴性率达91.0%,,符合率达62.5%。

关键词：结核分枝杆菌 Mtb8 1 可溶性表达抗原性

双歧杆菌介导的福氏志贺菌Bb-ipaB疫苗免疫机制研究

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中国病原生物学杂志 2013年第4期8卷 315-317,335页

作者：王国富薛士鹏吴利先云南省大理学院下关校区基础医学院微生物学教研室云南大理671000

目的探讨双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum,Bb)介导的福氏志贺菌(Shigella flexneri)Bb-ipaB疫苗的免疫机制。方法雌性BALB/c小鼠随机均分为3组:疫苗组(Bb-ipaB)、Bb组和PBS组。每周灌胃免疫1次,共4次。未次免疫1周后检测小鼠血清特异... 详细信息

目的探讨双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum,Bb)介导的福氏志贺菌(Shigella flexneri)Bb-ipaB疫苗的免疫机制。方法雌性BALB/c小鼠随机均分为3组:疫苗组(Bb-ipaB)、Bb组和PBS组。每周灌胃免疫1次,共4次。未次免疫1周后检测小鼠血清特异性IgG、IgE、IgA及小肠黏液sIgA;取小鼠胸腺和脾脏,称重,计算胸腺和脾指数;采用MTT法检测脾细胞增殖活性,采用ELISA法检测脾细胞因子IFN-γ和IL-4水平。结果疫苗组小鼠血清特异性IgG、IgE、IgA,小肠黏液sIgA,胸腺脾指数,脾细胞增殖能力及脾细胞IFN-γ和IL-4水平均显著高于对照组(P<0.01)。结论 Bb-ipaB疫苗免疫可刺激小鼠产生高水平的特异性抗体和细胞因子,并能促进脾细胞增殖,具有开发潜能和研究价值。

关键词：双歧杆菌福氏志贺菌疫苗免疫机制

注射用法罗培南钠对金葡菌的体内外抗菌活性研究

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中国抗生素杂志 2008年第5期33卷 289-292页

作者：罗涛黄文祥吴利先重庆医科大学附属第一医院重庆市传染病寄生虫病重点实验室重庆400016

目的研究注射用法罗培南钠对临床分离的金葡菌的体内外抗菌活性。方法用头孢西丁纸片法在近年来本室保存的临床分离金葡菌中筛选耐甲氧西林的金葡菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA),用琼脂平板稀释法测定法罗培南... 详细信息

目的研究注射用法罗培南钠对临床分离的金葡菌的体内外抗菌活性。方法用头孢西丁纸片法在近年来本室保存的临床分离金葡菌中筛选耐甲氧西林的金葡菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA),用琼脂平板稀释法测定法罗培南和万古霉素对甲氧西林敏感的金葡菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus,MSSA)和MRSA菌株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)。根据MIC选择对法罗培南敏感、中度和高度耐药的MRSA菌株及1株MSSA建立小鼠腹膜炎模型,以注射用法罗培南钠及万古霉素通过静脉注射进行感染动物的治疗,评价对感染小鼠的保护作用。结果151株金葡菌中共分离出65株MRSA,阳性率为43%;体外试验法罗培南和万古霉素对86株MSSA均敏感。65株MRSA对法罗培南敏感者10株,其余均耐药;对万古霉素均敏感。注射用法罗培南钠对4株菌的ED_(50)分别为38.3、38.6、71.9和7.07mg/kg;万古霉素则为2.25、10.18、20.85和1.77mg/kg。结论注射用法罗培南钠对MSSA有良好的体内和体外抗菌活性;注射用法罗培南钠对MRSA无效,即使体外敏感。

关键词：法罗培南钠金葡菌体外抗菌活性体内抗菌活性

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非结核分枝杆菌基因分型的研究进展

中国病原生物学杂志 2019年第3期14卷 371-372,F0003页

作者：翟凯新吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)是除结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的所有的分枝杆菌的总称。近年来,非结核分枝杆菌病呈上升趋势,NTM可侵犯以肺部病变为主的全身各部分组织器官。由于非结核分枝杆菌菌种多样,基因... 详细信息

非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)是除结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的所有的分枝杆菌的总称。近年来,非结核分枝杆菌病呈上升趋势,NTM可侵犯以肺部病变为主的全身各部分组织器官。由于非结核分枝杆菌菌种多样,基因型复杂,且不同菌株毒力与耐药性不同。其基因分型将为临床的诊断和治疗提供了有力的依据。目前非结核分枝杆菌基因分型技术主要分为非核酸法(传统方法)和核酸法(分子生物法)。本文就当前主要的核酸分型技术做一综述。

关键词：非结核分枝杆菌基因分型分子生物技术综述

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免疫佐剂在抗结核疫苗中的研究进展

中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 I0004-I0004,F0003,F0004页

作者：李萍吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

免疫佐剂可非特异性增强或改变抗原免疫应答,发挥免疫调节、抗原递呈作用,调动T细胞和B细胞介导的免疫应答成为疫苗的有效辅助成分。研究免疫佐剂的生物学特性及种类,有利于新型疫苗的开发。本文就抗结核疫苗研究中相关免疫佐剂的研发... 详细信息

免疫佐剂可非特异性增强或改变抗原免疫应答,发挥免疫调节、抗原递呈作用,调动T细胞和B细胞介导的免疫应答成为疫苗的有效辅助成分。研究免疫佐剂的生物学特性及种类,有利于新型疫苗的开发。本文就抗结核疫苗研究中相关免疫佐剂的研发现状作一综述。

关键词：免疫佐剂免疫应答结核分枝杆菌综述

非结核分枝杆菌的毒力因子及免疫机制研究进展

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中国病原生物学杂志 2020年第5期15卷 609-611,615页

作者：陈晓文吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)的病例有逐年呈上升的趋势,尤其是合并HIV感染的发病率。由于NTM菌种多样,毒力因子多样,且不同菌种毒力与耐药性不同,分为致病性和非致病性两类。致病性分枝杆菌只要寄生于巨噬细胞内,... 详细信息

非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)的病例有逐年呈上升的趋势,尤其是合并HIV感染的发病率。由于NTM菌种多样,毒力因子多样,且不同菌种毒力与耐药性不同,分为致病性和非致病性两类。致病性分枝杆菌只要寄生于巨噬细胞内,因此目前研究宿主对NTM的免疫反应以及NTM如何能够在宿主巨噬细胞防御机制中生存对未来寻找有效治疗NTM的新型疗法至关重要。本文将对NTM毒力因子及免疫机制做一综述。

关键词：非结核分枝杆菌免疫应答巨噬细胞综述

人类免疫缺陷病毒与结核分枝杆菌双重感染的研究进展

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中国病原生物学杂志 2016年第4期11卷 374-376页

作者：郝贤斌吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

人类免疫缺陷病毒和结核分枝杆菌双重感染是相互影响相互促进病变进展、恶化,迅速导致死亡的过程。因此,及时诊断结核分枝杆菌感染对人类免疫缺陷病毒感染者的临床诊治和降低病死率,对控制艾滋病和结核病的快速流行有着重要的意义。本文... 详细信息

人类免疫缺陷病毒和结核分枝杆菌双重感染是相互影响相互促进病变进展、恶化,迅速导致死亡的过程。因此,及时诊断结核分枝杆菌感染对人类免疫缺陷病毒感染者的临床诊治和降低病死率,对控制艾滋病和结核病的快速流行有着重要的意义。本文就HIV与MTB双重感染的流行情况、相互影响机制、实验室诊断、治疗与预防等方面的研究进展进行了综述。

关键词：人类免疫缺陷病毒结核分枝杆菌双重感染综述