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结核分枝杆菌特异性蛋白抗原研究进展及其应用策略探讨

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中国病原生物学杂志 2014年第2期9卷 180-182,187页

作者：聂恒吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋... 详细信息

结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋白、MTB81、MTB84和U1蛋白等9种结核分枝杆菌重要抗原的研究进展,并对其应用策略进行了探讨。

关键词：结核分枝杆菌蛋白抗原诊断综述

艾滋病与结核病双重感染的流行及相互作用机制的研究进展

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中国病原生物学杂志 2013年第8期8卷 756-758页

作者：王超吴利先云南省大理学院基础医学院微生物学教研室云南大理671000

艾滋病与结核病双重感染已成为严重的公共卫生问题,艾滋病和结核病相互促进,加速HIV感染发展为艾滋病的进程,增高了结核病的死亡率。只有弄清HIV与结核分枝杆菌相互作用机制,才有可能找到有效的治疗措施。本文综述了艾滋病合并结核病双... 详细信息

艾滋病与结核病双重感染已成为严重的公共卫生问题,艾滋病和结核病相互促进,加速HIV感染发展为艾滋病的进程,增高了结核病的死亡率。只有弄清HIV与结核分枝杆菌相互作用机制,才有可能找到有效的治疗措施。本文综述了艾滋病合并结核病双重感染的流行现状以及艾滋病与结核病的相互影响机制研究进展。

关键词：艾滋病结核病双重感染作用机制综述

大理白族自治州2017至2019年结核分枝杆菌药敏试验结果分析及空间分布特征

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中华检验医学杂志 2021年第11期44卷 1064-1069页

作者：陈冉张镜兰吴利先大理白族自治州疾病预防控制中心检验中心大理671000 大理大学医学微生物学与免疫学教研室大理671000

目的分析大理白族自治州(大理州)2017至2019年结核分枝杆菌(MTB)对常用抗结核药物的耐药情况及其空间分布规律,为结核病治疗和耐药结核病防控提供参考依据。方法收集2017年1月至2019年12月大理州12县(市)定点人民医院结核病实验室痰标... 详细信息

目的分析大理白族自治州(大理州)2017至2019年结核分枝杆菌(MTB)对常用抗结核药物的耐药情况及其空间分布规律,为结核病治疗和耐药结核病防控提供参考依据。方法收集2017年1月至2019年12月大理州12县(市)定点人民医院结核病实验室痰标本分离的1013株分枝杆菌菌株,采用比例法对6种抗结核药物进行药敏试验及菌种鉴定。运用ArcMap10.2和GeoDa1.14软件对MTB耐药情况进行地图可视化展示和空间自相关分析,即莫兰指数(Moran′s I指数)。结果2017至2019年大理州MTB药敏试验耐药率分别为10.33%(28/271)、10.35%(55/531)和30.00%(51/170),呈上升趋势(χ^(²)=26.62,P<0.05)。在1013份样本中MTB 972株(95.95%)、非结核分枝杆菌(NTM)41株(4.05%)。972株MTB总耐药率13.79%(134/972),其中单耐药率6.59%(64/972)、耐多药率4.84%(47/972)、多耐药率2.06%(20/972)、广泛耐药率0.31%(3/972)。耐药谱共有25种组合。NTM检出率为4%(41/1013),其中弥渡县检出率最高(0.89%,9/1013)。空间分布特征显示各县市间MTB耐药株数具有空间负相关性(Moran′s I值为‒0.367,P<0.05),说明各县市之间无聚集性耐药,表现为个别县市耐药显著。永平县和南涧彝族自治县为低高值聚集,云龙县为高低值聚集。结论2017至2019年大理州MTB耐药情况呈现上升趋势;地区间的耐药株数区域显著性大。

关键词：分枝杆菌,结核抗结核药药物敏感性试验空间自相关分析

鸟分枝杆菌MAV-4563蛋白的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第9期17卷 1015-1019页

作者：马枫茜陈瑞枫丁寿鹏李祥芳高婧华吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

目的应用生物信息学方法预测分析鸟结核分枝杆菌MAV-dalidaxue4563基因编码蛋白的结构功能和生物学特性。方法采用Protparam、ProtScaleon Expasy,TMHMM Server v 2.0,SignalP4.1,PSORT,NetPhos 3.1,BLAST,SOPMA,Phyre2,ABCpred,SYFPEITHI等生物信息学软件分析MAV4563蛋白的理化性质、亲疏水性、跨膜区、信号肽、亚细胞定位、磷酸化位点、保守域、二结构及三级结构同源建模、B细胞和T细胞表位等生物学特征。结果MAV4563基因全长756 bp,编码251个氨基酸的蛋白。该蛋白分子质量为28 ku,等电点为9.23,分子式(formula)为C_(1264)H_(2013)N_(385)O_(353)S_(7),为不稳定的疏水性蛋白。该蛋白无跨膜区,无信号肽,预测亚细胞定位于细胞质中,有13个磷酸化位点;蛋白二级结构中无规则卷曲占41.83%;预测该蛋白含多个B细胞和T细胞表位,其中MHC-I型和MHC-II型表位集中在蛋白C端的后90个氨基酸区域。结论预测MAV-4563蛋白含多个B细胞和T细胞表位,其中B细胞表位和MHC-I型表位集中在C端的后90个氨基酸区域,该区域可激活NTM特异性CTL和Th免疫应答,可作为非结核病的靶向疫苗抗原,为进一步研究该蛋白的治疗性T细胞疫苗奠定了基础。

关键词：鸟结核分枝杆菌 MAV-4563蛋白 T细胞疫苗

幽门螺杆菌HpaA-CtxB融合蛋白的研制及免疫原性研究

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幽门螺杆菌HpaA-CtxB融合蛋白的研制及免疫原性研究

作者：吴利先重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：用基因工程技术克隆和表达H.pylori 的hpaA基因，以纯化的重组蛋白为抗原，建立检测血清HpaA抗体的间接ELISA法，探讨以重组蛋白作为抗原在诊断H.pylori感染中的价值。方法：用PCR方法从H.pylori DNA中扩增hpaA基因片段。插入原... 详细信息

目的：用基因工程技术克隆和表达H.pylori 的hpaA基因，以纯化的重组蛋白为抗原，建立检测血清HpaA抗体的间接ELISA法，探讨以重组蛋白作为抗原在诊断H.pylori感染中的价值。方法：用PCR方法从H.pylori DNA中扩增hpaA基因片段。插入原核表达载体pQE30，转化受体菌DH5a，克隆及序列分析后在大肠杆菌中进行高效表达，表达产物经纯化和Western blot鉴定后，作为抗原,建立检测血清H.pylori HpaA抗体的间接ELISA法，与科研诊断标准比较评价其应用的可行性。结果： 1.重组表达质粒pQE30-hpaA构建成功,序列分析所得序列完整，插入的基因片段全长783bp，与基因文库中的hpaA基因同源性达97.3%;2. SDS-PAGE显示表达产物相对分子量为30 000，表达量占全菌总量的31.67%;3. Western blot显示该蛋白可被病人血清所识别;4.SDS-PAGE分析表达形式，蛋白主要存在于细菌裂解液上清中，部分存在于包涵体中,经Ni2+-NTA树脂对上清进行纯化后，可得到纯度90%以上的蛋白质;5.重组蛋白免疫兔后的免疫血清双扩

关键词：幽门螺杆菌粘附素原核表达酶联免疫吸附试验

鸟分枝杆菌MAV_2043基因编码蛋白的生物信息学分析

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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中国病原生物学杂志 2022年第8期17卷 907-911页

作者：陈瑞枫马枫茜李祥芳丁寿鹏高婧华吴利先大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的预测鸟分枝杆菌MAV_2043基因编码蛋白的结构和功能。方法利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、Protcale、TMHMM-2.0服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法和IEDB数据库等生物信息学预测软件对MAV_2043编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性分析、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测;运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA11软件构建进化树,进行系统进化分析。结果MAV_2043基因全长618 bp,共编码205个氨基酸。MAV_2043基因编码蛋白与鸟分枝杆菌亚种起源相同,该蛋白与结核分枝杆菌的[Cu-Zn]超氧化物歧化酶同源性较高。该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、有信号肽;预测该蛋白亚细胞定位在细胞膜上,二级结构以β折叠为主;三级结构模型显示该蛋白可形成同源二聚体,有两个Cu~+配体的结合空间位置。结论生物信息学预测鸟分枝杆菌MAV_2043基因编码蛋白可能为[Cu-Zn]超氧化物歧化酶,是鸟分枝杆菌中的重要毒力因子,可为鸟分枝杆菌靶向治疗提供新思路。

关键词：鸟分枝杆菌 MAV_2043 [Cu-Zn]超氧化物歧化酶生物信息学

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多位点测序技术在病原菌核型分析中的应用

中华检验医学杂志 2006年第3期29卷 278-281页

作者：吴利先黄文祥重庆医科大学附属第一医院感染科重庆市传染病寄生虫病学重点实验室 400016

随着分子生物学研究技术的发展,有人说在未来5～10年中,对人类健康做出贡献的最关键生物技术是传染病的分子诊断技术。

关键词：核型分析测序技术分子生物学研究病原菌位点分子诊断技术核酸分析遗传相关性脉冲场电泳生物技术

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幽门螺杆菌活载体疫苗的研究进展

中国人兽共患病学报 2011年第5期27卷 447-449页

作者：罗夙医吴利先大理学院基础医学院微生物学及免疫学教研室大理671000

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）被公认为是慢性活动性胃炎、消化性溃疡等疾病发生的主要病因,并与胃腺癌、胃淋巴瘤的发生密切相关,是一级致癌因子[1]。虽然HP确切的致病机制尚未完全阐明,但HP必须首先定植于胃粘膜,然后再进一... 详细信息

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）被公认为是慢性活动性胃炎、消化性溃疡等疾病发生的主要病因,并与胃腺癌、胃淋巴瘤的发生密切相关,是一级致癌因子[1]。虽然HP确切的致病机制尚未完全阐明,但HP必须首先定植于胃粘膜,然后再进一步侵入宿主防御系统,由其毒素的直接作用和诱导的炎症反应等间接作用损伤组织而致病。流行病学调查研究显示，我国幽门螺旋杆菌感染率约为40％～60％，儿童也有相当高的感染率。

关键词：幽门螺杆菌活载体疫苗慢性活动性胃炎宿主防御系统流行病学调查幽门螺旋杆菌致病机制消化性溃疡

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结核分枝杆菌与树突状细胞相互作用研究进展

中国病原生物学杂志 2017年第4期12卷 381-383页

作者：李萍吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

结核病仍是严重危害人类健康的慢性传染性疾病。树突细胞是体内作用最强大的专职抗原呈递细胞,也是机体联系固有免疫和适应性免疫的重要桥梁细胞。树突细胞与结核分枝杆菌的相互作用是抗结核感染中的重要途径。本文就近年树突细胞与结... 详细信息

结核病仍是严重危害人类健康的慢性传染性疾病。树突细胞是体内作用最强大的专职抗原呈递细胞,也是机体联系固有免疫和适应性免疫的重要桥梁细胞。树突细胞与结核分枝杆菌的相互作用是抗结核感染中的重要途径。本文就近年树突细胞与结核分枝杆菌的相互作用研究进展作一综述。

关键词：结核分枝杆菌树突状细胞免疫应答综述