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沙滩马鞭草提取物对HeLa细胞的生长抑制及诱导凋亡作用的实验研究

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沙滩马鞭草提取物对HeLa细胞的生长抑制及诱导凋亡作用的实验研究

作者：吴佳梅中国医科大学

学位级别：硕士

恶性肿瘤是目前危害人体生命和健康的严重疾病之一,据世界卫生组织(WHO)统计资料表明,全世界癌症每年发病约1000万人,死亡约700万人,已成为人类仅次于心血管病的第二杀手。因此探索有效的肿瘤治疗方法成为必然。在恶性肿瘤的治疗中,药... 详细信息

恶性肿瘤是目前危害人体生命和健康的严重疾病之一,据世界卫生组织(WHO)统计资料表明,全世界癌症每年发病约1000万人,死亡约700万人,已成为人类仅次于心血管病的第二杀手。因此探索有效的肿瘤治疗方法成为必然。在恶性肿瘤的治疗中,药物治疗占有重要地位。在合成的化学类抗肿瘤药物中绝大多数是以天然抗肿瘤活性成分为先导的化合物。因而,从天然植物成分中,筛选能够引起细胞凋亡,抑制细胞生长的药物,将是今后抗肿瘤治疗最理想的途径。沙滩马鞭草是原产于巴拉圭的多年生药用植物。目前有关沙滩马鞭草药理活性的研究主要集中在对神经生长因子(NGF)的增强作用方面,还未见沙滩马鞭草及其提取物有抗肿瘤活性的报道。本研究对从沙滩马鞭草中提取的16个单一成分的抗肿瘤活性进行了初步筛查,并对其中抗肿瘤活性较强的16#成分的抗肿瘤机制进行了初步探讨。宫颈癌是常见妇科恶性肿瘤之一,发病率和死亡率在女性恶性肿瘤中居第二位,仅次于乳腺癌。为此,我们选择了HeLa细胞(人宫颈癌细胞)为研究对象,观察沙滩马鞭草提取物对其生长的抑制作用,并从细胞凋亡方面来进一步探讨沙滩马鞭草提取物诱导细胞凋亡的机理。材料与方法一、细胞培养：将HeLa细胞接种于含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,置于37℃,5%的CO2培养箱中,2～3d传代1次,取对数生长期细胞用于实验。二、沙滩马鞭草提取物的制备单体化合物编号1-16,由沈阳药科大学提供,从沙滩马鞭草Verbena littoralisH.B.K.的甲醇提取物中利用硅胶吸附柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备型HPLC等方法分离得到,通过理化常数和光谱数据分析(EI-MS、1HNMR、13C NMR、HMQC和HMBC)鉴定其结构。每个单体化合物经DMSO溶解制成储备液,4℃避光保存。三、MTT法检测沙滩马鞭草提取物对肿瘤细胞的生长抑制作用1、沙滩马鞭草16种提取物抗肿瘤活性的筛查采用MTT的方法,选用大肠癌细胞系Clone A对沙滩马鞭草16种提取物的生物学活性进行筛查。2、16#化合物对不同肿瘤细胞系的生长抑制作用采用MTT的方法,用筛选到的有生物学活性的化合物对不同肿瘤细胞系进行作用,观察其对不同肿瘤细胞的生长抑制作用是否存在选择性。四、16#化合物对HeLa细胞的生长抑制和诱导凋亡作用1、16#化合物对HeLa细胞系的生长抑制作用我们以生长抑制作用最为明显的HeLa细胞作为研究对象,采用不同浓度的16#化合物作用HeLa细胞24h后,观察其生长抑制作用。2、16#化合物对HeLa细胞作用后的细胞形态变化观察不同浓度的16#化合物作用HeLa细胞24h,相差显微镜下对形态进行观察;不同浓度的16#化合物作用HeLa细胞24h,荧光显微镜下观察其形态变化。3、流式细胞术检测16#化合物对HeLa细胞的诱导凋亡作用不同浓度的16#化合物作用HeLa细胞24h,采用Annexin-v/PI凋亡检测试剂盒进行凋亡率的测定。4、凝胶电泳检测16#化合物对HeLa细胞作用的DNA片段化分别用10、20μmol的16#化合物作用HeLa细胞24h,收集细胞、提取全基因组DNA,经2%的琼脂糖凝胶电泳检测其基因组DNA变化。实验结果一、沙滩马鞭草提取物的筛选与生物活性的鉴定1、沙滩马鞭草16种提取物抗肿瘤活性的筛查沙滩马鞭草16种提取物中的第16#化合物对Clone A细胞的生长抑制作用最为显著,说明16#化合物是抗肿瘤作用的有效成分。2、16#化合物对不同肿瘤细胞系的生长抑制作用采用MTT的方法,用筛选到的有生物学活性的16#化合物对不同肿瘤细胞系进行作用,发现16#化合物对不同的肿瘤细胞均具有生长抑制作用。二、16#化合物对HeLa细胞的生长抑制和诱导凋亡作用1、16#化合物对HeLa细胞系的生长抑制作用16#化合物对HeLa细胞的生长具有明显的抑制作用。且随药物浓度的增加,HeLa细胞的生长抑制率也逐渐增高。2、16#化合物作用宫颈癌HeLa细胞后的形态学变化不同浓度的16#化合物作用HeLa细胞24h后,相差显微镜下对其形态进行观察可见：细胞变圆、体积变小、细胞间隔稍增大,并可见凋亡小体。不同浓度的16#化合物作用HeLa细胞24h后,DAPI染色后荧光显微镜观察可见明显的凋亡小体。3、流式细胞术检测16#化合物对H

关键词：沙滩马鞭草 HeLa 细胞凋亡肿瘤

知识型员工心理契约现状及影响因素研究 ——以JHA银行为例

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知识型员工心理契约现状及影响因素研究 ...

作者：吴佳梅华中农业大学

学位级别：硕士

随着经济快速发展,我国各类企业的竞争格局都发生了翻天覆地的变化。在知识经济时代,有效发挥企业内部知识型人力资源的作用是帮助企业摆脱自身发展困境的重要手段。人力资源区别于其他资源的重要一点在于人是具有各种需求的,只有当企... 详细信息

随着经济快速发展,我国各类企业的竞争格局都发生了翻天覆地的变化。在知识经济时代,有效发挥企业内部知识型人力资源的作用是帮助企业摆脱自身发展困境的重要手段。人力资源区别于其他资源的重要一点在于人是具有各种需求的,只有当企业能够满足知识型员工一定需求的时候,他们才会获得激励而付出相应的努力来工作。随着互联网金融的发展,科学技术的创新已成为金融行业未来发展的强大杠杆之一。银行业要想获取核心竞争优势,需要人力资本和知识资本二者的融合。较高知识型员工的离职率,会造成银行的人力资本过高,对银行产生一定的不利影响。尤其是核心人才的流失,会导致核心机密以及商业秘密的泄露。在此背景下,本文以JHA银行为例,将知识型员工心理契约现状及影响因素作为研究的主题,希望对其进行研究来发现知识型员工心理契约管理的不足与差距,分析出问题产生的原因,然后提出解决问题的对策。本文以JHA银行知识型员工作为研究对象进行实证研究,研究表明:（1）知识型员工心理契约从组织责任和员工责任两个方面,其中细分成组织规范责任、组织人际责任、组织发展责任、员工规范责任、员工人际责任和员工发展责任六个维度;（2）通过因子分析可以将心理契约影响因素划分为企业文化、员工激励、员工沟通、制度建设和职业发展五个维度;（3）通过回归分析得出,企业文化、员工激励、员工沟通、制度建设和职业发展等五个维度均对知识型员工心理契约有显著影响,其中员工激励、员工沟通、职业发展三个因素的影响最为显著。基于研究结论,本文针对当前JHA银行知识型员工的现状提出建议,即加强员工激励、建立有效沟通、关注员工职业发展,使员工与企业之间建立积极良好的心理契约关系,从而提升员工满意度、工作积极性和创造性。

关键词：知识型员工心理契约影响因素

中国植被覆盖变化研究遥感数据源及研究区域时空热度分析

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地球科学进展 2020年第9期35卷 978-989页

作者：吴佳梅彭秋志黄义忠黄亮昆明理工大学国土资源工程学院云南昆明650093

基于遥感数据源的植被覆盖变化研究是地表过程研究的重要组成与常见主题。利用文献计量结果GIS空间展现与分析方法,从1021篇研究中国植被覆盖变化的中文文献中提取遥感数据源和研究区域等信息,分析了遥感数据源的构成及其时间热度变化... 详细信息

基于遥感数据源的植被覆盖变化研究是地表过程研究的重要组成与常见主题。利用文献计量结果GIS空间展现与分析方法,从1021篇研究中国植被覆盖变化的中文文献中提取遥感数据源和研究区域等信息,分析了遥感数据源的构成及其时间热度变化、遥感数据源与研究区域的时空尺度对应关系,以及研究区域空间热度的分布与迁移特征。结果显示:①文献数量总体呈逐渐增多趋势,4种遥感数据源被使用的较热时段与其可用时段基本吻合;②平均研究时段长度逐渐加长,遥感数据源空间分辨率与研究区域面积呈正向关联且基本维持稳定;③热点研究区域主要集中于以黄土高原为核心的北方干旱半干旱地区。研究成果能为宏观把握中国植被覆盖变化研究遥感数据源及研究区域时空热度变化趋势提供基础参考。

关键词：植被覆盖变化遥感数据源时空热度文献计量中国

翻白草油对呼吸道合胞病毒感染宿主HeLa细胞凋亡的影响

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中国老年学杂志 2013年第16期33卷 3889-3891页

作者：刘蕾张建华陈光吴佳梅代立娟佳木斯大学基础医学院黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学附属第一医院

目的探讨翻白草油抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法 RSV感染宿主HeLa细胞后,进行翻白草油干预,采用流式细胞术检测宿主HeLa细胞凋亡百分比;Western印迹和免疫荧光检测caspase-3蛋白的表达。结果翻白草油(除药物预处理作用)组与RSV病... 详细信息

目的探讨翻白草油抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法 RSV感染宿主HeLa细胞后,进行翻白草油干预,采用流式细胞术检测宿主HeLa细胞凋亡百分比;Western印迹和免疫荧光检测caspase-3蛋白的表达。结果翻白草油(除药物预处理作用)组与RSV病毒组比较,宿主HeLa细胞凋亡百分比及caspase-3蛋白的表达明显降低(P<0.01)。结论翻白草油在三种作用方式下(直接灭活阶段、病毒复制阶段、病毒吸附阶段)有抗RSV作用,可能与降低宿主HeLa细胞凋亡及caspase-3蛋白的表达有关。

关键词：翻白草油呼吸道合胞病毒(RSV) HeLa细胞凋亡百分比 caspase-3

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对“嘟嘟闹情绪”的解读与反思

家庭教育导读 2018年第4期 6-7页

作者：吴佳梅

嘟嘟是个刚满三周岁的男孩，平时喜欢阅读、看动画和玩工程车辆。随着嘟嘟成长，我迎来了他的第一个叛逆期。他更加有主见和想法，也常常会闹情绪。虽然这是孩子发展的正常现象，但作为家长如何看待、回应孩子的情绪，引导孩子合理宣泄...

嘟嘟是个刚满三周岁的男孩，平时喜欢阅读、看动画和玩工程车辆。随着嘟嘟成长，我迎来了他的第一个叛逆期。他更加有主见和想法，也常常会闹情绪。虽然这是孩子发展的正常现象，但作为家长如何看待、回应孩子的情绪，引导孩子合理宣泄、表达自己，帮助孩子心理健康发展，培养更和谐的亲子关系，是值得思考的。关注内在需要，是采取有效对策的关键炎热的夏天午后，午睡醒来的嘟嘟带着起床气，刚睁开眼就“哇”地哭起来。他不理妈妈的询问，也不接受妈妈的肢体碰触，不停地大哭。直到妈妈拿出了新买的绘本——《建筑工地的车辆》，嘟嘟的注意力才被吸引了过去，勉强停止了哭闹。从卧室出来，妈妈说：“你现在要喝点水了。”嘟嘟头一扭说：“我不要喝水。”妈妈解释说：“睡午觉起来要喝点水对身体好。”嘟嘟继续说：“我不要喝水！”在平时，懂事的嘟嘟就算再不想喝水，也会妥协喝一口，满足一下他人的合理要求，但今天他态度异常坚决。接着妈妈又想出一个玩游戏的“妙招”，对嘟嘟说：“那我们来玩石头、剪刀、布的游戏，谁赢了就听谁的。”嘟嘟想了想说：“好。”嘟嘟虽然能理解游戏规则，但不及眼疾手快的妈妈，第一次出了“布”，被妈妈的“剪刀”打败了。妈妈想营造愉悦气氛，大声笑着说：“你看你输了，你得听我的！”谁知嘟嘟急了，立马又哭了起来说：“你输我赢，你听我的！”边哭边气急败坏地把手边的绘本往妈妈身上扔。妈妈把嘟嘟拉到面前严肃地教育：“扔书这个行为对不对？”嘟嘟噘着嘴说：“对的。”妈妈顺势拿着另一本书说：“你说对的，那妈妈的这本书也要扔你了哦。”嘟嘟虽然嘴上不肯承认，但心里清楚扔书行为不对，看着妈妈哭得更大声了。解读与反思：要允许孩子表达情绪。如果一味压抑坏情绪，让孩子做成人眼里没情绪的“乖孩子”，将在其今后的情绪管理中埋下一个巨大隐患。随着孩子成长，他们有了更多的想法和诉求，但有时又不能清楚表达，便需要成人更深入地关注、有效地引导，帮助孩子逐步学习正确管理情绪的方法，塑造更健康的心理环境。孩子情绪爆发大致可以分成两种，一是生理或心理不舒服，成人应尽快地帮助他们从不舒服的状态中解脱出来。当嘟嘟午睡醒来带着起床气时，生理上的不适让他心情不好。妈妈未能深入关注，用绘本转移了一下他的注意力，但内在的坏情绪未能全部消化。当孩子发脾气时，直接和他讲道理是很难起作用的，就如妈妈用“喝水身体好”、扔书时坚持用讲道理的方式要求嘟嘟道歉，只会引起孩子的抵触情绪。在消极情绪的影响下，“石头剪刀布”的策略也是失败的。游戏并非嘟嘟自主意愿，过程中不公平的挫败感使嘟嘟并未体验到一点快乐，无法称之为真正的游戏。其实，能不能让嘟嘟喝水，更多的是满足妈妈想让嘟嘟喝水的目的。当妈妈关注更多的是自己的感受时，缺乏了对孩子的关注和观察，做出的判断回应便偏离了轨道。另一种情绪爆发可能是孩子想要操纵成人，用“大闹一场”的方式让家长满足他们的要求。对于这种脾气，就不能让步，先安抚孩子，用亲昵的动作表示关注，当孩子情绪收敛一些后，先好好表扬他，让他明白“不乱发脾气”是好样的，然后转移注意力。

关键词：

来源：人大复印报刊资料评论

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人大复印报刊资料

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大班语言活动:我做小主播

早期教育（幼教·教育教学） 2022年第2期 40-41页

作者：吴佳梅江苏省常熟市实验幼儿园

活动来源当下,短视频直播已渗透到日常生活,幼儿对直播这种新事物充满了好奇,也有了初步的认知。游玩是幼儿的天性,但受全球新冠肺炎疫情影响,幼儿外出旅游机会大大减少。因此,我巧妙结合幼儿兴趣点,创设了旅游直播间情境,引导幼儿通过... 详细信息

活动来源当下,短视频直播已渗透到日常生活,幼儿对直播这种新事物充满了好奇,也有了初步的认知。游玩是幼儿的天性,但受全球新冠肺炎疫情影响,幼儿外出旅游机会大大减少。因此,我巧妙结合幼儿兴趣点,创设了旅游直播间情境,引导幼儿通过感知直播、梳理直播方法成为小主播,再到团队合作开直播,最后将直播旅游经验延伸到生活中,不断学习、拓展新经验。活动尝试让幼儿借助思维导图,学习多角度有逻辑地描述性讲述场景,在交流和运用中发展语言能力,提升语言表达的理性逻辑,发展自主性、合作性、创造性等优秀学习品质。

关键词：主播幼儿兴趣视频直播学习品质理性逻辑思维导图团队合作自主性

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谈药源性疾病的主要原因及防治

海峡药学 2016年第8期28卷 225-227页

作者：吴佳梅浙江省桐乡市妇幼保健院桐乡314500

为降低药源性疾病的发生率于最低限度,防止药害重演,真正提高治疗质量。文章着重介绍了引发药源性疾病的主要原因及防治原则。

关键词：药源性疾病合理用药防治药物不良反应

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整合,让小班生活区添光溢彩

家教世界 2016年第3X期 7-8页

作者：吴佳梅江苏省常熟市实验幼儿园

在多年带班的过程中,我们常常感到现在的孩子知识越加丰富,而动手、生活自理能力等方面却越来越弱。在家访中,许多家长认为生活自理能力只是单纯的动手能力,随着年龄的增长孩子早晚会学会的,对幼儿的学习帮助并不大。但作为一线教师,我... 详细信息

在多年带班的过程中,我们常常感到现在的孩子知识越加丰富,而动手、生活自理能力等方面却越来越弱。在家访中,许多家长认为生活自理能力只是单纯的动手能力,随着年龄的增长孩子早晚会学会的,对幼儿的学习帮助并不大。但作为一线教师,我们常常能体会到越是自理、动手能力强的幼儿。

关键词：生活自理能力幼儿活动学习活动主题教学教学活动小班幼儿幼儿生活优化整合成长需要家庭教育

在经验支持下培养儿童的学习品质——基于中班幼儿的实践案例分析

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家教世界 2018年第2X期 21-23页

作者：吴佳梅江苏省常熟市实验幼儿园

一、问题提出学习品质是指'能够反映儿童自己以多种方式进行学习的倾向、态度、习惯和风格等',它不是指儿童所获得的知识与技能,而是指儿童如何获得这些知识与技能。[1]简单地说,学习品质不是学什么,而是怎样学。2012年,我国教育部颁布... 详细信息

一、问题提出学习品质是指'能够反映儿童自己以多种方式进行学习的倾向、态度、习惯和风格等',它不是指儿童所获得的知识与技能,而是指儿童如何获得这些知识与技能。[1]简单地说,学习品质不是学什么,而是怎样学。2012年,我国教育部颁布的《3-6岁儿童学习与发展指南》（以下简称《指南》）指出幼儿在活动过程中表现出的积极态度和良好行为倾向是终身学习与发展所必需的宝贵品质。学习品质包括好奇心和学习兴趣。

关键词：学习品质中班幼儿游戏活动案例分析