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两类调节性T细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎发病机制中的作用研究

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两类调节性T细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎发病机制中的作用研究

作者：吕淑杰扬州大学

学位级别：硕士

背景:变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)是耳鼻咽喉头颈外科发病率最高的过敏性疾病之一;是变应原与特异性IgE结合所导致的速发型变态反应在鼻腔黏膜的局部表现。AR症状控制不佳会导致夜间睡眠质量受损、白天疲乏,进而显著影响患者的工... 详细信息

背景:变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)是耳鼻咽喉头颈外科发病率最高的过敏性疾病之一;是变应原与特异性IgE结合所导致的速发型变态反应在鼻腔黏膜的局部表现。AR症状控制不佳会导致夜间睡眠质量受损、白天疲乏,进而显著影响患者的工作或学习效率和总体生活质量。AR的发病机制与遗传和环境因素有关,但确切的病因尚不清楚。近年来研究发现与AR发病相关的T细胞模式由传统的Th1/Th2模式转变为与Thl、Th2、Th9、Th17、Tfh及调节性T(Treg)细胞关联型模式;Treg细胞是其中唯一发挥炎症负性调节作用的细胞类型,而其余细胞亚群均与炎症反应呈正相关。Treg细胞在维持自身免疫耐受方面发挥重要作用,其相当一部分免疫调节作用是借助于IL-10、IL-35、TGF-β等负调节细胞因子进行的。最近有研究表明变应性哮喘患者体内CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞数目减少,但是少有研究常年性持续性中重度AR患者体内CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞的变化以及这两种细胞与三种细胞因子之间的联系。目的:本实验主要采用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)分析常年性持续性中重度尘螨过敏AR患者外周血中CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞水平变化、研究这两类Treg细胞在AR发病机制中的作用;采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)技术测定常年性持续性中重度尘螨过敏AR患者外周血中Treg细胞相关细胞因子(IL-10、IL-35、TGF-β)浓度,探究各细胞因子在AR发病中的作用,并进一步分析两类Treg细胞亚群及三种细胞因子在AR发病机制中可能的联动作用。方法:选取从2020年5月至2020年10月之间就诊于江苏省苏北人民医院耳鼻咽喉头颈外科门诊且年龄介于18-60岁之间符合常年性持续性中重度尘螨过敏诊断标准的AR患者40例为实验组,另随机选取年龄与性别匹配的健康志愿者20例为对照组。所有研究对象均采取晨空腹前臂静脉血2份(5ml+5ml),其中一份血样经离心、裂红、洗涤等处理后使用流式荧光标记的鼠抗人细胞表面单克隆抗体(共5种,分别为APC-Cy7标记的细胞表面CD3单抗、FITC标记的细胞表面CD4单抗、BV510标记的细胞表面CD8单抗、BV421标记的细胞表面CD25单抗、BV711标记的细胞表面CD127单抗)染色;调节补偿后上机检测各样本并得出二维流式散点图,按照一定顺序设门分离出CD4+CD25+CD127low/-(CD4+Treg)细胞并观察其占CD4+T淋巴细胞中的百分比(%)、再从淋巴细胞中分离出CD8+CD25+(CD8+Treg)细胞并观察其占CD8+T淋巴细胞中的百分比(%)。另一份经离心冻存后分别使用人IL-10、IL-35和TGF-β ELISA检测试剂盒按照加样、加酶、洗涤、染色等步骤测定各样品中3种细胞因子在450nm波长处的吸光度、代入标品曲线回归方程式并计算出所有实验对象外周血中3种细胞因子的实际浓度(单位pg/mL)。使用SPSS 22.0统计软件进行统计分析,实验组和对照组CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞所占百分比以均数±标准差(X±SD)表示(单位为%),实验组和对照组血清中3种细胞因子浓度以均数±标准差(X±SD)表示(单位为pg/mL)。实验组和对照组之间数据比较采用Mann-Whitney U检验,对实验组CD4+Treg细胞、CD8+Treg细胞亚群与3种细胞因子间的相关性采用Spearman秩相关分析进行分析并计算出相关系数r。P<0.05认为有统计学差异。结果:对于外周血中CD4+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)明显降低(P=0.000<0.05);而对于外周血中CD8+Treg细胞占CD8+T淋巴细胞的百分比,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)明显降低(P=0.000<0.05)。对于外周血中血清IL-10和IL-35浓度,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)均明显降低(P=0.000<0.05,P=0.000<0.05);而对于外周血中血清TGF-β浓度,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)明显升高(P=0.000<0.05)。分析实验组(AR患者)外周血中各细胞与细胞因子间关联性后发现仅CD4+Treg细胞百分比与IL-35浓度之间呈现负相关关系(r=-0.334,P=0.035)。结论:1、CD4+Treg细胞数目的减少在AR发病机制中发挥重要作用,可能与其对环境变应原的异常Th2型免疫反应的抑制作用降低有关;2、AR患者中CD8+Treg细胞数目的减少与AR的发病有关,这可能是由于其抑制

关键词：变应性鼻炎调节性T细胞 IL-10 IL-35 TGF-β

蚓激酶干预冠心病患者阿司匹林抵抗60例临床观察

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中国老年学杂志 2009年第6期29卷 760-761页

作者：孙宓颖吕淑杰翟雨佳北华大学第一临床医院心血管二科吉林吉林132011

临床试验证实心、脑及外周血管疾病患者应用阿司匹林可减少各类栓塞和血栓形成事件约23%[1].但是,临床经常存在依从性好的患者使用治疗量的阿司匹林仍有部分发生动脉血栓性血管事件,加大治疗剂量,不仅未能达到治疗及预防的目的,反而不... 详细信息

临床试验证实心、脑及外周血管疾病患者应用阿司匹林可减少各类栓塞和血栓形成事件约23%[1].但是,临床经常存在依从性好的患者使用治疗量的阿司匹林仍有部分发生动脉血栓性血管事件,加大治疗剂量,不仅未能达到治疗及预防的目的,反而不良反应增加,即"临床阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR) ".同时这些患者在服用阿司匹林期间血小板聚集率仍然很高.因此干预AR已成为冠心病一、二级预防的关键.本研究观察蚓激酶对冠心病患者血小板聚集的影响,探讨其对AR的干预作用.

关键词：阿司匹林抵抗蚓激酶血小板聚集率

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秦岭落叶松红瘿球蚜的防治技术

林业科技 2000年第5期25卷 21-23页

作者：谢寿安吕淑杰刘铭汤西北农林科技大学西林校区资源学院昆虫教研室陕西杨凌712100

采用 L9(34 )混合正交设计 ,对 3个施药时期、 3种药剂、 3个浓度梯度进行化学防治落叶松红瘿球蚜效果比较 ,筛选出防治该虫的最佳时期、最佳药剂和最佳浓度。防治试验结果表明 ,用50 %抗蚜威可湿性粉剂防治该虫效果最好 ,防治最佳时期... 详细信息

采用 L9(34 )混合正交设计 ,对 3个施药时期、 3种药剂、 3个浓度梯度进行化学防治落叶松红瘿球蚜效果比较 ,筛选出防治该虫的最佳时期、最佳药剂和最佳浓度。防治试验结果表明 ,用50 %抗蚜威可湿性粉剂防治该虫效果最好 ,防治最佳时期为越冬虫产卵前期 ,即 5月下旬至 6月上中旬 ,防治最佳浓度为 1∶ 2 0 0 0倍。

关键词：落叶松红瘿球蚜药剂防治抗蚜威可湿性粉剂

华山松大小蠹和红脂大小蠹过氧化氢同工酶酶谱的比较

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西北林学院学报 2003年第2期18卷 61-62页

作者：谢寿安吕淑杰袁锋藤华容西北农林科技大学林学院陕西杨陵712100 西北农林科技大学植保学院陕西杨陵712100

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对华山松大小蠹和红脂大小蠹的过氧化氢同工酶进行了分析。研究结果表明,华山松大小蠹和红脂大小蠹成虫的过氧化氢同工酶具有明显的差异,2种大小蠹过氧化氢同工酶种间差异主要表现在酶带带数、迁移率、酶带... 详细信息

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对华山松大小蠹和红脂大小蠹的过氧化氢同工酶进行了分析。研究结果表明,华山松大小蠹和红脂大小蠹成虫的过氧化氢同工酶具有明显的差异,2种大小蠹过氧化氢同工酶种间差异主要表现在酶带带数、迁移率、酶带染色深浅、酶带宽窄等方面。而同种个体之间几乎没有差异。

关键词：华山松大小蠹红脂大小蠹过氧化氢同工酶酶谱比较研究聚丙烯酰胺凝胶电泳森林害虫

火地塘生态定位站不同植物群落与小蠹类群多样性

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生态学报 2005年第11期25卷 2961-2967页

作者：谢寿安吕淑杰袁锋杨忠岐西北农林科技大学林学院陕西杨凌712100 中国林业科学研究院森林生态与环境保护研究所北京100091

为探讨不同森林植物群落中植物类群与小蠹类群的结构特征以及小蠹类群随海拔高度而发生的变化,于2001～2003年夏季,采用取样调查法,依据海拔高度将秦岭火地塘生态定位站植物群落划分为山麓农田和侧柏群落(群落I)、油松-华山松-锐齿栎群... 详细信息

为探讨不同森林植物群落中植物类群与小蠹类群的结构特征以及小蠹类群随海拔高度而发生的变化,于2001～2003年夏季,采用取样调查法,依据海拔高度将秦岭火地塘生态定位站植物群落划分为山麓农田和侧柏群落(群落I)、油松-华山松-锐齿栎群落(群落Ⅱ)、油松-华山松-栓皮栎群落(群落Ⅲ)、油松-华山松-辽东栎群落(群落Ⅳ),亚高山云杉林群落(群落Ⅴ),亚高山冷杉林群落(群落Ⅵ)6种类型的植物群落中,分乔木层、灌木层、草本层3个层次,分别计算出高等森林植物群落和针叶树小蠹类群的Shannon-Wiener多样性指数、Berger-Parker生态优势度和Pielou均匀度指数.结果表明,在山麓灌丛群落至针阔混交林群落之间,森林植物物种多样性指数、群落均匀度指数和物种丰富度呈递增趋势;在针阔混交林群落与亚高山云杉林群落、亚高山冷杉林群落之间,物种多样性指数、群落均匀度指数和物种丰富度呈下降趋势.从总体看,阔叶林中森林植被的多样性程度高于亚高山云杉林和冷杉林.群落优势度指数的变化规律则与之相反.不同森林群落类型中针叶树小蠹类群的多样性、均匀度和优势度研究结果表明,针叶树小蠹物种多样性指数和均匀度由高到低的排列顺序依次为:油松-华山松-栓皮栎群落、油松-华山松-锐齿栎群落、油松-华山松-辽东栎群落、亚高山云杉林群落、亚高山冷杉林群落、山麓农田侧柏群落;针叶树小蠹群落优势度的变化趋势与之相反.6种类型的植物群落中,共获得针叶树小蠹21种.讨论了小蠹这一昆虫类群对森林植物群落的指示意义、海拔高度对森林植物和小蠹组成及分布的主要影响、研究森林生态系统各部分组成及相互关系的必要性以及进一步深入研究森林群落物种多样性需要注意的问题.

关键词：针叶树小蠢群落物种多样性垂直分布

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稳心颗粒治疗老年过早搏动的疗效观察

中国老年学杂志 2006年第7期26卷 970-971页

作者：纪文新吕淑杰孙宓颖北华大学附属医院循环二科吉林吉林132011

目前抗心律失常药物治疗具有明显的两面性：既能抗心律失常，又能促发心律失常，而且均具有负性肌力作用，影响心脏传导。因此寻找毒副作用少，安全有效的抗心律失常药物是临床亟待解决的问题。笔者应用步长稳心颗粒治疗由冠心病引起的... 详细信息

目前抗心律失常药物治疗具有明显的两面性：既能抗心律失常，又能促发心律失常，而且均具有负性肌力作用，影响心脏传导。因此寻找毒副作用少，安全有效的抗心律失常药物是临床亟待解决的问题。笔者应用步长稳心颗粒治疗由冠心病引起的过早搏动，取得了满意效果。

关键词：稳心颗粒心律平过早搏动

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我国昆虫生态学的研究与展望

西北林学院学报 2002年第1期17卷 51-54页

作者：谢寿安吕淑杰袁锋赵惠燕西北农林科技大学林学院陕西杨陵712100 西北农林科技大学植保学院陕西杨陵712100

论述了我国昆虫生态学不同分支学科的发展概况和研究现状 ,主要包括昆虫种群生态学、昆虫行为生态学、昆虫化学生态学、昆虫生理生态学和昆虫分子生态学。

关键词：昆虫生态学研究现状发展趋势中国

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草履蚧测报技术

东北林业大学学报 2002年第5期30卷 63-64页

作者：吕淑杰王小纪张军灵谢寿安西北农林科技大学杨陵712100 陕西省西安市森林病虫害防治检疫站

通过对西安市受草履蚧 [Drosichacorpulenata (Kuwana) ]危害最重的 1 5号杨和经济林木等的虫情调查 ,从实践中总结出简便、实用的草履蚧虫情调查方法和预测预报技术。其中 ,在测报技术上 ,着重探讨了将草履蚧主要天敌的发生规律及其对... 详细信息

通过对西安市受草履蚧 [Drosichacorpulenata (Kuwana) ]危害最重的 1 5号杨和经济林木等的虫情调查 ,从实践中总结出简便、实用的草履蚧虫情调查方法和预测预报技术。其中 ,在测报技术上 ,着重探讨了将草履蚧主要天敌的发生规律及其对草履蚧控制能力预测纳入测报内容 ,提高了测报的准确性。该技术主要适用于对草履蚧的发生期、发生量、发生范围和危害程序进行中。

关键词：草履蚧测报技术发生规律经济林木

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阻隔法防治草履蚧试验

东北林业大学学报 2002年第5期30卷 65-66页

作者：谢寿安张军灵王小纪吕淑杰西北农林科技大学杨陵712100 陕西省西安市森林病虫害防治检疫站

对草履蚧 [Drosichacorpulenta(Kuwana) ]进行了胶环、毒环、绑扎塑料裙和毒绳等阻隔试验。结果表明 :应用废机油 +羊毛脂 (5∶1 )进行涂环阻隔防治 ,效果最好 ,其粘性持续时间可达 80～ 1 2 0d。利用“阻隔法”防治草履蚧的防治最佳时... 详细信息

对草履蚧 [Drosichacorpulenta(Kuwana) ]进行了胶环、毒环、绑扎塑料裙和毒绳等阻隔试验。结果表明 :应用废机油 +羊毛脂 (5∶1 )进行涂环阻隔防治 ,效果最好 ,其粘性持续时间可达 80～ 1 2 0d。利用“阻隔法”防治草履蚧的防治最佳时期应设在草履蚧卵开始孵化后至上树前的 1月上旬至

关键词：阻隔法防治草履阶试验