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神经干细胞的分离培养与鉴定

西安交通大学学报（医学版） 2002年第5期23卷 428-431,453页

作者：吕海侠刘勇李敏杰丁海燕西安交通大学医学院神经科学研究中心西安710061

目的　分离培养新生鼠神经干细胞并获得细胞克隆 ,同时建立良好的传代方法。方法　取新生大鼠大脑室管膜、脑室周围及海马细胞 ,经消化及机械吹打后接种于加有N2添加剂及生长因子的DMEM/F12 培养基 ,悬浮培养 ;用含血清而不含生长因子... 详细信息

目的　分离培养新生鼠神经干细胞并获得细胞克隆 ,同时建立良好的传代方法。方法　取新生大鼠大脑室管膜、脑室周围及海马细胞 ,经消化及机械吹打后接种于加有N2添加剂及生长因子的DMEM/F12 培养基 ,悬浮培养 ;用含血清而不含生长因子的培养基贴壁培养 ,促使分化 ;最后用免疫细胞化学方法进行染色鉴定。结果　分离培养的细胞多聚集生长 ,并形成细胞克隆 ,可以传代 ;细胞为圆形或椭圆形 ,经鉴定为nestin抗原阳性 ;分化后细胞分别表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞特异性抗原。结论　分离培养的细胞具有自我更新和多向分化能力 ,表达神经干细胞的特异性抗原nestin ,是神经系统的干细胞。

关键词：神经干细胞分离培养鉴定大鼠

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治疗反复自然流产患者159例临床分析

生殖与避孕 1997年第3期17卷 181-182页

作者：李昭荣曲群吴上滨杨华吕海侠西安医科大学第二附属医院妇产科西安710004

新生大鼠器官型脑组织片培养和诱导神经干细胞分化的观察

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南方医科大学学报 2011年第8期31卷 1318-1322页

作者：焦倩章海霞吕海侠刘勇西安交通大学医学院神经生物研究所陕西西安710061

目的建立在改良条件下新生大鼠器官型脑组织片培养方法,初步探索空间信号对神经干细胞增殖分化的诱导作用。方法选取新生SD大鼠,以振荡切片机切取200μm脑组织片,以改良的Stoppini方法进行培养,培养不同时间在倒置相差显微镜下对脑组织... 详细信息

目的建立在改良条件下新生大鼠器官型脑组织片培养方法,初步探索空间信号对神经干细胞增殖分化的诱导作用。方法选取新生SD大鼠,以振荡切片机切取200μm脑组织片,以改良的Stoppini方法进行培养,培养不同时间在倒置相差显微镜下对脑组织片进行观察;采用本实验室改良后神经干细胞培养方法分离培养SD大鼠胚胎第14～15天大脑皮质神经干细胞,以CM-DiI对培养第3代细胞进行标记,并移植于体外培养2周后的脑组织片;对移植后CM-DiI阳性标记细胞的存活和分化情况进行观察。结果器官型脑组织片在体外培养体系中存活良好,脑片周围细胞向外迁移;培养2周后,组织片厚度由原来的200μm减小至130μm,原有的细胞构筑发生变化;接受细胞移植后的脑片上可见大量DiI标记细胞,继续培养7 d后,部分标记细胞分化为GFAP阳性星形胶质细胞和β-tubulin III阳性神经元。结论新生大鼠器官型脑组织片体外培养成功,可以作为研究空间信号诱导神经干细胞增殖分化的模型。

关键词：器官型脑组织片神经干细胞分化

国产伊曲康唑治疗不典型念珠菌性阴道炎疗效观察

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中国皮肤性病学杂志 2006年第1期20卷 63-64页

作者：吕海侠杜芬薛美盈张云平西安交通大学医学院第二医院妇产科陕西西安710004 西北橡胶厂职工医院陕西咸阳712000 三原县妇幼保健院陕西三原713800

目的观察药物易启康(国产伊曲康唑)治疗不典型念珠菌性阴道炎的临床疗效。方法将门诊就诊病例随机分为两组,每组35例,分别接受易启康治疗3日和易启康联合阴道放置惠复得或达克宁栓剂治疗7日,连续3个疗程,观察病人症状评分变化以及不良... 详细信息

目的观察药物易启康(国产伊曲康唑)治疗不典型念珠菌性阴道炎的临床疗效。方法将门诊就诊病例随机分为两组,每组35例,分别接受易启康治疗3日和易启康联合阴道放置惠复得或达克宁栓剂治疗7日,连续3个疗程,观察病人症状评分变化以及不良反应情况。结果两组70例病人症状完全缓解率分别为82.09%和84.30%,显效率为8.57%和9.25%,两组比较差异无显著性(P<0.05)。仅有少数病例出现轻微不良反应。结论易启康对不典型念珠菌性阴道炎疗效显著,不受月经周期影响,服药方便,且无耐药现象。

关键词：易启康念珠菌性阴道炎

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早期人胚神经干细胞分布及分离培养

西安交通大学学报（医学版） 2003年第2期24卷 97-100页

作者：吕海侠翟伟刘勇李敏杰刘朝晖王桂贤西安交通大学医学院神经科学研究中心陕西西安710061 西安市中心医院妇产科陕西西安710004 西安交通大学医学院人体解剖学教研室陕西西安710061 西安交通大学第二医院妇产科陕西西安710004

目的　研究发育早期人胚脑神经干细胞的形态特征及其分布情况 ,并观察其体外生长分化特性。方法　计划生育流产的 6～ 12周胚胎大脑组织切片用vimentin抗体进行免疫组织化学染色 ,光镜观察。机械分离皮质细胞 ,用无血清培养基和含血清... 详细信息

目的　研究发育早期人胚脑神经干细胞的形态特征及其分布情况 ,并观察其体外生长分化特性。方法　计划生育流产的 6～ 12周胚胎大脑组织切片用vimentin抗体进行免疫组织化学染色 ,光镜观察。机械分离皮质细胞 ,用无血清培养基和含血清培养基进行悬浮和贴壁培养 ,分别用MAP2 、GFAP及GalC抗体进行免疫细胞化学染色 ,鉴定干细胞和神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。结果　发育早期大脑Vimentin阳性细胞分布广泛 ,细胞形态单一 ,多呈圆球形 ,体积较小。体外培养的大脑皮质细胞在培养的第 5～ 7天时 ,形成较多克隆 ,可多次传代 ;贴壁培养时细胞发生分化 ,分别为MAP2 、GFAP、GalC阳性的神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。结论　胚胎发育早期大脑神经干细胞分布广泛 ,形态单一 ,皮质Vimentin阳性细胞数量多 ,便于分离 ,是最佳神经干细胞分离部位 ;

关键词：早期分离培养分布情况体外生长免疫细胞化学神经元星形胶质细胞人胚胎

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新生大鼠神经干细胞的分离培养与观察

细胞与分子免疫学杂志 2002年第4期18卷 316-319页

作者：李敏杰刘勇吕海侠丁海燕赵顺西西安交通大学医学院神经生物研究中心陕西西安710061

目的　建立神经干细胞的分离、培养及分化鉴定技术 ;观察神经干细胞的生长、增殖及分化的特点。方法　分离新生SD大鼠脑室下区的组织 ,经消化及机械吹打后 ,采用原代贴壁及传代悬浮的方法 ,培养获得细胞克隆。应用免疫细胞化学方法及透... 详细信息

目的　建立神经干细胞的分离、培养及分化鉴定技术 ;观察神经干细胞的生长、增殖及分化的特点。方法　分离新生SD大鼠脑室下区的组织 ,经消化及机械吹打后 ,采用原代贴壁及传代悬浮的方法 ,培养获得细胞克隆。应用免疫细胞化学方法及透射电镜检测技术 ,鉴定神经干细胞和分化的神经细胞。结果　从新生SD大鼠脑室下区分离的组织 ,经原代和传代培养均可形成细胞克隆 ,并具有增殖的能力。原代和传代细胞抗原 nestin呈阳性。分化后的细胞可表达神经元、星形角质细胞和少突角质细胞的特异性抗原。结论　用此方法分离的细胞具有自我更新和分化潜能 ,有很强的增殖能力。

关键词：神经干细胞细胞培养分离新生大鼠

关于高职院校学风与寝室文化建设的调查与研究

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九江职业技术学院学报 2014年第2期 66-67页

作者：吕海侠陕西工业职业技术学院陕西咸阳712000

健康向上的寝室文化对优良学风的形成具有非常显著的影响。本文就学风的形成与寝室文化的关系展开研究,并提出了两者关系能够相互促进,和谐发展的有效途径。

关键词：寝室文化学风建设相互促进

原因不明性习惯性流产孕早期免疫治疗前后细胞免疫功能的变化

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陕西医学杂志 2002年第5期31卷 390-392页

作者：李昭荣刘明吕海侠李牧蔡小宁刘琦西安交通大学第二医院妇产科西安710004

目的 :寻求新的、快捷、有效的治疗原因不明性习惯性流产 ( UHA)的方法 ,并探讨主动免疫治疗前后的细胞免疫功能变化。方法 :采用小剂量丈夫淋巴细胞对 3 2例 UHA患者在妊娠后 7周内予以治疗 ,3 0例采用生理盐水 0 .8ml作为对照 ;采用... 详细信息

目的 :寻求新的、快捷、有效的治疗原因不明性习惯性流产 ( UHA)的方法 ,并探讨主动免疫治疗前后的细胞免疫功能变化。方法 :采用小剂量丈夫淋巴细胞对 3 2例 UHA患者在妊娠后 7周内予以治疗 ,3 0例采用生理盐水 0 .8ml作为对照 ;采用流式细胞仪( FCM)对 3 2例 UHA患者及 3 0例正常未妊娠妇女外周血 CD4 、CD8、CD56细胞进行检测 ;对主动免疫治疗组 2 0例检测治疗前后 CD4 、CD8、CD56细胞的变化。结果 :1治疗组妊娠成功率为 87.5% ,对照组妊娠成功率为 3 0 %。两组比差异显著 ( P<0 .0 1 )。 2 UHA组 CD8细胞百分比低于正常未妊娠妇女 ( P<0 .0 1 ) ;CD4 / CD8比率及 CD56显著高于对照组 ( P<0 .0 5)。3主动免疫治疗后 CD8细胞百分比较治疗前明显上升 ( P<0 .0 1 ) ;CD4 / CD8比率及 CD56细胞百分比明显下降 ( P<0 .0 5)。结论 :UHA患者存在细胞免疫功能紊乱 ;主动免疫治疗可诱导CD8细胞增殖 ,使细胞免疫功能抑制 ,亦可导致 CD56细胞减少。可用于

关键词：习惯性流产孕早期免疫治疗细胞免疫功能

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波形蛋白阳性细胞在人胚脑中的分布

基础医学与临床 2002年第6期22卷 574-574,576页

作者：吕海侠刘勇李敏杰肖新莉丁海燕西安交通大学医学院神经科学研究中心西安710061

波形蛋白(Vimentin)是中间丝蛋白的一种，其表达在神经系统发育过程中有一定的时间性，主要表达于尚未发生终末分化的细胞，即神经祖细胞/前体细胞。神经祖细胞/前体细胞是一类尚保留有分化潜能的细胞，是神经系统发育到一定阶段的细胞... 详细信息

波形蛋白(Vimentin)是中间丝蛋白的一种，其表达在神经系统发育过程中有一定的时间性，主要表达于尚未发生终末分化的细胞，即神经祖细胞/前体细胞。神经祖细胞/前体细胞是一类尚保留有分化潜能的细胞，是神经系统发育到一定阶段的细胞群体，具有有限的自我更新（增殖）和分化能力。

关键词：波形蛋白阳性细胞人胚脑分布