检索结果-南通市图书馆

miR-16-5p对HIV感染者抗病毒治疗后T细胞功能影响的研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-16-5p对HIV感染者抗病毒治疗后T细胞功能影响的研究

作者：吕俊楠中国医科大学

学位级别：硕士

目的:获得性免疫缺陷综合征(Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS)是一种由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)感染诱发的严重危害人类健康和生命的传染病。抗逆转录病毒治疗(Antiretroviral therapy,ART)作为针对HIV感染最有效的治疗方法可以有效抑制病毒复制,重建免疫功能,降低相关并发症的发生率和死亡率。然而有一部分患者在ART治疗后尽管病毒水平得到了有效控制,而CD4+T细胞数量仍未恢复,成为免疫无应答者(Immunological Nonresponder,INR)。目前研究认为免疫恢复不良与骨髓造血减少、胸腺输出不足、异常免疫激活和代谢特征等因素相关,但均不能完全解释其产生机制。而本质上,HIV感染的免疫恢复主要与CD4+T细胞产生减少、消耗增多有关。我们的前期研究发现,与免疫应答者(Immunological Responder,IR)相比,INR患者血浆中7条miRNAs表达量升高并且可作为免疫恢复状态的预测标志物,进一步分析发现miR-16-5p在此过程中可能发挥重要作用。有研究报道miR-15/16家族缺陷的小鼠外周循环中CD4+和CD8+T细胞增殖及产生记忆CD8+T细胞频率更高,而miR-16-5p是否会对HIV感染者T细胞数量和功能产生影响,进而影响ART治疗后免疫恢复,目前尚不清楚。因此本研究拟探索miR-16-5p对T细胞增殖和凋亡情况的影响,并且进一步研究其功能变化的调节机制,明确miR-16-5p在HIV感染者在ART治疗后免疫恢复中的作用。研究方法:本研究选取了31例ART治疗1年以上的HIV感染者。实验方法:1、T细胞转染miR-16-5p mimics:PBMC用磁珠负选T细胞,分别将miRNA Control/miR-16-5p mimics及Lipofectamine RNAi MAX转染试剂溶于RPMI 1640,混匀静止5分钟。将miRNA稀释液与RNAi MAX稀释液混合并静置15分钟,放入24孔板中并加入培养基细胞悬液(不含青链霉素),置于37℃培养箱中培养40小时,之后可进行转染效率检测或细胞刺激处理。2、T细胞增殖水平的检测:将转染了miRNA的T细胞洗涤并重悬于PBS中,加入Violet荧光染料在37℃摇床孵育30分钟,加入5倍体积完全培养基静置5分钟并洗涤、重悬于新鲜培养基,放入48孔培养板中(0.5 million/500μL)。加入T细胞刺激物CD3/28 beads(beads:细胞=1:4),继续培养3天。3天后收集细胞,洗涤并加入PE-Cy7-CD3、APC-Cy7-CD4、FITC-CD8荧光抗体在4℃条件下避光染色30分钟。随后洗去多余染料并加入7AAD染色4分钟,使用流式细胞仪检测。3、T细胞凋亡情况的检测:T细胞在完成转染后,加入T细胞刺激物CD3/28 beads(beads:细胞=1:4),在48孔培养板中以0.5 million/500μL细胞密度继续培养48小时,之后收集细胞并标记PE-Cy7-CD3、APC-Cy7-CD4、APC-CD8表面抗体。加入凋亡染料Annexin V和7AAD并在室温避光染色15分钟,使用流式细胞仪上机检测。4、T细胞钙内流的检测:收集转染后的T细胞并用PBS洗涤,加入LIVE/DEAD染料在4℃避光条件染色15分钟。将钙离子染料Fluo-4、Fura-red与0.02%Pluronic F-127等体积混合后加入到T细胞中,加入RPMI 1640(1 million/m L)在室温染色30分钟,随后染PE-Cy7-CD3、APC-Cy7-CD4、APC-CD8表面抗体,最后用完全培养基洗细胞并重悬于1 m L,使用流式细胞仪上机检测。首先,获取90秒基底荧光信号,之后加入可溶性anti-CD3/anti-CD-28抗体(各10μg/m L)记录300秒激活后的荧光信号,最后加入离子霉素(1μg/m L)继续记录120秒阳性参照信号。5、实时荧光定量检测miRNA表达水平:将转染后T细胞洗涤离心,采用RNeasy Plus Micro KIT试剂盒提取胞内RNA,将得到的RNA使用Mir-X miRNA First-Strand Synthesis Kit试剂盒逆转录为c DNA。以U6基因为内参,通用TB Green染料法进行实时荧光定量,检测miRNA表达水平。6、转录组测序:将每个HIV感染者T细胞分别转染miR-16-5p mimics及miRNA Control,完成转染后提取胞内总RNA保存至-80℃条件,通过实时荧光定量检测miRNA转染效率并由上海欧易生物有限公司进行转录组测序分析,结果使用D

关键词： HIV 免疫重建 miR-16-5p T细胞钙流

抗着丝点抗体阳性的原发干燥综合征临床及实验室特征分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

医学研究生学报 2020年第8期33卷 839-843页

作者：史洪博吕俊楠大连医科大学附属第一医院检验科大连116011

目的抗着丝点抗体(ACA)阳性的原发干燥综合征(pSS)是干燥综合征(SS)的一个亚型,ACA在pSS中的临床意义尚未明确。文中旨在探讨ACA阳性pSS患者临床表现与实验室检查特征。方法收集大连医科大学附属第一医院风湿免疫科收治的88例pSS患者临... 详细信息

目的抗着丝点抗体(ACA)阳性的原发干燥综合征(pSS)是干燥综合征(SS)的一个亚型,ACA在pSS中的临床意义尚未明确。文中旨在探讨ACA阳性pSS患者临床表现与实验室检查特征。方法收集大连医科大学附属第一医院风湿免疫科收治的88例pSS患者临床资料,其中ACA阳性患者43例(阳性组)、ACA阴性患者45例(阴性组)。对比各组患者临床表现及实验室指标差异。结果阳性组患者年龄[(63.0±11.1)岁]高于阴性组年龄[(57.7±12.5)岁],差异有统计学意义(P0.05)。结论ACA阳性pSS的临床表现和实验室检查结果均具有特征性,患者年龄大,雷诺现象、肝损害、合并PBC较多见。

关键词：抗着丝点抗体原发干燥综合征临床表现自身抗体

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

试论城市绿化的生态学与园林艺术

中小企业管理与科技 2021年第2期5卷 166-167页

作者：吕俊楠洛阳职业技术学院河南洛阳471000

随着人们对生活环境要求的不断提高,城市绿化建设具有重要的意义。基于新时代生态和谐发展理念的不断推进,城市绿化融合生态学与园林艺术性。论文以城市绿化生态学与园林艺术的关联性作为切入点,提出构建融合生态学和园林艺术的城市绿... 详细信息

随着人们对生活环境要求的不断提高,城市绿化建设具有重要的意义。基于新时代生态和谐发展理念的不断推进,城市绿化融合生态学与园林艺术性。论文以城市绿化生态学与园林艺术的关联性作为切入点,提出构建融合生态学和园林艺术的城市绿化环境,以此为人们提供舒适、安全的绿化,实现生态自然和谐发展。

关键词：城市绿化生态学园林艺术和谐发展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

冶炼废水处理混凝剂的选用

机械工程与自动化 2001年第S1期 115-116页

作者：吴敬梅吕俊楠太钢设计院山西太原030009 太钢工程质量处山西太原030003

通过混凝试验确定太钢冶炼废水处理选用的混凝剂及最佳配比 ,为合理设计提供了依据。

关键词：冶炼废水混凝剂最佳配比

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物质CFB氮氧化物排放建模与优化控制

动力工程学报 2024年第1期44卷 45-55页

作者：郭炯楠高明明吕俊复岳光溪华北电力大学新能源电力系统国家重点实验室北京102206 清华大学能源与动力工程系北京100084

由于生物质循环流化床(CFB)燃烧不稳定,为实现负荷波动过程中机组NO_(x)的动态预测,从锅炉燃烧机理切入,建立了氧量模型与即燃碳模型;对炉内NO_(x)自生成与自还原机理进行分析,并结合数学建模的方法,建立了NO_(x)动态排放模型。进行给... 详细信息

由于生物质循环流化床(CFB)燃烧不稳定,为实现负荷波动过程中机组NO_(x)的动态预测,从锅炉燃烧机理切入,建立了氧量模型与即燃碳模型;对炉内NO_(x)自生成与自还原机理进行分析,并结合数学建模的方法,建立了NO_(x)动态排放模型。进行给料量、二次风量开环阶跃试验;分析NO_(x)排放与氧量耦合情况,采用简化对角解耦与前馈补偿解耦法解除耦合。结合某130 t/h生物质CFB实际运行数据进行仿真试验。结果表明:模型拥有较好的预测效果,能反映氧量及NO_(x)排放过程的动态特性,可实现给料量控制NO_(x)排放质量浓度、二次风控制氧体积分数的单回路控制,所设计的NO_(x)排放质量浓度模型及解耦控制方法可以为今后生物质CFB机组适应动态运行以及智能控制策略设计提供参考。

关键词：生物质 CFB 机理模型 NOx排放动态特性解耦控制

一种酸性木聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达及体外活性评价研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科技导报 2013年第5期15卷 59-66页

作者：杨雯涵郭晓晶陈轶群吕俊楠谢飞曹云鹤中国农业大学动物科技学院动物营养学国家重点实验室北京100193

通过构建硫色曲霉酸性木聚糖酶基因xynA串联双拷贝工程菌,提高酶的发酵活力。10 L发酵罐中,双拷贝菌株发酵活力达3 574 U/mL。重组木聚糖酶的最适催化温度为50℃,最适反应pH为2.2～3.4,在pH 1.7的酸性缓冲液下保持100 min,酶活残留70%... 详细信息

通过构建硫色曲霉酸性木聚糖酶基因xynA串联双拷贝工程菌,提高酶的发酵活力。10 L发酵罐中,双拷贝菌株发酵活力达3 574 U/mL。重组木聚糖酶的最适催化温度为50℃,最适反应pH为2.2～3.4,在pH 1.7的酸性缓冲液下保持100 min,酶活残留70%以上。重组木聚糖酶对胃蛋白酶和胰蛋白酶也具有较好的耐受性。该木聚糖酶在低pH条件下的高催化活性、耐酸性及蛋白酶耐受性,使之具有较好的应用前景。通过体外模拟猪胃肠道环境以快速评价重组酶的作用效果。试验以小麦型日粮作为基础日粮,设计4个处理组,重组酶的添加量分别为0 U/kg、2 000 U/kg、4 000 U/kg和6 000 U/kg,每个处理5个重复,使用SDS-Ⅱ单胃动物仿生消化系统模拟猪的胃肠道环境消化试验日粮,消化后的残渣烘干后测定其总能、粗蛋白质、中性洗涤纤维含量以计算其消化率。结果表明,添加重组酸性木聚糖酶显著提高了总能、粗蛋白质(线性和二次;P<0.01)和中性洗涤纤维的消化率(线性和二次;P<0.05)。重组酶的最适宜添加量为4 000 U/kg。

关键词：酸性木聚糖酶双拷贝菌株毕赤酵母体外法

官员直播带货传播效果的影响因素组态路径研究——基于140个案例的模糊集定性比较分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

电子政务 2024年第1期 102-112页

作者：沈霄吕俊西安交通大学新闻与新媒体学院

官员直播带货作为一种新型农产品销售增量渠道,取得了产销对接与消费扶贫的显著效果,为乡村振兴注入了重要力量。选取抖音平台2022年1月至10月的140场官员直播带货案例,基于“启发式-系统式模型”从内容属性、情境属性和政治属性三个维... 详细信息

官员直播带货作为一种新型农产品销售增量渠道,取得了产销对接与消费扶贫的显著效果,为乡村振兴注入了重要力量。选取抖音平台2022年1月至10月的140场官员直播带货案例,基于“启发式-系统式模型”从内容属性、情境属性和政治属性三个维度提炼出官员直播带货传播效果的五个前因条件,通过组态视角的模糊集定性比较分析法(fs QCA)探究官员直播带货传播效果的多重并发因果关系。研究表明,高传播效果有“产品为王”、主播引领和政府重视三种类型,非高传播效果有直播冗长、产品类型与官员不匹配两种类型。评估官员直播带货能否产生高传播效果主要有四个因素:直播时长、直播时段、主播类型与官员级别。研究结论可为政府部门优化官员直播带货的传播效果提供参考。

关键词：电子商务农村电商官员直播带货抖音

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

工业锅炉给水除氧

太原科技 2001年第6期 50-50,52页

作者：张建军吕俊楠王建国太原钢铁(集团)公司华北制药集团太原有限公司

对常用的热力除氧、真空除氧、炉内加药除氧、解吸除氧等技术进行了分析。

关键词：工业锅炉锅炉给水除氧技术热力除氧真空除氧加药除氧解吸除氧

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

遮光对射干苗生长及生理指标的影响

南方林业科学 2023年第1期51卷 16-20,25页

作者：徐鹏吕俊楠吴云虎金雅琴江苏百绿园林集团有限公司江苏南京210046 金陵科技学院·园林园艺学院江苏南京210038

通过设置T_(0)(100%透光率)、T_(1)(50%透光率)、T_(2)(25%透光率)、T_(3)(5%透光率)4种不同的遮光处理,研究了不同光照条件对1年生射干苗生长形态和生理指标的影响。结果表明:1)T_(1)、T_(2)处理下,射干苗的株高、基径均有所增加,单株... 详细信息

通过设置T_(0)(100%透光率)、T_(1)(50%透光率)、T_(2)(25%透光率)、T_(3)(5%透光率)4种不同的遮光处理,研究了不同光照条件对1年生射干苗生长形态和生理指标的影响。结果表明:1)T_(1)、T_(2)处理下,射干苗的株高、基径均有所增加,单株叶数、单叶长、单叶宽增大,但主根长与根粗减小,与对照呈显著差异,而以中度遮光(T_(2))最有利于生物量的增加;强度遮光条件下(T_(3))的单叶鲜重、单叶干重、单株叶鲜重、单株叶干重显著低于对照(T_(0))。2)随着遮光强度的加大,射干叶片内可溶性蛋白质含量增加,并以T_(2)处理的效应最明显,可溶性糖含量呈现类似的变化。3)随着光照强度的减弱,射干叶片内的叶绿素含量总体上呈上升趋势,重度遮光显著影响叶绿体的合成与发育,进而显著影响个体的生长和生物量。

关键词：射干遮光生长指标生理指标