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Nested polymerase chain reaction in detection of Plasmodium vivax sporozoites in mosquitoes

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Chinese Medical Journal 2001年第6期114卷 94-97,111页

作者：李凤舞牛春叶炳辉首都医科大学细胞生物系北京100054 南京医科大学寄生虫教研室南京210029

Objective　To detect malaria DNA in ***　A nested polymerase chain reaction (nested PCR) procedure which amplifies a 121 bp DNA of a SSUrRNA gene specific to Plasmodium vivax was ***　In laboratory-infected mosquitoes, nested PCR could detect as few as 3 sporozoites or 1 infected mosquito mixed in a group of 99 normal ones. Furthermore, no specific 121?bp band was seen with DNA templates from other malaria parasites or negative ***　Sensitivity and specificity obtained indicated an advantage of the nested PCR over DNA probes or direct PCR for the detection of Plasmodium vivax sporozoites in mosquitoes with low-grade parasitic infections.

关键词： Plasmodium vivax · mosquito · nested polymerase chain reaction · detection

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现代医学昆虫学 1

嗜人按蚊和中华按蚊不同发育阶段蛋白质和酯酶同工酶的比较研究

丛书名：高等学校教材

1996年

作者：苏寿汦叶炳辉

内容包括中国医学昆虫学的回顾与展望、形态、生态、生理、生化、免疫、毒理、病理、与疾病关系等12章。

ISBN: (纸本)7040056607

内容包括中国医学昆虫学的回顾与展望、形态、生态、生理、生化、免疫、毒理、病理、与疾病关系等12章。

关键词：医学:昆虫学学科:高等学校学科:教材昆虫学:医学

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昆虫学报 1991年第1期34卷 119-121页

作者：朱昌亮叶炳辉南京医学院南京210029

嗜人按蚊 Anopheles anthropophagus 和中华按蚊 Anopheles sinensis 是赫坎按蚊类群的两个主要成员,是我国疟疾和丝虫病的重要传播媒介。为进一步给我国赫坎按蚊类群的系统关系研究提供生物化学证据,亦为两蚊种发育生化及其毒理学研究... 详细信息

嗜人按蚊 Anopheles anthropophagus 和中华按蚊 Anopheles sinensis 是赫坎按蚊类群的两个主要成员,是我国疟疾和丝虫病的重要传播媒介。为进一步给我国赫坎按蚊类群的系统关系研究提供生物化学证据,亦为两蚊种发育生化及其毒理学研究提供参考,本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电点聚焦(IEF)电泳法,比较分析了嗜人按蚊和中华按蚊不同发育阶段蛋白质和酯酶同工酶,现将结果报告如下。

关键词：嗜人按蚊中华按蚊蛋白酯酶

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嗜人按蚊几项生化指标的比较研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1989年第4期7卷 18-20页

作者：叶炳辉朱昌亮南京医学院寄生虫学教研室

本文比较研究了嗜人按蚊和中华按蚊蛋白质、多糖和酯酶同工酶IEF及二维电泳图谱。结果表明,两者电泳图式基本相似,但亦存在一定的差异。糖蛋白、脂蛋白、糖脂蛋白、单纯蛋白、多糖和脂酶同工酶IEF区带在嗜人按蚊分别为10、0、6、14、2... 详细信息

本文比较研究了嗜人按蚊和中华按蚊蛋白质、多糖和酯酶同工酶IEF及二维电泳图谱。结果表明,两者电泳图式基本相似,但亦存在一定的差异。糖蛋白、脂蛋白、糖脂蛋白、单纯蛋白、多糖和脂酶同工酶IEF区带在嗜人按蚊分别为10、0、6、14、2和13条:中华按蚊分别为10、1、5、16、3和15条。嗜人按蚊显示多肽斑点234个,中华按蚊显示240个,两者平均差异点为27.8％。

关键词：嗜人按蚊同工酶二维电泳

叮咬不同免疫力兔后中华硬蜱中肠上皮细胞超微结构的观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第1期22卷 33-36页

作者：刘志刚叶炳辉朱清仙深圳大学生命科学学院深圳518060 南京医科大学基础医学院南京210029 江西医学院南昌330006

目的　探讨叮咬不同免疫力兔后中华硬蜱中肠上皮细胞的病理变化。　方法　选用中华硬蜱相对分子质量 (Mr)为 10 5 0 0 0纯化抗原 ,按常规方法分别于后足掌、腹股沟以及颈背部多点皮内注射免疫新西兰兔。免疫后每只兔用 3 0只雌性中华硬... 详细信息

目的　探讨叮咬不同免疫力兔后中华硬蜱中肠上皮细胞的病理变化。　方法　选用中华硬蜱相对分子质量 (Mr)为 10 5 0 0 0纯化抗原 ,按常规方法分别于后足掌、腹股沟以及颈背部多点皮内注射免疫新西兰兔。免疫后每只兔用 3 0只雌性中华硬蜱成虫叮咬 ,于 2 4h、48h、72h、5d及 8d ,每组各取 3只吸血中华硬蜱观察其中肠上皮细胞超微结构的变化。　结果　中华硬蜱初次叮咬兔后 ,消化细胞随叮咬时间延长而增多增大 ,微绒毛较密集 ,排列整齐 ,胞质内细胞器丰富 ,各单位膜结构清晰 ,并出现顶端小管、小泡、大量脂滴和高铁血红蛋白颗粒 ;近基膜的细胞膜内褶形成发达的基底迷路系统。叮咬经Mr 10 5 0 0 0纯化抗原免疫接种兔后 ,中华硬蜱中肠上皮细胞严重损伤和破坏 ,消化细胞数量与体积较初次叮咬组及佐剂对照组间差异具有显著性意义。叮咬后 2 4～ 48h消化细胞表面微绒毛减少 ,变短、排列不整 ,细胞粗面内质网扩张 ,线粒体嵴减少 ,高铁血红蛋白颗粒及脂滴等均较初次叮咬组和佐剂对照组明显减少 ,基底迷路系统空泡化 ,基膜变性、松散和断裂等。叮咬后 72h～ 8d ,细胞器变性、坏死 ,细胞核固缩、碎裂以及细胞溶解、碎裂等。　结论　中华硬蜱叮咬Mr 10 5 0 0 0的纯化抗原免疫接种新西兰兔 ,能使其产生获得性免疫力。

关键词：中华硬蜱免疫力中肠上皮细胞超微结构病理特点动物实验

套式PCR检测蚊体内疟原虫的敏感性与特异性

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1998年第3期16卷 164-167页

作者：李凤舞牛春叶炳辉诸欣平陈佩惠首都医科大学寄生虫学教研室南京医科大学寄生虫学教研室

目的：分析套式聚合酶链反应技术检测蚊体内疟原虫的敏感性与特异性。方法：采用２对针对间日疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因（ＳＳＵｒＤＮＡ）的特异引物，利用套式ＰＣＲ技术，从蚊体ＤＮＡ样本中，扩增间日疟原虫ＳＳＵｒＤＮＡ... 详细信息

目的：分析套式聚合酶链反应技术检测蚊体内疟原虫的敏感性与特异性。方法：采用２对针对间日疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因（ＳＳＵｒＤＮＡ）的特异引物，利用套式ＰＣＲ技术，从蚊体ＤＮＡ样本中，扩增间日疟原虫ＳＳＵｒＤＮＡ片段，进行间日疟原虫的检测。结果：扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析，可见扩增出特异的约１２１ｂｐ大小的ＤＮＡ片段，估测每份蚊虫ＤＮＡ样本中含有３个以上子孢子或１００只蚊中含有１只阳性蚊即可得此片段，而对恶性疟原虫、食蟹猴疟原虫、约氏疟原虫及正常蚊虫ＤＮＡ不能扩增出此片段。结论：此法具有高度的敏感性和特异性。

关键词：疟原虫间日疟原虫蚊虫套式PCR

中华硬蜱叮咬105kD纯化抗原免疫接种宿主后其吸血、生殖能力变化的实验研究

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中国人兽共患病杂志 2002年第5期18卷 12-15页

作者：童华章刘志刚叶炳辉江西医学院免疫学教研室南昌330006 南京医科大学寄生虫学教研室南京210029

目的　观察中华硬蜱叮咬免疫接种宿主后的吸血、生殖能力变化。方法　选用中华硬蜱 10 5kD柱层析纯化抗原对新西兰兔进行常规免疫接种 (3次 )后 ,用中华硬蜱成虫感染 (叮咬 )新西兰兔 ,分别观察空白对照组、佐剂对照组、10 5kD纯化抗原... 详细信息

目的　观察中华硬蜱叮咬免疫接种宿主后的吸血、生殖能力变化。方法　选用中华硬蜱 10 5kD柱层析纯化抗原对新西兰兔进行常规免疫接种 (3次 )后 ,用中华硬蜱成虫感染 (叮咬 )新西兰兔 ,分别观察空白对照组、佐剂对照组、10 5kD纯化抗原组中华硬蜱雌性成虫的吸血、生殖情况。结果　中华硬蜱 10 5kD纯化抗原可诱导新西兰兔产生显著的抗蜱免疫力 ,使其吸血、生殖能力显著降低 ,其中吸血量较空白叮咬对照组分别下降 6 7 9%、6 5 9% ,产卵量分别下降 74 6 %、73 7% ,并且中华硬蜱吸血时间延长 ,产卵量指数降低。而中华硬蜱叮咬佐剂免疫接种组兔后 ,其吸血、生殖能力较空白对照组相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　中华硬蜱 10

关键词：中华硬蜱 105kD纯化抗原免疫接种生殖能力动物实验吸血能力

顺式氯氰菊酯影响3种蚊幼虫蛋白、蛋白酶、羧酸酯酶活性的比较研究

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中国公共卫生 2000年第7期16卷 625-626页

作者：李凤舞朱莹叶炳辉首都医科大学寄生虫教研室北京100054

分别用 0 6 97nmol/L、1 393nmol/L顺式氯氰菊酯处理嗜人按蚊、斯氏按蚊和白纹伊蚊 3龄幼虫 ,待生长至 4龄 ,测定其蛋白质含量及蛋白酶、羧酸酯酶活力 ,观察 3种蚊幼虫上述各种指标的变化。与对照组相比 ,用药组幼虫蛋白质含量显著增... 详细信息

分别用 0 6 97nmol/L、1 393nmol/L顺式氯氰菊酯处理嗜人按蚊、斯氏按蚊和白纹伊蚊 3龄幼虫 ,待生长至 4龄 ,测定其蛋白质含量及蛋白酶、羧酸酯酶活力 ,观察 3种蚊幼虫上述各种指标的变化。与对照组相比 ,用药组幼虫蛋白质含量显著增加 ,蛋白酶、羧酸酯酶活力显著降低 ,具有非常显著性差异(P <0 0 1)或显著性差异 (P <0 0 5 )。本研究结果还表明顺式氯氰菊酯对不同蚊种的影响效果不同。

关键词：顺式氯氰菊酯蚊幼虫蛋白质蛋白酶羧酸酯酶

二棘血蜱叮咬中华硬蜱纯化抗原免疫接种宿主后的交叉免疫反应

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中国生物防治 2004年第2期20卷 95-98页

作者：刘志刚叶炳辉崔晓民徐敏深圳大学生命科学学院深圳518060 南京医科大学基础医学院南京210029 江西医学院南昌330006

选用中华硬蜱105kD柱层析纯化抗原对新西兰兔进行免疫接种,再用二棘血蜱进行叮咬,并与单纯二棘血蜱叮咬组和佐剂对照组进行对比,以探讨不同种属硬蜱之间的交叉免疫抗性。结果显示:单纯二棘血蜱叮咬组吸血量为181 3±44 3mg,而二棘血蜱... 详细信息

选用中华硬蜱105kD柱层析纯化抗原对新西兰兔进行免疫接种,再用二棘血蜱进行叮咬,并与单纯二棘血蜱叮咬组和佐剂对照组进行对比,以探讨不同种属硬蜱之间的交叉免疫抗性。结果显示:单纯二棘血蜱叮咬组吸血量为181 3±44 3mg,而二棘血蜱叮咬由中华硬蜱105kD纯化抗原免疫接种组和佐剂对照组新西兰兔后其吸血量分别为102 1±25 3mg和168 5±40 9mg,纯化抗原免疫接种组较单纯二棘血蜱叮咬组和佐剂对照组吸血量分别下降43 7%和39 4%(P<0 01)。同时,纯化抗原免疫接种组也较单纯二棘血蜱叮咬组和佐剂对照组产卵量有显著下降。该研究结果表明中华硬蜱和二棘血蜱之间存在着交叉免疫反应。

关键词：中华硬蜱二棘血蜱 105kD纯化抗原免疫接种交叉免疫反应