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SiO_2刺激肺泡上皮细胞间隙连接功能下调的研究

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中华劳动卫生职业病杂志 2002年第2期20卷 122-124页

作者：毛国根叶少菁曾群力浙江大学医学院劳动卫生与环境卫生研究所尘肺研究室杭州310031

目的　探索矽肺发病过程中 ,SiO2 对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法　不同剂量的SiO2 刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞 (PAM)培养上清液 ,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL 6 4细胞。用四唑盐 (MTT)法测定CCL 6 4细胞增... 详细信息

目的　探索矽肺发病过程中 ,SiO2 对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法　不同剂量的SiO2 刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞 (PAM)培养上清液 ,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL 6 4细胞。用四唑盐 (MTT)法测定CCL 6 4细胞增殖 (以A570nm值表示 ) ;采用激光扫描共焦显微镜 (LSCM ,LeicaTCSSP)用荧光光漂白后再恢复 (FRAP)技术测定CCL 6 4细胞GJIC功能 [以荧光扩散率K(× 10 -3 /s) ]表示。结果　体积分数为 5 %的SiO2 刺激的PAM上清液能诱导CCL 6 4细胞增殖 (F =9.6 79,P <0 .0 1) ,并抑制CCL 6 4细胞间GJIC功能 (F =2 0 .5 87,P <0 .0 1)。在 5 0～ 5 0 0 μg/mlSiO2 范围内 ,随SiO2 浓度增加 ,两者均呈良好的剂量依赖性关系 (GJIC :r =- 0 .943,P <0 .0 5 ;增殖 :r=0 .891,P <0 .0 5 )。结论　SiO2 刺激PAM培养上清液可以抑制肺泡上皮细胞的GJIC功能 ,并诱导细胞增殖。推论肺泡上皮细胞GJIC功能下调在SiO2 介导的肺泡上皮组织损伤中有重要的作用。

关键词： SiO2 间隙连接功能肺泡上皮细胞 FRAP技术矽肺

幽门螺杆菌全长cagA基因和霍乱毒素B亚单位基因的克隆与表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第2期22卷 211-214页

作者：方平楚周林福陈智叶少菁浙江大学医学院杭州310006

目的　构建表达幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白 (CagA)及粘膜免疫佐剂霍乱毒素B亚单位 (CTB)的重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法　用PCR方法从幽门螺杆菌扩增CagA基因片段 ,从霍乱弧菌扩增CTB基因片段 ,将它们转... 详细信息

目的　构建表达幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白 (CagA)及粘膜免疫佐剂霍乱毒素B亚单位 (CTB)的重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法　用PCR方法从幽门螺杆菌扩增CagA基因片段 ,从霍乱弧菌扩增CTB基因片段 ,将它们转入原核载体质粒pGEMEX 1,在大肠杆菌DH5α中克隆 ,并在JM10 9DE3中表达。结果　重组质粒pGEMEX CTB的全长序列经分析与Gen Bank公布的序列相符 ;各表达蛋白经SDS PAGE分析 ,相对分子量与文献相符 ;重组蛋白经Westernblot检测有较强的抗原性。

关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白霍乱毒素B亚单位基因表达克隆胃炎胃癌防治

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培养细胞缝隙连结细胞间通讯功能的测定

中华劳动卫生职业病杂志 2000年第6期18卷 376-377,F003页

作者：毛国根傅一提叶少菁浙江大学医学院劳动卫生与环境卫生研究所杭州310031

缝隙连结是机体多数细胞间连接的通道。细胞间通过缝隙连结形成电偶联和(或)代谢偶联，产生细胞间通讯，即缝隙连结细胞间通讯( gap junction intercellular communication, GJIC ) 。GJIC与细胞生长调控及癌变的关系日益受到重视。目... 详细信息

缝隙连结是机体多数细胞间连接的通道。细胞间通过缝隙连结形成电偶联和(或)代谢偶联，产生细胞间通讯，即缝隙连结细胞间通讯( gap junction intercellular communication, GJIC ) 。GJIC与细胞生长调控及癌变的关系日益受到重视。目前，已有多种技术途径用于功能性GJIC的研究。已经报道的技术有：电偶联、经过放射性代谢物移转的代谢协同、基因突变所致的代谢协同、刮除负载(scrape loading)染料传递、微注射荧光染料传递(microinjection and dye transfer assay, MDTA )，以及荧光光漂白再恢复(fluorescence redistribution after photobleaching,FRAP)技术[1]。我们就近年来本学科常用的MDTA法和新近开发的FRAP法对正常的和十四酰基咐拜醇酯(TPA)作用的体外培养中国仓鼠肺成纤维(CHL)细胞单层GJIC功能进行测定，并作量化比较。

关键词：缝隙连结细胞间通讯细胞培养测定

浙江地区幽门螺杆菌cagA、vacA、iceA基因型别分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第2期23卷 111-112页

作者：尤建飞方平楚叶少菁茅海燕周林福邱翔浙江大学医学院病原生物学教研室杭州310006

据初步统计，全世界超过50%的人群有幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）感染。其中西方国家的感染率为25%-50%，发展中国家有的高达90%~[1]。然而，只有少数感染者发展成消化性溃疡或胃癌，其中的原因尚不清楚。有研究表明，Hp的cag... 详细信息

据初步统计，全世界超过50%的人群有幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）感染。其中西方国家的感染率为25%-50%，发展中国家有的高达90%~[1]。然而，只有少数感染者发展成消化性溃疡或胃癌，其中的原因尚不清楚。有研究表明，Hp的cagA、vacA、iceA基因可能与疾病的发生有关。有关cagA、vacA与疾病的关系我国也有报道~[2]。本文研究了浙江地区Hp菌株的cagA、vacA、iceA基因型别并分析了与疾病的关系。

关键词：浙江幽门螺杆菌 cagA vacA iceA 基因型别 Hp菌株

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相关主题分析看尘肺研究的新动向

中华劳动卫生职业病杂志 1997年第4期15卷 221-226页

作者：毛国根叶少菁丁六松张琪凤浙江医科大学公共卫生学院

文献情报科学可以为学科的研究提供各方面的详尽的信息，诸如当今某一研究领域的主要内容、主要的研究手段和研究方向。采用一种新的科技文献情报分析方法——相关主题分析，对近１１年来《ＭＥＤＬＩＮＥＣＤ－ＲＯＭ》（Ｓｉｌｖｅｒ... 详细信息

文献情报科学可以为学科的研究提供各方面的详尽的信息，诸如当今某一研究领域的主要内容、主要的研究手段和研究方向。采用一种新的科技文献情报分析方法——相关主题分析，对近１１年来《ＭＥＤＬＩＮＥＣＤ－ＲＯＭ》（ＳｉｌｖｅｒＰｌａｔｅｒ）收录的所有有关尘肺主题文献中的加权主题词（ＭＪＭＥ），按文献计量学方法进行统计分析，提出尘肺研究的新动态和新方向，为尘肺研究工作的管理和研究方向的确立提供理论依据。

关键词：尘肺研究动向相关主题分析文献计量学

慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌babA2和cagA及vacA基因型分析

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浙江大学学报（医学版） 2003年第1期32卷 29-32页

作者：茅海燕方平楚叶少菁尤建飞朱永良俞建国浙江大学医学院病原生物学教研室浙江杭州310031 浙江大学医学院附属第二医院浙江杭州310009 浙江省舟山市岱山县人民医院浙江舟山316200

目的 :研究慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌 (Hp) bab A2、cag A、vac A基因型的分布 ,探讨 Hpbab A2、cag A、vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。方法 :用聚合酶链反应测定 5 8株从浙江省慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 H... 详细信息

目的 :研究慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌 (Hp) bab A2、cag A、vac A基因型的分布 ,探讨 Hpbab A2、cag A、vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。方法 :用聚合酶链反应测定 5 8株从浙江省慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2基因、cag A基因和 vac A基因亚型。结果 :5 8株 Hp中 bab A2、cag A、vac A s1a、vac A m1、vac A m2基因的阳性率分别为 87.9%、10 0 %、93.1%、1.7%、65 .5 %。慢性胃炎和消化性溃疡患者感染的Hp bab A2、vac A s1a、vac A m2基因阳性率差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :从浙江地区慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2、cag A、vac A基因型均以 bab A2阳性、cag A阳性和 vac A s1a/ m2型为主 ,未发现 Hp bab A2、cag A和 vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。

关键词：幽门螺杆菌基因型胃炎诊断消化性溃疡

微囊藻毒素-LR致肝细胞连接通讯下调的研究

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中国环境科学 2003年第1期23卷 34-37页

作者：毛国根徐立红叶少菁浙江大学劳动卫生与环境卫生研究所浙江杭州310031 浙江大学医学院浙江杭州310031

不同剂量(0, 10, 50,100, 200, 500, 1000nmol/L)的微囊藻毒素-LR作用于肝细胞株BRL-3A 24 h.采用激光扫描共焦显微镜,按荧光光漂白后再恢复技术测定BRL-3A的间隙连接细胞间通讯功能,四唑盐法测定BRL-3A细胞增殖,同时分析胆汁酸运输系... 详细信息

不同剂量(0, 10, 50,100, 200, 500, 1000nmol/L)的微囊藻毒素-LR作用于肝细胞株BRL-3A 24 h.采用激光扫描共焦显微镜,按荧光光漂白后再恢复技术测定BRL-3A的间隙连接细胞间通讯功能,四唑盐法测定BRL-3A细胞增殖,同时分析胆汁酸运输系统抑制剂利福平对两者的阻滞作用.结果表明,微囊藻毒素-LR可以显著地抑制BRL-3A细胞GJIC功能,并促进BRL-3A细胞增殖,两者均呈剂量效应关系.利福平(30靘ol/L)对微囊藻毒素-LR诱导的BRL-3A细胞GJIC功能下调和增殖有明显的抑制作用.微囊藻毒素-LR可诱导BRL-3A细胞膜泡形成.说明微囊藻毒素-LR肝脏毒性及致癌性可能与抑制肝细胞GJIC功能有关.

关键词：微囊藻毒素肝细胞间隙连接细胞间通讯细胞增殖

幽门螺杆菌CagA基因及其与致病性关系的研究进展

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中国人兽共患病杂志 1999年第4期15卷 98-100页

作者：叶少菁方平楚浙江大学医学院微生物学教研室

自本世纪８０年代初，Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌ［１，２］最先从胃炎及胃溃疡患者的胃粘膜活检标本中发现并分离到幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）以来，开创了感染与胃部疾病发生有关的新领域。随后，... 详细信息

自本世纪８０年代初，Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌ［１，２］最先从胃炎及胃溃疡患者的胃粘膜活检标本中发现并分离到幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）以来，开创了感染与胃部疾病发生有关的新领域。随后，大量研究资料确证ＨＰ与慢性胃炎、消...

关键词：幽门螺杆菌 CagA基因致病性

Purification and relationship with gastric disease of a 130 kDa (CagA)protein of Helicobacter pylori

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Journal of Zhejiang University Science 2003年第2期4卷 232-235页

作者：叶少菁方平楚毛国根厉朝龙丘翔陈海洋 DepartmentofMicrobiology CollegeofMedicineZhejiangUniversityHangzhou310006China

Objective: The aims of this research were to purify and identify the 1 30 kDa (CagA) protein of H. pylori clinical isolate HP97002 and evaluate the rel ationships between the purified 130 kDa (CagA) protein and gastric diseases. Met hods: The procedure for isolating the protein included 6 mol/L guanidine extract , size exclusion chromatography and elusion from gel. Sera of 68 patients with g astric diseases (44 with chronic gastritis,15 with atrophic gastritis,7 with p eptic ulcer disease,2 with gastric cancer ) were obtained, and the serological response to CagA was studied by Western-blot using the purified protein. Result s : The purified protein was 130 kDa and preserved good antigenicity and revealed basic isoelectric point about of 8.1. Among 68 sera, 43 sera could recognize the purified protein associated with chronic gastritis 47.7% (21/44),atrophic gast ritis 86.7% (13/15),peptic ulcer disease 100% (7/7),gastric cancer 100% (2/2). Compared with each other, the difference was significant (χ 2=13.327, P =0.004), and 130 kDa (CagA) protein was associated with severe gastric disease s (r_s=0.442, \%P\%=0.001). Conclusion: The 130 kDa (CagA) protein was asso ciated with severe gas tric diseases.

关键词： Helicobacter pylori CagA Elution from gel West ern-blot