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贵州省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学和防控技术研究

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贵州省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学和防控技术研究

作者：史开志贵州大学

学位级别：硕士

目的:为探索高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的防控技术,对贵州省高致病性PRRS的临床诊断特征,病原学鉴定、变异毒株与经典毒株的区别、病毒的分子流行病学、媒介动物的传播意义及疫... 详细信息

目的:为探索高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的防控技术,对贵州省高致病性PRRS的临床诊断特征,病原学鉴定、变异毒株与经典毒株的区别、病毒的分子流行病学、媒介动物的传播意义及疫苗免疫程序展开全面研究。方法:通过流行病学调查,了解贵州省PRRS发病猪品种,临床特征、季节性流行特征和地域分布;对PRRSV贵州流行毒株进行分离,通过比较PRRSV不同基因的RT-PCR扩增效果,筛选适于RT-PCR临床诊断的目的基因;基于12株PRRSV贵州流行毒株的Nsp2基因和10株PRRSV贵州流行毒株的GP5基因,开展分子流行病学研究;通过从三带喙库蚊、家蝇和家鼠检测PRRSV核酸,调查PRRSV隐蔽携带者,评估媒介动物在PRRS传播中的意义;根据PRRSV贵州流行毒株的遗传变异特征,选择适于贵州省使用的PRRSV疫苗种类,通过母源抗体和免疫抗体的消长规律检测,制定合理的免疫程序。结果:贵州省8个地区43个猪场中,37个猪场暴发高致病性PRRS。6～8月份为发病高峰,PRRS的发病与猪群遗传背景无明显关系,病猪普遍表现皮肤微循环障碍和体温升高(39.7℃～41.7℃),死亡猪以29d～99d为主(62.3%),病猪普遍发生肺和肺门淋巴结出血,表现间质性肺炎;与猪瘟病毒混合感染达24.32%;发病猪群的血清抗体水平明显高于临床健康非免疫猪群,而低于临床健康免疫猪群。通过Marc-145细胞增殖病毒,成功分离到11株PRRSV,在进行比较的4个基因中,N基因检测所需的核酸量最少,扩增效果最佳,适于含毒量较少样本的检测,Nsp2基因扩增可对高致病性毒株和经典毒株进行鉴别。共有3种Nsp2基因不同程度缺失类型的PRRSV同时在贵州省流行,66.67%的毒株缺失90个核苷酸,25%的毒株缺失177个核苷酸,8.33%的毒株缺失93个核苷酸,流行毒株的GP5基因均发生了点突变,表现了高致病性PRRSV的变异特征。贵州流行毒株间基于Nsp2基因的遗传距离为0.001～0.027,基于GP5基因的遗传距离为0.000～0.007,在系统发生树上聚为2大类,同是美洲型毒株;贵州流行株与参考毒株之间基于Nsp2基因的遗传距离为0.008～0.268,相似度为77.7%～99.2%,基于GP5基因的遗传距离为0.010～0.122,相似度为88.9%～99%,PRRSV贵州流行毒株与国内近年流行的毒株系统发生关系接近,与早期流行毒株距离较远,毒株间的差异与地域间的距离没有明显相关性,毒株在Nsp2和GP5基因水平上的进化趋势一致,但Nsp2基因更不稳定。三带喙库蚊可携带具有感染性的高致病性PRRSV 24h以上,具有传播PRRSV的重要意义,家蝇能在体表短期携带PRRSV(低于12h),家鼠和小白鼠不能检测到PRRSV。NVDC-JX-A1株灭活疫苗是当前最适于贵州省预防PRRS的疫苗,PRRS首免应在20d左右,50～60d时应加强免疫,母猪在配种前应进行免疫。结论:贵州省PRRS具有明显的发病特征,N基因最适于PRRS病原核酸的检出,Nsp2基因扩增可鉴别高致病性PRRSV和经典PRRSV,贵州省流行的PRRSV均为具有高致病性PRRSV变异特征的美洲型毒株,研究在贵州省新发现2种Nsp2基因缺失类型的流行毒株,三带喙库蚊具有传播PRRS的重要意义,家蝇和鼠类是否能够传播PRRS尚待研究,制定的疫苗接种程序等综合防控技术在全省52家猪场推广,取得了较理想的效果。

关键词：贵州省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学防控技术

法氏囊病毒感染对鸡群新城疫疫苗免疫效果的影响

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贵州农业科学 2012年第2期40卷 106-108页

作者：文晓棠史开志韩勇铜仁职业技术学院贵州铜仁554300 贵州省畜牧兽医研究所贵州贵阳550005

为了解传染性法氏囊病毒(IBDV)感染对鸡新城疫体液免疫应答的影响,对IBDV感染康复鸡群和正常鸡群接种新城疫(ND)疫苗后,通过血凝抑制试验测定血清中ND抗体。结果表明:1次、2次和3次免疫后,IBDV感染康复鸡群抗体效价始终显著低于正常鸡群... 详细信息

为了解传染性法氏囊病毒(IBDV)感染对鸡新城疫体液免疫应答的影响,对IBDV感染康复鸡群和正常鸡群接种新城疫(ND)疫苗后,通过血凝抑制试验测定血清中ND抗体。结果表明:1次、2次和3次免疫后,IBDV感染康复鸡群抗体效价始终显著低于正常鸡群,重复免疫并不能消除这种差异。

关键词：传染性法氏囊新城疫疫苗体液免疫应答免疫抑制

面向从江香猪选育的肌内脂肪活体超声无损测定

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农业工程学报 2018年第7期34卷 187-191页

作者：张雄张勇尚以顺史开志张永军王婧陈怡贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵阳550005 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州大学计算机科学与技术学院贵阳550025

为探索从江香猪肌内脂肪含量的超声活体预测方法,该文选取110头从江香猪育肥猪开展活体测定,以超声图像为研究对象,利用Matlab R2015b软件提取灰度-梯度共生矩阵(gray gradient cooccurrence matrix,GGCM)及4个角度灰度共生矩阵(gray le... 详细信息

为探索从江香猪肌内脂肪含量的超声活体预测方法,该文选取110头从江香猪育肥猪开展活体测定,以超声图像为研究对象,利用Matlab R2015b软件提取灰度-梯度共生矩阵(gray gradient cooccurrence matrix,GGCM)及4个角度灰度共生矩阵(gray level cooccurrence matrix,GLCM)图像纹理特征参数。通过逐步回归分析法构建肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量预测模型,再将此模型应用于另外42头从江香猪,验证模型准确性。逐步回归分析结果表明,背膘厚、灰度平均和梯度熵3个参数指标达到显著水平(P<0.05),回归预测模型决定系数R2=0.369。线性回归及相关分析得出,估测值与实测值间RMSE为0.686,皮尔逊积矩相关系数(pearson correlation coefficients)和斯皮尔曼相关系数(spearman correlation coefficients)分别为0.592和0.640(P<0.001)。该研究所构建的拟合回归模型可应用于从江香猪肌内脂肪活体预测,为后期高肌内脂肪含量从江香猪的选育提供更为便捷有效的手段。

关键词：超声图像无损检测模型从江香猪肌内脂肪选育

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一例规模化猪场猪呼吸道疫病的诊治

黑龙江畜牧兽医（下半月） 2016年第5期 122-123页

作者：余波杨莉史开志姜玲玲周思旋贵州省畜牧兽医研究所贵阳550005

2015年4—5月份,贵州省贵阳市某规模化猪场发生了猪呼吸道疫病,以体温升高、呼吸困难、胸膜炎、心包炎、关节炎为特征,发病猪死亡率达到80%。经过流行病学调查、临床症状、病理剖检、细菌分离鉴定、病毒核酸PCR鉴定,诊断为猪繁殖和呼吸... 详细信息

2015年4—5月份,贵州省贵阳市某规模化猪场发生了猪呼吸道疫病,以体温升高、呼吸困难、胸膜炎、心包炎、关节炎为特征,发病猪死亡率达到80%。经过流行病学调查、临床症状、病理剖检、细菌分离鉴定、病毒核酸PCR鉴定,诊断为猪繁殖和呼吸综合征病毒、副猪嗜血杆菌和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌混合感染。根据诊断结果对该规模化猪场采取综合防治措施,疫情得到有效控制。

关键词：规模化猪场猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV) 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌副猪嗜血杆菌混合感染

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动车组密接式车钩虚拟仿真实验系统设计

实验室研究与探索 2019年第10期38卷 109-114页

作者：肖乾王丹红史开志华东交通大学轨道交通技术创新中心南昌330013 南昌工善科技有限公司南昌330013

针对现场车钩教学实验过程中存在成本高、多限制、可视性差、难以重复等不足,为帮助学生熟练掌握密接式车钩结构、三态作用原理、连挂特性及拆装流程,以夏芬博格(Scharfenberg) 10型密接式车钩为例,基于Unity3D平台,利用Web、VR技术和... 详细信息

针对现场车钩教学实验过程中存在成本高、多限制、可视性差、难以重复等不足,为帮助学生熟练掌握密接式车钩结构、三态作用原理、连挂特性及拆装流程,以夏芬博格(Scharfenberg) 10型密接式车钩为例,基于Unity3D平台,利用Web、VR技术和数值仿真计算方法等,完成了具有教学和考核功能的动车组密接式车钩虚拟仿真实验系统的研发。学生可登陆实验系统,在虚拟环境中重复且无破坏的对车钩进行拆装操作、不同速度等级下的连挂操作、车钩性能测试操作等。实践表明,该系统能有效提高学生自主学习能力,加强了学生对专业知识的理解,学生学习兴趣及效率获得显著提高。

关键词：动车组密接式车钩虚拟仿真车钩三态作用连挂特性

猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州流行株GP5基因的RLFP分析

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畜牧与兽医 2009年第1期41卷 76-78页

作者：汪德生杨鹤峰史开志周碧君文明贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省六盘水市兽医防疫站贵州六盘水553000

为对贵州省某养猪场猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疑似病例进行确诊及分析其病原分子变异情况,采集该养猪场死亡猪病料样本进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PSSRV)的RT-PCR检测,并采用RLFP方法分析了现场流行毒株GP5基因的变异情况。结果表明,... 详细信息

为对贵州省某养猪场猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疑似病例进行确诊及分析其病原分子变异情况,采集该养猪场死亡猪病料样本进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PSSRV)的RT-PCR检测,并采用RLFP方法分析了现场流行毒株GP5基因的变异情况。结果表明,该猪场病猪样本中PRRSV的核酸检出率为100%,是由高致病性PRRSV变异毒株引起;RT-PCR扩增PRRSV贵州流行株GP5基因,经RLFP分析显示,流行株GP5基因呈1-3-3 PCR-RFLP模式;克隆测序后发现,贵州流行株GP5基因发生多个点突变,其中在第25、216、358、409和554位核苷酸的点突变,可导致一些酶切位点的丧失或显现。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征 RT-PCR检测 RLFP分析

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打造本地品牌筑牢产业之基

当代贵州 2020年第2期 66-67页

作者：史开志余波贵州省农业科学院畜牧兽医研究所

近年来,贵州利用本地优质品种资源优势,着力打造优质优价的中高端贵州黄牛、贵州山羊、贵州土猪品牌。围绕产业重点县,以降成本、提质量、增效益为目标,推广"龙头企业+合作社+农户"组织方式,健全完善利益联结机制,从而推动贵州省生态畜... 详细信息

近年来,贵州利用本地优质品种资源优势,着力打造优质优价的中高端贵州黄牛、贵州山羊、贵州土猪品牌。围绕产业重点县,以降成本、提质量、增效益为目标,推广"龙头企业+合作社+农户"组织方式,健全完善利益联结机制,从而推动贵州省生态畜牧业高质量、快速发展,实现农民增收,助推脱贫攻坚。

关键词：利益联结机制生态畜牧业农民增收降成本优质优价资源优势合作社着力打造

高致病性猪蓝耳病、猪瘟和沙门氏菌混合感染的诊断

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贵州农业科学 2009年第4期37卷 110-112页

作者：汪德生王文亮史开志贵州大学动物疫病研究所贵州贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

通过流行病学调查、病猪剖检病变观察和实验室诊断,得出贵州省某猪场发病猪为高致病性蓝耳病、猪瘟和沙门氏菌混合感染。其中,高致病性蓝耳病感染率为100%,猪瘟感染率50%,沙门氏菌感染率25%。

关键词：高致病性蓝耳病猪瘟沙门氏菌混合感染

贵州省规模化养猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查

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畜牧与兽医 2009年第3期41卷 37-39页

作者：杨均王开功史开志毛君婷贵州大学动物科学院贵州贵阳550025 贵州大学动物疫病研究所贵州贵阳550025

采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验(LAT),对贵州省4个地区6个规模化猪场240份血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪圆环病毒2型(PCV2)抗体水平检测。结果:... 详细信息

采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验(LAT),对贵州省4个地区6个规模化猪场240份血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪圆环病毒2型(PCV2)抗体水平检测。结果:CS-FV、PPV和PRV免疫抗体阳性率分别为64.2%、77.9%和59.2%;PRRSV、PCV2抗体阳性率分别为10.4%和32.5%。上述结果表明,猪细小病毒病、猪伪狂犬病和猪瘟免疫效果比较理想,但6个规模场存在PRRSV和PCV2混合感染,应引起各养殖场高度重视。

关键词：猪繁殖障碍性疾病血清学调查抗体