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不同生长素类型及ABA搭配对小麦幼胚再生效果的影响

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核农学报 2011年第5期25卷 1023-1028页

作者：别晓敏杜丽璞佘茂云徐惠君叶兴国中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室北京100081

生长素是小麦幼胚产生胚性愈伤组织的关键成分,培养基中适宜的生长素种类、浓度和组合决定着小麦幼胚再生效果。本研究以小麦基因型CB037幼胚为材料,在分别确定dicamba、2,4,5-T和picloram的适宜用量的基础上,比较了2,4-D、dicamba、2,4... 详细信息

生长素是小麦幼胚产生胚性愈伤组织的关键成分,培养基中适宜的生长素种类、浓度和组合决定着小麦幼胚再生效果。本研究以小麦基因型CB037幼胚为材料,在分别确定dicamba、2,4,5-T和picloram的适宜用量的基础上,比较了2,4-D、dicamba、2,4,5-T、picloram在适宜浓度下诱导再生的效果,筛选出ABA搭配2,4-D的最佳浓度组合。结果表明,dicamba、2,4,5-T和picloram的适宜用量分别为2.5mg/L、3.0mg/L和3.0mg/L,2,4-D诱导小麦幼胚再生效果最好,其次为dicamba,picloram和2,4,5-T诱导效果较差;在含有2,4-D 2.0mg/L的培养基中加入ABA 0.3mg/L能明显抑制幼胚直接萌发,显著提高胚性愈伤组织诱导率和再生率。

关键词：小麦幼胚生长素胚性愈伤组织诱导率植株再生率

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安全型转基因植物培育技术研究进展

植物遗传资源学报 2009年第4期10卷 607-612页

作者：高翔别晓敏佘茂云叶兴国中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室北京100081

由于关系到转基因植物的产业化前景,安全型转基因植物培育越来越受到公众的关注。在植物遗传转化体系中,绝大多数选择标记基因来源于细菌,对人类健康和环境安全存在潜在风险,因此无选择标记转基因植物培育受到科研工作者的高度重视。本... 详细信息

由于关系到转基因植物的产业化前景,安全型转基因植物培育越来越受到公众的关注。在植物遗传转化体系中,绝大多数选择标记基因来源于细菌,对人类健康和环境安全存在潜在风险,因此无选择标记转基因植物培育受到科研工作者的高度重视。本文综述了安全型转基因植物的培育途径,包括共转化系统、位点特异性重组系统、转座子系统、同源重组系统、不依赖于组织培养的简易转化技术及再生相关基因利用等技术,探讨了各种途径的优缺点,以期推动安全型转基因植物培育和转基因植物产业化进程。

关键词：转基因植物产业化生物安全选择标记

培养基中CuSO_4和Fe盐浓度对小麦胚培养再生效果的影响

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植物遗传资源学报 2011年第6期12卷 975-981页

作者：别晓敏杜丽璞徐惠君叶兴国中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室北京100081

以小麦基因型CB037、新春9号和Bobwhite为材料进行成熟胚和幼胚培养,研究了CuSO4和Fe2-EDTA对小麦组织培养再生效果的影响。结果发现,培养基中添加0.1～4.1μmol/L CuSO4对小麦成熟胚组织培养无显著效果,超过6.1μmol/L对愈伤组织有毒... 详细信息

以小麦基因型CB037、新春9号和Bobwhite为材料进行成熟胚和幼胚培养,研究了CuSO4和Fe2-EDTA对小麦组织培养再生效果的影响。结果发现,培养基中添加0.1～4.1μmol/L CuSO4对小麦成熟胚组织培养无显著效果,超过6.1μmol/L对愈伤组织有毒害作用;培养基中添加40μmol/L Fe盐对小麦成熟胚组织培养和植株再生具有促进作用;不同小麦基因型其幼胚培养对Fe盐的反应不同,40μmol/L～50μmol/L Fe盐处理对CB037幼胚再生效果最好,20μmol/L Fe盐浓度对新春9号和Bobwhite幼胚再生效果较好,高浓度铁盐抑制作用显著;在相同培养条件下,CB037幼胚再生率最高,新春9号次之,Bob-white最低。

关键词：小麦组织培养 CuSO4 Fe盐

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春小麦成熟胚愈伤组织诱导及再生体系的优化

分子植物育种 2020年第4期18卷 1244-1249页

作者：董鲁浩姚富泉詹悠李兴国别晓敏山东农业大学农学院作物生物学国家重点实验室泰安271018 山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室泰安271018

为优化小麦成熟胚再生体系,以CB037和中国春(CS) 2个春小麦品系的成熟胚为外植体,在培养基中添加不同浓度的TDZ (Thidiazuron, N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲)。结果显示,CB037和CS成熟胚胚性愈伤组织诱导率最适TDZ浓度为0.5 mg/L,在培... 详细信息

为优化小麦成熟胚再生体系,以CB037和中国春(CS) 2个春小麦品系的成熟胚为外植体,在培养基中添加不同浓度的TDZ (Thidiazuron, N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲)。结果显示,CB037和CS成熟胚胚性愈伤组织诱导率最适TDZ浓度为0.5 mg/L,在培养14 d时分别为90.43%和87.88%,均高于对照,达到极显著差异水平。CB037愈伤组织分化率和绿芽诱导率在0.5 mg/L TDZ时达到最高值,分别为48.94%和60.64%,与对照相比具有极显著性差异和显著性差异;CS愈伤组织分化率和绿芽诱导率的最适TDZ浓度为1.0 mg/L,与对照相比,二者均达到极显著性差异。TDZ最适响应浓度存在品种间差异,适量添加可提高成熟胚再生效率。本研究通过优化培养基成分提高成熟胚再生能力,为高频小麦遗传转化体系的建立提供了依据。

关键词：春小麦组织培养成熟胚再生体系

TaDOF3.4提高小麦遗传转化效率的研究

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TaDOF3.4提高小麦遗传转化效率的研究

小麦TaCAT新基因克隆及分子生物学和生化特性分析

第二十届中国作物学会学术年会

作者：别晓敏李梦璐孙雅琪宋颖张宪省小麦育种全国重点实验室山东农业大学生命科学学院

遗传转化是生物育种的关键环节,植株高效再生是遗传转化的重要基础。近年来,随着基因组测序技术的快速发展,大量小麦基因功能的研究工作需要快速开展,高效、稳定和规模化的遗传转化体系亟需建立。本研究通过RNA-seq、ATAC-seq和CUT&Tag... 详细信息

遗传转化是生物育种的关键环节,植株高效再生是遗传转化的重要基础。近年来,随着基因组测序技术的快速发展,大量小麦基因功能的研究工作需要快速开展,高效、稳定和规模化的遗传转化体系亟需建立。本研究通过RNA-seq、ATAC-seq和CUT&Tag等多组学测序分析,揭示了小麦再生过程中转录水平和染色质开放水平的动态变化之间的密切关系,建立了小麦芽再生的基因调控网络,筛选和鉴定到多个提高小麦再生的关键调控因子,其中TaDOF3.4基因可有效提高小麦不同基因型的转化效率。为进一步研究TaDOF3.4调控小麦再生的分子机理,我们利用酵母双杂交系统筛选了Ta DOF3.4的互作蛋白TaCBS,并进一步通过酵母双杂、双分子荧光互补实验(BiFC)、双荧光素酶实验(Luciferase)等验证了二者的互作关系,功能验证发现过表达TaCBS基因可提高Fielder、科农199和矮抗58等小麦基因型的转化效率。研究结果为改良小麦不同基因型再生和转化效率,克服基因型的依赖性,加快小麦基因功能研究,阐明小麦芽再生的机理提供了重要的信息和基因资源。

关键词：小麦多组学分析再生相关基因遗传转化效率

来源： cnki会议评论

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科技导报 2011年第12期29卷 23-31页

作者：佘茂云雷昊殷桂香冯晨别晓敏杜丽璞徐惠君叶兴国中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程农业部作物遗传育种重点开放实验室北京100081

小麦组织培养再生潜力与抗氧化胁迫能力具有相关性。为解析小麦TaCATs基因家族的分子生物学及生化特性并为后续试验验证奠定理论基础,利用e-PCR方法进行小麦过氧化氢酶(CAT)新基因克隆,结合in silico技术对小麦TaCATs基因家族的生化特... 详细信息

小麦组织培养再生潜力与抗氧化胁迫能力具有相关性。为解析小麦TaCATs基因家族的分子生物学及生化特性并为后续试验验证奠定理论基础,利用e-PCR方法进行小麦过氧化氢酶(CAT)新基因克隆,结合in silico技术对小麦TaCATs基因家族的生化特性进行分析和预测。氨基酸序列同源性比对结果表明,克隆的小麦TaCATs基因家族新成员与水稻的CatA和玉米的Cat3具有较高的相似性,分别达89%及81.1%,命名为TaCAT3,基因组DNA和cDNA长度分别为1986和1482bp,编码494个氨基酸的蛋白。亚细胞定位结果表明,TaCAT3可能定位在线粒体中,且所有的功能活性位点在小麦TaCATs家族中具有一致的保守性。系统发生树构建结果表明,小麦TaCATs能形成3个独立的分支。在蛋白质编码序列同源比对的基础上,利用SwissModel的Swiss-PdbViewer 3.7软件包对TaCATs高级结构进行同源模拟,发现所构建的模型能很好地反映TaCATs的高级结构。

关键词：小麦 TaCAT in silico 同源建模

小麦果聚糖合成酶基因6-SFT克隆和功能验证

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科技导报 2009年第23期27卷 70-75页

作者：高翔佘茂云殷桂香于洋别晓敏杜丽璞徐惠君叶兴国中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程农业部作物遗传育种重点开放实验室北京100081 中国农业科学院生物技术研究所北京100081

许多研究表明植物中果聚糖累积有助于提高植物耐逆境胁迫能力,但对小麦中果聚糖合成相关基因及其与抗逆性关系还缺乏研究。本研究拟从普通六倍体小麦中克隆出果聚糖合成酶基因6-SFT并进行生物学特性及功能研究,以期解析小麦通过累积果... 详细信息

许多研究表明植物中果聚糖累积有助于提高植物耐逆境胁迫能力,但对小麦中果聚糖合成相关基因及其与抗逆性关系还缺乏研究。本研究拟从普通六倍体小麦中克隆出果聚糖合成酶基因6-SFT并进行生物学特性及功能研究,以期解析小麦通过累积果聚糖途径提高自身抗逆境胁迫能力的分子机理,为转6-SFT基因提高小麦抗逆境胁迫能力提供理论依据。利用touch-down PCR技术从小麦品种杨麦6(Triticum aestivum cv. Yangmai 6)基因组及cDNA中分离出编码6-SFT基因的全长序列,运用生物学信息技术对其编码蛋白的相关理化及生物学功能进行了预测,同时利用农杆菌介导法将所克隆的小麦6-SFT基因转入了烟草,对转基因烟草植株进行了抗旱、抗盐和抗低温鉴定。结果表明,小麦中6-SFT基因的gDNA和cDNA长度分别为3134bp和1851bp,序列结构分析表明该基因含有4个外显子、3个内含子,编码产物为约68kD的蛋白质,其等电点(pI)约为5.25,具有液泡定位信号;转小麦6-SFT基因烟草植株表现出较强的抗旱、抗盐和抗低温能力。本研究为利用基因工程技术改良小麦抗逆性提供重要理论依据。

关键词：小麦 6-SFT基因烟草转基因抗逆性

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植物解剖学实验考核体系的改革与实践

中国现代教育装备 2020年第9期 129-131页

作者：别晓敏李滨高新起李兴国山东农业大学生命科学学院山东泰安271018

植物解剖学实验作为植物学课程教学的重要组成部分,不仅能够巩固植物学理论知识,锻炼学生的观察和操作能力,也有利于培养学生的实践创新能力和严谨的科学态度。重点从学生课堂表现的评价、实验报告的绘制和考核形式等方面探讨了植物解... 详细信息

植物解剖学实验作为植物学课程教学的重要组成部分,不仅能够巩固植物学理论知识,锻炼学生的观察和操作能力,也有利于培养学生的实践创新能力和严谨的科学态度。重点从学生课堂表现的评价、实验报告的绘制和考核形式等方面探讨了植物解剖学实验教学的改革措施,为提高教学质量提供指导。

关键词：植物解剖学实验考核体系教学改革

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除草剂筛选小麦转基因植株的有效浓度研究

山东农业大学学报（自然科学版） 2016年第5期47卷 664-667页

作者：李艺王悦王健赵翔宇王芳别晓敏山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室山东泰安271018

利用筛选标记基因可方便快捷的区分转基因植株和非转基因植株。筛选标记基因通常用PCR、Southern杂交等分子手段检测。随着规模化转基因工作的开展,大量转基因植株需要及时准确的鉴定。叶片涂抹除草剂筛选转基因植株具有快速、高效的优... 详细信息

利用筛选标记基因可方便快捷的区分转基因植株和非转基因植株。筛选标记基因通常用PCR、Southern杂交等分子手段检测。随着规模化转基因工作的开展,大量转基因植株需要及时准确的鉴定。叶片涂抹除草剂筛选转基因植株具有快速、高效的优势。本研究结果显示,除草剂草铵膦对小麦品种轮选987和科农199的有效筛选浓度分别为75 mg·L^(-1)和125 mg·L^(-1);对以轮选987为受体材料的转bar基因小麦植株的有效筛选浓度为100 mg·L^(-1),该浓度可用于针对此类转基因材料的大规模筛选。

关键词：小麦转基因除草剂 bar基因有效浓度