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基于高效液相色谱指纹图谱和网络药理学探究连翘保肝作用潜在机制

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中国现代中药 2024年

作者：田溪李雯钰张惠怡李红艳刘灵娣温春秀河北省农林科学院经济作物研究所河北医科大学药学院河北省药用植物技术创新中心

目的：根据高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱和网络药理学探讨连翘保肝作用的药效关联物质及作用机制。方法：采用HPLC建立28批连翘指纹图谱，结合对照品指认特征峰，进一步结合相似度评价、聚类分析和偏最小二乘法-判别分析进行评价，... 详细信息

目的：根据高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱和网络药理学探讨连翘保肝作用的药效关联物质及作用机制。方法：采用HPLC建立28批连翘指纹图谱，结合对照品指认特征峰，进一步结合相似度评价、聚类分析和偏最小二乘法-判别分析进行评价，筛选药效关联物质，进行网络药理学分析。利用SwissTargetPrediction数据库检索成分靶点；利用OMIM、GeneCards和Drugbank数据库检索肝损伤疾病靶点，取成分与疾病的交集靶点，采用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络图，并进行拓扑学参数分析；采用Cytoscape3.8.2软件构建成分-疾病-靶点网络图；采用Metascape网站对交集靶点进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。结果：连翘HPLC指纹图谱的相似度均大于0.90，通过聚类分析将28批样品聚为3类，偏最小二乘法-判别分析结果与聚类分析结果一致。经对照品比对及综合分析，确定连翘酯苷E、松脂醇二葡萄糖苷、连翘酯苷A、异槲皮苷、连翘苷为连翘的药效关联物质，其可能通过调控哈维大鼠肉瘤病毒致癌基因（HRAS）、前列腺素内过氧化物合酶2基因（PTGS2）、髓样细胞白血病-1基因（MCL1）、白细胞介素2基因（IL2）、热休克蛋白90α家族A 类成员 1基因（HSP90AA1）等核心靶点及白细胞介素17 信号通路、花生四烯酸代谢信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B 信号通路等关键信号通路来发挥作用。结论：结合HPLC指纹图谱及网络药理学，对连翘保肝作用药效关联物质及作用机制进行了探讨，为连翘的质量控制、品种选育及临床研究提供参考。

关键词：连翘高效液相色谱法指纹图谱网络药理学肝损伤保护

紫苏杂种F_(1)的SSR标记鉴定及性状分析

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分子植物育种 2024年第17期22卷 5701-5706页

作者：贾凯旋张笑玲孟义江温赛群李锦超刘灵娣温春秀葛淑俊河北农业大学农学院保定071000 河北农业大学教育部华北作物种质资源研究与利用重点实验室保定071000 河北农业大学生命科学学院保定071000 河北省农林科学院经济作物研究所石家庄050000

鉴定真实的F1杂种是开展紫苏杂交育种和构建遗传学研究群体的基础。本研究以‘冀紫1号’为母本,‘冀紫2号’为父本配制杂交组合,利用简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)标记进行F_(1)杂种真伪性鉴定,分析了亲本和真杂种的农艺性... 详细信息

鉴定真实的F1杂种是开展紫苏杂交育种和构建遗传学研究群体的基础。本研究以‘冀紫1号’为母本,‘冀紫2号’为父本配制杂交组合,利用简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)标记进行F_(1)杂种真伪性鉴定,分析了亲本和真杂种的农艺性状和生理生化指标。结果表明从29对SSR引物中筛选出1对扩增稳定、条带清晰、能够区分双亲及杂交种的引物ZS-14,利用该引物共鉴定出46株真实杂种。杂种植株在株高、叶长、叶宽、叶片重量和可溶性糖等性状上综合了双亲的优势。本研究结果为紫苏杂种真伪性鉴定及杂交育种提供了指导。

关键词：紫苏(Perilla frutescens) SSR F_(1)杂种真伪性鉴定

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滨海盐碱地不同深度土壤细菌菌群的研究

特产研究 2024年

作者：郝静秦会海赵宏慧刘灵娣冯国艺张世超姜涛河北省农林科学院经济作物研究所河北省农林科学院棉花所自然资源要素耦合过程与效应重点实验室中国地质调查局自然资源综合调查指挥中心

为研究滨海盐碱地不同深度土壤细菌菌群的结构。本研究以海兴县盐碱地土壤为研究对象，测定不同深度（15cm、30cm、45cm）土壤的理化性质，并运用高通量测序方法测定土壤细菌菌群结构。结果表明，本研究区域土壤pH等于8，含盐量为2‰左... 详细信息

为研究滨海盐碱地不同深度土壤细菌菌群的结构。本研究以海兴县盐碱地土壤为研究对象，测定不同深度（15cm、30cm、45cm）土壤的理化性质，并运用高通量测序方法测定土壤细菌菌群结构。结果表明，本研究区域土壤pH等于8，含盐量为2‰左右的盐碱土，土壤营养成分含量随着土壤深度的增加而降低；高通量测序结果显示，盐碱地15 cm土层中含有3 182个扩增子序列变异（ASVs）,30 cm土层中含有3 012个ASVs,45 cm土层中含有2 693个ASVs，三者共有214个ASVs，以ASVs为基础划分分类菌群，共获得土壤菌群2个界、35个门、83个纲、227个目、407个科、648个属和719个种。对35个门菌群进行分析，其中优势菌群为变形菌门、酸杆菌门、芽单胞菌门和绿弯菌门，随着土壤深度的增加细菌菌群的丰富度和多样性呈现出下降趋势。土壤深度对土壤的理化性质和土壤细菌菌群结构有较强的影响，细菌菌群通过氨基酸代谢、碳水化合物代谢和能量代谢等参与了土壤中碳、磷、氮等元素的循环和转化，促进植物的生长和发育，本研究可为河北省滨海盐碱地的土壤开发利用和土壤改良提供重要参考。

关键词：滨海盐碱地土壤细菌菌群相关性

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丹参花药组织培养研究

河北农业科学 2024年第3期28卷 78-82页

作者：吴姣姣王倩齐琳琳刘灵娣姜涛钱荣温春秀万修福河北工程大学园林与生态工程学院河北邯郸056001 河北省农林科学院经济作物研究所/河北省药用植物工程技术研究中心河北石家庄050051 道地药材国家重点实验室北京100700

为了建立丹参花药培养再生体系,进行了丹参花药组织培养技术研究。以丹参花蕾为试验材料,研究了小孢子发育时期的确定方法,明确了小孢子处于单核靠边期的花蕾长度,结果显示,丹参花蕾长度为5.0~7.9 mm时小孢子处于单核靠边期。并利用小... 详细信息

为了建立丹参花药培养再生体系,进行了丹参花药组织培养技术研究。以丹参花蕾为试验材料,研究了小孢子发育时期的确定方法,明确了小孢子处于单核靠边期的花蕾长度,结果显示,丹参花蕾长度为5.0~7.9 mm时小孢子处于单核靠边期。并利用小孢子处于单核靠边期的花药做外植体,采用正交试验设计,分别比较了不同激素种类及配比对愈伤组织诱导和不定芽诱导的影响。结果显示,6-BA浓度为1.50 mg/L、2,4-D浓度为0.25 mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达到83.33%,且愈伤组织长势较快,体积均匀,呈明显的颗粒状;6-BA浓度为1.25 mg/L、NAA浓度为0.05 mg/L、IBA浓度为0.25 mg/L时,不定芽诱导率最高且明显>其他处理,达到70.00%,且愈伤组织大部分呈鲜绿色,颗粒状明显,丛生苗较多,芽生长速度较快。丹参花蕾长度为5.0~7.9 mm时,小孢子处于单核靠边期,适合进行花药培养;适宜愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.50 mg/L+2,4-D 0.25 mg/L+糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;适宜不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.25 mg/L+NAA 0.05 mg/L+IBA 0.25 mg/L+糖30 g/L+琼脂6.5 g/L。

关键词：丹参花药小孢子组织培养

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丹参SmWRKY33基因的克隆与表达分析

江苏农业科学 2024年第3期52卷 53-60页

作者：龚婷刘灵娣温春秀武玉翠王升万修福孙亚倩姜涛河北省农林科学院经济作物研究所河北石家庄050051 河北工程大学园林与生态工程学院河北邯郸056038 道地药材国家重点实验室北京100700

为了研究WRKY33基因在丹参非生物胁迫中的作用机制,以白花丹参为试验材料,对丹参转录组数据进行分析,挖掘出丹参WRKY33基因参考序列并设计特异性引物,利用基因克隆技术从丹参中克隆出WRKY33基因的全长cDNA,命名为SmWRKY33。对SmWRKY33... 详细信息

为了研究WRKY33基因在丹参非生物胁迫中的作用机制,以白花丹参为试验材料,对丹参转录组数据进行分析,挖掘出丹参WRKY33基因参考序列并设计特异性引物,利用基因克隆技术从丹参中克隆出WRKY33基因的全长cDNA,命名为SmWRKY33。对SmWRKY33基因进行生物信息学分析,同时利用荧光定量方法探究SmWRKY33基因在逆境胁迫下的表达模式。结果表明,SmWRKY33基因核苷酸长度为1 635 bp,编码544个氨基酸。生物信息学分析显示,SmWRKY33基因的理论相对分子量为60 835.66,等电点为7.00,定位于细胞核,不存在跨膜区及信号肽,SmWRKY33蛋白为不稳定亲水蛋白。亲缘关系显示,SmWRKY33与紫苏、芝麻、白花泡桐的WRKY33亲缘关系较近。密码子偏好性分析得出拟南芥真核表达最适应丹参SmWRKY33基因的外源表达。qRT-PCR结果表明,SmWRKY33基因在低温、高温、PEG、NaCl等逆境胁迫诱导下具有不同的表达模式,其中低温、NaCl能显著诱导SmWRKY33基因的高表达,说明该基因对温度调节、盐胁迫较为敏感,猜测其参与温度、盐胁迫调控反应机制。本试验首次从丹参中克隆出SmWRKY33基因,探讨了该基因在丹参逆境胁迫下的作用机制,旨在为培育丹参的抗逆新品种提供参考基因。

关键词：丹参 SmWRKY33基因生物信息学 qRT-PCR 基因克隆

基于12个农艺性状的连翘种质资源多样性分析

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河北农业科学 2024年第3期28卷 83-88页

作者：王潇刘铭姜涛田伟贾东升温春秀齐琳琳杨卫宵王玉洁刘灵娣河北省农林科学院经济作物研究所/河北省药用植物技术创新中心河北石家庄050051

为了研究连翘种质资源多样性,提高连翘优良品种选育的效率,通过资源调查和收集,对来自河北省元氏县和涉县的72份连翘种质资源的12个性状进行描述和测定,并进行了数量性状的统计分析,以及表型性状的相关性分析、主成分分析和层次聚类分... 详细信息

为了研究连翘种质资源多样性,提高连翘优良品种选育的效率,通过资源调查和收集,对来自河北省元氏县和涉县的72份连翘种质资源的12个性状进行描述和测定,并进行了数量性状的统计分析,以及表型性状的相关性分析、主成分分析和层次聚类分析。统计结果表明,连翘种质的8个数量性状表现出不同程度的差异,8个性状的变异系数为9.965%~55.934%,变异幅度较大,其中连翘苷含量、果喙长和连翘酯苷A含量遗传变异丰富,这3个性状可以作为种质资源选育和品质评价的重要参考指标。相关性分析结果表明,多种连翘种质资源农艺表型性状之间是相互影响的,其中果长、果横径长和果喙长与多项性状具有显著正相关性,这3个性状可以作为品种选育的重要依据。主成分分析结果表明,前5个主成分的累计贡献率达71.792%,可以反映72份种质12个性状的大部分遗传信息;利用5个主成分求得综合得分发现,66号样品得分最高,其次是9号和20号,综合得分可以作为连翘种质资源农艺性状的评价指标,为连翘育种和遗传研究提供参考。层次聚类分析结果表明,在遗传距离为6.077时可以将72份连翘种质分为5大类群,即使来源于同一产地的连翘种质,其表型性状仍存在着明显差异。本研究收集了来自河北省元氏县和涉县的72份连翘资源,在同一采收期对不同连翘种质资源的农艺性状及表型性状进行综合鉴定,研究结果可为连翘种质资源评价、优异种质资源发掘和优良品种选育提供科学依据。

关键词：连翘农艺性状种质资源多样性分析

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山地丘陵连翘高效栽培技术

河北林业 2024年第06期 34-34页

作者：刘灵娣朱昀刘颖李朝炜李冬杰河北省农林科学院河北科技大学

连翘为木犀科落叶灌木，以果实入药，具有清热解毒、消肿散结、疏散风热功效，还有抗氧化、降血脂、抗炎、抗癌、保肝、抗菌、抗病毒的作用。其果实收购价持续走高，产业发展态势良好，农民收入稳步提高。连翘具有抗寒抗旱、耐贫瘠特性...

连翘为木犀科落叶灌木，以果实入药，具有清热解毒、消肿散结、疏散风热功效，还有抗氧化、降血脂、抗炎、抗癌、保肝、抗菌、抗病毒的作用。其果实收购价持续走高，产业发展态势良好，农民收入稳步提高。连翘具有抗寒抗旱、耐贫瘠特性，是山地丘陵营建防风固沙林、水源涵养林的优良树种。本文结合我省山地丘陵地形特征、土壤特点、气候类型，提出连翘高效栽培技术，为改善生态环境、助力乡村振兴提供有力支撑。

关键词：

水分胁迫对不同铃重基因型棉花源库协调性的影响

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水分胁迫对不同铃重基因型棉花源库协调性的影响

作者：刘灵娣河北农业大学

学位级别：硕士

以小铃品种(册亨大棉花)、中铃品种(新棉33B)和大铃品种(宿棉9108)3个不同铃重类型的棉花品种为试验材料,在田间进行水分胁迫处理,对各棉花品种在水分胁迫下植株形态指标、生理生化指标及产量和品质进行了研究,主要研究结果如下: 1、在... 详细信息

以小铃品种(册亨大棉花)、中铃品种(新棉33B)和大铃品种(宿棉9108)3个不同铃重类型的棉花品种为试验材料,在田间进行水分胁迫处理,对各棉花品种在水分胁迫下植株形态指标、生理生化指标及产量和品质进行了研究,主要研究结果如下: 1、在水分胁迫下,棉花的生长受到抑制,干物重减少;干旱下棉花生育时期提前,其中以小铃品种提前天数较多。 2、干旱条件下,各铃重基因型品种的株高均降低,叶面积减小。盛花期(7月17日)后各铃重基因型的LAI都远远低于同期的正常供水下的棉田,LAI达最高值时仅相当于正常供水棉田LAI最高值的46.7%～70.2%。 3、干旱胁迫使主茎叶片与不同部位内围果枝叶片可溶性糖含量均有不同程度的增加,而淀粉的积累受到明显抑制,并且各类基因型处理间可溶性糖与淀粉含量的变化趋势一致;小铃基因型棉花品种开花期(7月5日)之后主茎叶可溶性糖含量较中、大铃基因型稳定,淀粉含量低于大铃基因型棉花品种。上部内围果枝叶淀粉含量在棉铃发育过程中波动明显大于中、下部果枝,然而小铃品种相对稳定。 4、水分胁迫下,不同部位果枝叶Pro含量增加,其中以下部果枝叶Pro含量增加幅度最大;水分胁迫下,可溶性蛋白含量减少。主茎叶中铃品种可溶性蛋白含量变化幅度比较小;中、下部果枝叶可溶性蛋白含量变化趋势一致;上部果枝叶品种间相差不大;下部棉铃籽棉可溶性蛋白含量变化幅度大于中、上部棉铃,水分胁迫下中铃品种和小铃品种中、下部果枝叶可溶性蛋白含量变化幅度大于大铃品种。 5、研究水分胁迫对不同棉花品种膜伤害影响,结果表明,在水分胁迫下,细胞膜受到伤害,细胞膜透性增加,作为膜脂过氧化产物的MDA含量增加,各品种果枝叶细胞膜受到的伤害度有差异。两处理下各部位MDA含量变化趋势一致。 6、研究水分胁迫对不同棉花品种保护酶活性的影响,结果表明,水分胁迫下不同部位果枝叶SOD、POD活性上升,因部位、品种的不同呈现出不同的变化规律。 7、研究土壤水分胁迫对不同品种棉花叶绿素含量及光合作用特性的影响,结果表明,在水分胁迫下,棉花品种叶片的叶绿素含量和叶绿素a/b值、净光合速率均下降。不同部位果枝叶叶绿素含量的变化规律因品种不同呈现出不同的特点。 8、本试验中水分胁迫条件下大铃品种减产19.6%,中铃品种减产16.7%,小铃品种减产24.9%;各品种的品质均下降。 9、水分胁迫与棉花源库协调性关系是个复杂的问题,本研究结果表明,中铃品种新棉33B源库协调性最好,大铃品种宿棉9108次之,小铃品种最差。

关键词：棉花品种水分胁迫生理生化指标产量纤维品质

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荆芥多倍体的诱导及农艺性状评价

安徽农业科学 2024年第3期52卷 175-178页

作者：齐琳琳温春秀刘灵娣姜涛河北省农林科学院经济作物研究所/河北省药用植物工程技术研究中心河北石家庄050051

以荆芥种子萌发的幼苗为材料,开展秋水仙素诱导染色体倍性变异的最佳浓度和最适处理时间研究,调查比较多倍体植株的农艺性状。结果表明:用0.10%秋水仙素溶液处理荆芥幼苗生长点3 d最有利于四倍体的产生,诱导率达到1.15%。显微镜观察变... 详细信息

以荆芥种子萌发的幼苗为材料,开展秋水仙素诱导染色体倍性变异的最佳浓度和最适处理时间研究,调查比较多倍体植株的农艺性状。结果表明:用0.10%秋水仙素溶液处理荆芥幼苗生长点3 d最有利于四倍体的产生,诱导率达到1.15%。显微镜观察变异植株根尖染色体数目为2n=4x=24。田间表现四倍体植株较二倍体植株叶片厚大、叶色浓绿、穗多且密、种子大,且四倍体植株较二倍体植株有效成分含量提高。

关键词：荆芥秋水仙素多倍体农艺性状