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一株高产胞外多糖巨大芽孢杆菌的筛选鉴定、发酵条件优化及其对土壤团聚体的影响

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微生物学报 2024年第10期64卷 3968-3979页

作者：刘丙花丁延芹刘方春刘幸红马胜国彭琳孙铭婕于连家马海林山东省林业科学研究院山东济南250014 山东农业大学生命科学学院山东泰安271018 山东省林业保护和发展服务中心山东济南250014

【目的】筛选具有高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)特性的微生物菌株,为功能性土壤改良菌剂的研制提供菌种资源。【方法】采用LB-苯胺蓝平板结合菌丝拉丝法定性筛选获得具有产EPS特性的植物根际促生细菌(plant growth promoting rh... 详细信息

【目的】筛选具有高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)特性的微生物菌株,为功能性土壤改良菌剂的研制提供菌种资源。【方法】采用LB-苯胺蓝平板结合菌丝拉丝法定性筛选获得具有产EPS特性的植物根际促生细菌(plant growth promoting rhizobacteria,PGPR)功能菌株;采用低温醇沉分离、硫酸-蒽酮比色法测定PGPR功能菌株经4种培养基发酵后发酵液中EPS含量,获得具有高产EPS特性的PGPR功能菌株;以发酵液中EPS含量为衡量指标,采用正交试验对高产EPS菌株发酵条件进行优化;采用培养皿土壤培养试验,分析F1发酵液对砂壤土土壤大团聚体含量的影响。【结果】初选获得8株具有产EPS特性的PGPR功能菌株;经复选确定菌株F1具有高产EPS特性,PDA是F1产EPS的最优培养基,EPS含量为867.54μg/mL。基于形态学、生理生化特性测定,以及16SrRNA基因序列系统发育分析、全基因组平均核苷酸相似度分析,确定F1为一株巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。F1产EPS的最优培养条件:28℃、180 r/min培养24 h,在该条件下EPS产量为1 123.39μg/mL。F1应用于砂壤土进行土壤培养40 d后,粒径>0.25 mm土壤水稳性大团聚体含量比对照提高了4.44倍。【结论】F1菌株具有较强的产EPS能力,能够促进砂壤土水稳性大团聚体的形成;F1产EPS最优培养基为PDA,最优发酵条件为28℃、180 r/min培养24 h。

关键词：胞外多糖巨大芽孢杆菌产胞外多糖发酵条件土壤团聚体

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盆栽牡丹生长和生理特性对现蕾期氮肥的响应

山东农业科学 2024年第3期56卷 99-105页

作者：何晗颖赵俊福刘淑杰朱晓琳马海林刘方春司东霞聊城大学农学与农业工程学院山东聊城252059 山东省林业科学研究院资源与环境研究所山东济南250014

为明确牡丹现蕾期氮肥的施肥效应,确定适宜的氮肥用量,通过盆栽培养试验,设置5个氮素水平(0、0.75、1.50、2.25、3.00 g/株),研究现蕾期氮肥不同用量对牡丹生长和生理特性的影响。结果表明,牡丹现蕾期施用氮肥显著影响植株生长、氮素吸... 详细信息

为明确牡丹现蕾期氮肥的施肥效应,确定适宜的氮肥用量,通过盆栽培养试验,设置5个氮素水平(0、0.75、1.50、2.25、3.00 g/株),研究现蕾期氮肥不同用量对牡丹生长和生理特性的影响。结果表明,牡丹现蕾期施用氮肥显著影响植株生长、氮素吸收和光合特性,对功能叶片叶绿素及其组分含量和比例的影响未达显著水平。随氮肥用量的增加,牡丹株高、茎粗、地上部干物质累积量呈先上升后下降的变化趋势;与不施氮相比,低氮(0.75 g/株)处理植株地下部干物质累积量和根长增加,根冠比提高;0.75~1.50 g/株的氮素用量可明显增大花径,延长花期2~3 d,并提前始花期1~2 d;氮素用量2.25 g/株植株净光合速率最大,同时可显著增加地上部氮浓度和氮吸收量,显著提高氮素在地上部的分配比例。采用隶属函数法对牡丹生长状况进行综合评价,得出协同地上部营养生长和生殖生长的最佳氮素用量为1.56 g/株。综上,牡丹现蕾期适量施用氮肥可提高叶片光合效率,促进并协调地上部生长,可作为牡丹管理策略应用于生产实践。

关键词：氮素牡丹现蕾期生长养分吸收光合特性

不同有机废弃物载体对Bacillus megaterium有效性的影响

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中国农学通报 2024年第30期 55-60页

作者：刘丙花吴瑜健刘方春丁延芹刘幸红马胜国彭琳于连家马海林山东省林业科学研究院资源与环境研究所山东农业大学生命科学学院山东省林业保护和发展服务中心

为了给Bacillus megaterium选择理想的吸附载体。测定了草炭、金针菇渣、腐熟鸡粪、牛粪、羊粪的吸菌量及其载体菌剂的有效活菌数、胞外多糖（EPS）含量和发芽指数。草炭的吸菌量最高为1.64 mL/g，但随存放时间延长，草炭载体菌剂的有... 详细信息

为了给Bacillus megaterium选择理想的吸附载体。测定了草炭、金针菇渣、腐熟鸡粪、牛粪、羊粪的吸菌量及其载体菌剂的有效活菌数、胞外多糖（EPS）含量和发芽指数。草炭的吸菌量最高为1.64 mL/g，但随存放时间延长，草炭载体菌剂的有效活菌数和EPS含量急剧降低，且38 d内的发芽指数均小于80%，表现植物毒性。鸡粪和金针菇渣的吸菌量虽小于草炭，但随存放时间延长，鸡粪载体菌剂的有效活菌数和EPS含量逐渐增大，金针菇渣载体菌剂的EPS含量逐渐增加、有效活菌数降低幅度缓慢，且存放7 d后发芽指数均大于80%，表现植物无毒性。第38天时鸡粪和金针菇渣载体菌剂的有效活菌数分别为1.29×10～9CFU/g和6.20×10～8CFU/g,EPS含量分别为535.29 mg/kg和559.34 mg/kg，均显著高于其他载体菌剂。鸡粪和金针菇渣是B. megaterium较为理想的吸附载体。

关键词：吸附载体吸附能力有机废弃物巨大芽孢杆菌有效活菌数发芽指数胞外多糖

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丹参根腐病病原菌及其生防菌的筛选

中国农学通报 2024年第30期 119-127页

作者：袁梦蕾崔明悦张子通刘亚钰刘方春马海林刘幸红燕丽萍山东沃恩生物科技有限公司山东省林业科学研究院

本研究旨在筛选用于丹参根腐病防治的生物防治菌株。实验以山东省日照市、临沂市、泰安市发病的丹参及健康丹参的根际土为试材。采用组织分离法从发病丹参中分离病原菌，采用稀释涂布法和平板对峙法从根际土中筛选生防菌，利用形态学和1... 详细信息

本研究旨在筛选用于丹参根腐病防治的生物防治菌株。实验以山东省日照市、临沂市、泰安市发病的丹参及健康丹参的根际土为试材。采用组织分离法从发病丹参中分离病原菌，采用稀释涂布法和平板对峙法从根际土中筛选生防菌，利用形态学和16S rRNA进行鉴定，并在离体丹参上进行防效验证。结果表明，从发病丹参上分离出的病原菌RBT-2-1为木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)，从根际土中筛选出的生防菌i为绿针假单胞菌橙色亚种(Pseudomonas chlororaphis subsp. aurantiaca)。i对TBG-2-1的抑菌率为66.67%,i在离体丹参上对TBG-2-1的防治效果预防组均高于治疗组，且预防组中追加i菌液的防效最好，为44.45%，比预防组中未追加i菌液的处理提高了1.6倍，比治疗组提高了7.0倍。由此可知，i的接种顺序及使用次数会影响对TBG-2-1的防效。本研究为后期大田试验提供参考依据。

关键词：丹参根腐病木贼镰刀菌绿针假单胞菌橙色亚种生防菌平板对峙法防治效果接种顺序使用次数

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搞好承包经营的组织管理工作

中国农垦 1990年第11期 11-13页

作者：刘方春

今年底,农垦工业企业第一轮承包合同大部分都将陆续到期。笔者结合农垦工业企业实际,拟就如何搞好第二轮承包经营,略谈浅见。1.第二轮承包经营的组织管理工作原则。笔者认为:要以《中共中央关于进一步治理整顿和深化改革的决定》以及《... 详细信息

今年底,农垦工业企业第一轮承包合同大部分都将陆续到期。笔者结合农垦工业企业实际,拟就如何搞好第二轮承包经营,略谈浅见。1.第二轮承包经营的组织管理工作原则。笔者认为:要以《中共中央关于进一步治理整顿和深化改革的决定》以及《国家体改委关于在治理整顿中深化企业改革强化企业管理意见》为指导,依照《企业法》和《承包条例》规定,贯彻“稳定,充实、调整、改善”的方针,大稳定、小调整,在稳定中完善,在完善中

关键词：承包经营经营者《企业法》

干旱胁迫对杨树幼苗生长、光合特性及活性氧代谢的影响

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应用生态学报 2013年第7期24卷 1809-1816页

作者：井大炜邢尚军杜振宇刘方春德州学院山东德州253023 山东省林业科学研究院济南250014

2011年4—10月在山东省林业科学研究院试验苗圃,选取欧美I-107杨扦插苗为试材,采用盆栽控水试验,研究了不同水分处理(正常水分、轻度干旱、中度干旱和重度干旱)对杨树幼苗生长和气体交换、叶绿素荧光特性、活性氧代谢的影响.结果表明:... 详细信息

2011年4—10月在山东省林业科学研究院试验苗圃,选取欧美I-107杨扦插苗为试材,采用盆栽控水试验,研究了不同水分处理(正常水分、轻度干旱、中度干旱和重度干旱)对杨树幼苗生长和气体交换、叶绿素荧光特性、活性氧代谢的影响.结果表明:与正常水分处理相比,轻度、中度和重度干旱胁迫下的地径生长量分别下降12.8%、44.5%和65.6%,苗高生长量分别下降12.2%、43.1%和57.2%;随着胁迫强度的增加和胁迫时间的延长,杨树幼苗叶片的PSⅡ光能转化效率、实际量子产量、光化学猝灭系数、净光合速率和气孔导度在轻度胁迫下缓慢下降,而在中度和重度胁迫下迅速下降;非光化学猝灭系数在轻度胁迫下显著升高,而在中度和重度胁迫下先升高后降低;叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均先升高后降低,但对干旱胁迫和活性氧的响应存在一定差异;叶片相对电导率、丙二醛含量显著增加,质膜受损,大量离子外渗,且重度胁迫下质膜的损害最严重.轻度干旱胁迫下,I-107杨树幼苗具有较高的光合效率和较强的抗氧化保护酶系统;而中度和重度干旱下,其光合效率显著下降,抗氧化保护酶系统明显遭到破坏.

关键词： I-107欧美杨干旱胁迫地径苗高叶绿素荧光活性氧代谢

褐煤草碳的吸附解吸特性及生产腐殖酸缓效肥的效应研究

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褐煤草碳的吸附解吸特性及生产腐殖酸缓效肥的效应研究

作者：刘方春山东农业大学

学位级别：硕士

化肥在农业生产中占有重要地位,但其较低的利用效率及其给环境、农产品等带来的系列危害越来越受到人们的重视,因此,各种缓效肥料的研究正成为植物营养与肥料学科研究的热点问题之一。褐煤作为一种重要的肥料基质,在我国已探明的保有储... 详细信息

化肥在农业生产中占有重要地位,但其较低的利用效率及其给环境、农产品等带来的系列危害越来越受到人们的重视,因此,各种缓效肥料的研究正成为植物营养与肥料学科研究的热点问题之一。褐煤作为一种重要的肥料基质,在我国已探明的保有储量就达1300 多亿t。本试验采用室内试验同盆栽试验相结合的方法,研究了不同处理方法对褐煤中腐殖酸含量及其特性的影响,并以处理后的腐植酸样品为吸附基质,探讨了其对N、P、K 吸附的特性,分析了褐煤、草炭混合样品对各养分离子吸附条件及影响因素。利用其吸附特性制成腐殖酸缓效肥,以土肥混合法研究了该肥料中各养分离子的释放规律,并通过盆栽试验探讨了该腐殖酸缓效肥对菠菜产量及其各品质指标的影响,主要研究结果如下: 1. 在褐煤腐殖酸提纯处理试验中,HPO 和HCl 处理能在一定程度上提高阳离子交换能力,但对腐殖酸含量及光学性质基本无影响。一定强度的HNO3 能使腐殖酸含量增加25%以上,阳离子交换能力有了很大程度的提高,且其随硝酸强度的变化过程要明显滞后于腐殖酸含量的变化过程,光学性质发生了很大的变化。不同褐煤达到最佳处理效果的条件也不尽相同。 2. 适宜的固液比例可提高铵单位吸附量;在试验pH(1.514.03)时,化学交换占主导地位,经硝酸处理后褐煤样品的分配系数Kd 和吸附量Q 明显大于未处理样品的Kd 和Q。腐殖酸对铵氮的吸附等温式可用Freundlich 等温曲线描述,其动力学吸附方程用Elovich 方程拟合最佳。 3. 在试验范围内,腐殖酸样品对磷的吸附存在一最大值,对于样品1,在pH 为4.7 时,吸附量和分配系数有一最大值,而样品2 随着pH 的升高,吸附量和分配系数一直减小。且经硝酸处理后,样品对磷的单位吸附量和分配系数有了较大程度的降低。随平衡溶液浓度的升高,两样品对磷的单位吸附量也不断升高,其吸附规律可用Langmuir 方程来加以描述,在第60min 和90min 时,两样品对磷的吸附基本达到吸附平衡,其吸附动力学

关键词：褐煤草炭腐殖酸吸附菠菜

创面处理对结直肠病变内镜黏膜下剥离术后出血的影响

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创面处理对结直肠病变内镜黏膜下剥离术后出血的影响

作者：刘方春中南大学

学位级别：硕士

目的:迟发性出血(delayed bleeding,DB)是结直肠病变内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)常见的并发症之一,本研究通过对比分析结直肠病变ESD术后不同的创面处理方式(完全闭合、部分闭合和创面旷置),探讨创面处理对... 详细信息

目的:迟发性出血(delayed bleeding,DB)是结直肠病变内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)常见的并发症之一,本研究通过对比分析结直肠病变ESD术后不同的创面处理方式(完全闭合、部分闭合和创面旷置),探讨创面处理对ESD术后DB等并发症的影响,分析DB的危险因素,以期为DB的防治提供参考。方法:回顾性分析2018年1月至2023年1月于中南大学湘雅三医院消化内镜中心行结直肠病变(直径≤4 cm)ESD治疗患者的临床资料。根据结直肠病变ESD术后创面是否使用钛夹闭合分为闭合组和旷置组,根据创面闭合的程度将闭合组分为完全闭合和部分闭合两个亚组。本研究主要的观察指标是DB,次要观察指标包括术后穿孔、电凝综合征等并发症和手术疗效。DB的危险因素采用多因素logistic回归分析,多因素分析有意义的指标绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC),评估对DB的预测价值。结果:1.本研究共纳入415例患者,创面闭合组(307例)和旷置组(108例)术后DB的发生率分别为2.3%和7.4%,两者具有统计学差异(P=0.031);创面闭合组的电凝综合征发生率、腹痛发生率和住院天数明显低于创面旷置组(P﹤0.05)。闭合组和旷置组在完整切除率、整块切除率和住院费用方面无统计学差异(P﹥0.05)。2.亚组分析中,部分闭合组(107例)和完全闭合组(200例)术后DB的发生率分别为3.7%和1.5%,两者无显著性差异(P=0.395);创面部分闭合组与完全闭合组在电凝综合征、发热和腹痛的发生率方面无统计学差异(P﹥0.05)。在手术疗效方面,创面部分闭合与创面完全闭合的完整切除率、整块切除率、住院天数、住院费用均无统计学差异(P﹥0.05);创面部分闭合的手术时间和钛夹使用数量明显低于创面完全闭合(P﹤0.05)。3.多因素logistic回归分析结果表明:术后DB和无DB的患者在合并高血压病、使用抗栓药物史、病变直径和创面处理方式的差异有统计学意义(P﹤0.05)。***曲线结果显示:病变直径在ROC曲线下的面积(area under the curve,AUC)为0.834(P﹤0.001),创面处理方式的AUC为0.682(P=0.017)。结论:1.与术后创面旷置相比,结直肠病变ESD术后创面闭合能降低DB等并发症的风险,建议直径≤4 cm的结直肠病变ESD术后创面实施闭合处理。2.与创面完全闭合相比,创面部分闭合并未增加术后DB的发生风险,创面部分闭合也是预防DB的有效方式。3.创面旷置、合并高血压病、使用抗栓药物史和病变直径是结直肠病变ESD术后发生DB的独立危险因素。4.病变直径和创面处理方式能对DB进行预测,且病变直径对DB预测的准确性更高。图2幅,表6个,参考文献55篇

关键词：结直肠病变内镜黏膜下剥离术创面闭合术后迟发性出血危险因素

生物有机肥对樱桃生长及根际土壤生物学特征的影响

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水土保持学报 2013年第2期27卷 267-271页

作者：陈波马海林刘方春杜秉海山东农业大学生命科学学院山东省农业微生物重点实验室山东泰安271018 山东省林业科学研究院山东济南250014

以一年生‘吉塞拉’樱桃苗为试材,通过盆栽试验,利用传统的平板计数法和现代的T-RFLP技术,研究有机肥(OF)和生物有机肥(BF)对樱桃根际土壤微生物数量、微生物量碳和氮、细菌群落结构多样性、土壤酶活性、樱桃生长及养分吸收的影响。结... 详细信息

以一年生‘吉塞拉’樱桃苗为试材,通过盆栽试验,利用传统的平板计数法和现代的T-RFLP技术,研究有机肥(OF)和生物有机肥(BF)对樱桃根际土壤微生物数量、微生物量碳和氮、细菌群落结构多样性、土壤酶活性、樱桃生长及养分吸收的影响。结果表明:施用OF和BF后可不同程度地提高根际土壤中的微生物数量及微生物量碳、氮;同OF处理比,BF处理中的放线菌、真菌、微生物总量、微生物量碳和微生物量氮分别提高了115.65%,115.96%,48.3%,58.68%和23.72%,细菌数量差异未达显著水平。同对照相比,OF和BF的施用可提高根际土壤细菌群落结构的多样性及丰富度。同对照相比,OF提高了土壤脲酶、蔗糖酶活性。同OF相比,BF处理的脲酶、磷酸酶、蔗糖酶和多酚氧化酶活性显著提高。OF的施用可促进樱桃根系的生长,提高N和P的养分吸收量。同OF处理相比,BF处理根、茎和叶的生物量分别增加9.55%,9.98%和11.16%,N、P和K养分吸收量分别提高15.35%,21.06%和32.09%。由此可见,盆栽条件下,施用有机肥和生物有机肥均可有效改善樱桃根际土壤生态环境,促进樱桃生长和养分的吸收,但生物有机肥的施用效果明显优于有机肥。

关键词：生物有机肥樱桃土壤微生物土壤酶养分积累干物质积累