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miR-129-5p通过靶向SALL4抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究

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天津医科大学学报 2024年第1期30卷 11-14,34页

作者：张华范松刘冀琴张学军天津医科大学基础医学院免疫学系天津300070 武警特色医学中心检验科天津300162 武警河北省总队医院检验科石家庄050000

目的:探讨miR-129-5p在肝细胞癌(HCC)发展中的作用及其机制。方法:通过实时荧光定量-PCR(qRT-PCR)检测miR-129-5p在正常血清及肝癌患者血清、人正常肝细胞LO2和人肝癌细胞系中的表达情况。采用脂质体转染技术将miR-129-5p mimics转染至... 详细信息

目的:探讨miR-129-5p在肝细胞癌(HCC)发展中的作用及其机制。方法:通过实时荧光定量-PCR(qRT-PCR)检测miR-129-5p在正常血清及肝癌患者血清、人正常肝细胞LO2和人肝癌细胞系中的表达情况。采用脂质体转染技术将miR-129-5p mimics转染至人肝癌细胞HCCLM3细胞,应用Western印迹检测人类婆罗双树样基因-4(SALL4)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)蛋白的表达。通过CCK-8实验、克隆形成实验、细胞周期检测、细胞划痕实验和Transwell实验等检测在体外过表达miR-129-5p对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。此外,通过生物信息学工具、数据库分析和荧光素酶报告基因检测实验,探索miR-129-5p在HCC中的靶点,并探讨靶点SALL4是否介导miR-129-5p对HCC细胞的作用。结果:与正常血清相比,肝癌患者血清miRNA-129-5p表达量显著降低(t=13.32,P<0.001),与LO2相比,肝癌细胞系HepG2、Hep3B、HCCLM3、BEL-7402和QGY-7703的miR-129-5p表达量均显著降低(t=30.35、33.08、37.11、32.87、8.2,均P<0.05)。miR-129-5p过表达可以抑制肝癌细胞增殖、侵袭和转移。StarBase预测显示miR-129-5p与SALL4有潜在结合位点,双荧光素酶报告基因检测证明miR-129-5p与SALL4直接结合。与对照组相比,miR-129-5p表达后SALL4和PD-L1的蛋白水平明显降低(t=12.68、t=8.798,均P<0.05)。miR-129-5p可以通过调控SALL4的表达,抑制HCC细胞的活力、增殖、迁移和侵袭(F=26.11、147.2、4.302、321.3,均P<0.05)。结论:过表达miR-129-5p通过抑制SALL4表达,抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：肝细胞癌 miR-129-5p SALL4 增殖侵袭迁移

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两种抗氧化剂对免疫反应影响的实验研究

两种抗氧化剂对免疫反应影响的实验研究

作者：刘冀琴河北医科大学

学位级别：硕士

目的: 探讨两种抗氧化剂（N-acetyl-cysteine;NAC和Tetra-methylthiourea;TMTU）对机体免疫功能的影响，为应用抗氧化剂治疗活性氧自由基（Reactive Oxygen Species;ROS）引起的各种疾病提供实验依据。方法: 1 脾细胞实验部分 (1)采用[3... 详细信息

目的: 探讨两种抗氧化剂（N-acetyl-cysteine;NAC和Tetra-methylthiourea;TMTU）对机体免疫功能的影响，为应用抗氧化剂治疗活性氧自由基（Reactive Oxygen Species;ROS）引起的各种疾病提供实验依据。方法: 1 脾细胞实验部分 (1)采用[3H]-TdR掺入法研究抗氧化剂对小鼠脾细胞体外增殖反应的作用。采用anti-Thy1抗体或anti-Ig抗体与补体共同作用，去除脾细胞中的T细胞或B细胞，分别检测抗氧化剂对B、T细胞增殖反应的影响。在此基础上，进一步使用Sephadex G-10凝胶过滤，去除B细胞成分中的巨噬细胞，观察抗氧化剂对纯化B细胞增殖的作用。(2)采用流式细胞计数，观察抗氧化剂对脾细胞中T、B细胞组成含量的影响。(3)采用ELISA法，检测抗氧化剂对小鼠脾细胞分泌细胞因子IL-2、IL-4的影响。(4)采用ELISA法检测小鼠脾细胞或纯化B细胞在抗氧化剂作用下产生IgG的情况。2 体内实验部分使用卵蛋白Ovalbumine注射入小鼠腹腔，以诱导特异性抗体的产生，同时给予小鼠NAC灌胃，观察NAC在体内对抗体产生的影响。3 巨噬细胞实验部分 (1) ELISA法检测抗氧化剂对巨噬细胞产生细胞因子IL-6、IL-12p40、IL-12p70的影响。(2)生物法检测抗氧化剂对巨噬细胞产生TNF-α的影响。(3) RT-PCR方法检测IL-12p40、p35mRNA的表达。(4)使用巨

关键词：抗氧化剂 N-乙酰半胱氨酸四甲基硫脲 T细胞 B细胞巨噬细胞细胞因子

产KPC酶肺炎克雷伯菌9株的药敏试验结果分析

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中国感染与化疗杂志 2015年第3期15卷 257-259页

作者：靳颖王俊妨刘冀琴周鑫武警后勤学院附属医院检验科天津300162

目的分析产KPC酶肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型及对替加环素的敏感性,为临床治疗该类菌感染提供依据。方法收集2012年2月—2013年5月自临床科室分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌9株,采用VITEK2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴... 详细信息

目的分析产KPC酶肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型及对替加环素的敏感性,为临床治疗该类菌感染提供依据。方法收集2012年2月—2013年5月自临床科室分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌9株,采用VITEK2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及药敏试验,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,聚合酶链反应(PCR)法检测菌株的KPC酶基因型,E试验法检测替加环素对菌株的体外抗菌活性。结果所分离的9株肺炎克雷伯菌对所测试的19种抗菌药物均显耐药,7株改良Hodge试验阳性。9株肺炎克雷伯菌均扩增出KPC目的基因条带,均为KPC-2型基因。9株耐药菌对替加环素均敏感。结论产KPC酶肺炎克雷伯菌耐药形势严峻,替加环素作为新一代抗生素对其有良好的体外抗菌活性。

关键词：肺炎克雷伯菌 K PC酶耐药性替加环素

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中药五加皮抗肿瘤作用体内外实验研究

中国中西医结合杂志 2004年第1期24卷 55-58页

作者：单保恩李巧霞梁文杰许红刘冀琴张华刘刚叁河北医科大学第四医院科研中心石家庄050011 石家庄市第四医院华北制药集团新药研究开发中心

目的 :分离中药五加皮抗肿瘤活性物质 ,研究五加皮提取物在体内外的抗肿瘤细胞作用 ,为五加皮抗肿瘤新药开发、研制提供依据。经皮下注射肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型 ,通过灌胃给药检测五加皮提取物的体内抗肿瘤作用。方法 :用3H TdR... 详细信息

目的 :分离中药五加皮抗肿瘤活性物质 ,研究五加皮提取物在体内外的抗肿瘤细胞作用 ,为五加皮抗肿瘤新药开发、研制提供依据。经皮下注射肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型 ,通过灌胃给药检测五加皮提取物的体内抗肿瘤作用。方法 :用3H TdR掺入法测定了肿瘤细胞增殖反应 ;用凝胶层析法初步分离、纯化了五加皮抗肿瘤成分。结果 :五加皮提取物对多种组织来源的肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用 (P <0 0 1) ,而且有较好的量效关系。五加皮提取物经口投入荷瘤小鼠后 ,实验组小鼠一般情况较对照组小鼠好 ,肿瘤生长较慢 ,生存期明显延长 (P <0 0 1)。经凝胶层析分析 ,分离得到一种对肿瘤细胞增殖反应有抑制作用的蛋白质成分 ,分子量为 6 4kda。结论 :中药五加皮不仅在体外对多种肿瘤细胞增殖有抑制作用 ,在体内也有较好的抗肿瘤效果。其抗肿瘤活性与一种分子量为 6 4kda的蛋白质成分有关 ,该成分的进一步分离、纯化和作用机理研究 ,对五加皮抗肿瘤作用的临床应用和新药开发提供科学依据。

关键词：中药五加皮抗肿瘤作用实验研究药理

抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸对巨噬细胞产生IL-12及IL-23的不同作用

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免疫学杂志 2010年第9期26卷 776-780页

作者：张明华刘冀琴赵娟靳颖庞博吴玉秀刘锦武警医学院附属医院检验科天津300162 武警医学院基础部生理与病理生理学教研室天津300162

目的观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对巨噬细胞产生白介素-12(IL-12)及白介素-23(IL-23)的作用。方法 IL-12p35,p40,IL-23p19及IL-17的mRNA表达采用RT-PCR进行检测。IL-12p40,IL-12p70,IL-23及IFN-γ的产生使用ELISA进行测定。结果小鼠巨噬细胞经过NAC刺激6h后IL-12p35和p40的mRNA表达增强,而NAC刺激24h后p35的mRNA表达和IL-12p70的产生被减弱。另一方面,NAC增进了IL-23p19的mRNA表达和IL-23产生。此外,在小鼠脾细胞中,NAC增强了IL-23p19mRNA表达而抑制了IFN-γ的产生。NAC刺激后的CD11b+细胞能够促进T细胞中IL-17mRNA的表达。结论 NAC抑制巨噬细胞产生IL-12而促进巨噬细胞产生IL-23,从而促进Th17免疫反应。

关键词： N-乙酰半胱氨酸 IL-12 IL-23

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中药五加皮提取成分抗肿瘤活性作用机理研究

中国中西医结合杂志 2005年第9期25卷 825-828页

作者：单保恩付小梅华正祥李巧霞梁文杰刘冀琴张华刘刚叁河北医科大学第四医院科研中心石家庄050011 承德医学院附属医院华北制药集团新药研究开发中心

目的研究五加皮提取成分(Acanthopanaxgracilistylusextract,Age)对肿瘤细胞的作用机理。方法采用〔3H〕TdR掺入法测定肿瘤细胞增殖反应;用流式细胞技术分析Age对肿瘤细胞周期的影响;用蛋白印迹技术检测Age对肿瘤细胞Rb(retinoblastoma)... 详细信息

目的研究五加皮提取成分(Acanthopanaxgracilistylusextract,Age)对肿瘤细胞的作用机理。方法采用〔3H〕TdR掺入法测定肿瘤细胞增殖反应;用流式细胞技术分析Age对肿瘤细胞周期的影响;用蛋白印迹技术检测Age对肿瘤细胞Rb(retinoblastoma)、Cdk(cyclindependentkinases)等酶类的影响。结果体外细胞活力试验证明,Age仅抑制肿瘤细胞增殖,并不导致细胞死亡。在Age的作用下,肿瘤细胞增殖停止在细胞周期的G0/G1期,而未见直接的细胞毒效应。Age可诱导Rb、Cdk2和Cdk4表达降低,使细胞停止增殖。结论Age对肿瘤细胞的作用机制是通过调节控制细胞周期的酶类而发挥作用的。

关键词：五加皮提取成分细胞周期 Rb Cdk 抗肿瘤机制机理研究提取成分抗肿瘤五加皮活性作用

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重症恶性疟疾伴急性心肌炎1例

武警医学 2022年第9期33卷 783-785页

作者：刘新林刘冀琴王娜武警特色医学中心心血管内科天津300162 武警特色医学中心检验科天津300162 武警北京总队医院内三科天津300162

目前,我国疟疾发病率维持在较低水平,普通医疗机构对疟疾,尤其是重症恶性疟疾患者,救治经验不足。重症疟疾会导致贫血、肾衰竭等多脏器靶器官损害表现,临床救治中容易忽视疟疾造成的心肌损伤。本文以救治的1例重症疟疾患者心肌损伤标志... 详细信息

目前,我国疟疾发病率维持在较低水平,普通医疗机构对疟疾,尤其是重症恶性疟疾患者,救治经验不足。重症疟疾会导致贫血、肾衰竭等多脏器靶器官损害表现,临床救治中容易忽视疟疾造成的心肌损伤。本文以救治的1例重症疟疾患者心肌损伤标志物升高为线索,对疟疾导致心肌损伤的可能原因做初步讨论。1病例报告患者,男,26岁,主因间断发热伴寒颤4 d,腹泻呕吐伴肉眼血尿3 d入院。

关键词：疟疾贫血肾衰竭心肌损伤

五加皮抗肿瘤活性物质Age对单核细胞产生TNF-α和IL-12的影响

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中国免疫学杂志 2003年第7期19卷 490-493页

作者：单保恩段建萍张丽华梁文杰李巧霞刘冀琴张华刘刚叁河北医科大学第四医院科研中心石家庄050011 河北省老年病医院石家庄050000 华北制药集团新药研究开发责任有限公司石家庄050012

目的 :研究五加皮抗肿瘤成分Age对单核细胞功能的影响 ,揭示Age抗肿瘤机制。方法 :使用对TNF敏感的L92 9细胞采用生物法测定了TNF含量 ,用ELISA法测定了IL 12的含量。用RT PCR法分析了单核细胞的细胞因子mRNA表达。用同位素法分析了Age... 详细信息

目的 :研究五加皮抗肿瘤成分Age对单核细胞功能的影响 ,揭示Age抗肿瘤机制。方法 :使用对TNF敏感的L92 9细胞采用生物法测定了TNF含量 ,用ELISA法测定了IL 12的含量。用RT PCR法分析了单核细胞的细胞因子mRNA表达。用同位素法分析了Age对单核细胞吞噬功能的作用。结果 :Age与单核细胞共同培养后 ,单核细胞TNF α、IL 12等细胞因子的产生明显增加 (P <0 0 1) ,而且有较好的量效关系。在单核细胞与LPS的培养液中加入不同浓度的Age ,经培养后与单独加入LPS相比TNF α分泌的量显著增加 ,显示了Age对LPS的单核细胞刺激有相加作用。经Age处理后 ,单核细胞的TNF α、IL 12等细胞因子的mRNA表达也明显增强。体内实验结果也显示 ,Age对单核细胞的细胞因子产生有一定的影响。荷瘤小鼠经口连续投入Age后 ,血清中和脾脏分离的单核细胞体外培养上清中TNF α和IL 12含量明显提高 ,单核细胞TNF α、IL 12mR NA表达也明显增强 (P <0 0 1) ,从蛋白水平和分子水平证明了Age对单核细胞的细胞因子产生有促进作用。结论 :中药五加皮抗肿瘤有效成分Age对单核细胞有较强的刺激作用。通过促进其细胞因子的分泌和吞噬功能的增强杀伤肿瘤或抵抗肿瘤发生 ,所分泌的细胞因子还可通过调节免疫功能达到治疗肿瘤作用。该结果对五加皮?

关键词：五加皮抗肿瘤活性物质 Age 单核细胞 TNF-α IL-12

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红细胞体积分布宽度的临床应用价值研究进展

武警医学 2010年第3期21卷 265-266,274页

作者：张明华刘冀琴庞博匡铁吉武警医学院附属医院检验科天津300162 解放军309医院检验科北京100091

红细胞体积分布宽度（red blood cell volume distribution width，RDW）是利用循环中红细胞大小不同而对其体积不均一性，用全自动血细胞分析仪进行定量检测，属于全血成分计数的一个组成部分。通过对RDW的检测，可以了解红细胞体积大... 详细信息

红细胞体积分布宽度（red blood cell volume distribution width，RDW）是利用循环中红细胞大小不同而对其体积不均一性，用全自动血细胞分析仪进行定量检测，属于全血成分计数的一个组成部分。通过对RDW的检测，可以了解红细胞体积大小是否具有均一性，通常可用红细胞体积分布宽度变异系数（RDW—CV）和标准差（RDW—SD）表示。

关键词：红细胞体积分布宽度心力衰竭急性冠脉综合征