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丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K/Akt信号通路的调节作用

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丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K/Akt信号通路的调节作用

作者：刘东慧承德医学院

学位级别：硕士

随着社会经济的发展和人民生活水平的提高,糖尿病的发病率正逐年上升。2型糖尿病以胰岛素抵抗为主要特征,而胰岛素抵抗的重要原因之一是胰岛素信号转导通路障碍。肝脏损伤是2型糖尿病常见的慢性并发症之一。因此,研究肝脏胰岛素信号转... 详细信息

随着社会经济的发展和人民生活水平的提高,糖尿病的发病率正逐年上升。2型糖尿病以胰岛素抵抗为主要特征,而胰岛素抵抗的重要原因之一是胰岛素信号转导通路障碍。肝脏损伤是2型糖尿病常见的慢性并发症之一。因此,研究肝脏胰岛素信号转导通路对2型糖尿病及其并发症的防治具有十分重要的意义。丝胶是蚕丝中包被在丝素外围的高分子水溶性蛋白,主要由18种氨基酸组成,分子量为10-300KD,具有生物相容性,可生物降解。丝胶约占蚕丝总量的30%,但在缫丝和精炼时被去除,造成了极大的浪费。本课题组前期研究表明,丝胶能有效降低2型糖尿病大鼠的血糖,并对糖尿病血糖升高具有一定的预防作用,但具体机制尚不明确。本研究以高脂高糖饲料联合链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠模型,探讨丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K/Akt信号转导通路的调节作用,为防治糖尿病及其并发症提供新思路。目的:通过观察丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体(Insulin receptor,IR)、胰岛素受体底物-1(Insulin receptor substrate-1,IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Protein kinase B,Akt/PKB)、葡萄糖转运蛋白4(Glucose transporter 4,GLUT4)和肝细胞Tribbles同源蛋白3(Tribbles-related protein 3,TRB3)表达的作用,探讨丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K/Akt信号转导通路的调节作用及可能机制。方法:1.60只SPF级雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(DM组)、丝胶治疗高剂量组(HS组)、丝胶治疗低剂量组(LS组)、阳性对照组(PC组),每组12只。采用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素(35mg/kg,2次)腹腔注射的方法建立大鼠2型糖尿病模型,以空腹血糖≥11.1mmol/l作为成模标准。待模型成功建立后,hs组大鼠给予2.4g/kg/d的丝胶连续灌胃35d,ls组大鼠给予1.8g/kg/d的丝胶连续灌胃35d,pc组大鼠给予55.33mg/kg/d的二甲双胍灌胃35d;nc组和dm组大鼠给予同等剂量生理盐水灌胃35d。2.采用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的空腹血糖;elisa法检测各组大鼠血清胰岛素的水平。3.采用he染色法观察各组大鼠肝脏形态结构的变化。4.采用过碘酸-schiff染色法观察各组大鼠肝脏糖原的含量。5.采用免疫组织化学染色法和westernblotting法检测各组大鼠肝脏ir、irs-1、pi3k、akt、glut4、trb3蛋白的表达。6.釆用实时荧光定量pcr法(realtimeq-pcr)检测各组大鼠肝脏ir、irs-1、pi3k、akt、glut4、trb3mrna的表达。结果:1.各组大鼠的血糖:nc组大鼠的血糖为(10.83±2.03)mmol/l,dm组大鼠的血糖为(29.45±4.82)mmol/l,明显高nc组(p0.05)。2.各组大鼠血清胰岛素水平:nc组大鼠血清胰岛素水平为(11.45±1.72)μg/l,dm组大鼠血清胰岛素水平为(7.28±0.58)μg/l,明显低于nc组(p0.05)。3.各组大鼠肝脏形态结构的变化:he染色可见各组大鼠肝细胞核被染成蓝色,肝细胞浆被染成粉红色。nc组大鼠肝小叶结构清晰,肝细胞以中央静脉为中心呈条索状排列,核大、圆,居于细胞中央,胞浆染色均匀,肝血窦清晰;dm组大鼠肝细胞基本以中央静脉为中心呈条索状排列,但肝细胞明显肿胀、体积增大,胞浆中出现明显的空泡状结构,部分肝细胞出现溶解性坏死,肝血窦狭窄或闭锁;与dm组相比,hs组、ls组大鼠肝脏的病理变化明显减轻;pc组大鼠肝细胞肿胀不明显,但可见部分肝细胞出现溶解性坏死,肝血窦变狭窄。4.各组大鼠肝脏糖原的含量:肝糖原阳性表达产物呈红色至紫红色颗粒,主要位于肝细胞的胞浆。与nc组比较,dm组大鼠肝糖原含量明显降低(p<0.05);与dm组比较,hs组、ls组、pc组大鼠肝糖原含量明显升高(p<0.05),且

关键词：丝胶 2型糖尿病胰岛素PI3K/Akt信号转导通路胰岛素受体胰岛素受体底物-1 磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白激酶B 葡萄糖转运蛋白4

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中国展览行业现状及管理运行机制研究

中国展览行业现状及管理运行机制研究

作者：刘东慧北京交通大学

学位级别：硕士

摘要：我国的展览行业经过近几十年的发展,在国民经济中日益占有更加重要的地位,对经济的影响和推动作用越来越明显。我国展览行业还处于起步阶段,展览品种多而杂、市场混乱展览重复、缺乏具有世界影响力的品牌展会、缺乏行业专业的人... 详细信息

摘要：我国的展览行业经过近几十年的发展,在国民经济中日益占有更加重要的地位,对经济的影响和推动作用越来越明显。我国展览行业还处于起步阶段,展览品种多而杂、市场混乱展览重复、缺乏具有世界影响力的品牌展会、缺乏行业专业的人才、展馆盲目上马,二级城市展览配套服务水平低等林林总总的问题仍然困扰着我国展览行业的发展。要想提升行业整体水平,营造展览行业更好的发展环境,仍需要努力和探索。本文通过查阅资料和实地走访的形式归纳总结我国展览行业当前的发展状况以及运作模式的基础上,以德国、美国和我国香港特别行政区为范例分析了国际上展览行业发达国家和地区行业运作模式。之后以波特的产业国际竞争力模型为框架,将我国展览行业的发展现状与运作模式与此作对比分析,找出我国展览行业发展中存在的缺陷和不足。针对这些问题,提出通过挖掘我国展览行业的关键成功因素的手段,寻找能够提升行业竞争力的有利因素以及制约行业发展的不利因素。粗糙集方法是一种能够客观反映知识分类和进行属性约简的方法,特别适用于从知识表达系统重提炼核心信息。因此利用粗糙集方法从影响展我国展览业发展的因素中剔除影响作用较小的因素,剩余的因素即为关键成功因素。最后,在分析我国展览行业存在的主要问题和制定相应对策的基础上,设计出一套符合我国展览业发展的管理运行模式。本研究的结果表明政府管理职责的缺位、没有形成统一的行业协会和行业管理制度、相关法律框架和约束机制的缺失、展览行业资源分散且层次过低、展览会规格不高缺乏知名品牌是制约我国展览行业竞争力提高的主要因素。在我国展览行业的关键成功因素中,政府、行业协会、展览企业扮演者最为关键的角色,他们的协同发展与相互制约成为我国展览行业健康有序发展的动力。

关键词：中国展览业发展现状管理运行模式关键成功因素粗糙集

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益肾汤治疗难治性肾病综合征的临床研究

益肾汤治疗难治性肾病综合征的临床研究

作者：刘东慧黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究立足中医理论,针对难治性肾病综合征脾肾两虚、痰瘀互阻的病机关键,创立健脾益肾、祛瘀化痰法,并遵法拟益肾汤,通过临床病例观察,探讨益肾汤治疗难治性肾病综合征的临床疗效。方法:本课题采用自身前后对照的方法,对50例难治... 详细信息

目的:本研究立足中医理论,针对难治性肾病综合征脾肾两虚、痰瘀互阻的病机关键,创立健脾益肾、祛瘀化痰法,并遵法拟益肾汤,通过临床病例观察,探讨益肾汤治疗难治性肾病综合征的临床疗效。方法:本课题采用自身前后对照的方法,对50例难治性肾病综合征患者进行治疗前后的比较。在一般治疗基础上,加服用益肾汤。疗程为8周。观察患者治疗前后的总疗效、中医证候积分变化,以及24h尿蛋白定量、血浆白蛋白等实验室指标的变化。结果:(1)本方的临床总体疗效显著,治疗后在症状体征方面改善明显优于治疗前(P<0.05)。(2)治疗后尿蛋白定性、24小时尿蛋白定量较治疗前明显减少(P<0.01),血浆白蛋白较治疗前明显升高(P<0.01)。(3)治疗后胆固醇、甘油三脂较治疗前降低(P<0.05)。(4)治疗后PT、APTT较治疗前时间延长(P<0.05),FIB较治疗前降低(P<0.05)。结论:(1)益肾汤组方严谨,紧扣病机,其总有效率为80%,在治疗过程中患者没有出现明显的不良反应。(2)益肾汤可以有效的改善脾肾两虚、痰瘀互阻型患者的中医症状,降低中医症状积分。(3)益肾汤有助于减少患者尿蛋白的排泄,升高血浆白蛋白,延缓难治性肾病综合征的进展。(4)益肾汤在调节血脂代谢紊乱,改善血液的高凝状态方面有一定疗效。

关键词：难治性肾病综合征益肾汤临床研究

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QX公司薪酬体系优化研究

QX公司薪酬体系优化研究

作者：刘东慧河北工业大学

学位级别：硕士

伴随着中国市场化进程的加快，劳动力市场也日趋完善，人才作为一种资源要素，其配置也必须符合市场经济规律要求，人才流动必然会受到“价格”——薪酬的影响。因此人才向着工资水平高的地区、企业流动就成为普遍现象。从这个意义上讲... 详细信息

伴随着中国市场化进程的加快，劳动力市场也日趋完善，人才作为一种资源要素，其配置也必须符合市场经济规律要求，人才流动必然会受到“价格”——薪酬的影响。因此人才向着工资水平高的地区、企业流动就成为普遍现象。从这个意义上讲，企业能否吸引和留住人才，企业的薪酬管理起着重要的作用。中国改革开放和现代化建设的总设计师邓小平曾说过，“科学技术是第一生产力”，而掌握科学技术的往往是优秀人才。因此，如何吸引优秀人才加盟企业，对企业竞争力的提高，甚至企业的生存发展都是特别重要的。本文基于QX公司薪酬体系管理现状，运用访谈法、问卷调查法、观察法、文献检索法等科学方法进行广泛调查和深入研究，通过分析员工对薪酬体系方面不满意现状，找出了QX公司现有薪酬体系方面出现的问题及产生原因，根据国家和天津市薪酬政策、公司环境等，提出了针对现有薪酬体系的优化设计方案。同时完善了各岗位的工作分析，对公司各部门的岗位进行定义说明，将岗位说明书与薪酬管理相结合、以提高员工的工作积极性，从而激发企业活力，提升企业核心竞争力，为其长期稳定的发展奠定坚实的基础。同时，对优化后的薪酬体系提出了宣传和培训保障、组织保障、沟通机制保障、人力资源保障、制度创新保障、薪酬总额控制机制和积极的薪酬改革观念保障等多项措施。

关键词：薪酬体系优化设计岗位评价

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云南烟叶与进口烟叶品质差异分析

云南烟叶与进口烟叶品质差异分析

作者：刘东慧河南农业大学

学位级别：硕士

本文根据烟叶的外观质量、化学成分、致香物质和评吸鉴定结果,借鉴国际和国内烤烟质量评价标准,以云南保山、云南文山、巴西和津巴布韦不同烟叶样品为试验材料,对云南烟叶和进口烟叶的差异性和相似性作出评价。结果表明: 1、从外观质量... 详细信息

本文根据烟叶的外观质量、化学成分、致香物质和评吸鉴定结果,借鉴国际和国内烤烟质量评价标准,以云南保山、云南文山、巴西和津巴布韦不同烟叶样品为试验材料,对云南烟叶和进口烟叶的差异性和相似性作出评价。结果表明: 1、从外观质量上看,巴西和津巴布韦烟叶样品均为混部位和混颜色的混打片,成熟度好,疏松感强。云南保山和云南文山烟叶整体感觉成熟度较好,组织结构疏松感较强,油润感较差;整体色度表现较差,混颜色叶片较多。2、烟叶化学成分分析表明:(1)进口烟叶淀粉含量在4.06～5.69%之间,平均4.90%,云南烟叶淀粉含量在3.22～6.48%,平均5.16%,总体水平高于进口烟叶,尤其云南保山上中部烟叶和文山中部烟叶淀粉含量明显偏高。(2)进口烟叶总糖含量在21.90～28.40%,平均24.20%,还原糖含量在19.70～25.30%,平均21.54%,云南烟叶总糖含量在16.70～32.40%,平均25.65%,还原糖含量在15.10～27.60%,平均22.64%,整体上云南烟叶和进口烟叶在总糖和还原糖的平均含量差异不大,但云南保山、文山烟叶总糖和还原糖含量的波动幅度却远大于进口烟叶。(3)进口烟叶烟碱含量在2.10～2.89%,平均2.60%,总挥发碱含量在0.23～0.32%,平均0.28%,云南烟叶烟碱含量在1.69～3.56%,平均2.76%,总挥发碱含量在0.21～0.40%,平均0.31%,云南保山烟叶烟碱水平低于文山,两地区烟叶烟碱随部位的降低含量逐渐较低的规律性较强。(4)进口烟叶的总氮含量在1.70～2.04%,平均1.93%,云南烟叶的总氮含量在1.61～3.16%,平均2.26%,云南保山烟叶总氮含量平均为2.05%,比较接近进口烟叶。(5)进口烟叶的硝酸根含量在0.08～0.26%,平均0.16%,含量差异大,巴西烟叶含量远高于津巴布韦,云南烟叶的硝酸根含量在0.07～0.23%,平均0.11%,含量变化规律较为明显,即由高到低为下部、上部、中部,下部叶硝酸根含量表现出异常的高。(6)进口烟叶的钾含量在2.13～2.51%,平均2.34%,云南烟叶钾含量在1.78～2.63%,平均2.08%,进口烟叶和云南保山烟叶,随着部位升高钾含量呈下降趋势,规律明显,文山各部位间差异不大。进口烟叶氯含量在0.28～0.52%,平均0.41%,云南烟叶氯含量在0.19～0.29%,平均0.22%,远低于进口烟叶。3、不同地区烟叶化学成分间的协调性分析表明:(1)钾氯比平均值由低到高的顺序为津巴布韦、进口平均、巴西、云南文山、云南平均、云南保山。(2)糖碱比平均值由低到高的顺序为文山、巴西、进口、云南、津巴布韦、保山。(3)氮碱比平均值由低到高的顺序为巴西、进口、津巴布韦、保山、云南、文山。不同部位烟叶,氮碱比平均值由高到低的顺序分别为:云南保山下部、中部、上部;云南文山下部、上部、中部;巴西下部、上部;津巴布韦上部、中部。4、评吸结果表明:巴西和津巴布韦的的五个烟叶样品均属于浓香型,云南的保山和文山烟叶样品均属于清香型。五个等级的进口烟叶内在质量均较好,烟香醇和,劲头和浓度适中,香气突出,香气质好,整体协调性好,可用性较强。云南保山的C2F、C3F和X2F,文山的B2F和X2F内在质量较好,其余几个样品均存在不同程度的缺陷,主要表现在香气量不够、烟香粗糙、杂气较显露和口腔残留较多等现象。

关键词：烤烟烟叶质量外观质量化学成分致香物质评吸鉴定

基于悬浮细胞培养流产衣原体的工艺研究及其抗原性评价

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基于悬浮细胞培养流产衣原体的工艺研究及其抗原性评价

作者：刘东慧中国农业科学院

学位级别：硕士

流产衣原体主要侵袭动物的生殖道黏膜,引起山羊、绵羊、猪、牛等动物发生流产、死胎,感染后的动物向周围环境中大量排放病原菌,对其他动物和人类健康造成严重的威胁。这种慢性接触性传染病在世界各国都有发生,对畜牧养殖业造成了不可估... 详细信息

流产衣原体主要侵袭动物的生殖道黏膜,引起山羊、绵羊、猪、牛等动物发生流产、死胎,感染后的动物向周围环境中大量排放病原菌,对其他动物和人类健康造成严重的威胁。这种慢性接触性传染病在世界各国都有发生,对畜牧养殖业造成了不可估量的损失。预防和降低流产衣原体感染的有效方法是接种疫苗,传统的流产衣原体灭活疫苗主要是鸡胚卵黄囊膜甲醛灭活疫苗,但该疫苗生产工艺落后、生产周期长。与鸡胚培养方式相比,使用悬浮细胞培养生产抗原的技术操作相对简单可控、方便扩大培养、污染率和成本低,能够实现抗原的大规模生产,但目前没有使用悬浮细胞培养流产衣原体的相关研究。本研究通过改变培养液和降低血清浓度的方法驯化L929贴壁细胞适应低血清悬浮培养基培养,悬浮培养液占比由0%、50%、66%、75%、100%依次提高,血清浓度依次由5%、2.5%、1.67%、1%依次降低。然后将适应后的细胞转移至摇瓶中培养,驯化贴壁细胞悬浮培养,经25代驯化培养,获得了适应1%血清培养的悬浮细胞株。再次降低血清浓度,最后用无血清培养基驯化细胞,经25代驯化培养,获得了适应无血清培养的L929悬浮细胞。当该悬浮细胞初始接种密度为5×10～5个/m L时,培养72 h后细胞浓度可达到约7×10～6个/m L,细胞活力在95%以上。本研究成功建立流产衣原体特异性序列重组质粒的荧光定量PCR标准曲线,Ct值与基因拷贝数成良好的线性关系,为后续菌量的测定奠定基础。将流产衣原体接种于L929悬浮细胞上,通过加入不同的促感染试剂提高收菌量,选择出最佳的培养方法。在细胞密度为6×10～6个/m L,接菌量为5.5×10～4IFU/m L,加入脂质体2000的量为1.7μL/m L、放线菌酮浓度为0.4μg/m L时,菌量扩增倍数最大,48 h内约扩增了100倍。以β-丙内酯、二乙烯亚胺和甲醛作灭活剂,将在悬浮细胞上收集的流产衣原体进行灭活,通过对比灭活后抗原蛋白的含量,最终选择以1‰浓度的甲醛作为灭活剂。以流产衣原体鸡胚卵黄囊膜甲醛灭活疫苗为参照,对收集的流产衣原体抗原进行定量,然后将抗原灭活,以206为佐剂制备出流产衣原体悬浮细胞灭活疫苗。将制备好的流产衣原体悬浮细胞灭活疫苗免疫小鼠后,经ELISA检测小鼠产生的抗体水平随免疫剂量的增加而提升;小鼠脾淋巴细胞增殖试验及脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-17含量检测的结果表明,接种50μL、100μL疫苗组小鼠的脾淋巴细胞增殖水平、IFN-γ、IL-2的含量远高于接种25μL疫苗和注射PBS组的小鼠。对免疫后且怀孕7d的小鼠进行攻毒,17d后检测小鼠组织器官中流产衣原体基因拷贝数,接种疫苗组小鼠的脾脏、十二指肠、子宫中的流产衣原体基因组含量远低于未接种疫苗组小鼠。对比接种不同剂量疫苗组小鼠子宫的病理变化,发现注射PBS组及接种25μL疫苗组的小鼠子宫出现了不同程度的坏死及炎症,而其余两组小鼠的子宫无异常变化。因此,接种50μL、100μL该灭活疫苗可以有效抑制流产衣原体的感染。综上所述,本研究成功将L929贴壁细胞驯化为无血清悬浮培养的细胞,并在驯化的悬浮细胞上培养流产衣原体,将收集的流产衣原体灭活制备出流产衣原体悬浮细胞灭活疫苗,免疫小鼠后产生了特异性的抗体,有良好的免疫效果。这为将来通过L929细胞大规模培养流产衣原体并制备灭活疫苗奠定了基础。

关键词： L929贴壁细胞悬浮培养驯化流产衣原体灭活疫苗免疫评价

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数字化转型对企业绩效的影响机制与路径研究

数字化转型对企业绩效的影响机制与路径研究

作者：刘东慧山东理工大学

学位级别：硕士

在新一轮科技革命和产业变革加速演进的背景下,数字技术作为一种新的“生产要素”,与实体经济深度融合,成为推动产业高质量发展的全新引擎,引导着传统经济向数字化转型迈进。越来越多的传统企业将数字化转型作为重点发展战略,以期通过... 详细信息

在新一轮科技革命和产业变革加速演进的背景下,数字技术作为一种新的“生产要素”,与实体经济深度融合,成为推动产业高质量发展的全新引擎,引导着传统经济向数字化转型迈进。越来越多的传统企业将数字化转型作为重点发展战略,以期通过数字化转型实现组织优化和绩效提升。但企业数字化转型是一项复杂的系统性工程,企业既要摆脱传统的路径依赖,还要经历技术升级、组织结构调整、资源重组等多重变革,转型成本高,阵痛期长。在这个过程中,是数字化转型带来的管理等方面成本的增加对企业绩效产生的负向影响更大,还是数字化转型驱动模式创新、效率优化对企业绩效产生的正向影响更胜一筹,未有定论。因此,基于微观企业视角,进一步深入论证数字化转型对企业绩效的影响及路径机制兼具理论和实践意义。本文以权变管理理论、资源基础理论和信息不对称理论为基础,以2012—2020年中国A股上市制造业企业为研究样本,从过程视角实证检验数字化转型的数字技术应用阶段和数字化商业模式转型阶段对企业绩效的影响。并构建基于结构方程的多重中介效应模型,分析数字化转型影响企业绩效的多重路径机制。研究发现:数字化转型的两个阶段,数字技术应用和数字化商业模式转型都可以显著提升企业绩效,其中数字化商业模式转型的绩效提升作用更强;进一步地,数字化转型可以通过降低生产成本、提高人力资本使用效率、增加技术创新产出的机制间接促进企业绩效提升,通过增加交易成本、增加技术创新投入的机制间接抑制企业绩效提升;此外,同群效应检验结果显示,企业数字化转型存在明显的行业、地区、行业×地区同群效应;情境分析结果表明,数字化转型在国有企业、知识产权保护程度更高以及环境动态性更强的样本中,对企业绩效具有更明显的提升效应。研究结论有助于深刻理解实体企业数字化转型的微观经济后果,为政府制定有效的产业政策提供理论依据。

关键词：数字化转型企业绩效结构方程模型多重中介效应