检索结果-南通市图书馆

乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液RNA组分与HT-29细胞和VSV相互作用研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液RNA组分与HT-29细胞和VSV相互...

作者：凌宗欣大连医科大学

学位级别：硕士

目的:乳杆菌在维持宿主肠道自稳,促进肠道免疫系统成熟,提高机体免疫力,保持宿主健康等方面发挥着重要的作用。本课题组发现乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液中存在大量的100bp左右的核酸组分,该核酸组分的性质、来源、核苷酸序列、生... 详细信息

目的:乳杆菌在维持宿主肠道自稳,促进肠道免疫系统成熟,提高机体免疫力,保持宿主健康等方面发挥着重要的作用。本课题组发现乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液中存在大量的100bp左右的核酸组分,该核酸组分的性质、来源、核苷酸序列、生物学功能等具有重要的研究价值。本实验通过对乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液中核酸组分的提取和分析,观察其可能的来源;通过其在体外对肠道肿瘤细胞增殖的影响,探讨其对肠道肿瘤细胞的作用及其机制。通过其对VSV感染细胞的影响研究及其诱导细胞产生IFN的研究,探讨其在抵抗肠道病毒性感染性疾病方面的作用及其机制。为阐明乳杆菌DM9811与宿主相互作用规律的分子机制奠定基础。方法:1、乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液中核酸的提取、纯化、保存。绘制乳杆菌DM9811的细菌生长曲线。取对数生长期培养基滤液,核酸提取,并定量分析,观察其与细菌生长曲线的关系;电泳分析滤液中核酸组分的组成,用RNase(Free DNase)处理提取物,同时抽提相同条件下处理的细菌培养基,观察分析核酸组分可能的来源,将提取的核酸组分保存于液氮中。2、观察核酸组分对HT-29细胞增殖的影响及其机制。调整HT-29细胞浓度为1.0×10/mL,MTT法观察不同核酸组分终浓度,作用24h、48h、72h、96h时对HT-29细胞生长的影响,计算细胞生长抑制率。取终浓度为200μg/mL进行24h、48h、72h时细胞周期测定,并检测相应细胞周期相关蛋白mRNA的表达情况。3、观察核酸组分对VSV感染细胞的抑制作用及其机制。用HEp-2细胞扩增VSV,进行TCID检测。调整WI-38细胞浓度为2.5×10/mL,接种于细胞培养板形成细胞单层,而后进行病毒学实验。检测不同核酸组分终浓度对WI-38细胞的毒性作用,竞争性抑制病毒感染的作用,阻断病毒侵入的作用,抑制病毒生物合成的作用及诱导细胞产生IFN的抗病毒效应,病毒感染情况以细胞存活率检测。免疫荧光检测核酸组分抑制病毒感染细胞的分子机制。结果:1、乳杆菌DM9811细菌在接种后第0 2h之间为对数生长期,其世代时间为1.95h。琼脂糖电泳分析该核酸组分为RNA,其片段约为100bp左右。发现核酸组分的量与细菌数量呈现明显的正相关。经RNase(Free DNase)处理后未见条带,说明其中无DNA存在,表明对数期基本不存在细菌裂解,此RNA可能是由细菌分泌产生的。核酸组分保存于液氮中1月左右后,结果显示无明显的降解。2、体外对HT-29细胞增殖的影响:核酸组分对HT-29细胞生长具有明显抑制效果,抑制率呈现显著的时间剂量依赖性,终浓度200μg/mL作用96h时抑制率为63.29±3.49%。核酸组分作用于HT-29细胞24h时细胞周期检测结果显示为显著的G1/S期阻滞,并随着作用时间的延长,细胞凋亡率增加显著。RT-PCR检测G/S期细胞周期相关蛋白,Cyclin D1、Cyclin E的表达明显下降,CDK2、CDK4表达有下降,CDK6表达有上升,p27、p53的表达明显升高,PCNA的表达明显降低。3、体外对VSV感染细胞的影响:VSV扩增后,其TCID为10/0.1mL。核酸组分对WI-38细胞在本实验的浓度范围内无明显细胞毒性作用。核酸组分终浓度为200μg/mL时竞争性抑制病毒感染作用和阻断病毒侵入细胞的作用效果明显,但抑制病毒生物合成的作用不明显。核酸组分无明显诱导WI-38细胞产生抗病毒效应,但可有效诱导BALB/c小鼠脾细胞产生IFN-α的抗病毒效应,并呈现一定的剂量依赖性。细胞免疫荧光检测结果为核酸组分可抑制VSV吸附细胞,从而阻止病毒对细胞的感染。结论:1、乳杆菌DM9811对数生长期培养基滤液中存在着大量的100bp左右的RNA片段,此RNA的来源可能是细菌分泌的。2、核酸组分对HT-29细胞的生长具有显著的抑制作用,抑制作用呈现明显的时间剂量依赖性,细胞周期检测结果显示为明显的G1/S期阻滞。3、核酸组分在实验检测的浓度范围内对WI-38细胞无毒性,其对VSV具有竞争性抑制作用和阻断其侵入细胞作用,可诱导BALB/c小鼠脾细胞产生IFN-α,并呈现出剂量依赖性。核酸组分可抑制VSV吸附到细胞表面,从而阻止病毒对细胞的感染。

关键词：乳杆菌核酸 HT-29细胞 VSV IFN 免疫荧光

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

龋病儿童唾液菌群动态变化及功能分析

四川大学学报（医学版） 2022年第2期53卷 242-249页

作者：王媛张杰凌宗欣邓淑丽浙江大学医学院附属口腔医院·浙江大学口腔医学院·浙江省口腔疾病临床医学研究中心·浙江省口腔生物医学研究重点实验室·浙江大学癌症研究院杭州310016 传染病诊治国家重点实验室浙江大学医学院附属第一医院杭州310003

目的观察龋病和无龋儿童唾液菌群的动态变化,同时对二者口腔微生态在糖代谢及多种氨基酸合成转运过程中的功能差异进行分析。方法采用宏基因组学的方法分别对10例无龋儿童和10例龋病儿童唾液菌群进行组成及功能分析,6个月后,进一步利用P... 详细信息

目的观察龋病和无龋儿童唾液菌群的动态变化,同时对二者口腔微生态在糖代谢及多种氨基酸合成转运过程中的功能差异进行分析。方法采用宏基因组学的方法分别对10例无龋儿童和10例龋病儿童唾液菌群进行组成及功能分析,6个月后,进一步利用PacBio SMRT测序技术,分析两组儿童口腔菌群变化,探索疾病和健康状态下,口腔菌群变化规律,从组成到功能对儿童口腔微生态进行全面解读。结果随时间推移,两组儿童口腔微生态组成发生显著改变,在门水平上,菌群变化趋势一致,Firmicutes比例增加,而Actinobacteria和Bacteroidetes比例降低。在属水平上,两组儿童唾液菌群的变化出现差异,其中,Lactobacillus、Methylobacterium和Megasphaera在龋病组儿童中的丰度呈上升趋势,而在无龋组儿童中呈下降趋势。在种水平上,隶属于乳杆菌属的***、***、***、***等菌株在龋病儿童中呈上升趋势,但在无龋儿童中始终处于较低水平。***以及***在龋病儿童中有一定程度下降,但在无龋儿童中始终处于低水平。***和***等菌种与龋失补牙数(decayed,missing and filled teeth,dmft)呈正相关,而***与dmft呈负相关。三羧酸循环关键节点相关基因,gltA、icd以及mqo,谷氨酸生成相关基因gudB以及精氨酸生成相关基因argAB/C/J在无龋儿童中丰度显著增加。同时,电子传递链中的NADH脱氢酶相关基因nuoB/C/D/E/H/I/J/K/L/M在无龋儿童中的丰度显著增加。结论儿童唾液菌群是动态变化的,其变化趋势与口腔健康状态有关,健康的口腔微生态中有更广泛的氧化磷酸化,谷氨酸以及精氨酸等氨基酸生成和转运也更为活跃。

关键词：龋病唾液菌群高通量测序氨基酸生成

同方期刊数据库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

树突状细胞与肠道免疫

中国微生态学杂志 2008年第3期20卷 310-315页

作者：凌宗欣唐立大连医科大学微生态教研室辽宁大连116044

肠道黏膜免疫系统是肠道防御细菌和病毒感染的第一道防线,在维持肠道黏膜自稳方面发挥着重要的作用。肠道黏膜免疫系统持续不断的与来自外界的食物抗原和病原微生物及自身长期共存的肠道菌群相互作用,刺激机体对有害抗原产生免疫应答反... 详细信息

肠道黏膜免疫系统是肠道防御细菌和病毒感染的第一道防线,在维持肠道黏膜自稳方面发挥着重要的作用。肠道黏膜免疫系统持续不断的与来自外界的食物抗原和病原微生物及自身长期共存的肠道菌群相互作用,刺激机体对有害抗原产生免疫应答反应,诱导机体对无害抗原产生免疫耐受。树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是目前已知的最强有力的一种专职抗原递呈细胞(Professional antigen presenting cells,APC),[第一段]

关键词：树突状细胞肠道免疫

低温热处理制备介孔NiO、Co_3O_4及超电容性能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

化学学报 2009年第10期67卷 1069-1074页

作者：郑明波凌宗欣廖书田杨振江姬广斌曹洁明陶杰南京航空航天大学材料与科学技术学院纳米材料研究所南京210016

在不使用有机试剂的条件下,通过简单的水热法制备了纳米结构的Ni(OH)2与Co(OH)2,低温热处理得到NiO与Co3O4.透射电子显微镜及N2等温吸附-脱附测试结果表明金属氧化物具有无序的介孔结构及高比表面积.电化学测试结果表明介孔金属氧化物... 详细信息

在不使用有机试剂的条件下,通过简单的水热法制备了纳米结构的Ni(OH)2与Co(OH)2,低温热处理得到NiO与Co3O4.透射电子显微镜及N2等温吸附-脱附测试结果表明金属氧化物具有无序的介孔结构及高比表面积.电化学测试结果表明介孔金属氧化物具有良好的超电容性能,介孔NiO,Co3O4在5mA放电电流下的比电容分别达176,298F·g-1.

关键词：介孔金属氧化物纳米结构超级电容器

阿尔茨海默病肠道细菌和真菌菌群结构和组成改变研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国微生态学杂志 2024年第5期36卷 577-583页

作者：雷雯慧高婕徐鹏程译文赵龙友凌宗欣山东第一医科大学附属省立医院山东济南250000 济南微生态生物医学省实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病重症诊治全国重点实验室丽水市第二人民医院检验科

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者肠道细菌组和真菌组的变化特征及其与宿主应答的互作关系。方法收集AD患者(n=39)和健康者(n=39)粪便样本和空腹血清样本,提取样本总DNA,采用MiSeq高通量测序分析样本中细菌和真菌的组成,并采用人27细胞因... 详细信息

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者肠道细菌组和真菌组的变化特征及其与宿主应答的互作关系。方法收集AD患者(n=39)和健康者(n=39)粪便样本和空腹血清样本,提取样本总DNA,采用MiSeq高通量测序分析样本中细菌和真菌的组成,并采用人27细胞因子联合检测试剂盒检测血清细胞因子水平。结果AD患者肠道细菌菌群多样性(Shannon指数)和丰富度(Observed OTUs,Chao 1指数,ACE指数)显著下降(P0.05),但菌群组成中克柔假丝酵母菌(Candida xylopsoci)和埃切假丝酵母菌(Candida etchellsii)相对丰度显著降低(P<0.05),而裂褶菌(Schizophyllum commune)和变色栓菌(Trametes versicolor)显著增加(P<0.05)。AD患者血清中IFN-γ,MIP-1α和MCP-1显著降低,而TNF-α和IP-10显著升高(P<0.05);网络互作分析发现,AD肠道关键功能细菌、真菌和炎症标志物的互作网络更为复杂。结论AD患者肠道细菌组和真菌组发生显著改变,并与外周炎症因子相关,这为探索AD发病新机制和早诊早治提供新的线索。

关键词：阿尔茨海默病粪杆菌酵母菌高通量测序 TNF-α

前列腺癌组织中TMPRSS2-ETS融合基因检测及其意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华病理学杂志 2011年第3期40卷 187-188页

作者：向华凌宗欣孙柯任国平尤启汉朱雄增浙江大学医学院附属第一医院病理科杭州310003 传染病诊治国家重点实验室复旦大学附属肿瘤医院病理科

近年学者发现，大多数前列腺癌中跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）基因与ETS转录因子家族的ERG、ETV1或ETV4之间可以发生融合，形成融合基因TMPRSS2-ERG、-ETV1和-ETV4（此型极少见），且它们可能还是重要预后指标[1-3]。为探讨中国人前列... 详细信息

近年学者发现，大多数前列腺癌中跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）基因与ETS转录因子家族的ERG、ETV1或ETV4之间可以发生融合，形成融合基因TMPRSS2-ERG、-ETV1和-ETV4（此型极少见），且它们可能还是重要预后指标[1-3]。为探讨中国人前列腺癌组织中TMPRSS2基因与ERG和ETV1基因的融合情况，

关键词：融合基因检测前列腺癌组织转录因子家族丝氨酸蛋白酶预后指标 S2基因 ERG ETS

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

无氰化学镀金工艺的研究

电镀与环保 2012年第4期32卷 27-28页

作者：卢银东凌宗欣赵晶晶中国电子科技集团第55研究所江苏南京210016 南京航空航天大学材料科学与技术学院江苏南京211100 苏州春兴精工股份有限公司江苏苏州215121

研究了亚硫酸盐/硫代硫酸盐复合体系下,2-巯基苯并噻唑(2-MBT)对镀液稳定性的影响,以及乙二胺对镀速、镀层厚度的影响。结果表明:2-MBT的存在有利于提高镀液稳定性;镀速与镀层厚度均随着乙二胺的质量浓度的增加而增大。

关键词：无氰化学镀金 2-巯基苯并噻唑乙二胺

2010-2014年黏液型铜绿假单胞菌药物敏感性及多药耐药菌分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医院感染学杂志 2016年第17期26卷 3855-3858页

作者：胡晓峰孙淑红凌宗欣朱德全陈维忠临沂市人民医院山东临沂276003 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州3100031 日照市莒县中医院山东日照276500

目的分析医院2010-2014年分离出的黏液型铜绿假单胞菌的药物敏感性及多药耐药菌的检出情况,为临床及时、合理用药提供参考依据。方法对分离出的黏液型铜绿假单胞菌进行药物敏感性检测,同时对多药耐药菌的检出率进行统计。结果黏液型铜... 详细信息

目的分析医院2010-2014年分离出的黏液型铜绿假单胞菌的药物敏感性及多药耐药菌的检出情况,为临床及时、合理用药提供参考依据。方法对分离出的黏液型铜绿假单胞菌进行药物敏感性检测,同时对多药耐药菌的检出率进行统计。结果黏液型铜绿假单胞菌对常见抗菌药物的敏感率均>75.0%,对大部分抗菌药物的敏感率逐年下降;与非黏液型铜绿假单胞菌相比,黏液型铜绿假单胞菌的敏感率较高;门诊患者对头孢他啶和环丙沙星的敏感率高于住院患者(P<0.05);呼吸内科患者对头孢他啶的敏感率低于其他非呼吸科室(P<0.05);多药耐药黏液型铜绿假单胞菌检出率9.0%,泛耐药黏液型铜绿检出率0.9%,均低于非黏液型铜绿假单胞菌。结论黏液型铜绿假单胞菌药物敏感率较高,但呈逐年下降趋势;其多药耐药菌检出率逐年递增;治疗黏液型铜绿假单胞菌感染时应注意其生物膜影响,可联合用药,避免抗菌药物滥用,以减缓多药耐药菌的产生。

关键词：铜绿假单胞菌黏液型药物敏感性多药耐药菌

外阴阴道假丝酵母菌病患者阴道菌群多样性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国微生态学杂志 2015年第5期27卷 600-603页

作者：刘霞凌宗欣浙江大学医学院附属第一医院监护室浙江杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心浙江杭州310003

目的探讨外阴阴道假丝酵母菌病患者阴道菌群多样性的变化。方法采集育龄期女性健康受试者（control,CN,n=50）、细菌性阴道病患者（Bacterial vaginosis,BV,n=50）、外阴阴道假丝酵母菌病患者（Vulvovaginal candidiasis,VVC,n=48）、... 详细信息

目的探讨外阴阴道假丝酵母菌病患者阴道菌群多样性的变化。方法采集育龄期女性健康受试者（control,CN,n=50）、细菌性阴道病患者（Bacterial vaginosis,BV,n=50）、外阴阴道假丝酵母菌病患者（Vulvovaginal candidiasis,VVC,n=48）、细菌性阴道病合并外阴阴道假丝酵母菌病患者（Bacterial vaginosis in combination of vulvovaginal candidiasis,BVC,n=32）的阴道拭子,提取细菌基因组DNA,而后应用25%~55%变性梯度的PCR-DGGE进行指纹图谱分析。结果阴道菌群指纹图谱结果显示,VVC组中阴道优势菌群与CN组基本一致,但与BV组和BVC组比较差异均有统计学意义。结论外阴阴道假丝酵母菌病阴道菌群多样性无明显变化。

关键词：外阴阴道假丝酵母菌病阴道菌群菌群多样性 PCR-DGGE