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胰岛素及其类似物与受体结合的负协同效应

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1982年第1期 63-68页

作者：冯佑民张新堂朱菊红张友尚中国科学院上海生物化学研究所

本文结果表明除用豚鼠红细胞在15℃观察到负协同效应外,用脂肪细胞和豚鼠红细胞在其生理温度均未观察到负协同效应。比较了某些胰岛素类似物在15℃引起豚鼠红细胞胰岛素受体负协同效应的能力。

关键词：胰岛素解离豚鼠多肽荷兰猪负协同效应胰岛素受体受体结合

人胰岛素在甲醇酵母Pichiapa storis中的分泌表达

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生物化学与生物物理学报 1999年第5期31卷 587-589页

作者：王燕梁镇和张友尚崔大敷冯佑民中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室中国科学院上海生物化学研究所!上海200031

将猪胰岛素前体（ＰＩＰ）基因和在其５′端引入９个氨基酸的间隔肽序列的ＰＩＰ基因（ｓｐ ＰＩＰ）插入到Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ的分泌表达质粒ｐＰＩＣ９中，得到分泌表达质粒ｐＰＩＣ９／ＰＩＰ... 详细信息

将猪胰岛素前体（ＰＩＰ）基因和在其５′端引入９个氨基酸的间隔肽序列的ＰＩＰ基因（ｓｐ ＰＩＰ）插入到Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ的分泌表达质粒ｐＰＩＣ９中，得到分泌表达质粒ｐＰＩＣ９／ＰＩＰ和ｐＰＩＣ９／ｓｐ ＰＩＰ并用以转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓＧＳ１１５。用点杂交筛选，获得高拷贝转化子Ｐ３９（ｓｐ）和Ｓ５１（＋ｓｐ）。经１Ｌ摇瓶培养，Ｐ３９和Ｓ５１在Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ中分泌表达ＰＩＰ和ｓｐ ＰＩＰ的量分别为１０ｍｇ／Ｌ和４０ｍｇ／Ｌ。ｓｐ ＰＩＰ在Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ中的表达水平高于其在本实验室报道的Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ和Ｋ．ｌａｃｔｉｓ中的表达，表明间隔肽的引入有助于提高ＰＩＰ的表达。用１０Ｌ罐发酵ｓｐ ＰＩＰ表达量达２５０ｍｇ／Ｌ。ＰＩＰ和ｓｐ ＰＩＰ经转肽得到重组人胰岛素，其受体结合能力与猪胰岛素相同，体内生物活力２７ＩＵ／ｍｇ。

关键词：重组人胰岛素猪胰岛素前体甲醇酵母Pichiapastoris 表达体系

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胰岛素受体抗体的产生及其初步鉴定

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1982年第6期 93-96页

作者：冯佑民朱菊红王育西张友尚中国科学院上海生物化学研究所

六年前Kahn 等报道了在严重抗胰岛素型的特殊的糖尿病患者(称B 型)的血清中,存在有胰岛素受体的抗体。这种抗体可以抑制胰岛素与其受体的结合,并且有类似胰岛素的生物活性,如促进葡萄糖的氧化、抑制脂肪的分解等。这一发现,对于糖尿病的临

关键词：胰岛素受体细胞膜初步鉴定蛋白抗体人胎盘

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胰岛素蛋白质工程：［B9Glu］人胰岛素

生物化学与生物物理学报 1996年第3期28卷 245-249页

作者：刘滨梁镇和唐月华张新堂朱尚权冯佑民中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室

用基因定位突变方法将胰岛素Ｂ链第９位的Ｓｅｒ改为Ｇｌｕ。获得速效胰岛素─—［Ｂ９Ｇｌｕ］人胰岛素．它的受体结合能力和体内生物活力分别为猪胰岛素的２１％和４０％。

关键词： [B9Glu]人胰岛素蛋白质工程速效胰岛素

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脑内的铁、转铁蛋白及转铁蛋白受体

生理科学进展 1999年第4期30卷 337-340页

作者：杜宇冯佑民钱忠明香港理工大学应用生物及化学技术系

脑铁异常增高可能参与脑神经变性性疾病的发生发展。这一发现使得脑铁代谢成为近年广为关注和研究较为广泛的领域。本文综述了这一领域某些方面的目前认识，包括：（１）脑铁分布及功能；（２）转铁蛋白及转铁蛋白受体在脑内的合成与... 详细信息

脑铁异常增高可能参与脑神经变性性疾病的发生发展。这一发现使得脑铁代谢成为近年广为关注和研究较为广泛的领域。本文综述了这一领域某些方面的目前认识，包括：（１）脑铁分布及功能；（２）转铁蛋白及转铁蛋白受体在脑内的合成与分布；（３）脑铁摄取和运输。此外，对铁与某些金属离子，转铁蛋白和转铁蛋白受体与脑神经变性性疾病的关系，以及转铁蛋白受体内吞在生物大分子跨血脑屏障（ＢＢＢ）运输中的作用也作了简要讨论。

关键词：脑铁代谢铁蛋白转铁蛋白受体脑神经变性

类胰岛素生长因子-1何以折叠成2种高级结构的分子基础

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世界科技研究与发展 2007年第5期29卷 44-49页

作者：黄启龙程龙霄冯佑民浙江理工大学生命科学院杭州310018

胰岛素和IGF-1属于同一超家族,具有共同的结构模体和非常类似的三维结构,但两者的折叠行为却迥然不同。胰岛素和单链胰岛素(PIP)折叠成唯一的热力学稳定的三维结构,而IGF-1则折叠成两种热力学稳定的三维结构。即是说:IGF-1的同一序列编... 详细信息

胰岛素和IGF-1属于同一超家族,具有共同的结构模体和非常类似的三维结构,但两者的折叠行为却迥然不同。胰岛素和单链胰岛素(PIP)折叠成唯一的热力学稳定的三维结构,而IGF-1则折叠成两种热力学稳定的三维结构。即是说:IGF-1的同一序列编码两种折叠信息。是序列中的什么部位决定胰岛素/PIP和IGF-1具有不同的折叠行为?这是一个极为有趣且长期为人们所困惑的问题。本实验室在PIP和mini-IGF-1工作的基础上,用蛋白质工程技术先后设计表达了一系列胰岛素和IGF-1的杂交分子,阐明了胰岛素和IGF-1不同折叠行为的分子基础。此外,还研究了文昌鱼胰岛素类似肽(aILP)的体外再折叠,结果提示胰岛素和IGF-1的不同折叠行为是由它们的祖先分子aILP分支进化而来的。

关键词：胰岛素类胰岛素生长因子-1 蛋白质折叠

猪胰岛素前体氨基酸位点突变对其结构和折叠的影响

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浙江理工大学学报（自然科学版） 2007年第4期24卷 475-478页

作者：赵杰许根俊冯佑民浙江理工大学生命科学学院杭州310018

蛋白质的氨基酸序列决定了它的高级结构和生物功能。用蛋白质工程技术得到了猪胰岛素前体(PIP)的突变体[B10D]PIP,并得到HPLC纯的蛋白质样品。通过对该突变体的研究发现:它的结构稳定性、二硫键稳定性、体外再折叠速率和效率都与野生型... 详细信息

蛋白质的氨基酸序列决定了它的高级结构和生物功能。用蛋白质工程技术得到了猪胰岛素前体(PIP)的突变体[B10D]PIP,并得到HPLC纯的蛋白质样品。通过对该突变体的研究发现:它的结构稳定性、二硫键稳定性、体外再折叠速率和效率都与野生型PIP有所不同。

关键词：胰岛素猪胰岛素前体稳定性再折叠

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PCR技术在糖尿病研究中的应用

重庆医科大学学报 1993年第2期18卷 101-105页

作者：刘先俊吕懿娟杜建国冯佑民重庆医科大学生物化学教研室中国科学院上海生化所

本文应用PCR技术从人基因组DNA中扩增出胰岛素基因片段(1128bp),将扩增产物直接克隆到M_(13)载体中去,用双脱氧链终止法作DNA序列分析。是鉴定胰岛素基因中前肽、A链、B链和C肽编码区域有无碱基突变的一种简便。

关键词： DNA 胰岛素糖尿病聚合酶链反应

无排卵综合征大鼠肝脏、卵巢和肾上腺胰岛素受体的鉴定

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上海医科大学学报 1999年第1期26卷 51-53页

作者：李桂玲归绥琪唐月华冯佑民上海医科大学妇产医院中西医结合科中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室

目的探讨高胰岛素高雄激素无排卵综合征的发病机制。方法采用放射配体结合分析法首次对雄激素致高胰岛素高雄激素无排卵大鼠（ＡＳＲ）肝脏、卵巢和肾上腺的的胰岛素受体作了鉴定，并与正常对照大鼠进行比较。结果ＡＳＲ肝脏、卵巢和肾... 详细信息

目的探讨高胰岛素高雄激素无排卵综合征的发病机制。方法采用放射配体结合分析法首次对雄激素致高胰岛素高雄激素无排卵大鼠（ＡＳＲ）肝脏、卵巢和肾上腺的的胰岛素受体作了鉴定，并与正常对照大鼠进行比较。结果ＡＳＲ肝脏、卵巢和肾上腺胰岛素受体的数目及亲和力均与正常大鼠相似。结论ＡＳＲ不存在受体水平的胰岛素拮抗。

关键词：大鼠胰岛素受体无排卵综合征不育症