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香烟对气道上皮细胞表达4-羟基壬烯醛的影响以及银杏内酯B的干预作用

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中华结核和呼吸杂志 2006年第4期29卷 247-251页

作者：于亮冉丕鑫广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所 510120

目的探讨香烟烟雾浓缩物(CSC)对人类支气管上皮细胞系(16-HBE)表达4-羟基壬烯醛(4-HNE)的影响以及银杏内酯 B 的干预作用;并观察4-HNE 对中性粒细胞的趋化作用。方法采用免疫细胞化学和 Western blot 方法。(1)不同浓度(1、10μg/ml CSC... 详细信息

目的探讨香烟烟雾浓缩物(CSC)对人类支气管上皮细胞系(16-HBE)表达4-羟基壬烯醛(4-HNE)的影响以及银杏内酯 B 的干预作用;并观察4-HNE 对中性粒细胞的趋化作用。方法采用免疫细胞化学和 Western blot 方法。(1)不同浓度(1、10μg/ml CSC)CSC 刺激16-HBE 细胞4h后4-HNE 加成蛋白的表达水平,设正常对照组(无血清培养基代替 CSC);(2)10μg/ml CSC 刺激不同时间(1、4、8、12、24、30h)后,16-HBE 中4-HNE 加成蛋白的水平,设正常对照组(无血清培养基代替 CSC);(3)用100μmol/L 银杏内酯 B 孵育16-HBE 后,CSC 刺激1、4、8、12h,检测4-HNE 加成蛋白表达的变化,设正常对照组(无银杏内酯 B 孵育);(4)以趋化实验检测0.1、1、10μmol/L 4-HNE 对兔中性粒细胞的趋化作用。结果(1)1、10μg/ml CSC 刺激4h 后,16-HBE 细胞表达4-HNE 加成蛋白水平(免疫化学为2.12±0.38、2.69±0.42,Western blot 为100.2±6.3、72.3±6.1)均较正常对照组显著增加(免疫化学为1.25±0.37,Western blot 为122.4±4.2,P 均<0.01)。(2)10μg/ml CSC 刺激1、4、8、12、24、30h后,16-HBE 细胞表达4-HNE 加成蛋白(免疫化学为2.67±0.46、2.69±0.42、2.71±0.48、2.72±0.56、2.93±0.11、2.92±0.20,Western blot 为73.2±8.3,72.3±6.4,72.6±9.2,71.5±8.1,54.4±3.6,56.7±4.4)较正常对照组(免疫化学为1.25±0.35,Western blot 为122.4±4.1)显著增加(P 均<0.01),刺激24h 和30h,细胞内4-HNE 加成蛋白较其他时间点增加。(3)50、100μmol/L 银杏内酯 B 孵育后再以 CSC 刺激时,16-HBE 细胞内4-HNE 加成蛋白表达水平(Westernblot 为84.6±4.4、101.2±4.4)明显低于未以内酯 B 孵育组,但高于正常对照组(Western blot 为72.5±6.4,P 均<0.01)。(4)0.1、1、10μmol/L 4-HNE 对兔中性粒细胞趋化数目(92±12、104±16、131±12)较正常对照组(72±12)均显著增加,10 μmol/L 4-HNE 趋化数目显著高于0.1和1μmol/L4-HNE,差异均有统计学意义(P 均<0.01)。结论香烟所引起肺中性粒细胞趋化的结果可能与其促使4-HNE 产生增加有关,银杏内酯 B 可以抑制 CSC 对4-HNE 的诱生。

关键词： 4-羟基壬烯醛银杏内酯B 中性粒细胞吸烟

红霉素对4-羟基壬烯醛引起的支气管上皮细胞白细胞介素-8和谷氨酰半胱氨酸合成酶变化的影响

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中华结核和呼吸杂志 2009年第2期32卷 133-138页

作者：于亮冉丕鑫广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所 510182

目的探讨红霉素对4-羟基壬烯醛（4-HNE）引起的支气管上皮细胞（16-HBE细胞）前炎因子白细胞介素-8（IL-8）和谷氨酰半胱氨酸合成酶（1-GCS）升高的影响。方法将16-HBE细胞分为4-HNE组（10μmol／L）和健康对照组，每组样本量为4个培养... 详细信息

目的探讨红霉素对4-羟基壬烯醛（4-HNE）引起的支气管上皮细胞（16-HBE细胞）前炎因子白细胞介素-8（IL-8）和谷氨酰半胱氨酸合成酶（1-GCS）升高的影响。方法将16-HBE细胞分为4-HNE组（10μmol／L）和健康对照组，每组样本量为4个培养皿，4-HNE刺激细胞0．5,2、4、8及12h后，检测磷酸化c—Jun氨基末端激酶（JNK）、p38丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）、细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）-1及转录激活蛋白-1（AP-1）活性的变化，观察细胞外信号调节激酶活化激酶-1（MEK-1）抑制剂PD98059对4-HNE引起的AP-1结合活性的影响；观察两组IL-8、γ-GCS和IL-8 mRNA、γ-GCS mRNA表达水平的变化；观察PD98059和红霉素对4-HNE引起的IL-8、1-GCS和1-GCS mRNA表达及红霉素对4-HNE引起的AP-1结合活性的影响。结果（1）4-HNE组在0．5,2、4、8及12h各时间段ERK-1分别为110．4±1．6、106．1±2．1、104．4±3．4、96．3±9．6和86．3±2．9，对照组分别为114．6±2．4、110．2±2．0、112．8±2．4、113．1±2．0和115．4±3．8，两组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）；4-HNE组各时间段AP-1结合活性表达分别为90．6±2．0、85．7±2．2、78．2±2．6、70．6±1．8和64．9±4．8，对照组分别为98．6±2．1、98．7±3．4、100．1±3．8、101．3±4．2和97．4±3．6，两组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）；PD98059可降低4-HNE引起的AP-1结合活性。（2）4-HNE组IL-8水平在2、4、8及12h分别为（87±4）、（98±4）、（102±6）及（117±6）μg/L，对照组分别为（64±4）、（65±6）、（65±5）及（64±7）μg／L，两组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）；4-HNE组γ—GCS水平在4、8及12h分别为5．43±0．23、5．41±0．27及5．54±0．53，对照组分别为4．78±0．26、4．03±0．34及3．22±0．31，两组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。4-HNE组比对照组IL-8 mRNA及γ-GCSmRNA表达水平高。（3）PD98059和红霉素可降低4-HNE引起的IL-8和AP-1结合活性，增加4-HNE引起的γ-GCS表达。结论4-HNE可通过ERK．1途径增强AP-1转录活性，促进支气管上皮细胞IL-8表达；红霉素通过抑制AP-1活性，减少4-HNE引起的支气管上皮细胞IL-8的合成。红霉素及PD98059可上调4-HNE对γ-GCS的合成作用，阻断AP-1途径并不能减少支气管上皮细胞γ-GCS的合成。

关键词：白细胞介素类谷氨酰-半胱氨酸连接酶红霉素 4-羟基壬烯醛

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肺动脉高压血管收缩与重塑的研究

中华结核和呼吸杂志 2007年第9期30卷 645-648页

作者：王健冉丕鑫 Divison of Pulmonary & Critical Care Medicine Johns Hopkings University USA 广州医学院广州呼吸疾病研究所

肺动脉高压（PH）可以出现在原发于肺动脉的疾病（如特发性肺动脉高压，IPAH）或者继发于心肺疾病同时伴有肺动脉高压的疾病（如继发性肺动脉高压，SPH）。由于肺动脉高压发病机制复杂且有许多机制不明，治疗效果不理想。特别是IPAH，... 详细信息

肺动脉高压（PH）可以出现在原发于肺动脉的疾病（如特发性肺动脉高压，IPAH）或者继发于心肺疾病同时伴有肺动脉高压的疾病（如继发性肺动脉高压，SPH）。由于肺动脉高压发病机制复杂且有许多机制不明，治疗效果不理想。特别是IPAH，一经确诊，平均存活时间只有2．5年，有学者认为其预后比恶性肿瘤还差。诸多致病因素参与了肺动脉高压的发生与发展并最终引起血管收缩，导致血管重塑。

关键词：特发性肺动脉高压血管收缩继发性肺动脉高压心肺疾病平均存活时间发病机制治疗效果 IPAH

香烟烟雾凝聚物通过AP-1探针调节肺泡上皮细胞γ-GCS限速酶的表达

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中华医学杂志 2005年第46期85卷 3289-3292页

作者：邹朝霞冉丕鑫广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所 510120

目的探讨香烟烟雾凝集物(CSC)对肺泡上皮细胞(CCL149)表达限速酶r-GCS的影响与机制。方法用不同浓度的CSC处理CCL149细胞1、4、8、12、24、48 h后,采用反向聚合酶链反应和W est印记法在CSC作用不同时间点检测CCL149细胞表达r-GCS的mRNA... 详细信息

目的探讨香烟烟雾凝集物(CSC)对肺泡上皮细胞(CCL149)表达限速酶r-GCS的影响与机制。方法用不同浓度的CSC处理CCL149细胞1、4、8、12、24、48 h后,采用反向聚合酶链反应和W est印记法在CSC作用不同时间点检测CCL149细胞表达r-GCS的mRNA和蛋白的水平;脂质体转染及荧光素酶活性检测法测定CSC对大鼠gamm a-GCS重链(GCLC)基因5′-端启动子区域功能的影响;用EMSA法测定AP-1探针的结合水平。结果CSC可刺激CCL-149细胞表达gamm a-GCS,在一定浓度时(>1μg/m l),CCL149细胞用CSC处理后1、4、8 h组-γGCS mRNA的表达水平未见到有明显的差别;而12、24、48 h组-γGCS mRNA的表达水平较对照组明显增高(1.71±0.12 vs.0.67±0.06,P<0.05)。CSC亦能使带有GCLC 5′-端全长的荧光素酶报道基因的荧光素酶的活性增强,与无启动子的空载体对照组比较,CSC刺激后12、24、48 h组荧光素酶的活性均明显增强,其γ-GCS的活性均有升高(0.63±0.24 vs.1.75±0.27,P<0.05)。CSC尚促进AP-1与GCLC的DNA结合水平。结论CSC通过激活氧化应激敏感的转录因子AP-1上调CCL-149细胞内r-GCS的表达。

关键词：烟草对健康的危害烟草肺泡基因表达

肠道菌群失衡在常见呼吸系统疾病中的研究进展

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中国呼吸与危重监护杂志 2022年第3期21卷 215-220页

作者：石满杰胡瑞宇李冰冉丕鑫李乃健广州医科大学第一临床学院广东广州510120 广州医科大学中国科学院广州生物医药与健康研究院联合生命科学学院广东广州510120 广州医科大学附属第一医院呼吸疾病国家重点实验室国家呼吸医学中心广东广州510120

肠道菌群是保障人体内环境稳定的重要因素,对于调节人体免疫和炎症发挥着重要作用。肺部作为血液循环中重要的滤过器官不可避免地会受到肠道作用的影响,据此提出了肠道与肺部间免疫和炎症的相关性,即“肠-肺轴”这一概念。随着近年来研... 详细信息

肠道菌群是保障人体内环境稳定的重要因素,对于调节人体免疫和炎症发挥着重要作用。肺部作为血液循环中重要的滤过器官不可避免地会受到肠道作用的影响,据此提出了肠道与肺部间免疫和炎症的相关性,即“肠-肺轴”这一概念。随着近年来研究人员对“肠-肺轴”认知的加深,肠道菌群及其代谢产物在呼吸系统疾病中的作用和机制研究也开始受到广泛的关注。因此,本文就肠道菌群失衡在常见呼吸系统疾病中的研究进展做一综述。

关键词：呼吸系统疾病肠道菌群血液循环滤过器人体内环境人体免疫代谢产物炎症

红霉素对支气管上皮细胞谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的影响

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中国应用生理学杂志 2009年第1期25卷 101-102,132页

作者：于亮李冰冉丕鑫广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所广泛医学院医学实验研究中心广东广州510182

目的:探讨红霉素对支气管上皮细胞16-HBE谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和谷胱甘肽(GSH)的影响。方法:应用红霉素5μg/ml分别孵育细胞16-HBE细胞2 h,8 h,16 h,24 h。分别应用显色法,Western blot和荧光定量PCR方法检测细胞内GSH,γ-GCS... 详细信息

目的:探讨红霉素对支气管上皮细胞16-HBE谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和谷胱甘肽(GSH)的影响。方法:应用红霉素5μg/ml分别孵育细胞16-HBE细胞2 h,8 h,16 h,24 h。分别应用显色法,Western blot和荧光定量PCR方法检测细胞内GSH,γ-GCS重链蛋白和mRNA的表达。结果:经红霉素孵育后,16、24 h后,细胞内GSH、γ-GCS重链蛋白和mRNA的表达较对照组增加。结论:红霉素对支气管上皮细胞谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和GSH的合成有上调作用。

关键词：谷氨酰半胱氨酸合成酶谷胱甘肽红霉素

不可忽视生物燃料在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用

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中华结核和呼吸杂志 2010年第4期33卷 241-242页

作者：冉丕鑫呼吸疾病国家重点实验室(广州医学院)广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所 510120

一直以来，香烟在COPD发病中的作用受到高度重视。但是，25％～45％的COPD患者从不吸烟，说明除吸烟之外，室内外空气污染、职业粉尘暴露和儿童时期下呼吸道感染病史等，在COPD的发病中也具有重要作用。

关键词：慢性阻塞性肺疾病发病生物燃料 COPD患者室内外空气污染下呼吸道感染儿童时期不吸烟

生物燃料颗粒物暴露对大鼠肺泡巨噬细胞的络氨酸激酶抑制剂受体和肺表面活性蛋白D表达的影响

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中华结核和呼吸杂志 2021年第12期44卷 1090-1096页

作者：王慎临李冰冉丕鑫西北民族大学附属第一医院宁夏回族自治区人民医院银川750021 广州医科大学生命科学院 510120 广州医科大学呼吸疾病国家重点实验室广州呼吸健康研究所510120

目的观察生物燃料颗粒物(BMF)对肺泡巨噬细胞(AM)的络氨酸激酶抑制剂受体(SIRPα)、肺表面活性蛋白(SP)A和D的表达及吞噬功能的影响。方法将72只雄性SD大鼠使用随机数字表分为BMF组和清洁空气组,通过蛋白印迹法和免疫荧光检测BMF暴露4 d... 详细信息

目的观察生物燃料颗粒物(BMF)对肺泡巨噬细胞(AM)的络氨酸激酶抑制剂受体(SIRPα)、肺表面活性蛋白(SP)A和D的表达及吞噬功能的影响。方法将72只雄性SD大鼠使用随机数字表分为BMF组和清洁空气组,通过蛋白印迹法和免疫荧光检测BMF暴露4 d、1及6个月大鼠AM的SIRPα、SPA和SPD的表达,采用荧光标记金黄色葡萄糖球菌和铜绿假单胞菌,检测三个时间点大鼠AM吞噬细菌的能力。结果 BMF暴露4 d,SIRPα和SPD的蛋白与清洁空气组相比,差异无统计学意义(P>0.05);BMF暴露1个月SIRPα和SPD的蛋白相对表达量为(1.73±0.64)和(2.01±0.78),BMF暴露6个月SIRPα和SPD的蛋白相对表达量为(1.49±0.28)和(1.48±0.34),均高于清洁空气组(P<0.05)。BMF暴露1个月大鼠AM吞噬金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MFI相对比为(0.56±0.16)和(0.80±0.09),BMF暴露6个月大鼠AM吞噬金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MFI相对比为(0.67±0.11)和(0.76±0.16),均低于清洁空气组(P<0.05)。结论 BMF诱导AM的SIRPα和SPD的表达上调,抑制AM的吞噬功能。

关键词：生物燃料颗粒物肺泡巨噬细胞络氨酸激酶抑制剂受体吞噬功能

长链非编码RNA在呼吸系统疾病中的研究进展

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中华结核和呼吸杂志 2016年第11期39卷 894-898页

作者：郑梦凝冉丕鑫李冰呼吸疾病国家重点实验室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院 510120

人类基因组大约只有2＆#215;104个蛋白编码基因,所占比例不到全基因组的2％,其余的基因都不编码蛋白质,这部分核酸序列曾被认为是“垃圾序列”.近年大规模的基因测序使人们对基因组结构有了更深入的了解,揭示了细胞内多个分子多环节作... 详细信息

人类基因组大约只有2＆#215;104个蛋白编码基因,所占比例不到全基因组的2％,其余的基因都不编码蛋白质,这部分核酸序列曾被认为是“垃圾序列”.近年大规模的基因测序使人们对基因组结构有了更深入的了解,揭示了细胞内多个分子多环节作用导致了疾病的发生发展,一些非编码基因也在其中发挥了重要的作用.近年研究结果发现长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）在多种呼吸系统疾病的发生、发展过程中发挥作用,本文简要介绍lncRNA基本概念、作用机制及研究方法,对相关研究进展综述如下.

关键词：呼吸系统疾病非编码RNA 长链蛋白编码基因人类基因组核酸序列编码蛋白质基因组结构