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作者：侯建永郑州大学

学位级别：硕士

目的尘肺病是我国职业病中占比例最多的疾病,一直以来影响着发病者的生活质量和社会的经济发展,而游离SiO2粉尘致肺纤维化作用最强,矽肺也是尘肺中进展最快、死亡率最高的一种之一。长期以来,人们对矽肺进行了大量研究,但是其发病机制... 详细信息

目的尘肺病是我国职业病中占比例最多的疾病,一直以来影响着发病者的生活质量和社会的经济发展,而游离SiO2粉尘致肺纤维化作用最强,矽肺也是尘肺中进展最快、死亡率最高的一种之一。长期以来,人们对矽肺进行了大量研究,但是其发病机制仍不清楚,因而缺乏有效的早期诊断、动态观察的生物标志,也不能消除或逆转肺组织纤维化。随着表观遗传学的研究和发展,表观遗传学调控可能是矽肺形成中成纤维细胞转分化的重要机制。本课题组前期研究在建立细胞共培养的矽肺体外模型基础上,通过高效液相色谱法对矽肺中肺成纤维细胞DNA甲基化进行了研究,发现整体甲基化程度降低,因此认为DNA甲基化改变可能是矽肺发生发展的一种调控方式。但并未进行甲基化特异性位点的探索和研究,而相关研究也尚未见报道。因此,该研究采用DNA甲基化免疫共沉淀测序(MeDIP-seq)技术对SiO2所致肺成纤维细胞转分化过程中可能存在的DNA甲基化差异基因进行检测,并探讨其可能的机制,为进一步研究其表观遗传学调控机制提供实验基础。方法本次实验中采取组织块法提取雄性SD大鼠的肺成纤维细胞进行原代培养,培养至6-8代时转移至6孔板中。采用肺泡灌洗术提取雄性SD大鼠的肺泡巨噬细胞。使用transwell对肺成纤维细胞和肺泡巨噬细胞进行共培养,肺成纤维细胞在下层,巨噬细胞在transwell之上,建立矽肺体外模型。使用100μg/ml的SiO2的工作液对共培养模型的巨噬细胞进行染毒处理,分别在0h(A1)、24h(A2)、48h(A3)收取成纤维细胞。采用QIAamp DNA Mini Kit试剂盒提取成纤维细胞的DNA。采用DNA甲基化免疫共沉淀测序(MeDIP-seq)技术对不同组的DNA进行DNA甲基化的检测,测序所得到的数据经过初步的筛选和处理之后用于后续的分析。分别对测序所得reads和高甲基化区域扫描peak进行统计描述和基因元件分布的描述。进一步的对差异甲基化区域和差异基因进行统计,并使用DAVID工具对DNA甲基化差异基因进行GO和KEGG pathway的生物信息学分析。使用亚硫酸氢盐测序的方法对MeDIP-seq的结果进行验证。结果***-seq数据分析发现分别有26,048,428(60.90%)、34,162,578(61.53%)、33,314,252(60.18%)个reads比对到了大鼠的参考基因组上,进一步的分析发现,分别有22,192,364、28,930,222、28,256,146个reads比对到参考基因组的唯一位置上。基因组功能原件的分布分析发现,集中在基因间区的reads最多,其次是内含子和外显子等。2.扫描显著性的甲基化peak区域,分析结果发现,总共308,723个peak被扫描发现,在各组分别有208,253、206,685和232,504个peak扫描获得,分别有208,253、206,685、232,504个peak定位在了基因的功能元件上。在不同的功能元件上,在基因间区的peak数量最多,内含子次之。***甲基化差异区域对应的唯一差异基因有16,292个,其中a1与a2的比较组中有13,311个,a2与a3的比较组中有13,753个,a1与a3的比较组中有13,381个,更深入的分析发现总共有8,791个基因被发现在三个差异组中都存在。***甲基化差异基因的go分析发现这些差异基因主要集中在生物学过程、构成细胞的组分,实现的分子功能三个大的分类中。其中4,402个基因分类在生物学过程中,3,920个基因分类在细胞组成成份,4,290个基因分类在分子功能中。***甲基化差异基因的keggpathway分析发现,这些差异甲基化基因主要富集在37个通路中,这37个通路按照其特征又归化为了5个大类的通路,包括新陈代谢、环境信息加工、细胞过程、生物体系统和人类疾病相关的通路。结论成纤维细胞转分化过程中涉及的dna甲基化改变的位点主要分布在基因的基因间区和内含子、外显子区域,启动子和基因下游区域很少。成纤维细胞转分化过程中存在大量dna甲基化程度发生改变的基因,这些基因的功能主要集中在与磷代谢相关的生物学过程、质膜相关的细胞组成成份和离子通道相关的分子功能中。成纤维细胞转分化过程可能与线粒体的能量活动有关;成纤维细胞转分化后形成肺纤维化的主要形式是成纤维细胞与细胞外基质的连接形成粘着斑;成纤维细胞转分化过程中有与突触形成相关基因的功能变化变化;成纤维细胞转分化过程与癌症形成有许多相似的过程,其中的MAPK、Wnt、ErbB、p53和TGF-β等通路可能在矽肺的形成中起到重要作用,值得进行进一步研究。

关键词： MeDIP-seq 游离SiO2 肺成纤维细胞转分化 DNA甲基化

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游离二氧化硅所致肺成纤维细胞转分化过程中DNA甲基化差异基因的MeDIP-seq检测

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郑州大学学报（医学版） 2017年第1期52卷 5-8页

作者：侯建永姚武郝长付郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室郑州450001

目的:检测游离二氧化硅所致肺成纤维细胞转分化过程中可能存在的DNA甲基化差异基因并探讨其可能作用机制。方法:原代培养肺成纤维细胞和肺泡巨噬细胞,建立共培养的矽肺体外模型,采用甲基化DNA免疫共沉淀测序技术检测分析不同染毒时间(0... 详细信息

目的:检测游离二氧化硅所致肺成纤维细胞转分化过程中可能存在的DNA甲基化差异基因并探讨其可能作用机制。方法:原代培养肺成纤维细胞和肺泡巨噬细胞,建立共培养的矽肺体外模型,采用甲基化DNA免疫共沉淀测序技术检测分析不同染毒时间(0、24、48 h)的肺成纤维细胞之间的DNA甲基化差异基因,并采用DAVID工具对检测到的甲基化差异基因进行KEGG的通路富集分析。结果:共发现8 791个基因的DNA甲基化程度在3个染毒时间组中均存在差异,DAVID工具分析发现这些差异主要集中在代谢、环境信息过程、细胞过程、生物体系统、人类疾病相关通路等通路中。结论:矽肺形成过程中存在大量DNA甲基化程度发生改变的基因,且这些基因涉及多个通路。

关键词：矽肺 DNA甲基化甲基化DNA免疫共沉淀测序

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实验性矽肺大鼠肺组织中Th1/Th2型细胞因子动态变化

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卫生研究 2016年第4期45卷 553-557,586页

作者：暴磊刘素娜李娟王娟张红义侯建永郝长付姚武郑州大学公共卫生学院郑州450000

目的检测Th1/Th2型细胞因子在实验性矽肺大鼠肺组织中的动态表达水平。方法将SPF级成年雄性SD大鼠随机分为染尘组和对照组,每组42只。模型组采用非气管暴露法一次性注入1 m L二氧化硅悬液（100 mg/m L）建立大鼠矽肺模型,对照组气管内... 详细信息

目的检测Th1/Th2型细胞因子在实验性矽肺大鼠肺组织中的动态表达水平。方法将SPF级成年雄性SD大鼠随机分为染尘组和对照组,每组42只。模型组采用非气管暴露法一次性注入1 m L二氧化硅悬液（100 mg/m L）建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量灭菌生理盐水。分别在染尘第1天、1周、2周、3周、6周、9周和12周各处死6只大鼠,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测大鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素18（IL-18）、白介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）及IFN-γ/IL-4的表达水平。结果染尘组TNF-α表达量均高于对照组（P〈0.05）;染尘组IFN-γ在染尘第1天-2周表达量高于对照组（P〈0.05）;染尘组IL-18表达量均高于对照组,差异无统计学意义;染尘组IL-4在染尘第1周表达量低于对照组（P〈0.05）,第9周及12周高于对照组（P〈0.05）;染尘组IL-10在染尘第6-9周表达量高于对照组（P〈0.05）;染尘组Th1/Th2比值随染尘时间增长而降低,染尘组Th1/Th2在染尘第1天-2周比值高于对照组（P〈0.05）。结论在矽肺的发生发展过程中细胞因子发生变化：Th1型细胞因子持续高表达,Th2型细胞因子表达量先降低后升高。

关键词：矽肺大鼠细胞因子

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一种双无人机协同跟踪地面移动目标方法

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计算机应用研究 2013年第7期30卷 2195-2198页

作者：符小卫侯建永高晓光刘重西北工业大学电子信息学院西安710129

针对通信延时情况下双无人机协同跟踪地面移动目标问题进行研究,构建了基于分布式遗传算法和滚动时域优化结合的目标跟踪航迹规划算法模型。考虑到通信延时会增加目标状态信息数据融合时的误差,导致无人机跟踪任务效果变差,结合递推最... 详细信息

针对通信延时情况下双无人机协同跟踪地面移动目标问题进行研究,构建了基于分布式遗传算法和滚动时域优化结合的目标跟踪航迹规划算法模型。考虑到通信延时会增加目标状态信息数据融合时的误差,导致无人机跟踪任务效果变差,结合递推最小二乘滤波和加权最小二乘估计设计了融合方法,来融合处理目标状态信息;考虑到无人机对目标的观测效果与未来时刻的目标状态信息密切相关,采用递推最小二乘滤波预测目标的状态信息,结合分布式遗传算法和滚动时域优化设计了双无人机目标跟踪航迹规划算法。适应度函数考虑了无人机和目标之间的距离、无人机之间的通信距离、无人机之间的通信角度。仿真结果表明:该协同跟踪方法能够较好地完成跟踪任务;与一架无人机跟踪相比误差明显减小,并且可以减小通信延时带来的跟踪误差。

关键词：双无人机协同跟踪通信延时融合方法分布式遗传算法滚动航迹规划

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煤工尘肺患者血清中血管内皮生长因子抗体的表达

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四川大学学报（医学版） 2014年第5期45卷 805-809页

作者：程远博刘素娜暴磊张红义侯建永郝长付姚武郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室郑州450000

目的检测煤工尘肺患者及接尘工人血清中血管内皮生长因子抗体（VEGF-Ab）的表达水平,探讨其在尘肺病发病过程中的意义。方法将对象分为4组：以230例煤工尘肺观察对象（已出现尘肺病变但尚未达到壹期尘肺）为观察对象组,以328例煤工尘肺... 详细信息

目的检测煤工尘肺患者及接尘工人血清中血管内皮生长因子抗体（VEGF-Ab）的表达水平,探讨其在尘肺病发病过程中的意义。方法将对象分为4组：以230例煤工尘肺观察对象（已出现尘肺病变但尚未达到壹期尘肺）为观察对象组,以328例煤工尘肺患者为煤工尘肺组,以309例正在接尘的工人为接尘组（尚未出现尘肺病变）,以393例医院健康体检人员为对照组,对所有研究对象进行问卷调查,并采集外周静脉血,分离收集血清,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中VEGF-Ab的表达水平。结果煤工尘肺组和接尘组血清中VEGF-Ab表达水平均高于健康对照组和观察对象组（P〈0.05）。随着尘肺病期别的增高,煤工尘肺组患者血清中VEGF-Ab的表达水平虽有增加的趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）。观察对象组中20~岁组和40~岁组VEGF-Ab表达水平均高于60~岁组（P〈0.05）;煤工尘肺组和健康对照组中20~岁组和40~岁组VEGF-Ab表达水平均低于60~岁组（P〈0.05）。煤工尘肺组中采煤组血清VEGF-Ab高于辅助工种组（P〈0.05）,接尘组中掘进组血清VEGF-Ab高于采煤组（P〈0.05）。观察对象组和煤工尘肺组的壹期尘肺组中,工龄〈25年的患者血清中VEGF-Ab表达低于工龄≥25年者（P〈0.05）。结论血清中VEGF-Ab的表达水平可能与煤工尘肺的发生发展过程相关,随着年龄的增大、接尘工龄的增加VEGF-Ab的表达水平升高。

关键词：血管内皮生长因子抗体煤工尘肺接尘工人

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Stanford A型主动脉夹层术中左锁骨下动脉植入血管覆膜支架的临床效果

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河南医学研究 2023年第9期32卷 1605-1608页

作者：李方旭侯建永河南省胸科医院心血管外科河南郑州450002

目的探究Stanford A型主动脉夹层外科手术中左锁骨下动脉植入血管覆膜支架的临床治疗效果。方法回顾性分析2020年2月至2021年11月在河南省胸科医院收治的急性Stanford A型主动脉夹层患者123例,其中45例患者接受左锁骨下动脉植入血管... 详细信息

目的探究Stanford A型主动脉夹层外科手术中左锁骨下动脉植入血管覆膜支架的临床治疗效果。方法回顾性分析2020年2月至2021年11月在河南省胸科医院收治的急性Stanford A型主动脉夹层患者123例,其中45例患者接受左锁骨下动脉植入血管覆膜支架技术(A组),78例患者接受传统支架血管技术(B组)。比较分析两组患者的术中指标、围手术期指标、术后病死率和并发症发生率。结果 A组患者的手术时间、体外循环时间、停循环时间短于B组,24 h引流量和血浆用量少于B组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论对于Stanford A型主动脉夹层的外科治疗,通过对象鼻支架开窗,植入左锁骨下动脉覆膜支架的方法,可以避免左锁骨下动脉位置较深带来的操作困难,简化了手术方案,达到与传统术式相同的临床效果。

关键词： Stanford A型主动脉夹层左锁骨下动脉血管覆膜支架

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胸主动脉腔内修复术治疗Stanford B型主动脉夹层的疗效观察

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临床研究 2022年第10期30卷 4-7页

作者：李方旭侯建永河南省胸科医院心血管外科河南郑州450000

目的探讨Stanford B型主动脉夹层(TBAD)患者给予胸主动脉腔内修复术(TEVAR)治疗的疗效。方法选取2019年12月至2020年7月河南省胸科医院收治的79例TBAD患者作为研究对象,均给予TEVAR治疗,比较手术前后主动脉真腔最大径、免疫细胞水平,统... 详细信息

目的探讨Stanford B型主动脉夹层(TBAD)患者给予胸主动脉腔内修复术(TEVAR)治疗的疗效。方法选取2019年12月至2020年7月河南省胸科医院收治的79例TBAD患者作为研究对象,均给予TEVAR治疗,比较手术前后主动脉真腔最大径、免疫细胞水平,统计预后情况及并发症发生率。结果术后与术前相比,主动脉真腔最大径更大,差异有统计学意义(P<0.05);术后与术前相比,白细胞百分比(WBC)、中性粒细胞百分比(N)更低,差异有统计学意义(P<0.05),淋巴细胞百分比(Lym)更高,差异有统计学意义(P<0.05);79例患者30 d内未出现死亡;79例患者出现并发症6例,并发症发生率为7.59%(6/79)。结论TBAD患者给予TEVAR治疗,能够改善主动脉真腔直径,调节免疫细胞水平,预后情况良好,安全性高。

关键词： Stanford B型主动脉夹层胸主动脉腔内修复术免疫细胞预后

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肝癌射频治疗80例临床经验总结

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临床军医杂志 2019年第9期47卷 987-988页

作者：孙高斌彭玲马波胡博李治锋侯建永解放军第九八九医院肝胆外科河南洛阳471000 解放军第九八九医院特检科河南洛阳471000

目的总结彩色多普勒引导下肝癌射频治疗(RFA)的方式方法。方法选取自2013年1月至2018年12月于解放军989医院行RFA的80例患者为研究对象。总结患者RFA方式选择特点。结果80例患者中,66例行彩色多普勒引导下经皮穿刺RFA治疗,10例行腹腔镜... 详细信息

目的总结彩色多普勒引导下肝癌射频治疗(RFA)的方式方法。方法选取自2013年1月至2018年12月于解放军989医院行RFA的80例患者为研究对象。总结患者RFA方式选择特点。结果80例患者中,66例行彩色多普勒引导下经皮穿刺RFA治疗,10例行腹腔镜下RFA,4例手术中进行RFA。结论应本着创伤小、微创化、保安全的基本原则选择RFA治疗方式,要设计进针路线、射频范围和射频次数,以其达到最佳的治疗效果。

关键词：肝癌射频治疗治疗方式

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车架涂装线前处理加热系统改造

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机械工程师 2018年第7期 104-106页

作者：侯建永吴永福于在洋北汽黑豹(威海)汽车有限公司山东威海264400

某车架涂装线原前处理系统中燃煤锅炉全天24 h不停,费用较高,热效率低。文中对原加热系统进行升级改造,重新布置车间供热系统,采用天然气常压热水锅炉提供热水,槽液用热水循环加热,设计非标换热装置,优化加热管路系统,减少换热环节。

关键词：车架涂装线加热系统前处理

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树突状细胞在实验性矽肺发生发展中的作用初探

树突状细胞在实验性矽肺发生发展中的作用初探

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中国毒理学会免疫毒理专业委员会2014年学术会议

作者：姚武郝长付刘素娜暴磊张红义侯建永郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室

目的:初步探讨树突状细胞在矽肺发生发展过程中作用。方法:体外细胞因子诱导培养外周血来源的树突状细胞。用不同浓度的SiO对树突状细胞进行染毒处理24h后,MTT法检测SiO对树突状细胞活性的影响;应用扫描电镜和投射电镜观察吞噬SiO前后...

目的:初步探讨树突状细胞在矽肺发生发展过程中作用。方法:体外细胞因子诱导培养外周血来源的树突状细胞。用不同浓度的SiO对树突状细胞进行染毒处理24h后,MTT法检测SiO对树突状细胞活性的影响;应用扫描电镜和投射电镜观察吞噬SiO前后树突状细胞外部形态和内部结构的变化

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来源： cnki会议评论

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