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草鱼精氨酸酶的分离鉴定、表达特征分析和功能鉴定

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草鱼精氨酸酶的分离鉴定、表达特征分析和功能鉴定

作者：侯博仁电子科技大学

学位级别：硕士

精氨酸酶(Arginase,ARG)是一种锰金属酶,它催化尿素循环的最后一步,将L-精氨酸(L-arginine)分解为L-鸟氨酸(L-ornithine)和尿素(urea)。ARG包含精氨酸酶1(ARG1)和精氨酸酶2(ARG2)两种亚型,哺乳动物中ARG1定位在胞质中,ARG2则是定位在线... 详细信息

精氨酸酶(Arginase,ARG)是一种锰金属酶,它催化尿素循环的最后一步,将L-精氨酸(L-arginine)分解为L-鸟氨酸(L-ornithine)和尿素(urea)。ARG包含精氨酸酶1(ARG1)和精氨酸酶2(ARG2)两种亚型,哺乳动物中ARG1定位在胞质中,ARG2则是定位在线粒体中。近年来ARG被发现与心血管系统、肾脏和中枢神经系统的功能障碍和病理相关,并被证明在炎症引发的免疫功能障碍和免疫抑制等中发挥功能。尽管哺乳动物ARG的功能已有相当深入研究,但硬骨鱼ARG的功能地位还未明确。本论文以草鱼(Grass carp)为模型,分离鉴定其ARG,阐明了它与诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的竞争关系,并发现ARG通过该竞争关系在NO(nitric oxide)引起的细胞损伤中发挥作用,具体研究内容如下:首先克隆获取草鱼ARG1和ARG2的编码序列(Coding sequence,CDS),草鱼ARG1的CDS长度为1014bp,编码337个氨基酸;草鱼ARG2的CDS长度为1041bp,可编码346个氨基酸。序列分析结果显示草鱼ARG1和ARG2与鲤科鱼的同系物亲缘关系最近,其活性中心内的Mn结合位点与哺乳动物同系物保守,并且它们的蛋白质二级结构也保守。通过生物信息学方法预测发现几乎所有鱼类的ARG1和ARG2都定位在线粒体中。通过组织分布分析发现草鱼ARG1在肝脏和肾脏中分布较多,而ARG2主要分布在肝脏和鳃。随后在嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,***)感染草鱼的活体实验中发现,肾脏和肝脏组织中ARG1和ARG2的m RNA表达水平上调,而iNOS的基因表达没有变化。在哺乳动物中发现ARG与iNOS存在底物竞争关系,因此推测在草鱼中ARG可能通过竞争底物对iNOS活性产生抑制。因此使用能够同时表达ARG和iNOS的草鱼原代头肾单核/巨噬细胞(Monocytes/Macrophages,Mο/Mφ)作为细胞模型进行体外实验,在细胞层面上探究ARG的功能。使用多种细胞因子分别处理草鱼头肾Mο/Mφ后,发现ARG2的m RNA水平上调时,iNOS的m RNA水平下调,反之亦然,提示ARG2和iNOS之间可能存在联系。在草鱼头肾Mο/Mφ中几乎检测不到ARG1的基因表达,ARG1也不受细胞因子的调控,因此认为在草鱼头肾Mο/Mφ中的ARG活性主要来自ARG2。进一步,在草鱼头肾Mο/Mφ中,抑制上调的ARG2活性能促进NO产量上调,NO主要由iNOS产生,表明ARG2能够抑制iNOS的活性。单独使用***处理草鱼头肾Mο/Mφ,且在处理12-72小时后ARG2和iNOS都被诱导表达,表明ARG2和iNOS在时间水平上有竞争的基础。而过表达融合绿色荧光蛋白(EGFP)的草鱼ARG2后确定其为线粒体定位蛋白,在空间水平上与定位在胞质中的iNOS没有重合。病原体侵入后,会诱导巨噬细胞中iNOS的大量表达,随后产生NO对病原体进行清除。但NO能够与超氧阴离子结合生成过氧亚硝酸根(peroxynitrite,ONOO),ONOO能够引起蛋白质氨基酸残基的氧化和硝化导致蛋白质失活,从而导致细胞的损伤,通常以酪氨酸硝化形成的硝基酪氨酸作为ONOO的检测指标。基于在草鱼头肾Mο/Mφ中ARG2与iNOS之间的竞争关系,为了探究ARG2能否抑制NO导致的细胞损伤,同时使用ARG抑制剂处理***刺激的草鱼头肾Mο/Mφ,发现抑制ARG2活性后,硝基酪氨酸水平出现上调,表明ARG2在NO引起的细胞损伤中发挥了作用。本研究首次在鱼类细胞中鉴定了ARG和iNOS的竞争关系,并发现ARG对NO导致的细胞损伤存在抑制作用,为明确硬骨鱼ARG的功能地位提供了线索。

关键词：草鱼精氨酸酶功能鉴定诱导型一氧化氮合酶竞争作用

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近代二人转艺术的传承及其艺人地位变化探析

戏剧之家 2023年第27期 51-53页

作者：侯博仁大连大学历史学院辽宁大连116622

有着三百余年历史的二人转是东北地区特有的民间艺术。它源于东北人民的日常生活,是东北人民喜闻乐见的娱乐形式。二人转的表演形式相对简单、灵活轻便,从艺人员通过说、唱、扮、舞、绝的形式表达人物性格和故事情节。其表演技巧如唱词... 详细信息

有着三百余年历史的二人转是东北地区特有的民间艺术。它源于东北人民的日常生活,是东北人民喜闻乐见的娱乐形式。二人转的表演形式相对简单、灵活轻便,从艺人员通过说、唱、扮、舞、绝的形式表达人物性格和故事情节。其表演技巧如唱词、唱功、绝活等难以自通,需要跟随经验丰富的艺人长时间地学习和磨炼,二人转从艺人员需要拜师或偷艺才能传承这门艺术。这些从艺人员大多出身寒微,且被人欺压,受生存本能的驱使,他们认为自己必须传承好二人转艺术。一些二人转名家前辈传承并创新了二人转的表演内容;新中国成立后这些名家成为了文艺领域的改良先锋,他们为二人转的整理与改良做出了重要贡献,亲身感受到二人转地位的变化。

关键词：二人转传承艺人地位

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传统宗藩体系及其崩溃

今古文创 2022年第30期 57-59页

作者：侯博仁大连大学历史学院辽宁大连116622

1895年《马关条约》的签订标志着中日甲午战争中方的战败,朝鲜这个最后的藩属国也随之丧失,传统中国的宗藩体系开始走向“崩溃”。经此一役,几千年的藩属关系及其“天朝上国”观念随之崩塌,东亚的国际秩序面临着重新洗牌,东亚地区需要... 详细信息

1895年《马关条约》的签订标志着中日甲午战争中方的战败,朝鲜这个最后的藩属国也随之丧失,传统中国的宗藩体系开始走向“崩溃”。经此一役,几千年的藩属关系及其“天朝上国”观念随之崩塌,东亚的国际秩序面临着重新洗牌,东亚地区需要建立一个新秩序,而日本则凭借强大的军事力量欲取代传统中国成为这个新秩序的建立者。但与此同时西方列强加强了对远东的渗透,东亚的局势变得异常复杂。

关键词：传统中国宗藩体系甲午战争

CdGeAs_(2)晶体热力性质的第一性原理研究

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成都信息工程大学学报 2021年第2期36卷 238-243页

作者：侯博仁虞游成都信息工程大学光电工程学院四川成都610225

采用密度泛函理论和密度泛函微扰理论研究了CdGeAs_(2)晶体的晶格动力学和热力学性质。通过计算给出了布里渊区中Γ点的声子频率和对称性分类,拉曼活性和红外活性的声子频率与实验值和其它理论计算值一致;得到CdGeAs_(2)晶体沿高对称线... 详细信息

采用密度泛函理论和密度泛函微扰理论研究了CdGeAs_(2)晶体的晶格动力学和热力学性质。通过计算给出了布里渊区中Γ点的声子频率和对称性分类,拉曼活性和红外活性的声子频率与实验值和其它理论计算值一致;得到CdGeAs_(2)晶体沿高对称线的声子色散曲线和相对应的声子态密度。根据计算出的声子态密度并结合准谐近似方法进一步计算出包括声子贡献的赫尔姆赫兹自由能、内能、熵、热容量和热膨胀系数等热力学参量。

关键词： CdGeAs_(2) 密度泛函理论第一性原理声子热力学性质

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基于间苯三酚的电池热失效自毁机制研究

工程热物理学报 2024年第6期45卷 1663-1670页

作者：侯博文彭勇冯旭宁清华大学车辆与运载学院北京100084

高比能锂离子电池的热失控问题是限制其大规模应用的关键原因。本文从自毁电池的角度出发,以间苯三酚为自毁剂,阻断负极和电解液的反应,避免大量还原性气体的产生,减少气体串扰的反应热释放,最终降低热失控灾害程度。结果表明,间苯三酚... 详细信息

高比能锂离子电池的热失控问题是限制其大规模应用的关键原因。本文从自毁电池的角度出发,以间苯三酚为自毁剂,阻断负极和电解液的反应,避免大量还原性气体的产生,减少气体串扰的反应热释放,最终降低热失控灾害程度。结果表明,间苯三酚的引入使热失控反应提前至120℃,且消除了200℃时的剧烈放热,实现了热失控反应时序的调控和热失控反应焓值的降低,提高了电池的安全性。本文为高安全电池设计提供了新的思路,具有一定的指导意义。

关键词：锂离子电池自毁电池热失控反应时序调控间苯三酚

食品安全风险治理中的公众参与意愿:影响机制与提升策略

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中国农业大学学报 2024年第2期29卷 205-215页

作者：侯博刘强江苏师范大学食品安全与农业绿色发展研究中心江苏徐州221116

为提升公众食品安全风险治理参与意愿,基于扩展的计划行为理论和态度-情境-行为理论构建分析框架,借助微观调查数据,采用结构方程模型、Bootstrap中介效应检验法和分层回归法对公众食品安全治理参与意愿的影响机制进行实证研究。结果表... 详细信息

为提升公众食品安全风险治理参与意愿,基于扩展的计划行为理论和态度-情境-行为理论构建分析框架,借助微观调查数据,采用结构方程模型、Bootstrap中介效应检验法和分层回归法对公众食品安全治理参与意愿的影响机制进行实证研究。结果表明:1)行为态度、主观规范、知觉行为控制、感知风险和过去经历对公众食品安全治理参与意愿有显著正向影响,2)行为态度在感知风险、过去经历与参与意愿关系中发挥中介作用,3)政策规制在行为态度与参与意愿关系中发挥调节作用。因此,应从提高公众食品安全风险认知、优化公众食品安全治理参与体验、改善公众食品安全治理参与态度、营造促进公众参与的政策环境等方面提升公众食品安全风险治理参与意愿,推进食品安全风险社会共治。

关键词：食品安全风险公众参与社会共治中介效应结构方程模型

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世界文学客厅(南京)

建筑学报 2024年第4期 39-42页

作者：无侯博文(摄影) 东南大学建筑设计研究院有限公司不详

关键词：

数字化转型背景下XH国有书店营销策略优化研究

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数字化转型背景下XH国有书店营销策略优化研究

作者：侯博赟河南工业大学

学位级别：硕士

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一种散热器的性能衰减实验研究

工程热物理学报 2024年第4期45卷 1162-1168页

作者：纳鑫郭鈺乾侯博卢鑫王良璧兰州交通大学机电工程学院兰州730070 铁道车辆热工教育部重点实验室(兰州交通大学) 兰州730070

内燃机车散热器是内燃机车冷却系统的核心组成部分,随着运行里程增加,翅片表面表面积灰,散热器管内沉积污垢,或由于腐蚀冲蚀等,部分管子破损后堵管。如此一系列的累计作用,导致散热热阻增大,空气侧、水侧流动阻力增加,严重降低散热器的... 详细信息

内燃机车散热器是内燃机车冷却系统的核心组成部分,随着运行里程增加,翅片表面表面积灰,散热器管内沉积污垢,或由于腐蚀冲蚀等,部分管子破损后堵管。如此一系列的累计作用,导致散热热阻增大,空气侧、水侧流动阻力增加,严重降低散热器的性能,最终不能满足内燃机车柴油机的工作要求。为了给运用管理部门提供做出多长时间大修或更换散热器决策依据,需要散热器性能衰减规律。为此,论文通过对运行里程达到90、180万公里HXN5型内燃机车上拆检的散热器进行传热性能实验,获得该部件经90、180万公里后的实际性能状态。在额定运行工况(额定水流量及空气质量流速为10.3 kg·m^(-2)·s^(-1)时),相较于全新HXN5型内燃机车散热器,运行90万公里后主散热器传热系数下降了22.96%,运行180万公里后主散热器传热系数下降27.93%。另外,根据不同堵管率的实验结果表明堵管为散热器性能衰减的次要因素,主要因素是翅片表面及管内壁的污垢热阻。

关键词： HXN5型内燃机车散热器实验研究传热性能